Name: Aplicações da Espectrometria de Massa em Tandem por Cromatografia Líquida na Pesquisa de Produtos Naturais: Alcalóides Tropânicos como Estudo de Caso (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-03-08T14:50:00.000+00:00
Duration: 9 min 36 s
Description: Aprenda a usar espectrometria de massa em tandem para anotar e classificar alcalóides tropânicos em plantas. Este método rápido e sensível permite a descoberta de novos compostos medicinais em amostras vegetais.

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<meta charset="utf8"></head><body>Classificação de alcalóides tropanos de metabólitos vegetais usando LC-MS/MS

<ol><li>Newman, D. J., Cragg, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+products+as+sources+of+new+drugs+over+the+30+years+from+1981+to+2010%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nat+Prod%22%5BJournal%5D)">Natural products as sources of new drugs over the 30 years from 1981 to 2010.</a> J Nat Prod. 75, 311-335 (2012).</li>
<li>Newman, D. J., Cragg, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+products+as+sources+of+new+drugs+over+the+nearly+four+decades+from+01%2F1981+to+09%2F2019%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nat+Prod%22%5BJournal%5D)">Natural products as sources of new drugs over the nearly four decades from 01/1981 to 09/2019.</a> J Nat Prod. 83 (3), 770-803 (2020).</li>
<li>Kohnen-Johannsen, K., Kayser, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tropane+alkaloids%3A+Chemistry%2C+pharmacology%2C+biosynthesis+and+production%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Tropane alkaloids: Chemistry, pharmacology, biosynthesis and production.</a> Molecules. 24 (4), 796(2019).</li>
<li>Shim, K. H., Kang, M. J., Sharma, N., An, S. S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beauty+of+the+beast%3A+anticholinergic+tropane+alkaloids+in+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Prod+Bioprospect%22%5BJournal%5D)">Beauty of the beast: anticholinergic tropane alkaloids in therapeutics.</a> Nat Prod Bioprospect. 12 (1), 33(2022).</li>
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<li>Kerchner, A., Farkas, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Worldwide+poisoning+potential+of+Brugmansia+and+Datura%5BTitle%5D)+AND+%22Forensic+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Worldwide poisoning potential of Brugmansia and Datura.</a> Forensic Toxicol. 38, 30-41 (2020).</li>
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<li>Alexander, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scientific+opinion+of+the+panel+on+contaminants+in+the+food+chain+on+a+request+from+the+European+Commission+on+tropane+alkaloids+%28from+Datura+sp.%29+as+undesirable+substances+in+animal+feed%5BTitle%5D)+AND+%22EFSA+J%22%5BJournal%5D)">Scientific opinion of the panel on contaminants in the food chain on a request from the European Commission on tropane alkaloids (from Datura sp.) as undesirable substances in animal feed.</a> EFSA J. 691, 1-55 (2008).</li>
<li>González-Gómez, L., Morante-Zarcero, S., Pérez-Quintanilla, D., Sierra, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Occurrence+and+chemistry+of+Tropane+alkaloids+in+foods%2C+with+a+focus+on+sample+analysis+methods%3A+A+review+on+recent+trends+and+technological+advances%5BTitle%5D)+AND+%22Foods%22%5BJournal%5D)">Occurrence and chemistry of Tropane alkaloids in foods, with a focus on sample analysis methods: A review on recent trends and technological advances.</a> Foods. 11 (3), 407(2022).</li>
<li>Cirlini, M., Cappucci, V., Galaverna, G., Dall'Asta, C., Bruni, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+sensitive+UHPLC-ESI-MS%2FMS+method+for+the+determination+of+tropane+alkaloids+in+herbal+teas+and+extracts%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Control%22%5BJournal%5D)">A sensitive UHPLC-ESI-MS/MS method for the determination of tropane alkaloids in herbal teas and extracts.</a> Food Control. 105, 285-291 (2019).</li>
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<li>Xing, J., Xie, C., Lou, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+applications+of+liquid+chromatography-mass+spectrometry+in+natural+products+bioanalysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Biomed+Anal%22%5BJournal%5D)">Recent applications of liquid chromatography-mass spectrometry in natural products bioanalysis.</a> J Pharm Biomed Anal. 44 (2), 368-378 (2007).</li>
<li>Negrin, A., Long, C., Motley, T. J., Kennelly, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LC-MS+metabolomics+and+chemotaxonomy+of+caffeine-containing+holly+%28Ilex%29+species+and+related+taxa+in+the+Aquifoliaceae%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Agric.+Food+Chem%22%5BJournal%5D)">LC-MS metabolomics and chemotaxonomy of caffeine-containing holly (Ilex) species and related taxa in the Aquifoliaceae.</a> J. Agric. Food Chem. 67 (19), 5687-5699 (2019).</li>
<li>Och, A., Szewczyk, K., Pecio, L., Stochmal, A., Zaluski, D., Bogucka-Kocka, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((UPLC-MS%2FMS+profile+of+alkaloids+with+cytotoxic+properties+of+selected+medicinal+plants+of+the+Berberidaceae+and+Papaveraceae+families%5BTitle%5D)+AND+%22Oxid+Med+Cell+Longevity%22%5BJournal%5D)">UPLC-MS/MS profile of alkaloids with cytotoxic properties of selected medicinal plants of the Berberidaceae and Papaveraceae families.</a> Oxid Med Cell Longevity. 2017, 9369872(2017).</li>
<li>Li, Y., Pang, T., Shi, J., Liu, X., Deng, J., Lin, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+determination+of+alkaloids+and+their+related+tobacco-specific+nitrosamines+in+tobacco+leaves+using+LC-MS-MS%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+Sci%22%5BJournal%5D)">Simultaneous determination of alkaloids and their related tobacco-specific nitrosamines in tobacco leaves using LC-MS-MS.</a> J Chromatogr Sci. 53 (10), 1730-1736 (2015).</li>
<li>González-Gómez, L., Morante-Zarcero, S., Pereira, J. A. M., Câmara, J. S., Sierra, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+analytical+approach+for+determination+of+tropane+alkaloids+in+leafy+vegetables+based+on+%C2%B5-QuEChERS+combined+with+HPLC-MS%2FMS%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins%22%5BJournal%5D)">Improved analytical approach for determination of tropane alkaloids in leafy vegetables based on µ-QuEChERS combined with HPLC-MS/MS.</a> Toxins. 14 (10), 650(2022).</li>
<li>Cinelli, M. A., Jones, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alkaloids+of+the+Genus+Datura%3A+Review+of+a+rich+resource+for+natural+product+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Alkaloids of the Genus Datura: Review of a rich resource for natural product discovery.</a> Molecules. 26, 2629(2021).</li>
<li>Gonçalves Dantas, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dereplication+of+tropane+alkaloids+from+four+Erythroxylum+species+using+liquid+chromatography+coupled+with+ESI-MSn+and+HRESIMS%5BTitle%5D)+AND+%22Rapid+Commun+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Dereplication of tropane alkaloids from four Erythroxylum species using liquid chromatography coupled with ESI-MSn and HRESIMS.</a> Rapid Commun Mass Spectrom. 37 (21), e9629(2023).</li>
<li>Santos, C. L. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+networking-based+dereplication+of+strictosidine-derived+monoterpene+indole+alkaloids+from+the+curare+ingredient+Strychnos+peckii%5BTitle%5D)+AND+%22Rapid+Commun+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Molecular networking-based dereplication of strictosidine-derived monoterpene indole alkaloids from the curare ingredient Strychnos peckii.</a> Rapid Commun Mass Spectrom. 34 (3), e8683(2020).</li>
<li>Qin, G. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MS%2FMS-based+molecular+networking%3A+An+efficient+approach+for+natural+products+dereplication%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">MS/MS-based molecular networking: An efficient approach for natural products dereplication.</a> Molecules. 28, 157(2023).</li>
<li>Du, N., Zhou, W., Jin, H., Liu, Y., Zhou, H., Liang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+tropane+and+cinnamamide+alkaloids+from+Scopolia+tangutica+by+high-performance+liquid+chromatography+with+quadrupole+time-of-flight+tandem+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sep+Sci%22%5BJournal%5D)">Characterization of tropane and cinnamamide alkaloids from Scopolia tangutica by high-performance liquid chromatography with quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry.</a> J Sep Sci. 42 (6), 1163-1173 (2019).</li>
<li>Agnes, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implementation+of+a+MS%2FMS+database+for+isoquinoline+alkaloids+and+other+annonaceous+metabolites%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Data%22%5BJournal%5D)">Implementation of a MS/MS database for isoquinoline alkaloids and other annonaceous metabolites.</a> Sci Data. 9 (1), 270(2022).</li>
<li>Sixto, A., Pérez-Parada, A., Niell, S., Heinzen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GC-MS+and+LC-MS%2FMS+workflows+for+the+identification+and+quantitation+of+pyrrolizidine+alkaloids+in+plant+extracts%2C+a+case+study%3A+Echium+plantagineum%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Bras+Farmacog%22%5BJournal%5D)">GC-MS and LC-MS/MS workflows for the identification and quantitation of pyrrolizidine alkaloids in plant extracts, a case study: Echium plantagineum.</a> Rev Bras Farmacog. 29 (4), 500-503 (2019).</li>
<li>Wang, H., Xu, X., Wang, X., Guo, W., Jia, W., Zhang, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+analytical+strategy+for+discovering+structural+analogues+of+alkaloids+in+plant+food+using+characteristic+structural+fragments+extraction+by+high+resolution+orbitrap+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22LWT-+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">An analytical strategy for discovering structural analogues of alkaloids in plant food using characteristic structural fragments extraction by high resolution orbitrap mass spectrometry.</a> LWT- Sci Technol. 154, 112329(2022).</li>
<li>Parks, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Redirecting+tropane+alkaloid+metabolism+reveals+pyrrolidine+alkaloid+diversity+in+Atropa+belladonna%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytol%22%5BJournal%5D)">Redirecting tropane alkaloid metabolism reveals pyrrolidine alkaloid diversity in Atropa belladonna.</a> New Phytol. 237 (5), 1810-1825 (2023).</li>
<li>MassBank of North America. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://mona.fiehnlab.ucdavis.edu">https://mona.fiehnlab.ucdavis.edu</a> (2024).</li>
<li>Maier, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorodaturatin+und+Homofluorodaturatin+-+zwei+neue+%CE%B2-carbolinderivate+in+Samen+von+Datura+stramonium+L.+var.+stramonium%5BTitle%5D)+AND+%22Monatsh+Chem%22%5BJournal%5D)">Fluorodaturatin und Homofluorodaturatin - zwei neue β-carbolinderivate in Samen von Datura stramonium L. var. stramonium.</a> Monatsh Chem. 112, 1425-1439 (1981).</li>
<li>Jennett-Siems, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemotaxonomy+of+the+pantropical+genus+Merremia+%28Convolvulaceae%29+based+on+the+distribution+of+tropane+alkaloids%5BTitle%5D)+AND+%22Phytochemistry%22%5BJournal%5D)">Chemotaxonomy of the pantropical genus Merremia (Convolvulaceae) based on the distribution of tropane alkaloids.</a> Phytochemistry. 66, 1448-1464 (2005).</li>
<li>Kohnen, K. L., Sezgin, S., Spiteller, M., Hagels, H., Kayser, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localization+and+organization+of+scopolamine+biosynthesis+in+Duboisia+myoporoides+R%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+Plant+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Localization and organization of scopolamine biosynthesis in Duboisia myoporoides R.</a> Br. Plant Cell Physiol. 59 (1), 107-118 (2018).</li>
<li>Guan, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Full+collision+energy+ramp-MS2+spectrum+in+structural+analysis+relying+on+MS%2FMS%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Full collision energy ramp-MS2 spectrum in structural analysis relying on MS/MS.</a> Anal Chem. 93 (46), 15381-15389 (2021).</li>
<li>Al Balkhi, M. H., Schlitz, S., Lesur, D., Lanoue, A., Wadouachi, M., Boitel-Conti, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Norlittorine+and+norhyoscyamine+identified+as+products+of+littorine+and+hyoscyamine+metabolism+by+13C-labeling+in+Datura+innoxia+hairy+roots%5BTitle%5D)+AND+%22Phytochemistry%22%5BJournal%5D)">Norlittorine and norhyoscyamine identified as products of littorine and hyoscyamine metabolism by 13C-labeling in Datura innoxia hairy roots.</a> Phytochemistry. 74, 105-114 (2012).</li>
<li>Sumner, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proposed+minimum+reporting+standards+for+chemical+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Metabolomics%22%5BJournal%5D)">Proposed minimum reporting standards for chemical analysis.</a> Metabolomics. 3, 211-221 (2007).</li>
<li>Gambaro, V., Labbe, C., Castillo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angeloyl%2C+Tigloyl+and+Senecioyloxytropane+Alkaloids+from+Schizanthus+hookerii%5BTitle%5D)+AND+%22Phytochemistry%22%5BJournal%5D)">Angeloyl, Tigloyl and Senecioyloxytropane Alkaloids from Schizanthus hookerii.</a> Phytochemistry. 22 (8), 1838-1839 (1983).</li>
<li>Christen, P., Cretton, S., Humam, M., Bieri, S., Muñoz, O., Joseph-Nathan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemistry+and+biological+activity+of+alkaloids+from+the+genus+Schizanthus%5BTitle%5D)+AND+%22Phytochem+Rev%22%5BJournal%5D)">Chemistry and biological activity of alkaloids from the genus Schizanthus.</a> Phytochem Rev. 19, 615-641 (2020).</li>
<li>Lounasmaa, M., Tamminen, T. The Tropane Alkaloids. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLounasmaa%2C+M+%22The+Alkaloids%3A+Chemistry+and+Pharmacology%22">The Alkaloids: Chemistry and Pharmacology</a>. , Academic Press. New York, NY. (1993).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Acetonitrila, Para UHPLC, adequado para espectrometria de massa</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>900667</td><td>HPLC solvente</td></tr><tr><td>Gás argônio</td><td>AirGas</td><td>AR UHP300</td><td>Gás CID</td></tr><tr><td>Ácido fórmico, 99% para análise</td><td>Thermo Scientific</td><td>AC270480010</td><td>HPLC aditivo</td></tr><tr><td>Guarda suporte de coluna</td><td>Restek</td><td>25812</td><td></td></tr><tr><td>HPLC, Shimadzu LC-2030C 3D Plus</td><td>Shimadzu</td><td>228-65802-58</td><td>Coluna HPLC</td></tr><tr><td>LCMS, Shimdazu LCMS-8045</td><td>Shimadzu</td><td>225-31800-44</td><td>Espectrômetro de massa; executamos o software LabSolutions, que é padrão para instrumentos Shimadzu</td></tr><tr><td>Nitrogênio líquido</td><td>AirGas</td><td>NI 180LT22</td><td></td></tr><tr><td>Metanol, para HPLC/UHPLC/LCMS</td><td>VWR BDH</td><td>85800.400</td><td>Para fazer solvente de extração</td></tr><tr><td>Microcentrífuga&nbsp;</td><td>VWR</td><td>2400-37</td><td></td></tr><tr><td>Tubos de microcentrífuga, 1,5 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>05-408-129</td><td></td></tr><tr><td>Argamassa&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB961C</td><td>Para moer tecidos vegetais</td></tr><tr><td>Pilão</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB961M</td><td>Para moer tecidos vegetais</td></tr><tr><td>Pipeta 1000 mL</td><td>Gilson&nbsp;</td><td></td><td></td>F144059M</tr><tr><td>Ponta de pipeta 1000 mL</td><td>Fisher scientific</td><td>02-707-404</td><td></td></tr><tr><td>Tecidos vegetais</td><td>Várias fontes</td><td>N/A</td><td>Pode ser qualquer coisa selvagem ou cultivada</td></tr><tr><td>Tubos cônicos de polipropileno, 15 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>05-539-4</td><td></td></tr><tr><td>Resfriador de poliestireno</td><td>ULINE</td><td>S-18312</td><td>O tipo de resfriadores em que os reagentes para biologia molecular são enviados seria </td></tr><tr><td>apropriado Roc C18 3 &micro; m, 100 mm x 4,6 mm</td><td>Restek</td><td>9534315</td><td>coluna HPLC</td></tr><tr><td>Roc C18, 10 mm x 4 mm</td><td>Restek</td><td>953450210</td><td>coluna Guard</td></tr><tr><td>agitador de balanço</td><td>Themo Scientific</td><td>11-676-680</td><td></td></tr><tr><td>Kit de conveniência de frasco de rosca de parafuso (9 mm)</td><td>Fisher scientific</td><td>13-622-190</td><td>Frascos de amostrador automático LCMS</td></tr><tr><td>Seringa, 3 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>03-377-27</td><td></td></tr><tr><td>Filtro de seringa 0,45 &micro; m&nbsp;</td><td>Avantor/VWR</td><td>76479-008</td><td></td></tr><tr><td>Água, para utilização em cromatografia líquida e espectrometria de massa</td><td>JT Baker</td><td>9831-03</td><td>Para fazer solvente de extração</td></tr><tr><td>Solução aquosa, contém 0,1% v/v de ácido fórmico, Para UHPLC, adequado para espectrometria de massa</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>900687-1L</td><td>Solvente HPLC</td></tr></tbody></table>

aplicações da espectrometria de massa em tandem por cromatografia líquida na pesquisa de produtos naturais: alcalóides tropânicos como estudo de caso

Applications of Liquid-Chromatography Tandem Mass Spectrometry in Natural Products Research: Tropane Alkaloids as a Case Study

Aplicações da Espectrometria de Massa em Tandem por Cromatografia Líquida na Pesquisa de Produtos Naturais: Alcalóides Tropânicos como Estudo de Caso

Although many drugs utilized today are synthetic in origin, natural products still provide a rich source of novel chemical diversity and bioactivity, and ...

applications-liquid-chromatography-tandem-mass-spectrometry-natural

Research

JoVE Journal

Chemistry

Química

Um método para a identificação de espécies de material botânico por análise directa em espectrometria de massa de alta resolução de tempo-real e análise estatística multivariada é apresentada.

Rápida de alta capacidade: Identificação de Espécies de material botânico Usando Direct Análise em Tempo Real alta resolução Espectrometria de Massa

Descrevemos um protocolo geral que integra análise de espectrometria de massa de alta resolução e docking molecular na pesquisa da medicina tradicional chinesa.

Espectrometria de massa em tandem de alta resolução para estudar constituintes químicos de Gynura bicolor DC

Descrevemos o uso de cromatografia em camada delgada, ensaio de bioautografia direta e cromatografia líquida-espectrometria de massa para identificar produtos naturais microbianos que apresentam antagonismo contra patógenos fúngicos usando o patógeno Sclerotinia sclerotiorum e isolados de Bacillus biopesticidas como sistema modelo.

Identificação guiada por bioensaio de produtos naturais para biocontrole por cromatografia em camada delgada - bioautografia direta

Este protocolo apresenta um método validado de cromatografia líquida-mobilidade iónica e espectrometria de massa de alta resolução para determinar a presença de alcaloides da cravagem nos alimentos, em conformidade com o Regulamento (UE) 2023/915 da Comissão, recentemente publicado.

Detecção de Alcalóides Ergot Regulados em Matrizes de Alimentos por Cromatografia Líquida - Espectrometria de Mobilidade Iônica Aprisionada - Espectrometria de Massa por Tempo de Voo

Este estudo desenvolveu uma cromatografia líquida de alta performance combinada com o método de espectrometria de massa tripla quadrupolar (HPLC-QQQ-MS) para identificar e quantificar alcaloides de tropano (hiosciamina, anisodamina, escopolamina) em Anisodus tanguticus. O método provou ser rápido, preciso e confiável para análises de alta produtividade de plantas medicinais.

Um método HPLC-QQQ-MS eficiente e rápido para a quantificação de alcaloides tropanos em plantas medicinais

O perfil de metabólitos não direcionados por cromatografia líquida de ultra eficiência acoplada à espectrometria de massa (UPLC-MS) é uma técnica poderosa para investigar o metabolismo.  Este artigo descreve um fluxo de trabalho típico utilizado para o perfil de metabólitos não direcionados do soro, incluindo organização e preparação de amostras, aquisição de dados, análise de dados, controle de qualidade e identificação de metabólitos.

Grande Escala Profiling não-alvo metabolômica de soro por cromatografia líquida de ultra-espectrometria de massa (UPLC-MS)

Irrelevantes metabolômica fornece uma hipótese gerando instantâneo de um perfil metabólico. Este protocolo irá demonstrar a extracção e análise de metabolitos a partir de células, soro ou tecido. Uma gama de metabolitos são pesquisadas utilizando extracção de fase líquido-líquido, cromatografia líquida de microfluxo UltraPerformance /-espectrometria de massa de alta resolução (UPLC-HRMS), acoplado ao software de análise diferencial.

Metabolomics irrelevantes de fontes biológicas Usando UltraPerformance cromatografia líquida de alta resolução Espectrometria de Massa (UPLC-HRMS)

Fosfoinositídeos estão sinalizando lipídios, cuja abundância relativa muda rapidamente em resposta a vários estímulos. Este artigo descreve um método para medir a abundância de fosfoinositídeos por meio de rotulagem metabolicamente células com 3 H- mio-inositol, seguido por extracção e desacilação. Extraídos glicero-inositides são então separados por cromatografia líquida de alto desempenho e quantificadas por cintilação fluxo.

Radiomarcação e quantificação dos níveis celulares de Fosfoinositídeos por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplado Fluxo de Cintilação

Aqui, descrevemos um ensaio cromatográfico, juntamente com a separação de mobilidade do íon de precursores de peptídeo seguido de alta resolução (~ 30.000) MS-detecção de fragmentos de peptídeo para a quantificação dos padrões de peptídeo cravado em um anticorpo monoclonal digerir.

Um ensaio de HS-MRM para a quantificação de proteínas de célula hospedeira em biofármacos de proteínas por espectrometria de massa líquida cromatografia iônica mobilidade QTOF

Apresentamos uma conveniente extração de fase sólida acoplada a cromatografia líquida de alta pressão (HPLC) com deteção eletroquímica (ECD) para a determinação simultânea de três neurotransmissores monoamina e dois dos seus metabolitos na urina dos bebês. Também identificamos o metabólito MHPG como um potencial biomarcador para o diagnóstico precoce de lesões cerebrais para infantes.

Um método conveniente para extração e análise com a cromatografia líquida de alta pressão de neurotransmissores catecolaminas e seus metabólitos

Aprenda a usar espectrometria de massa em tandem para anotar e classificar alcalóides tropânicos em plantas. Este método rápido e sensível permite a descoberta de novos compostos medicinais em amostras vegetais.

Aplicações da Espectrometria de Massa em Tandem por Cromatografia Líquida na Pesquisa de Produtos Naturais: Alcalóides Tropânicos como Estudo de Caso (Vídeo) | JoVE Journal

Aplicações da Espectrometria de Massa em Tandem por Cromatografia Líquida na Pesquisa de Produtos Naturais: Alcalóides Tropânicos como Estudo de Caso

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