Name: Coleta sequencial de sangue da veia cava inferior seguida da veia porta para avaliar metabólitos microbianos intestinais em camundongos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-06-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 9 s
Description: Aprenda a coletar sangue sequencialmente da veia porta e veia cava inferior em camundongos para avaliar metabólitos microbianos intestinais. Este método permite medir ácidos graxos de cadeia curta com precisão in vivo.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Técnica aprimorada de amostragem de sangue para avaliar metabólitos microbianos intestinais em camundongos

<ol><li>vander Hee, B., Wells, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbial+regulation+of+host+physiology+by+short-chain+fatty+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Microbial regulation of host physiology by short-chain fatty acids.</a> Trends Microbiol. 29 (8), 700-712 (2021).</li>
<li>Koh, A., De Vadder, F., Kovatcheva-Datchary, P., Bäckhed, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+dietary+fiber+to+host+physiology%3A+Short-chain+fatty+acids+as+key+bacterial+metabolites%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">From dietary fiber to host physiology: Short-chain fatty acids as key bacterial metabolites.</a> Cell. 165 (6), 1332-1345 (2016).</li>
<li>Vinolo, M. A. R., Rodrigues, H. G., Nachbar, R. T., Curi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+inflammation+by+short+chain+fatty+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">Regulation of inflammation by short chain fatty acids.</a> Nutrients. 3 (10), 858-876 (2011).</li>
<li>Layden, B. T., Angueira, A. R., Brodsky, M., Durai, V., Lowe, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+chain+fatty+acids+and+their+receptors%3A+new+metabolic+targets%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Res%22%5BJournal%5D)">Short chain fatty acids and their receptors: new metabolic targets.</a> Transl Res. 161 (3), 131-140 (2013).</li>
<li>den Besten, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+short-chain+fatty+acids+in+the+interplay+between+diet%2C+gut+microbiota%2C+and+host+energy+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">The role of short-chain fatty acids in the interplay between diet, gut microbiota, and host energy metabolism.</a> J Lipid Res. 54 (9), 2325-2340 (2013).</li>
<li>Tian, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevated+gut+microbiome-derived+propionate+levels+are+associated+with+reduced+sterile+lung+inflammation+and+bacterial+immunity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Elevated gut microbiome-derived propionate levels are associated with reduced sterile lung inflammation and bacterial immunity in mice.</a> Front Microbiol. 10, 159(2019).</li>
<li>Liu, Q., Tian, X., Maruyama, D., Arjomandi, M., Prakash, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+immune+tone+via+gut-lung+axis%3A+Gut-derived+LPS+and+short-chain+fatty+acids%E2%80%99+immunometabolic+regulation+of+lung+IL-1%CE%B2%2C+FFAR2%2C+and+FFAR3+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Lung immune tone via gut-lung axis: Gut-derived LPS and short-chain fatty acids’ immunometabolic regulation of lung IL-1β, FFAR2, and FFAR3 expression.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 321 (1), L65-L78 (2021).</li>
<li>De Vadder, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbiota-generated+metabolites+promote+metabolic+benefits+via+gut-brain+neural+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Microbiota-generated metabolites promote metabolic benefits via gut-brain neural circuits.</a> Cell. 156 (1-2), 84-96 (2014).</li>
<li>Dalile, B., Van Oudenhove, L., Vervliet, B., Verbeke, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+short-chain+fatty+acids+in+microbiota%E2%80%93gut%E2%80%93brain+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">The role of short-chain fatty acids in microbiota–gut–brain communication.</a> Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 16 (8), 461-478 (2019).</li>
<li>Sun, M., Wu, W., Liu, Z., Cong, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbiota+metabolite+short+chain+fatty+acids%2C+GPCR%2C+and+inflammatory+bowel+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Microbiota metabolite short chain fatty acids, GPCR, and inflammatory bowel diseases.</a> J Gastroenterol. 52 (1), 1-8 (2017).</li>
<li>Cummings, J. H., Pomare, E. W., Branch, H. W. J., Naylor, C. P. E., MacFarlane, G. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+chain+fatty+acids+in+human+large+intestine%2C+portal%2C+hepatic+and+venous+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Short chain fatty acids in human large intestine, portal, hepatic and venous blood.</a> Gut. 28 (10), 1221-1227 (1987).</li>
<li>Macfarlane, G. T., Gibson, G. R., Cummings, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+fermentation+reactions+in+different+regions+of+the+human+colon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Comparison of fermentation reactions in different regions of the human colon.</a> J Appl Bacteriol. 72 (1), 57-64 (1992).</li>
<li>Neis, E. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distal+versus+proximal+intestinal+short-chain+fatty+acid+release+in+man%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Distal versus proximal intestinal short-chain fatty acid release in man.</a> Gut. 68 (4), 764-765 (2019).</li>
<li>Yamashita, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+acetate+on+lipid+metabolism+in+muscles+and+adipose+tissues+of+type+2+diabetic+Otsuka+Long-Evans+Tokushima+Fatty+%28OLETF%29+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biosci+Biotechnol+Biochem%22%5BJournal%5D)">Effects of acetate on lipid metabolism in muscles and adipose tissues of type 2 diabetic Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty (OLETF) Rats.</a> Biosci Biotechnol Biochem. 73 (3), 570-576 (2009).</li>
<li>Ríos-Covián, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+short+chain+fatty+acids+and+their+ink+with+diet+and+human+health%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Intestinal short chain fatty acids and their ink with diet and human health.</a> Front Microbiol. 7, 185(2016).</li>
<li>Jaworska, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+in+vivo+method+for+evaluating+the+gut-blood+barrier+and+liver+metabolism+of+microbiota+products%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">An in vivo method for evaluating the gut-blood barrier and liver metabolism of microbiota products.</a> J Vis Exp. (140), e58456(2018).</li>
<li>Ashcroft, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+to+assess+arteriovenous+differences+across+the+liver+and+hindlimb+muscles+in+mice+following+treadmill+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol to assess arteriovenous differences across the liver and hindlimb muscles in mice following treadmill exercise.</a> STAR Protoc. 4 (1), 101985(2023).</li>
<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li>
<li>Cheever, A. W., Warren, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+vein+ligation+in+mice%3A+Portal+hypertension%2C+collateral+circulation%2C+and+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Portal vein ligation in mice: Portal hypertension, collateral circulation, and blood flow.</a> J Appl Physiol. 18, 405-407 (1963).</li>
<li>Bloemen, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+chain+fatty+acids+exchange+across+the+gut+and+liver+in+humans+measured+at+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Nutr%22%5BJournal%5D)">Short chain fatty acids exchange across the gut and liver in humans measured at surgery.</a> Clin Nutr. 28 (6), 657-661 (2009).</li>
<li>Hoyles, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbiome%E2%80%93host+systems+interactions%3A+Protective+effects+of+propionate+upon+the+blood%E2%80%93brain+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome%22%5BJournal%5D)">Microbiome–host systems interactions: Protective effects of propionate upon the blood–brain barrier.</a> Microbiome. 6 (1), 55(2018).</li>
<li>Shimizu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propionate-producing+bacteria+in+the+intestine+may+associate+with+skewed+responses+of+IL10-producing+regulatory+T+cells+in+patients+with+relapsing+polychondritis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Propionate-producing bacteria in the intestine may associate with skewed responses of IL10-producing regulatory T cells in patients with relapsing polychondritis.</a> PLoS One. 13 (9), e0203657(2018).</li>
<li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propionate+protects+against+lipopolysaccharide-induced+mastitis+in+mice+by+restoring+blood%E2%80%93milk+barrier+disruption+and+suppressing+inflammatory+response%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Propionate protects against lipopolysaccharide-induced mastitis in mice by restoring blood–milk barrier disruption and suppressing inflammatory response.</a> Front Immunol. 8, 1108(2017).</li>
<li>Lucas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-chain+fatty+acids+regulate+systemic+bone+mass+and+protect+from+pathological+bone+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Short-chain fatty acids regulate systemic bone mass and protect from pathological bone loss.</a> Nat Commun. 9 (1), 55(2018).</li>
<li>Xie, C., Wei, W., Zhang, T., Dirsch, O., Dahmen, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+of+systemic+and+hepatic+hemodynamic+parameters+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Monitoring of systemic and hepatic hemodynamic parameters in mice.</a> J Vis Exp. (92), e51955(2014).</li>
<li>Sänger, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrahepatic+vascular+anatomy+in+rats+and+mice+-+Variations+and+surgical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Intrahepatic vascular anatomy in rats and mice - Variations and surgical implications.</a> PLoS One. 10 (11), e0141798(2015).</li>
<li>Phillips, B. J., Mirzaie, M., Turco, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+Vein+Injuries%3A+A+Review%5BTitle%5D)+AND+%22J+Emerg+Trauma%22%5BJournal%5D)">Portal Vein Injuries: A Review.</a> J Emerg Trauma. 2 (2), 4(2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2,2,2 Tribromoetanol, 97% (Avertin)</td><td>Sigma Aldrich&nbsp;</td><td>T48402-25G</td><td>Agente anestésico&nbsp;</td></tr><tr><td>Injeção de Cloridrato de Buprenorfina 0.3 mg/mL</td><td>PAR Farmacêutica&nbsp;</td><td>NDC 42023-179-05</td><td>Agente Analgésico</td></tr><tr><td>Dressing Fórceps</td><td>Miltex&nbsp;</td><td>6-100</td><td>Dissecção</td></tr><tr><td>Fórceps Graefe</td><td>Roboz</td><td>RS-5136</td><td>Dissecção</td></tr><tr><td>Hepatina sódica 1000 unidades USP/mL</td><td>Hikma</td><td>NDC 0641-0391-12</td><td>Seringas/tubos de amostra de sangue heparinização</td></tr><tr><td>Prolene 7-0</td><td>Ethicon</td><td>8696G</td><td>Ligadura de veia portal</td></tr><tr><td></td><td>Tesoura F.S.T</td><td>14058-11</td><td>Dissecção</td></tr><tr><td>Estudante Halsted-Mosquito Hemostats</td><td>F.S.T&nbsp;</td><td>91308-12</td><td>Dissecção</td></tr><tr><td>Fita cirúrgica</td><td>3M Transpore</td><td>1527-1</td><td>Fixação de membros de camundongo</td></tr><tr><td>U-100 Seringa de Insulina 28G1/2</td><td>EXEL</td><td>26027</td><td>Coleta de amostras de sangue&nbsp;</td></tr></tbody></table>

coleta sequencial de sangue da veia cava inferior seguida da veia porta para avaliar metabólitos microbianos intestinais em camundongos

Sequential Blood Collection from Inferior Vena Cava Followed by Portal Vein to Evaluate Gut Microbial Metabolites in Mice

Usando o método descrito acima, podemos coletar amostras de sangue do IVC e PV sequencialmente no mesmo camundongo com uma taxa de sucesso de mais de 95%. Os volumes médios de amostras de sangue coletadas são de 0,25 mL para a VCI e 0,35 mL para a VP.
Usando cromatografia gasosa-espectrometria de massa (GC-MS), medimos a concentração de SCFAs nas fezes, sangue PV e sangue IVC e, assim, fomos capazes de rastrear a absorção e o trânsito de acetato (C2), propionato (C3) e butirato (C4) do compartimento colônico, onde são produzidos pela fermentação de bactérias intestinais, para a circulação sistêmica.
Especificamente, nesses experimentos, investigamos os efeitos da ingestão de fibra alimentar na produção de SCFAs em camundongos. Fornecemos aos camundongos uma dieta rica em fibras (35% de fibra) por 1 semana ou 2 semanas e os comparamos com aqueles alimentados com uma dieta sem fibras. Esperávamos e observamos um aumento nos táxons bacterianos fermentadores de fibras nos grupos ricos em fibras (dados não mostrados). Em seguida, examinamos o conteúdo colônico, o sangue PV e o sangue circulante sistêmico (IVC) para níveis de SCFAs (quantificados por GC-MS no Metabolomics Core Facility da Universidade de Michigan)3 (Figura 2). Embora tenhamos sido capazes de detectar um aumento consistente nos AGCC com a exposição à fibra alimentar nas amostras de PV, as medições de AGCC nas amostras fecais do cólon foram muito mais variáveis de camundongo para camundongo em comparação com as medições de sangue de PV e VCI (matéria fecal do cólon versus sangue PV / IVC para acetato, propionato e butirato na Figura 2). Essa variabilidade pode ser devida à distribuição não homogênea de AGCC na matéria fecal ou pode refletir absorção variável de AGCC pelo epitélio intestinal. Independentemente disso, para fins de investigação dos efeitos dos AGCC na fisiologia extra-intestinal do hospedeiro, os níveis dentro da VP e na circulação periférica provavelmente serão mais relevantes para o estudo.
Comparando os níveis de AGCC dentro da VP com os níveis no sangue sistêmico da VCI, também pudemos observar os níveis de absorção de acetato e propionato pelo fígado (Figura 2A,B). A proporção de acetato que permanece no sangue sistêmico (em comparação com o PV) após passar pelo fígado é maior do que a do propionato (mais de 50% do acetato de PV entrou na circulação periférica em comparação com menos de 30% do propionato). Isso é consistente com relatos anteriores de que o propionato é absorvido ou usado pelo fígado, com níveis mais baixos entrando na circulação sistêmica, enquanto o acetato pode ser absorvido ou usado em outros tecidos periféricos, como o tecido muscular13,20 (Figura 2A,B). No entanto, trabalhos anteriores de vários grupos mostraram que os níveis de propionato que são absorvidos pela circulação sistêmica são capazes de influenciar significativamente a fisiologia e a patologia em órgãos distantes21 , 22 , 23 , 24 .
Além disso, descobrimos que as concentrações de butirato no sangue PV e sistêmico eram muito menores do que no propionato, embora as concentrações fecais de butirato e propionato fossem bastante semelhantes. Essas descobertas confirmaram trabalhos anteriores de que o butirato gerado pelo intestino no cólon é amplamente absorvido e usado localmente pelo epitélio intestinal. 11 (Figura 2C). 
Normalmente, durante a dissecção abdominal, observa-se que as dimensões da VP são menores que a VCI (Figura 3A). No entanto, depois que a sutura ao redor da VP é amarrada (aproximadamente 4 mm abaixo do hilo hepático) e o vaso é ligado, a VP aumenta de tamanho e é quase igual em diâmetro ao tamanho original da VCI antes da ligadura da VP (Figura 3B). Como pode ser visto na figura, a VCI colapsa ligeiramente após a ligadura do VP (Figura 3B). No geral, essa abordagem facilita a coleta máxima de sangue do PV em camundongos. Em nossa experiência, coletar o sangue PV primeiro e depois o sangue IVC produziu resultados menos ótimos do que os resultados. Isso ocorre porque observamos colapso significativo da VCI após a coleta de sangue de PV.
<img alt="Diagrama de anatomia do fígado, ligadura da veia porta, identifica o hilo hepático, as veias esplênicas e duodenais." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66673/66673fig01.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> Figura 1: Ligadura VP. Uma sutura é passada atrás da VP entre a veia duodenal e a veia esplênica. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66673/66673fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Gráfico de caixa ilustrando as alterações dos metabólitos (C2, C3, C4) nas fezes, sangue, plasma por ingestão de fibras." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66673/66673fig02.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> Figura 2: Concentração de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) nas fezes, sangue da veia porta (VP) e sangue venoso sistêmico. Os níveis de SCFAs foram medidos para três grupos diferentes de camundongos experimentais, incluindo dieta livre de fibras por 2 semanas (n = 10 camundongos), rica em fibras por 1 semana (n = 9 camundongos) e rica em fibras por 2 semanas (n = 7 camundongos). (A) acetato (C2), (B) propionato (C3) e (C) butirato (C4). Os níveis de AGCC nas fezes são relatados como nM / mg (eixo Y esquerdo) de material fecal e no plasma de PV e veia cava inferior (VCI) como μM (eixo Y direito). Os dados nas figuras são expressos como média ± DP. As análises estatísticas foram realizadas usando análises não paramétricas de Mann-Whitney bicaudais. Valores de p &lt; 0,05 foram considerados significativos. Os valores de p são representados da seguinte forma: *p &lt; 0,05; **p &lt; 0,01; p &lt; 0,001; p &lt; 0,0001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66673/66673fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Diagrama de cirurgia de ligadura da veia porta; vasos marcados como veia porta (VP) e veia cava inferior (VCI)." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66673/66673fig03.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> Figura 3: A PV do camundongo dilata e se expande após amarrar a ligadura a 4 mm abaixo do hilo hepático. (A) PV e VCI antes da ligadura da VP; (B) PV e VCI após ligadura VP. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66673/66673fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>

Coleta sequencial de sangue da veia cava inferior seguida da veia porta para avaliar metabólitos microbianos intestinais em camundongos

Gut microbial products are known to act both locally within the intestine and get absorbed into circulation, where their effects can extend to numerous ...

sequential-blood-collection-from-inferior-vena-cava-followed-portal

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Imunologia e Infecção

Este filme demonstra como adquirir hemodinâmica sistêmica e hepática em ratos. Todo o monitoramento inclui a aquisição de parâmetros vitais, pressão arterial sistêmica, pressão venosa central, a taxa de fluxo da artéria hepática comum, e pressão da veia porta, bem como a taxa de fluxo portal em camundongos.

Monitoramento da sistêmicas e hepática Hemodinâmica em Ratos

O acesso de nutrientes, metabólitos da microbiota e medicamentos para a circulação é controlado pela barreira sangue-intestino (GBB). Nós descrevemos um método direto para medir a GBB permeabilidade na vivo, que, em contraste com comumente usados métodos indirectos, praticamente não é afetado pelas funções de fígado e rim.

Um método In Vivo para avaliar a barreira de sangue do intestino e metabolismo hepático da Microbiota produtos

Este estudo relata de amostra de sangue da veia da cauda em ratos, utilizando um sistema de tubo de aspiração com lupa do eyeglass. Nosso método é fácil de praticar e poderia ser usado para amostragem de sangue de repetição em camundongos.

Coleta de sangue modificado de veias de cauda de ratos não anestesiados com um sistema de coleta de sangue do vácuo e óculos lupa

Aqui, apresentamos um protocolo para tirar amostras de sangue da veia subclávia de camundongos.

Coleta de sangue por punção da veia subclávia em camundongos

Nós descrevemos um método novo para gerar os BLT-ratos humanizados dobro que caracterizam um sistema imune humano funcional e um microbioma humano-como enxertado estável do intestino. Este protocolo pode ser seguido sem a necessidade para ratos germe-livres ou facilidades gnotobióticos.

Um duplo humanizado BLT-MICE modelo caracterizando um estável humano-como o intestino Microbiome e sistema imunológico humano

Função de barreira epitelial intestinal disregulada e respostas imunológicas são marcas de doença inflamatória intestinal que permanecem mal investigadas devido à falta de modelos fisiológicos. Aqui, descrevemos um modelo de alça intestinal de camundongos que emprega um segmento intestinal bem vascularizado e exteriorizado para estudar a permeabilidade mucosa e o recrutamento de leucócitos in vivo.

Avaliação Funcional da Permeabilidade Intestinal e Migração Transepitelial de Neutrófilo em Camundongos usando um Modelo de Laço Intestinal Padronizado

O protocolo descreve um método simples de ressecção de um fígado de rato intacto para estudos metabólicos através da perfusão venosa portal.

Ex Vivo Perfusão hepática através do Portal Veia em Rato

O objetivo aqui é delinear um protocolo para investigar os mecanismos de disbiose na doença cardiovascular. Este artigo discute como coletar e transplantar amostras fecais murinas assepticamente, isolar intestinos e usar o método "Swiss-roll", seguido por técnicas de imunomarcação para interrogar alterações no trato gastrointestinal.

Isolamento Fecal Murino e Transplante de Microbiota

Neste protocolo, métodos relevantes para metabolômica arteriovenosa otimizada para BAT usando GC-MS em um modelo de camundongo são descritos. Esses métodos permitem a aquisição de informações valiosas sobre a troca de metabólitos mediada por MTD em nível de organismo.

Metabolômica Arteriovenosa para Mensuração da Troca de Metabólitos In Vivo no Tecido Adiposo Marrom

Aqui, apresentamos um protocolo para uma técnica otimizada de coleta de sangue em indivíduos murinos por meio de punção venosa venosa da veia facial usando uma lanceta. Usamos essa técnica juntamente com a avaliação por citometria de fluxo para caracterizar fenótipos celulares de cepas transgênicas, congênitas e repórteres. Também é adequado para análise de citocinas séricas e estudos de diabetes.

Punção venosa da veia facial para coleta de sangue murino

A punção cardíaca subclávia é um método simples e confiável para coletar sangue terminal em camundongos. É fácil de operar e garante amostras de alta pureza.

Coleta de Sangue Cardíaca por Punção Subclávia em Camundongos

Aprenda a coletar sangue sequencialmente da veia porta e veia cava inferior em camundongos para avaliar metabólitos microbianos intestinais. Este método permite medir ácidos graxos de cadeia curta com precisão in vivo.

Coleta sequencial de sangue da veia cava inferior seguida da veia porta para avaliar metabólitos microbianos intestinais em camundongos (Vídeo) | JoVE Journal

Coleta sequencial de sangue da veia cava inferior seguida da veia porta para avaliar metabólitos microbianos intestinais em camundongos

Explorar mais vídeos