Name: Uma Radiossíntese Automatizada de 68Ga Ga-FAPI-46 para Uso Clínico de Rotina (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-24T14:20:00.000+00:00
Duration: 10 min 33 s
Description: Aprenda a radiossíntese automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 para imagem PET em oncologia usando o sintetizador iPHASE MultiSyn. Este método melhora a segurança do pessoal e garante conformidade com as BPF.

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Os autores reconhecem e agradecem à SOFIE Biosciences Inc. por fornecer o precursor químico FAPI-46 e o padrão [natGa]Ga-FAPI-46, à Charlies Foundation for Research pelo apoio financeiro, Stan Poniger da iPHASE Pty Ltd e à equipe de Produção de Radiofármacos (RAPID) do Departamento de Tecnologia Médica e Física do Hospital Sir Charles Gairdner por seu apoio científico e técnico. Os autores também reconhecem a assistência do WA National Imaging Facility Node, que é apoiado por financiamento de infraestrutura do Governo do Estado da Austrália Ocidental em parceria com o Governo Federal Australiano, por meio da capacidade da Estratégia Nacional de Infraestrutura de Pesquisa Colaborativa (NCRIS).

Automated Production of [68Ga]Ga-FAPI-46 on the iPHASE MultiSyn Synthesizer

<ol><li>Imlimthan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+frontiers+in+cancer+imaging+and+therapy+based+on+radiolabeled+fibroblast+activation+protein+inhibitors%3A+a+rational+review+and+current+progress%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">New frontiers in cancer imaging and therapy based on radiolabeled fibroblast activation protein inhibitors: a rational review and current progress.</a> Pharmaceuticals. 14 (10), 1023(2021).</li>
<li>Siveke, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblast-activating+protein%3A+targeting+the+roots+of+the+tumor+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">Fibroblast-activating protein: targeting the roots of the tumor microenvironment.</a> J Nucl Med. 59 (9), 1415-1423 (2018).</li>
<li>Koczorowska, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblast+activation+protein-%CE%B1%2C+a+stromal+cell+surface+protease%2C+shapes+key+features+of+cancer+associated+fibroblasts+through+proteome+and+degradome+alterations%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Fibroblast activation protein-α, a stromal cell surface protease, shapes key features of cancer associated fibroblasts through proteome and degradome alterations.</a> Mol Oncol. 10 (1), 40-58 (2016).</li>
<li>Altmann, A., Haberkorn, U., Siveke, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+latest+developments+in+imaging+of+fibroblast+activation+protein%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">The latest developments in imaging of fibroblast activation protein.</a> J Nucl Med. 62 (2), 160-167 (2021).</li>
<li>Lindner,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+of+activated+fibroblasts+for+imaging+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Targeting of activated fibroblasts for imaging and therapy.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 4, 16(2019).</li>
<li>Linder, T., Giesel, F. L., Kratochwil, C., Serfling, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radioligands+targeting+fibroblast+activation+protein+%28FAP%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Radioligands targeting fibroblast activation protein (FAP).</a> Cancers. 13 (22), 5744(2021).</li>
<li>Loktev, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+tumor-imaging+method+targeting+cancer-associated+fibroblast%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">A tumor-imaging method targeting cancer-associated fibroblast.</a> J Nucl Med. 59 (9), 1423-1429 (2018).</li>
<li>Lindner, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+quinoline-based+theranostic+ligands+for+the+targeting+of+fibroblast+activation+protein%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">Development of quinoline-based theranostic ligands for the targeting of fibroblast activation protein.</a> J Nucl Med. 59 (9), 1415-1422 (2018).</li>
<li>Giesel, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((68Ga-FAPI+PET%2FCT%3A+biodistribution+and+preliminary+dosimetry+estimate+of+2+DOTA-containing+FAP-targeting+agents+in+patients+with+various+cancers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">68Ga-FAPI PET/CT: biodistribution and preliminary dosimetry estimate of 2 DOTA-containing FAP-targeting agents in patients with various cancers.</a> J Nucl Med. 60 (3), 386-392 (2019).</li>
<li>Loktev, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+fibroblast+activation+protein-targeted+radiotracers+with+improved+tumor+retention%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">Development of fibroblast activation protein-targeted radiotracers with improved tumor retention.</a> J Nucl Med. 60, 1421-1429 (2019).</li>
<li>Giesel, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FAPI-74+PET%2FCT+using+either+18F-AlF+or+cold-kit+68Ga+labeling%3A+biodistribution%2C+radiation+dosimetry%2C+and+tumor+delineation+in+lung+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">FAPI-74 PET/CT using either 18F-AlF or cold-kit 68Ga labeling: biodistribution, radiation dosimetry, and tumor delineation in lung cancer patients.</a> J Nucl Med. 62 (2), 201-207 (2021).</li>
<li>Jansen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+inhibitors+of+fibroblast+activation+protein+%28FAP%29+with+a+%284-quinolinoyl%29-glycyl-2-cyanopyrrolidine+scaffold%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Med+Chem+Lett%22%5BJournal%5D)">Selective inhibitors of fibroblast activation protein (FAP) with a (4-quinolinoyl)-glycyl-2-cyanopyrrolidine scaffold.</a> ACS Med Chem Lett. 4 (5), 491-496 (2013).</li>
<li>Tsai, T. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substituted+4-carboxymethylpyroglutamic+acid+diamides+as+potent+and+selective+inhibitors+of+fibroblast+activation+protein%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Substituted 4-carboxymethylpyroglutamic acid diamides as potent and selective inhibitors of fibroblast activation protein.</a> J Med Chem. 53 (18), 6572-6583 (2010).</li>
<li>Zboralski, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+evaluation+of+FAP-2286+for+fibroblast+activation+protein+targeted+radionuclide+imaging+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Nucl+Med+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Preclinical evaluation of FAP-2286 for fibroblast activation protein targeted radionuclide imaging and therapy.</a> Eur J Nucl Med Mol Imaging. 49 (11), 3651-3667 (2022).</li>
<li>Greifenstein, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3BP-3940%2C+a+highly+potent+FAP-targeting+peptide+for+theranostics+-+production%2C+validation+and+first+in+human+experience+with+Ga-68+and+Lu-177%5BTitle%5D)+AND+%22iScience%22%5BJournal%5D)">3BP-3940, a highly potent FAP-targeting peptide for theranostics - production, validation and first in human experience with Ga-68 and Lu-177.</a> iScience. 26 (12), 108541(2023).</li>
<li>Kratochwil, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((68Ga-FAPI+PET%2FCT%3A+tracer+uptake+in+28+different+kinds+of+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">68Ga-FAPI PET/CT: tracer uptake in 28 different kinds of cancer.</a> J Nucl Med. 60 (6), 801-805 (2019).</li>
<li>Guglielmo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Head-to-head+comparison+of+FDG+and+radiolabeled+FAPI+PET+A+systematic+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Life%22%5BJournal%5D)">Head-to-head comparison of FDG and radiolabeled FAPI PET A systematic review of the literature.</a> Life. 13 (9), 1821(2023).</li>
<li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Usefulness+of+%5B68Ga%5DGa-DOTA-FAPI-04+PET%2FCT+in+patients+presenting+with+inconclusive+%5B18F%5DFDG+PET%2FCT+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Nucl+Med+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Usefulness of [68Ga]Ga-DOTA-FAPI-04 PET/CT in patients presenting with inconclusive [18F]FDG PET/CT findings.</a> Eur J Nucl Med Mol Imaging. 48 (1), 73-86 (2021).</li>
<li>Hicks, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FAPI+PET%2FCT%3A+Will+it+end+the+hegemony+of+18F-FDG+in+oncology%5BTitle%5D)+AND+%22JNucl+Med%22%5BJournal%5D)">FAPI PET/CT: Will it end the hegemony of 18F-FDG in oncology.</a> JNucl Med. 62 (3), 296-302 (2021).</li>
<li>Kuwert, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FAPI+PET+opens+a+new+window+to+understanding+immune-mediated+inflammatory+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22JNucl+Med%22%5BJournal%5D)">FAPI PET opens a new window to understanding immune-mediated inflammatory diseases.</a> JNucl Med. 63 (8), 1136-1137 (2022).</li>
<li>Haberkorn, U., et al. FAP inhibitor. (International publication no. WO 2019/154886 A1). WIPO. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://patentscope.wipo.int/search/en/detail.jsf?docId=WO2019154886">https://patentscope.wipo.int/search/en/detail.jsf?docId=WO2019154886</a> (2019).</li>
<li>Bouscaillou, M., Dawn, A. SOFIE and GE HealthCare Enter Licensing Agreement to Develop FAP PET Radiotracers. GE Healthcare. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.gehealthcare.com/about/newsroom/press-releases/sofie-and-ge-healthcare-enter-licensing-agreement-to-develop-fap-pet-radiotracers">https://www.gehealthcare.com/about/newsroom/press-releases/sofie-and-ge-healthcare-enter-licensing-agreement-to-develop-fap-pet-radiotracers</a> (2023).</li>
<li>Meyer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiation+dosimetry+and+biodistribution+of+68Ga-FAPI-46+PET+imaging+in+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22JNucl+Med%22%5BJournal%5D)">Radiation dosimetry and biodistribution of 68Ga-FAPI-46 PET imaging in cancer patients.</a> JNucl Med. 61 (8), 1171-1177 (2020).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblast+activation+protein+targeted+therapy+using+%5B177Lu%5DFAPI-46+compared+with+%5B225Ac%5DFAPI-46+in+a+pancreatic+cancer+model%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Nucl+Med+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Fibroblast activation protein targeted therapy using [177Lu]FAPI-46 compared with [225Ac]FAPI-46 in a pancreatic cancer model.</a> Eur J Nucl Med Mol Imaging. 49 (3), 871-880 (2022).</li>
<li>Meisenheimer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Manual+vs+automated+68Ga-radiolabelling-A+comparison+of+optimized+processes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Labelled+Comp+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Manual vs automated 68Ga-radiolabelling-A comparison of optimized processes.</a> J Labelled Comp Radiopharm. 63, 162-173 (2020).</li>
<li>Spreckelmeyer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fully+automated+production+of+%5B68Ga%5DGa-FAPI-46+for+clinical+application%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Fully automated production of [68Ga]Ga-FAPI-46 for clinical application.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 5 (31), (2020).</li>
<li>Boonkawin, N., Chotipanich, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+first+radiolabeled+68Ga-FAPI-46+for+clinical+PET+applications+using+a+fully+automated+iQS-TS+synthesis+system+in+Thailand%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chulabhorn+Royal+Acad%22%5BJournal%5D)">The first radiolabeled 68Ga-FAPI-46 for clinical PET applications using a fully automated iQS-TS synthesis system in Thailand.</a> J Chulabhorn Royal Acad. 3 (3), 180-188 (2021).</li>
<li>Nader, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%5B68Ga%5D%2F%5B90Y%5DFAPI-46%3A+Automated+production+and+analytical+validation+of+a+theranostic+pair%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">[68Ga]/[90Y]FAPI-46: Automated production and analytical validation of a theranostic pair.</a> Nucl Med Biol. 110-111, 37-44 (2022).</li>
<li>Da Pieve, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+fully+automated+preparation+of+high+apparent+molar+activity+68Ga-FAPI-46+on+a+Trasis+AiO+platform%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">New fully automated preparation of high apparent molar activity 68Ga-FAPI-46 on a Trasis AiO platform.</a> Molecules. 27 (3), 675(2022).</li>
<li>Alfteimi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+synthesis+of+%5B68Ga%5DGa-FAPI-46+without+pre-purification+of+the+generator+eluate+on+three+common+synthesis+modules+and+two+generator+types%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Automated synthesis of [68Ga]Ga-FAPI-46 without pre-purification of the generator eluate on three common synthesis modules and two generator types.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 7 (1), 20(2022).</li>
<li>Plhak, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+synthesis+of+%5B68Ga%5DGa-FAPI-46+on+a+Scintomics+GRP+synthesizer%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">Automated synthesis of [68Ga]Ga-FAPI-46 on a Scintomics GRP synthesizer.</a> Pharmaceuticals. 16 (8), 1138(2023).</li>
<li>Rubira, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((68Ga%5DGa-FAPI-46+synthesis+on+a+GAIA%C2%AE+module+system%3A+Thorough+study+of+the+automated+radiolabeling+reaction+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">68Ga]Ga-FAPI-46 synthesis on a GAIA® module system: Thorough study of the automated radiolabeling reaction conditions.</a> Appl Radiat Isot. 206, 111211(2024).</li>
<li>Mallapura,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfuidic-based+production+of+%5B68Ga%5DGa-FAPI-46+and+%5B68Ga%5DGa-DOTA-TOC+using+the+cassette-based+iMiDEV+microfluidic+radiosynthesizer%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Microfuidic-based production of [68Ga]Ga-FAPI-46 and [68Ga]Ga-DOTA-TOC using the cassette-based iMiDEV microfluidic radiosynthesizer.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 8 (42), (2023).</li>
<li>Rosenberg, A. J., Cheung, Y. -Y., Sollert, C., Peterson, T. E., Kropski, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fully+automated+radiosynthesis+of+%5B68Ga%5D+Ga-FAPI-46+with+cyclotron+produced+gallium%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Fully automated radiosynthesis of [68Ga] Ga-FAPI-46 with cyclotron produced gallium.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 8 (29), (2023).</li>
<li>Eryilmaz, K., Kilbas, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fully+automated+synthesis+of+177Lu+labelled+FAPI+derivatives+on+the+module+modular+lab-Eazy%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Fully automated synthesis of 177Lu labelled FAPI derivatives on the module modular lab-Eazy.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 6, 16(2021).</li>
<li>Greifenstein, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+automated+synthesis+to+in+vivo+application+in+multiple+types+of+cancer-clinical+results+with+%5B68Ga%5DGa-DATA5m.SA.FAPi%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">From automated synthesis to in vivo application in multiple types of cancer-clinical results with [68Ga]Ga-DATA5m.SA.FAPi.</a> Pharmaceuticals. 15 (8), 1000(2022).</li>
<li>Haskali, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+preparation+of+clinical+grade+%5B68Ga%5DGa-DOTA-CP04%2C+a+cholecystokinin-2+receptor+agonist%2C+using+iPHASE+MultiSyn+synthesis+platform%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Automated preparation of clinical grade [68Ga]Ga-DOTA-CP04, a cholecystokinin-2 receptor agonist, using iPHASE MultiSyn synthesis platform.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 4 (1), 23(2019).</li>
<li>Wichmann, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+radiosynthesis+of+%5B68Ga%5DGa-PSMA-11+and+%5B177Lu%5DLu-PSMA-617+on+the+iPHASE+MultiSyn+module+for+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Labelled+Comp+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Automated radiosynthesis of [68Ga]Ga-PSMA-11 and [177Lu]Lu-PSMA-617 on the iPHASE MultiSyn module for clinical applications.</a> J Labelled Comp Radiopharm. 64 (3), 140-146 (2021).</li>
<li>Wichmann, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+radiosynthesis+of+%5B89Zr%5DZr-DFOSq-Durvalumab+for+imaging+of+PD-L1+expressing+tumours+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Automated radiosynthesis of [89Zr]Zr-DFOSq-Durvalumab for imaging of PD-L1 expressing tumours in vivo.</a> Nucl Med Biol. , 108351 120-121 (2023).</li>
<li>European Pharmacopoeia. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22European+Pharmacopoeia.+11+edn%22">European Pharmacopoeia. 11 edn</a>. , Directorate for the Quality of Medicines and HealthCare of the Council of Europe (2024).</li>
<li>Mu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification%2C+characterization+and+suppression+of+side-products+formed+during+the+synthesis+of+high+dose+68Ga-DOTA-TATE%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">Identification, characterization and suppression of side-products formed during the synthesis of high dose 68Ga-DOTA-TATE.</a> Appl Radiat Isot. 76, 63-69 (2013).</li>
</ol>

Os autores não têm parcerias comerciais ou fontes de financiamento que resultem em um conflito de interesse real ou percebido relacionado a este trabalho para divulgar.

Este trabalho descreve a produção confiável e de alto rendimento de [68Ga]Ga-FAPI-46 no sintetizador MS para aplicações clínicas. O trabalho preliminar deste protocolo testou, na mesma série de experimentos, diferentes tempos de reação para a síntese de [68Ga]Ga-FAPI-46, bem como quatro cartuchos SPE diferentes para a purificação do produto final. A fim de (i) reduzir a dose de radiação para o operador e (ii) recriar as condições em que a produção de rotina de [68Ga]Ga-FAPI-46 seria desenvolvida, esses experimentos preliminares também foram conduzidos usando o sintetizador MS sempre que possível. Uma sequência [68Ga]Ga-FAPI-46 foi criada usando parâmetros semelhantes usados para a produção de [68Ga]Ga-PSMA-11 e [68Ga]Ga-DOTA-TATE. A sequência é baseada em programação passo a passo simples em uma planilha do Excel e pode ser facilmente editada. Os kits e reagentes foram montados apenas para a primeira parte da síntese de [68Ga]Ga-FAPI-46 (eluição e purificação de 68Ga; reação de marcação), omitindo as etapas finais (purificação de SPE e filtração estéril final), pois esses experimentos preliminares foram realizados no material bruto manualmente. Como resultado, o cartucho SPE pós-purificação (Strata X 60 mg), bem como os frascos de etanol, água e solução salina no Manifold 4 e o frasco do produto final não precisaram ser instalados.
A literatura publicada sobre a produção de [68Ga]Ga-FAPI-46 descreve a purificação do produto final usando diferentes cartuchos de SPE: OASIS HLB 30 mg sorvente23,29, OASIS HLB Plus 225 mg28, CM26,34, C18 Plus Sep-Pak30,32 e Sep-Pak Light C1831. Este trabalho compara três dos diferentes cartuchos de SPE utilizados na literatura (HLB 30 mg; C18 SepPak Plus Short e HLB 225 mg) com o Strata X 60 mg que é fornecido com nossos existentes para a purificação de [68Ga]Ga-PSMA-11 e [68Ga]Ga-DOTA-TATE. Até onde sabemos, o cartucho Strata X 60 mg SPE ainda não havia sido avaliado para purificação de [68Ga]Ga-FAPI-46. O Strata X 60 mg apresentou semelhantes (HLB 30 mg; C18 SepPak Plus Short) ou melhor (HLB 225 mg) do que outros SPE usados na literatura para a purificação de [68Ga]Ga-FAPI-46, no que diz respeito à eficiência de captura e eluição (Tabela 3). A eluição do HLB 225 mg com um mililitro extra de etanol não resultou em melhora significativa (resultados não mostrados). O cartucho Strata X 60 mg foi selecionado para validação da síntese totalmente automatizada descrita neste protocolo.
A síntese automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 descrita no protocolo acima pode ser descrita em quatro etapas principais. O primeiro passo é a eluição de um ou dois geradores de 68Ge/68Ga com HCl 0,1 M e subsequente aprisionamento de [68Ga]GaCl3 no cartucho de troca iônica. Segue-se a eluição de [68Ga]Ga3+ do cartucho de permuta iónica para o recipiente de reação (pré-carregado com a solução precursora contendo 50 μg de precursor FAPI-46, 1,4 ml de água contendo uma concentração de nível residual de metal e 7 mg de ácido ascórbico) utilizando uma solução acidificada de cloreto de sódio 5 M. O pH da reação de marcação é 3,5-4. O próximo passo é a reação de radiomarcação durante a qual o reator é aquecido a 95 ° C por 10 min para permitir a complexação do [68Ga] Ga3+ pela porção DOTA do precursor FAPI-46. Após o arrefecimento da mistura de reação a 40 °C, a quarta e última etapa é a purificação de [68Ga]Ga-FAPI-46, que consiste em i) aprisionamento e purificação da mistura de reação no cartucho de SPE Strata X 60 mg pós-purificação, ii) enxaguamento do cartucho de SPE Strata X 60 mg com água para preparações injetáveis, (iii) eluição do produto final com etanol, (iv) diluição com solução salina para injeção e (v) transferência para o frasco do produto final através de um filtro ventilado esterilizante de 0,22 μm. A reação pode ser monitorada em tempo real por inspeção visual e leituras de sensores (por exemplo, temperatura, pressão, vácuo, leitura de radiação e temporizadores de contagem regressiva). Uma captura de tela representativa da interface do usuário é mostrada na Figura 1A,B. O perfil de radioatividade mostrado na Figura 2 é particularmente útil para monitorar o progresso da síntese, exibindo a transferência de radioatividade através das etapas críticas descritas acima.
Foram realizadas seis validações que passaram por todas as especificações de controle de qualidade, usando um ou dois geradores de 68Ge/68Ga (2,41 GBq). Três execuções foram concluídas usando 68Ga de uma única eluição de gerador, produzindo 0,59-0,63 GBq de [68Ga]Ga-FAPI-46. Três execuções foram concluídas usando 68Ga eluídos de dois geradores, produzindo 1,54-1,71 GBq de [68Ga]Ga-FAPI-46. Cada corrida foi concluída em ~ 25 min. O método de gerador único foi projetado antecipando a necessidade de atividades superiores a serem produzidas no futuro. Consequentemente, 7 mg de estabilizador de ácido ascórbico foram adicionados à mistura de reação para evitar radiólise durante a etapa de radiomarcação, conforme descrito anteriormente por Mu et al. para a produção de [68Ga]Ga-DOTA-TATE41. Da Pieve et al.29 e Alfteimi et al.30 também relataram a adição de estabilizador de ácido ascórbico de 0,3 mg à mistura de reação para a produção automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 (Tabela Suplementar S1-Arquivo Suplementar 1). De fato, observamos radiólise significativa para uma síntese de alta atividade (~ 2,8 GBq no reator) quando o estabilizador de ácido ascórbico foi omitido da mistura de reação (Figura Suplementar S3-Arquivo Suplementar 1). Além disso, para evitar a radiólise do produto final, 5 mg de ascorbato de sódio em 1 mL de soro fisiológico a 0,9% injetáveis foram adicionados manualmente ao frasco do produto final através do filtro esterilizante, resultando em um volume de produto final de 11 mL. Cada lote foi testado até 3 h após a produção e tanto a produção de baixa atividade (eluição de gerador único) quanto a de alta atividade (eluição de gerador duplo) demonstraram excelente estabilidade radioquímica (>95% por HPLC e TLC). É importante enfatizar que a implementação deste protocolo envolve o manuseio de materiais radioativos não selados e só deve ser realizada por pessoal devidamente treinado. O protocolo deve ser realizado atrás de proteção contra radiação, de preferência dentro de uma célula quente ventilada. O objetivo esperado da síntese de [68Ga]Ga-FAPI-46 usando este protocolo é a administração a pacientes para diagnóstico por imagem. Como tal, técnicas assépticas rigorosas devem ser seguidas por toda parte. O teste de controle de qualidade de [68Ga]Ga-FAPI-46, conforme descrito no protocolo acima, é fundamental para garantir a qualidade do produto final.
Prevê-se que qualquer local que fabrique [68Ga]Ga-PSMA-11 ou [68Ga]Ga-DOTA-TATE no sintetizador MS deve estar totalmente equipado para preparar [68Ga]Ga-FAPI-46 usando o protocolo descrito aqui, com apenas pequenas modificações necessárias para o uso de geradores ou reagentes alternativos. Devido à crescente demanda por [68Ga]Ga-FAPI-46 nas clínicas, o trabalho apresentado aqui foi projetado para atender a várias necessidades e capacidades do local, desde a produção de doses de 1-2 pacientes de [68Ga]Ga-FAPI-46 por síntese no método de gerador único e até 4-5 pacientes por síntese para o método de gerador duplo, dependendo da disponibilidade da(s) câmera(s) PET.

A proteína de ativação de fibroblastos (FAP) tornou-se um alvo proeminente para imagens e terapia do câncer1,2. A PAF é um marcador específico de fibroblastos associados ao câncer (CAFs), um tipo de célula estromal que constitui grande parte do microambiente de cânceres sólidos. Os CAFs desempenham um papel fundamental no crescimento, invasão e metástase do tumor3. Eles são encontrados na maioria dos tumores sólidos, incluindo câncer de mama, próstata e pâncreas1. Ao direcionar a PAF com inibidores de pequenas moléculas marcados com radionuclídeos diagnósticos ou terapêuticos, imagens não invasivas seletivas e terapia desses cânceres podem ser alcançadas4,5,6. Moléculas inibidoras de FAP (FAPI), como FAPI-02, FAPI-04, FAPI-46 e FAPI-74 marcadas com 68Ga e 18F, representam uma classe de agentes direcionados à FAP à base de quinolina que foram desenvolvidos por equipes do Hospital Universitário de Heidelberg e do Centro Alemão de Pesquisa do Câncer (DKFZ), Alemanha7,8,9,10,11, com base em trabalhos anteriores que identificaram o altamente promissor andaime N-(4-quinolinoil)-glicil-(2-cianopirrolidina) para inibição de FAP12,13. Mais recentemente, inibidores de FAP de peptídeo cíclico, como FAP-228614 e 3BP-394015, foram desenvolvidos para imagem e terapia.
[68Ga]Ga-FAPI-04 demonstrou captação em 28 tipos diferentes de câncer, incluindo câncer de mama, pulmão, próstata, pâncreas e colorretal16. Além da vantagem prática de não exigir jejum e repouso9, o FAPI-PET mostrou uma vantagem diagnóstica sobre (ou um papel complementar com) FDG-PET, como no câncer gastrointestinal, de mama, ovário e fígado, em metástases cerebrais de câncer de pulmão17 e nos casos em que os achados do FDG são inconclusivos18. 68A FAPI marcada com Ga também mostrou algumas aplicações não oncológicas interessantes em doenças inflamatórias relacionadas ao sistema imunológico, como fibrose e artrite reumatoide19,20. O [68Ga]Ga-FAPI-46 apresentado mais recentemente, uma variante do [68Ga]Ga-FAPI-04, que tem uma ligação modificada com o ácido dodecano tetracético (DOTA), exibe propriedades farmacocinéticas aprimoradas e melhor retenção tumoral, resultando em imagens de maior contraste do que aquelas obtidas usando [68Ga]Ga-FAPI-02 ou [68Ga]Ga-FAPI-046,10. O uso de inibidores de FAP marcados para diagnóstico e tratamento está sob patente internacional21 e o uso de [68Ga]Ga-FAPI-46 está atualmente licenciado22.
As preparações relatadas de [68Ga]Ga-FAPI-46 usando 68Ga produzidos por cíclotron ou 68Ga eluídos de um gerador de 68Ge/68Ga incluem o uso de protocolos manuais e sintetizadores automatizados. Um protocolo de rotulagem manual para [68Ga]Ga-FAPI-46 foi descrito, com base em métodos relatados anteriormente para [68Ga]Ga-FAPI-02 e [68Ga]Ga-FAPI-0423,24. Embora a rotulagem manual não exija equipamento especializado, essa abordagem pode levar ao aumento da dose de radiação do operador e à variabilidade potencial dentro da produção25; daí a necessidade de automatizar a produção para aplicações clínicas de rotina. Além disso, o uso de um sintetizador automatizado é mais compatível com os regulamentos internacionais de BPF. A preparação de [68Ga]Ga-FAPI-46 foi desenvolvida em uma variedade de sintetizadores comerciais, usando 68Ga de diferentes geradores26,27,28,29,30,31,32,33 ou produzido por ciclotron68Ga34. As especificidades desses métodos automatizados estão resumidas na Tabela Suplementar S1 (Arquivo Suplementar 1). Métodos de síntese automatizados para outros inibidores de FAP marcados com 68Ga e 177Lu também foram publicados nos últimos anos35,36.
No Sir Charles Gairdner Hospital RAPID Center, desenvolvemos e validamos a preparação de [68Ga]Ga-FAPI-46 no sintetizador iPHASE MultiSyn (doravante denominado sintetizador MS). Este sintetizador é usado rotineiramente em nosso laboratório, bem como em outras instalações de produção na Austrália para a preparação de radiofármacos marcados com 68Ga, 177Lu e 89Zr37,38,39. O sintetizador MS é operado baixando uma lista de etapas de sequência do Excel para sua memória interna. Esta lista de etapas de sequência é fácil de usar e facilmente modificável. Além disso, o sintetizador permite intervenções no meio da produção, como repetir etapas, voltar às etapas anteriores, pular etapas e pausar a produção quando necessário. É equipado com detectores de radiação colocados em locais estratégicos, permitindo ao usuário monitorar o processo de produção em tempo real. O sintetizador MS é compatível com todos os geradores comerciais de 68Ga e permite a eluição de gerador simples ou duplo. O procedimento descrito neste trabalho utiliza 68Ga de um ou dois geradores de 68Ge/68Ga e envolve tanto a pré-purificação de 68Ga quanto a pós-purificação do produto final. O tempo de reação ideal e a comparação do desempenho de três tipos diferentes de cartuchos de extração em fase sólida (SPE) de pós-purificação com o fornecido no do fornecedor também foram avaliados como parte deste estudo.

<table><tbody><tr><td>0,1 M Ácido clorídrico (HCl) ultra puro</td><td>ABX composto bioquímico avançado (Radberg, Alemanha)</td> <td>HCl-103-G</td><td>Usado para eluição de gerador (es)</td></tr><tr><td>Acetato de amônio</td><td>Sigma Aldrich Pty Ltd (NSW, Austrália)</td> <td>A1542-250G</td><td>Usado para fazer a fase móvel iTLC</td></tr><tr><td>C18 SepPak Plus curto (360 mg)</td> <td>Águas</td><td>WAT020515</td><td>Sílica pós-purificação SPE</td></tr><tr><td>Chromolith Performance RP-18 endcapped 100-4.6 monolítico</td><td>Merck Pty Ltd (Victoria (Austrália)</td><td>1021290001</td><td>HPLC RP-18 endcapped column, usado para controle de qualidade de HPLC</td></tr><tr><td>Calibrador de dose</td><td>Capintec</td><td>CRC-15PET</td><td>Usado para calibrar e medir a atividade de 68Ga</td></tr><tr><td>Dual scan-RAM&nbsp;</td><td>LabLogic Limited (VA, EUA)</td><td>SR-1A</td><td>Scanner Radio-TLC para análise do papel iTLC</td></tr><tr><td>Precursor FAPI-46 (GMP)</td><td>Composto bioquímico avançado ABX (Radberg, Alemanha)</td><td>3601.0000.050</td><td>Precursor de peptídeos</td></tr><tr><td>Facilidade de enchimento Frasco de vácuo estéril (10 mL)</td><td>Iosotopos HUAYI</td><td>SVV-10C</td><td>Usado para amostras de esterilidade e retenção</td></tr><tr><td>Facilidade de enchimento Frasco de vácuo estéril (25 mL)</td><td>Iosotopos</td> <td>HUAYISVV-25A</td><td>Usado para radiomarcação de</td></tr><tr><td>peptídeo Ga68 do produto final com pré-purificação do gerador</td><td>iPHASE Technologies (Melbourne, Austrália)</td> <td>MSR-120G- (RK-3296)</td> <td>Conjunto de reagentes&nbsp;</td></tr><tr><td>Radiomarcação Ga68 com pré-purificação do gerador</td><td>iPHASE Technologies (Melbourne, Austrália)</td><td>MSH-120</td><td>Hardware + conjunto de auxiliares&nbsp;</td></tr><tr><td>Sistema de cromatografia gasosa (GC)</td><td>Tecnologias Agilent (Vic, Austrália)</td><td>G2630A</td><td>Usado para medir solvente residual</td></tr><tr><td>GS Fonte padrão (Ba133)</td><td>Global Medical Solutions Pty Ltd (Austrália)</td><td>D-102-19</td><td>Usado para calibrar o espectômetro gama</td></tr><tr><td>GS Fonte padrão (Co60)</td><td>Global Medical Solutions Pty Ltd (Austrália)</td><td>1559-84</td><td>Usado para calibrar o espectômetro gama</td></tr><tr><td>Sistema de cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC)</td><td>Shimadzu Scientific Instruments (NSW, Austrália)</td><td>LC-20</td><td>Equipamento HPLC</td></tr><tr><td>Agulha de ventilação hidrofóbica</td><td>Baldwin Medical (Victoria, Austrália)</td><td>1088</td><td>Usado com frasco de produto final</td></tr><tr><td>&nbsp; IGG100&nbsp;</td><td>Eckert & Produtos de isótopos Ziegler&nbsp; (Berlim, Alemanha)</td><td>Gerador IGG100-65M-NT</td><td>68Ge/68Ga</td></tr><tr><td>Seringa de 5 mL (Seringa individual Injekt luer lock)</td><td>B Braun (Melsungen, Alemanha)</td><td>4606710V</td><td>Seringas de polipropileno (PP)/polietileno (PE), livres de látex, PVC e seringa livre de óleo de silicone usadas para reagentes</td></tr><tr><td>Tecnologias Agilent de papel iTLC-SG</td><td>(Vic, Austrália)</td><td>SGI0001</td><td>Usado para análise iTLC</td></tr><tr><td>Software LabLogic (LAURA)</td><td>LabLogic Limited (VA, EUA)</td><td>Software LAURA versão 6.1</td><td>Usado para análise de rádio-TLC</td></tr><tr><td>Ácido L-ascórbico Trace select</td><td>Fluka Sigma</td><td>05878-100G</td><td>Usado como eliminador de radicais na mistura de reação</td></tr><tr><td>Lichrosolv Acetonitrila (ACN)</td><td>Sigma Aldrich Pty Ltd (NSW, Austrália)</td><td>1.00030.2500</td><td>Usado para fazer HPLC fase móvel orgânica</td></tr><tr><td>Lichrosolv Water</td><td>Sigma Aldrich Pty Ltd (NSW, Austrália)</td><td>1.15333.2500</td><td>Usado para fazer HPLC fase móvel aquosa</td></tr><tr><td>Metanol (MeOH)</td> <td>Sigma Aldrich Pty Ltd (NSW, Austrália)</td> <td>1060182500</td><td>Usado para fazer detector de fase móvel iTLC</td></tr><tr><td>Na + I-</td><td>LabLogic Limited (VA, EUA)</td> <td>1 "NaI / PMT</td><td>Radiodetector usado para radio-HPLC</td></tr><tr><td>Oasis HLB (30 mg)</td> <td>Waters (Milford, MA, EUA)</td><td>WAT094225</td><td>Copolímero de pós-purificação SPE</td></tr><tr><td>Oasis HLB Plus curto (225 mg)</td><td>Waters (Milford, MA, EUA)</td><td>186000132</td><td>Tiras de pH SPE de copolímero de pós-purificação</td></tr><tr><td></td><td>Thermo Fisher Scientific Australia Tty Ltd</td><td>90424</td><td>Usado para medir o pH do produto</td></tr><tr><td>Detector PS&nbsp;</td><td>LabLogic Limited (VA, EUA)</td><td>Radiodetector de plástico/PMT</td><td>PS usado para rádio-TLC</td></tr><tr><td>&nbsp; Tubo Safe Lock (1,5 mL)</td><td>Eppendorf</td><td>0030 120.086</td><td>Usado para amostras de controle de qualidade</td></tr> <tr><td>(+)-L-ascorbato de sódio</td><td>Merck Pty Ltd (Victoria (Austrália)</td><td>11140-250G</td><td>Estabilizador do produto final Solução de</td></tr><tr><td>cloreto de sódio (NaCl) (solução salina)</td><td>Pfizer</td><td>PS111</td><td>0,9%, para injeção, grau USP</td></tr><tr><td>Sterican 100 Needles</td><td>B Braun (Melsungen, Alemanha)</td><td>4667093</td><td>Usado para produto final</td></tr><tr><td>Filtro de seringa estéril (0,22 &micro; m)</td> <td>Millipore Sigma (Burlington, MA, EUA)</td><td>SLGSV255F</td><td>Millex-GV</td></tr><tr><td>Strata SCX (no kit de de hardware)</td><td>Phenomenex dentro do kit de hardware da iPHASE Technologies (Melbourne, Austrália)</td><td>MSH-120</td><td>Sílica de pré-purificação SPE dentro do</td></tr><tr><td>de hardware Strata X (no kit de de hardware)</td><td>Phenomenex dentro do kit de hardware da iPHASE Technologies (Melbourne, Austrália)</td><td>MSH-120</td><td>Sílica de pós-purificação SPE dentro do de hardware</td></tr><tr><td>Trace Select Water para análise de traços</td><td>Honeywell Riedel-de-Haen</td><td>95305-2.5L</td><td>Usado para mistura de reação e para pré-condicionar o cartucho SPE de pré-purificação</td></tr><tr><td>Ácido trifluoracético (TFA)</td> <td>Sigma Aldrich Pty Ltd (NSW, Austrália)</td> <td>302031-10X1mL</td><td>Usado para fazer seringa de insulina ultrafina de fase móvel aquosa HPLC</td></tr><tr><td>(0,5 mL)</td> <td>BD</td><td>326769</td><td>Usado para dispensar amostras de controle de qualidade</td></tr><tr><td>Filtro ventilado Cathivex-GV 0.22 &micro; m, membrana Durapore PVDF de baixa ligação a proteínas</td><td>Merk Millipore (Cork, Irlanda)</td><td>SLGV02505</td><td>Usado para filtrar o produto final</td></tr></tbody></table>

uma radiossíntese automatizada de [68ga]ga-fapi-46 para uso clínico de rotina

An Automated Radiosynthesis of [68Ga]Ga-FAPI-46 for Routine Clinical Use

[68Ga]Ga-FAPI-46 é um novo marcador promissor para a imagem da proteína de ativação de fibroblastos (FAP) por tomografia por emissão de pósitrons (PET). Os inibidores de FAP marcados (FAPIs) demonstraram captação em vários tipos de câncer, incluindo câncer de mama, pulmão, próstata, pâncreas e colorretal. O FAPI-PET também possui uma vantagem prática sobre o FDG-PET, pois não são necessários jejum e repouso. [68Ga]O Ga-FAPI-46 exibe propriedades farmacocinéticas aprimoradas, retenção tumoral aprimorada e imagens de maior contraste do que as imagens apresentadas anteriormente [68Ga]Ga-FAPI-02 e [68Ga]Ga-FAPI-04. Embora um protocolo de síntese manual para [68Ga]Ga-FAPI-46 tenha sido inicialmente descrito, nos últimos anos, métodos automatizados usando diferentes sintetizadores comerciais foram relatados.
Neste trabalho, descrevemos o desenvolvimento da síntese automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 usando o sintetizador iPHASE MultiSyn para aplicações clínicas. Inicialmente, foram investigadas a otimização do tempo de reação e a comparação do desempenho de quatro diferentes cartuchos de extração em fase sólida (SPE) para purificação do produto final. Em seguida, o desenvolvimento e a validação da produção de 0,6-1,7 GBq de [68Ga]Ga-FAPI-46 foram conduzidos usando esses parâmetros otimizados. O produto foi sintetizado em 89,8 ± rendimento corrigido de caimento de 4,8% (n = 6) ao longo de 25 min. O produto final atendeu a todas as especificações de controle de qualidade recomendadas e foi estável até 3 h após a síntese.

A eficiência de marcação radioativa avaliada entre 5 e 20 minutos de reação a 95 °C é apresentada na Tabela 2. As cartuchas de SPE pós-purificação HLB 30 mg, Strata X 60 mg e Sep-Pak C18 Plus Short 360 mg apresentaram recuperações muito semelhantes (94,3 ± 0,5% corrigida para decaimento [DC]) (Tabela 3). Em nossa experiência, a recuperação na HLB 225 mg foi muito menor (63,8 ± 3,5% DC).
Tabela 2: Resumo da conversão radioquímica da reação bruta medida por cromatografia em camada delgada (CCD) para tempos de reação de 5, 10, 15 e 20 minutos (n = 3). Abreviações: CCD = cromatografia em camada delgada; Exp. = experimento. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708_Table%202_Summary%20of%20the%20radiochemical...xlsx" target="_blank">Clique aqui para baixar esta tabela.</a>
Tabela 3: Resumo da % de recuperação e das análises de pureza radioquímica por TLC e HPLC de [68Ga]Ga-FAPI-46 no final da síntese (EOS), utilizando quatro cartuchos diferentes de extração em fase sólida (n = 3). Abreviações: SPE = extração em fase sólida; FAPI = inibidor da proteína ativadora de fibroblastos; EOS = final da síntese; RSD = desvio padrão relativo; TLC = cromatografia em camada delgada; HPLC = cromatografia líquida de alta eficiência. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708_Table%203.zip" target="_blank">Clique aqui para baixar esta tabela.</a>
O protocolo automatizado para a produção de [68Ga]Ga-FAPI-46 foi desenvolvido utilizando um tempo de reação de 10 min e a cartela de extração em fase sólida (SPE) Strata X de 60 mg. Foram realizadas duas séries de três lotes de validação utilizando eluições de um único gerador e de dois geradores, obtendo-se atividades médias finais do produto de 0,60 GBq e 1,6 GBq, respectivamente (Tabela 4). Em ambas as séries, o final [68O produto Ga]Ga-FAPI-46 passou por todos os testes de controle de qualidade (Tabela 4). A estabilidade do [68O produto [⁶⁸Ga]Ga-FAPI-46 foi avaliado mediante a análise da pureza radioquímica do produto por TLC e HPLC (Figura 3 e Figura 4) para todas as seis produções por até 3 h pós-síntese e foi maior que 98,0 ± 1,8% (n = 3) e 99,1 ± 0,9% (n = 3), respectivamente. No geral, a síntese de [68Ga]Ga-FAPI-46 foi validado com um rendimento corrigido para decaimento de 89,8 ± 4,8% (n = 6). A produção automatizada está atualmente sendo utilizada para a produção de [68Ga]Ga-FAPI-46 para apoiar ensaios clínicos.
Tabela 4: Resumo dos resultados de controle de qualidade (CQ) das corridas de validação de [68Ga]Ga-FAPI-46 (n = 6): com baixa atividade a partir de uma única eluição de gerador (n = 3) e alta atividade a partir de eluição dupla de gerador (n = 3). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/Table%204_Summary%20of%20the%20QC..._Revision%202.xlsx" target="_blank">Clique aqui para baixar esta tabela.</a>
<img alt="Gráfico de radioatividade versus distância para compostos de \[^{68}\text{Ga}\]; resultados de separação cromatográfica." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66708/66708fig03.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Figure 3"> 
Figura 3: Cromatograma de CLT de [68Ga]Ga-FAPI-46: (Aplicação de 5 µL) no final da síntese (EOS), utilizando papel iTLC-SG e eluente de acetato de amônio 1 M/metanol (1:1 v/v). A radioatividade foi medida com um scanner de CLT com detecção radioativa PS Plastic, integrando a cada incremento de 1 mm a uma velocidade de 1 mm/s. Abreviações: CLT = cromatografia em camada delgada; FAPI = inibidor da proteína de ativação de fibroblastos; EOS = fim da síntese; iTLC-SG = CLT instantânea em gel de sílica. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para visualizar uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Gráfico de cromatografia; detecção UV e radioativa de Ga-FAPI-46; intensidade do pico versus tempo." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66708/66708fig04.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Figure 4"> 
Figura 4: Análise por HPLC do produto final [68Ga]Ga-FAPI-46. Coluna RP-18 encapada, fase móvel A: ácido trifluoroacético 0,1%, fase móvel B: acetonitrila pura. Gradiente: 0-0,5 min 2% B, 0,5-10,0 min 2%-35% B, 10,0-12,0 min 35% B e 12,0-15,0 min 35% B. O comprimento de onda UV foi de 280 nm e a vazão de 2 mL/min. (A) Cromatograma UV do produto [68Ga]Ga-FAPI-46, incluindo o sinal UV do ascorbato de sódio em 1,0 min e os dois picos pequenos em 4,5 e 4,8 min, correspondentes ao [natGa]Ga-FAPI-46 e ao precursor FAPI-46, respectivamente. Os cromatogramas UV dos padrões de [natGa]Ga-FAPI-46 a 10 mg/L e do precursor FAPI-46 a 10 mg/L estão apresentados na Figura Suplementar S2 (Arquivo Suplementar 1). (B) Radio-cromatograma do [68Ga]Ga-FAPI-46 (Rt [68Ga]Ga-FAPI-46 = 4,6 min - Rt do [68Ga]Ga3+ livre = 1,1 min). Abreviações: HPLC = cromatografia líquida de alta eficiência; FAPI = inibidor da proteína de ativação de fibroblastos; Na+Asc- = ascorbato de sódio. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708fig04large.jpg" target="_blank">Clique aqui para visualizar uma versão maior desta figura.</a>
Arquivo Suplementar 1: Este documento inclui: Tabela Suplementar S1 — Detalhes relatados de sínteses automatizadas e controle de qualidade para [68Ga]Ga-FAPI-46, Seção Suplementar 1 — Experimentos preliminares: Otimização do tempo de reação e seleção da cartela de SPE pós-purificação para a produção automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 no radio-sintetizador MS, Figura Suplementar S1 — Imagens dos reagentes e configuração final para a síntese automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 no sintetizador MS, Figura Suplementar S2 — Cromatogramas UV de [natGa]Ga-FAPI-46 e do precursor FAPI-46, e Figura Suplementar S3 — Cromatograma radioativo de [68Ga]Ga-FAPI-46 para marcação com alta atividade (2,8 GBq) sem ácido ascórbico no reator. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708_Supplemental%20file_Final_14052024.zip" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>

Este trabalho descreve a produção automatizada de até 1,7 GBq de [68Ga]Ga-FAPI-46 no sintetizador iPHASE MultiSyn para imagens PET da proteína de ativação de fibroblastos.

Uma Radiossíntese Automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 para Uso Clínico de Rotina

[68Ga]Ga-FAPI-46 is a promising new tracer for the imaging of fibroblast activation protein (FAP) by positron emission tomography (PET). Labeled FAP ...

an-automated-radiosynthesis-of-68gaga-fapi-46-for-routine-clinical-use

Research

JoVE Journal

Chemistry

Química

Demonstramos a síntese radioquímica semi-automatizada de [18F] 3F4AP e procedimentos de controle de qualidade.

Automotive Radiochemical Synthesis of [<sup&gt; 18</sup&gt; F] 3F4AP: Um novo marcador de PET para imagens de doenças desmielinizantes

Positron-emissão tomografia computadorizada (PET) de imagens locais que são envolvidos em múltiplas tentativas iniciais de pesquisa clínica precisam de recursos de fabricação radiotracer robusto e versátil. Usando o radiotracer [18F] Clofarabine como um exemplo, ilustramos como automatizar a síntese de um radiotracer usando um radiosynthesizer flexível, baseada em fita e validar a síntese para uso clínico.

Automação de um protocolo de síntese Positron emission Tomography (PET) Radiotracer para produção clínica

Este artigo descreve a radiossíntese, formulação, controle de qualidade de uma nova sonda radiomarcada (ou seja, nanocorpo NM-02 marcado com 68Ga) e seu uso para imagens de PET/CT de pequenos animais em um modelo de xenoenxerto.

Radiossíntese, controle de qualidade e imagens de tomografia por emissão de pósitrons de pequenos animais de 68nanomoléculas marcadas com Ga

Esta pesquisa descreve o processo automatizado para produção de [68Ga]Ga-3BP-3940 com o sintetizador GAIA V2, para imagens PET da proteína de ativação de fibroblastos. Os resultados dos testes de controle de qualidade realizados em três lotes de teste também são apresentados.

Preparação automatizada de [68Ga]Ga-3BP-3940 em um módulo de síntese para imagens PET do microambiente tumoral

Este vídeo é ilustrar um método rápido, eficiente para metacrilato de poli (etileno-glicol), permitindo que as polimerizações de cadeia e síntese de hidrogel. Ele vai demonstrar como a introdução de funcionalidades semelhante metacrilamida em peptídeos, detalhe métodos analíticos comuns para avaliar a eficiência de funcionalização, fornecer sugestões para a solução de problemas e modificações avançadas, e demonstrar técnicas típicas de caracterização hidrogel.

A funcionalização assistida por microondas, de poli (etileno glicol) e Peptídeos On-resina para uso em Polimerizações cadeia e formação de hidrogel

Devido à sua meia-vida radioativa de vários dias e propriedades de decaimento favoráveis, o radiometal emissor de pósitrons 89Zr é extremamente adequado para uso em radiofármacos baseados em anticorpos para imagens PET. Neste protocolo, serão descritas a bioconjugação, radiossíntese e aplicação pré-clínica de 89anticorpos marcados com Zr.

O bioconjugação e radiossíntese de<sup&gt; 89</sup&gt; Anticorpos Zr-DFO-rotulados

Os protocolos apresentados descrevem duas técnicas baseadas em ensaio imunossorbente ligado a enzima (ELISA) para a investigação rápida de interações ligante-receptor: O primeiro ensaio permite a determinação da constante de dissociação entre ligante e receptor. O segundo ensaio permite uma triagem rápida de peptídeos bloqueadores para interações ligante-receptor.

Um ELISA baseada Encadernação e Método de competição de determinar rapidamente interacções ligando-receptor

A espectrometria de massa de tempo de reação de transferência de prótons de voo permite a análise de alta sensibilidade, rápida e não invasiva de compostos orgânicos voláteis. Para demonstrar seu potencial, damos três exemplos: fermentação de ácido lático de iogurte (monitoramento on-line de bioprocessos), diferentes genótipos de maçã (triagem em larga escala) e espaço retronasal após beber café (análise do espaço nasal).

PTR-ToF-MS acoplado com um sistema automatizado da amostragem e uma análise costurada dos dados para estudos do alimento: Monitoração do Bioprocess, seleção e análise do espaço do nariz

A moderna difração de pó de raios-X de alta resolução (XRPD) em laboratório é usada como uma ferramenta eficiente para determinar estruturas cristalinas de produtos de corrosão há muito conhecidos em objetos históricos.

Difração de raios-X em Ciência da Conservação: Rumo a rotina determinação da estrutura cristalina de corrosão produtos na arte Heritage Objects

Este trabalho apresenta um protocolo para a visualização de fluxos gasosos de uma fonte de ionização ambiente usando fotografia de schlieren e espectrometria de massas.

Visualização de ambiente Espectrometria de Massa com o uso da fotografia Schlieren

Aprenda a radiossíntese automatizada de [68Ga]Ga-FAPI-46 para imagem PET em oncologia usando o sintetizador iPHASE MultiSyn. Este método melhora a segurança do pessoal e garante conformidade com as BPF.

Uma Radiossíntese Automatizada de [⁶⁸Ga]Ga-FAPI-46 para Uso Clínico de Rotina

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