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JoVE Journal Developmental Biology
Light Sheet Microscopy Imaging and Mounting Strategies for Early Zebrafish Embryos

Imagem de microscopia de folha de luz e estratégias de montagem para embriões iniciais de peixe-zebra

Full Text
1,403 Views
08:33 min
July 19, 2024

DOI: 10.3791/66735-v

Swetha Nagarajan*1, Siddhartha Bardhan*1, Sundar Ram Naganathan1

1Department of Biological Sciences,Tata Institute of Fundamental Research

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Uma estratégia de preparação de amostras para imagens de embriões iniciais de peixe-zebra dentro de um córion intacto usando um microscópio de folha de luz é descrita. Ele analisa as diferentes orientações que os embriões adquirem dentro do córion nos estágios de 70% de epibólia e gema e detalha estratégias de imagem para obter resolução em escala celular em todo o embrião usando o sistema de folha de luz.

Apesar das assimetrias internas ao longo do eixo esquerda-direita, na maioria dos organismos superiores, estruturas externas como esqueleto e músculo se desenvolvem de maneira simétrica. Usando embriões de peixe-zebra, combinamos imagens ao vivo de alta resolução, análise quantitativa e modelagem teórica para investigar os princípios do estabelecimento de simetria. O campo depende fortemente de várias técnicas de microscopia para imagens de embriões em desenvolvimento com alta resolução espaço-temporal, seguidas de análise quantitativa das imagens adquiridas.

Diferentes formas de microscopia oferecem vantagens únicas. No entanto, ultimamente, a microscopia de super-resolução em folha de luz e ao vivo avançou significativamente nossa visão dos processos dinâmicos no desenvolvimento embrionário. A microscopia confocal e multifotônica tradicional geralmente leva ao fotobranqueamento e fototoxicidade, além de um campo de visão limitado ao obter imagens de embriões vivos.

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