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DOI: 10.3791/66771-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol describes a technique for the analysis of respiratory supercomplexes when only small amounts of samples are available. The research focuses on understanding mitochondrial biogenesis and the organization of the OXPHOS system.
Este protocolo descreve uma técnica para a análise de supercomplexos respiratórios quando apenas pequenas quantidades de amostras estão disponíveis.
Nossa pesquisa está focada em entender melhor a biogênese mitocondrial, em particular, a organização e regulação do Sistema OXPHOS, e também em definir o papel que as mitocôndrias desempenham em doenças que vão do câncer a distúrbios neurodegenerativos. As mitocôndrias desempenham papéis múltiplos e essenciais na célula, condicionando todo o seu metabolismo e sobrevivência. Estamos lentamente aumentando nosso conhecimento da complexidade mitocondrial e sua contribuição para os mecanismos de adaptação celular na saúde e na doença.
Contribuímos para estabelecer um novo modelo de organização para o sistema OXPHOS, o modelo de plasticidade que integra propostas anteriores e assume a coexistência de supercomplexos e complexos livres em diferentes proporções para otimizar sua função e permitir adaptações celulares. Nosso protocolo permite partir de pequenos tecidos ou amostras de cultura de células para obter quantidades suficientes de proteína mitocondrial para analisar a montagem e o status e função de supercomplexos por eletroforese nativa azul ou outras técnicas. Podemos fazer isso de forma reprodutível em pouco tempo com um equipamento simples e relativamente com baixos custos.
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