Name: Avaliação dinâmica da função plaquetária multiparamétrica usando um biossensor capacitivo (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-02T12:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 32 s
Description: Aprenda a avaliar a função plaquetária multiparamétrica usando um biossensor capacitivo em ambiente semi-rígido. Este método mede contagem, ativação e vias de sinalização plaquetária com maior relevância fisiológica.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>1-Dodecanethiol</td><td>Sigma-Aldrich, MO, EUA</td><td>471364-100ML</td><td>1 mM</td></tr><tr><td>200-proof etanol</td><td>Sigma-Aldrich, MO, EUA</td><td>EX0276-1</td><td></td></tr><tr><td>impressora 3D</td><td>Shenzhen Creality 3D Technology Co, Ltd.</td><td>Ender-3 V3</td><td></td></tr><tr><td>Material de impressão 3D</td><td>HATCHBOX 3D, CA, U.S.A</td><td>3D PLA-1KG-1.75</td><td></td></tr><tr><td>Adenosina 5&prime;-difosfato</td><td>Sigma Aldrich, U.S.A</td><td>01905-250MG-F</td><td></td></tr><tr><td>ADP Aspirina&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich, MO, EUA</td><td>A2093-100G</td><td></td></tr><tr><td>Gravação de íons reativos profundos</td><td>Omega Engineering, Inc.</td><td>SPTS Rapier DRIE</td><td></td></tr><tr><td>Dimetil Sulfóxido</td><td>Sigma-Aldrich, MO, EUA</td><td>D8418-50ML</td><td>DMSO</td></tr><tr><td>Sistemas de Deposição de Alto Vácuo</td><td>CHA&nbsp;</td><td>SEC-600</td><td></td></tr><tr><td>Fibronectina Humana</td><td>Sigma-Aldrich, MO, EUA</td><td>CLS356008-1EA</td><td>Fn</td></tr><tr><td>KOH</td><td>Sigma-Aldrich, MO, EUA</td><td>P1767-250G</td><td></td></tr><tr><td>Medidor LCR&nbsp;</td><td>Keithley Instruments, Inc., OH, EUA</td><td>Keithley EL 4980AL</td><td></td></tr><tr><td>Suportes de medidores LCR</td><td>Signatone Corporation, CA, EUA</td><td>SCA-50-4</td><td></td></tr><tr><td>Sistema de alinhador de máscara</td><td>ABM, EUA, Inc.</td><td>Micro-posicionadores ABM/6/350/NUV/DCCD/SA</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Signatone, CA, EUA</td> Sonda de agulha <td>S-725</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Signatone Corporation, CA,</td><td>EUA SCAT5T-4</td><td>12.5 &mu; m raio</td></tr><tr><td>tampolado com fosfato solução salina</td><td>Sigma-Aldrich, MO, EUA</td><td>P4474-1L</td><td>PBS, pH 7,4</td></tr><tr><td>Gravura a Ácido de Íons Reativos</td><td>Plasma-Therm, EUA</td><td>RIE Vision 320</td><td></td></tr><tr><td>substrato de silício</td><td>Wafer World Inc</td><td>SKU # 1766</td><td></td></tr><tr><td>Tubos padrão de citrato de 3,2%</td><td>Tiger Medical, NJ, EUA</td><td>Covidien / Cardinal Health 8881340478 Monoject</td><td></td></tr><tr><td>Thrombin</td><td>Enzyme Research Laboratories, EUA</td><td>HT 1002a</td><td></td></tr><tr><td>Ticagrelor</td><td>Sigma-Aldrich, MO, EUA</td><td>PHR2788-400MG</td><td></td></tr><tr><td>Tyrode' s buffer</td><td>Boston Bioproducts, EUA</td><td>BSS-375</td><td></td></tr><tr><td>UV fotorresistente</td><td>AZ materiais eletrônicos, NC, EUA</td><td>AZ 9260</td><td>15um</td></tr></tbody></table>

avaliação dinâmica da função plaquetária multiparamétrica usando um biossensor capacitivo

Dynamic Multiparameter Platelet Function Assessment Using a Capacitive Biosensor

Este estudo tem como objetivo realizar uma avaliação dinâmica da função plaquetária. Seguindo o protocolo descrito acima, a solução de c-PRP foi preparada e as plaquetas foram semeadas no eletrodo revestido com Fn em T-MCC. As plaquetas flutuantes foram lavadas pela etapa de lavagem e um agonista foi adicionado para ativar as plaquetas aderidas. Resultados detalhados e discussão podem ser encontrados em nosso relatório anterior28.
A Figura 4A</stron...

Avaliação dinâmica da função plaquetária multiparamétrica usando um biossensor capacitivo

Platelets play a fundamental role in blood clotting through a series of regulated responses, including adhesion, spreading, granular secretion, ...

dynamic-multiparameter-platelet-function-assessment-using-capacitive

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioengenharia

Este vídeo demonstra o método para avaliar o impacto da tensão de cisalhamento nas plaquetas. O tratamento com anticorpos induz dissociação e alterações conformacionais nos complexos mecanorreceptores, ativando as plaquetas e expressando marcadores na superfície. Esses marcadores são observados por meio de imunomarcação e citometria de fluxo.

Os efeitos do estresse de cisalhamento em plaquetas tratadas com anticorpos contra receptores mecanossensoriais

A transfusão de plaquetas e hemostasia foi modelada usando reconstituição sanguínea e câmaras de fluxo microfluídico para investigar a função dos bancos de plaquetas de sangue. Os dados demonstram as consequências da lesão de armazenamento plaquetário na hemostasia, in vitro.

Microfluídico Fluxo Chambers utilizando sangue reconstituído ao Modelo Hemostasia e transfusão de plaquetas<em&gt; In Vitro</em

Este trabalho descreve um modelo experimental de hemostasia que mede simultaneamente a função plaquetária e coagulação. Plaquetas e fibrina de fluorescência é medida em tempo real, e taxa de adesão de plaquetas, taxa de coagulação, e o início da coagulação são determinados. O modelo é usado para determinar as propriedades pró-coagulantes de plaquetas sob fluxo em concentrados para transfusão.

Um Modelo de Câmara Microfluidic Fluxo de transfusão de plaquetas e Hemostasia Medidas deposição de plaquetas e formação de fibrina em tempo real

Aqui, apresentamos um protocolo para a detecção e quantificação de baixas moléculas abundantes em soluções complexas usando molecular imprinting em combinação com um biossensor de capacitância.

Detecção ultra-sensível de biomarcadores usando um Imprinting Molecular baseado Biosensor capacitivo

Um protocolo detalhado para imagens de plaquetas migratórias únicas usando amarras avidina-biotina funcionalizadas por RGD com densidade ajustável é fornecido, revelando que as plaquetas geram força suficiente para romper a ligação avidina-biotina.

Um ensaio in vitro para estudar a migração plaquetária usando amarras Avidina-Biotina Funcionalizadas por RGD

A formação de plaquetas pró-coagulantes tem sido correlacionada com um risco aumentado de trombose. Apresenta-se aqui um protocolo preciso para isolar plaquetas lavadas do sangue humano, destinado a quantificar a exposição à fosfatidilserina e a liberação de microvesículas, que são características distintivas das plaquetas pró-coagulantes.

Caracterização de plaquetas pró-coagulantes medindo a exposição à fosfatidilserina e a liberação de microvesículas de plaquetas purificadas humanas

A função plaquetária sob fluxo pode ser avaliada e a ressuscitação hemostática simulada pode ser modelada usando um dispositivo microfluídico, que tem aplicações em trauma e medicina transfusional.

Microfluídica na avaliação da função plaquetária

A citometria de fluxo multicolorida para plaquetas pode identificar novos subtipos de plaquetas dentro de subpopulações clássicas de plaquetas, como plaquetas em repouso, agregatórias, pró-coagulantes e apoptóticas. Isso permite a comparação de diferentes padrões de subpopulação induzidos por vários agonistas plaquetários. Aqui, um procedimento para estabelecer um painel de citometria de fluxo multicolorido é descrito em detalhes.

Análise de subpopulações plaquetárias por citometria de fluxo multicolorida

O presente protocolo fornece um conjunto abrangente de procedimentos necessários para analisar plaquetas pró-coagulantes, que exibem características sobrepostas de necrose, apoptose e ativação plaquetária.

Análise abrangente de plaquetas pró-coagulantes exibindo características de necrose, apoptose e ativação plaquetária

Este trabalho descreve um ensaio microfluídico que utiliza o estresse de cisalhamento para desencadear a formação de trombos no sangue e caracteriza o trombo por múltiplas dimensões de leitura. O ensaio pode medir a tendência protrombótica de amostras de sangue e, portanto, é útil no diagnóstico de doenças, descoberta de fármacos, bem como em estudos mecanicistas básicos relacionados à trombose.

Ensaio de Perfil de Trombo: Uma Plataforma Baseada em Microfluídica para Caracterização Abrangente da Trombogênese Biomecânica

Aprenda a avaliar a função plaquetária multiparamétrica usando um biossensor capacitivo em ambiente semi-rígido. Este método mede contagem, ativação e vias de sinalização plaquetária com maior relevância fisiológica.

Avaliação dinâmica da função plaquetária multiparamétrica usando um biossensor capacitivo

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