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DOI: 10.3791/66834-v
Terri A. Pietka1,2, Rita T. Brookheart1,3
1John T. Milliken Department of Medicine, Division of Nutritional Sciences and Obesity Medicine,Washington University School of Medicine, 2Nutrition and Obesity Research Center, Cellular and Molecular Biology Core,Washington University School of Medicine, 3Nutrition and Obesity Research Center, Animal Model Research Core,Washington University School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Aqui, descrevemos um método abrangente para medir a fosforilação oxidativa mitocondrial em fibras musculares esqueléticas permeabilizadas frescas de músculos humanos ou de camundongos. Este método permite a quantificação em tempo real da respiração mitocondrial e a avaliação da preferência de combustível e flexibilidade metabólica, preservando as redes mitocondriais existentes e a integridade da membrana.
Nossa pesquisa se concentra na interseção do metabolismo e das respostas ao estresse na doença metabólica, um tema importante do programa NORD da Universidade de Washington. Por meio de sinergismos entre nossos núcleos NORD, somos capazes de lidar com questões complexas no metabolismo nutricional e doenças por meio de uma abordagem interdisciplinar e colaborativa. Os ensaios tradicionais de respiração mitocondrial examinaram mitocôndrias isoladas.
O isolamento das mitocôndrias é demorado e pode comprometer a integridade da membrana mitocondrial externa. Além disso, as mitocôndrias não funcionam sozinhas, mas fazem parte de uma rede dinâmica de adaptação metabólica celular. Nosso protocolo mantém essa rede para fornecer uma avaliação fisiologicamente relevante da função mitocondrial.
Nosso foco se estendeu à identificação de reguladores da adaptação metabólica que são importantes na saúde e na doença. As principais perguntas que estamos fazendo incluem: esses reguladores, como a protease do sítio 1, são igualmente importantes em diferentes tipos de tecidos? E qual é o seu significado fisiológico?
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