Name: A remoção parcial imediata de complexos cumulus-oócitos: uma abordagem refinada para observação rápida da fertilização in vitro (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-18T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 6 s
Description: Aprenda a remoção parcial imediata de complexos cumulus-oócitos para otimizar a observação da fertilização em FIV. Este método refinado melhora a eficiência laboratorial e potencialmente a qualidade embrionária.

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<meta charset="utf8"></head><body>Melhorando os resultados da fertilização in vitro com remoção parcial de células da granulosa pós-recuperação

<ol><li>Chen, C., Kattera, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rescue+ICSI+of+oocytes+that+failed+to+extrude+the+second+polar+body+6+h+post-insemination+in+conventional+IVF%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Rescue ICSI of oocytes that failed to extrude the second polar body 6 h post-insemination in conventional IVF.</a> Hum Reprod. 18 (10), 2118-2121 (2003).</li>
<li>Barlow, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fertilization+failure+in+IVF%3A+why+and+what+next%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Fertilization failure in IVF: why and what next.</a> Hum Reprod. 5 (4), 451-456 (1990).</li>
<li>Kuczyński, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rescue+ICSI+of+unfertilized+oocytes+after+IVF%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Rescue ICSI of unfertilized oocytes after IVF.</a> Hum Reprod. 17 (9), 2423-2427 (2002).</li>
<li>He, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+early+cumulus+cells+removal+and+early+rescue+ICSI+on+pregnancy+outcomes+in+high-risk+patients+of+fertilization+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Gynecol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Effect of early cumulus cells removal and early rescue ICSI on pregnancy outcomes in high-risk patients of fertilization failure.</a> Gynecol Endocrinol. 34 (8), 689-693 (2018).</li>
<li>Turathum, B., Gao, E. M., Chian, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+function+of+cumulus+cells+in+oocyte+growth+and+maturation+and+in+subsequent+ovulation+and+fertilization%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">The function of cumulus cells in oocyte growth and maturation and in subsequent ovulation and fertilization.</a> Cells. 10 (9), 2292(2021).</li>
<li>Bárcena, P., Rodríguez, M., Obradors, A., Vernaeve, V., Vassena, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Should+we+worry+about+the+clock%3F+Relationship+between+time+to+ICSI+and+reproductive+outcomes+in+cycles+with+fresh+and+vitrified+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Should we worry about the clock? Relationship between time to ICSI and reproductive outcomes in cycles with fresh and vitrified oocytes.</a> Hum Reprod. 31 (6), 1182-1191 (2016).</li>
<li>Telfer, E. E., Grosbois, J., Odey, Y. L., Rosario, R., Anderson, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+a+good+egg%3A+human+oocyte+health%2C+aging%2C+and+in+vitro+development%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Making a good egg: human oocyte health, aging, and in vitro development.</a> Physiol Rev. 103 (4), 2623-2677 (2023).</li>
<li>D'Angelo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+good+practice+in+ultrasound%3A+oocyte+pick+up%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod+Open%22%5BJournal%5D)">Recommendations for good practice in ultrasound: oocyte pick up.</a> Hum Reprod Open. 2019 (4), hoz025(2019).</li>
<li>Hu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptomic+profiles+reveal+the+characteristics+of+oocytes+and+cumulus+cells+at+GV%2C+MI%2C+and+MII+in+follicles+before+ovulation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ovarian+Res%22%5BJournal%5D)">Transcriptomic profiles reveal the characteristics of oocytes and cumulus cells at GV, MI, and MII in follicles before ovulation.</a> J Ovarian Res. 16 (1), 225(2023).</li>
<li>Lu, W. H., Gu, Y. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+semen+analysis%3A+a+Chinese+perspective+on+the+fifth+edition+of+the+WHO+laboratory+manual+for+the+examination+and+processing+of+human+semen%5BTitle%5D)+AND+%22Asian+J+Androl%22%5BJournal%5D)">Insights into semen analysis: a Chinese perspective on the fifth edition of the WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen.</a> Asian J Androl. 12 (4), 605-606 (2010).</li>
<li>Delos Santos, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revised+guidelines+for+good+practice+in+IVF+laboratories+%282015%29%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Revised guidelines for good practice in IVF laboratories (2015).</a> Hum Reprod. 31 (2015), 685-686 (2016).</li>
<li>Nagy, Z. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pronuclear+morphology+evaluation+with+subsequent+evaluation+of+embryo+morphology+significantly+increases+implantation+rates%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Pronuclear morphology evaluation with subsequent evaluation of embryo morphology significantly increases implantation rates.</a> Fertil Steril. 80 (1), 67-74 (2003).</li>
<li>Gardner, D. K., Lane, M., Stevens, J., Schlenker, T., Schoolcraft, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reprint+of%3A+Blastocyst+score+affects+implantation+and+pregnancy+outcome%3A+towards+a+single+blastocyst+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Reprint of: Blastocyst score affects implantation and pregnancy outcome: towards a single blastocyst transfer.</a> Fertil Steril. 112 (4), Suppl1 e81-e84 (2019).</li>
<li>Esfandiari, N., Claessens, E. A., Burjaq, H., Gotlieb, L., Casper, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ongoing+twin+pregnancy+after+rescue+intracytoplasmic+sperm+injection+of+unfertilized+abnormal+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Ongoing twin pregnancy after rescue intracytoplasmic sperm injection of unfertilized abnormal oocytes.</a> Fertil Steril. 90 (1), e5-e7 (2008).</li>
<li>Wetzels, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+co-culture+with+human+fibroblasts+on+human+embryo+development+in+vitro+and+implantation%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">The effects of co-culture with human fibroblasts on human embryo development in vitro and implantation.</a> Hum Reprod. 13 (5), 1325-1330 (1998).</li>
<li>Kattera, S., Chen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+coincubation+of+gametes+in+in+vitro+fertilization+improves+implantation+and+pregnancy+rates%3A+a+prospective%2C+randomized%2C+controlled+study%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Short coincubation of gametes in in vitro fertilization improves implantation and pregnancy rates: a prospective, randomized, controlled study.</a> Fertil Steril. 80 (4), 1017-1021 (2003).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>G-IVFT PLUS</td><td>Vitrolife</td><td>10136</td><td></td></tr><tr><td>OVOIL</td><td>Vitrolife</td><td>10029</td><td></td></tr><tr><td>G-MOPS PLUS</td><td>Vitrolife</td><td>10130</td><td></td></tr><tr><td>Falcon 3003 prato</td><td>Corning</td><td>353003</td><td></td></tr><tr><td>Falcon 3001 prato</td><td>Corning</td><td>353001</td><td></td></tr><tr><td>Falcon 2001 tubo</td><td>Corning</td><td>352001</td><td></td></tr><tr><td>Falcon 4013 xícara</td><td>Corning</td><td>354013</td><td></td></tr><tr><td>Falcon 3037 prato</td><td>Corning</td><td>351058</td><td></td></tr><tr><td>Pasteur pipeta</td><td>Darwin</td><td>D1150-5P</td><td></td></tr></tbody></table>

a remoção parcial imediata de complexos cumulus-oócitos: uma abordagem refinada para observação rápida da fertilização in vitro

The Immediate Partial Removal of Cumulus-Oocyte Complexes: A Refined Approach for Rapid Observation of In Vitro Fertilization

No grupo submetido a procedimentos curtos de co-incubação, os pacientes que receberam resgate foram excluídos. Das 47 pacientes que receberam inseminação de curto prazo, não foram observadas diferenças significativas em relação à idade das pacientes e ao número de oócitos recuperados (Tabela 1). A remoção parcial imediata do OCCC resultou em um afrouxamento do OCCC remanescente ao redor dos oócitos (Figura 3), facilitando a detecção de um segundo corpo polar. O tempo médio do procedimento foi significativamente menor no grupo de remoção parcial do CCOC (4,42 ± 1,68 min vs. 9,29 ± 5,04 min, P &lt; 0,001) em comparação com o grupo controle, apesar de não terem sido encontradas diferenças significativas na taxa de clivagem, taxa ideal de embriões e taxa ideal de blastocisto.
Em outra coorte de 68 pacientes submetidas à fertilização in vitro tradicional (FIV), onde as verificações de fertilização foram realizadas 18-20 h após a inseminação, foram observadas semelhanças na idade das pacientes e no número de oócitos recuperados entre os dois grupos (Tabela 2). Um aumento da frouxidão na estrutura das células da granulosa ao redor do oócito foi observado em pacientes submetidas à remoção parcial imediata do OCCC durante a coleta do óvulo (Figura 4). Embora tenha sido observado um tempo médio de operação ligeiramente menor na remoção parcial do grupo CCO (4,93 ± 0,80 min vs. 6,54 ± 7,77 min, P = 0,207), nenhuma diferença estatisticamente significativa foi evidente. Embora aderências apertadas em alguns casos possam levar a procedimentos de observação prolongados superiores a 40 minutos, as aderências geralmente soltas de OCCC na maioria dos casos após o armazenamento noturno podem ser responsáveis pela falta de variação estatística nos tempos de operação entre os dois grupos. Como no grupo anterior, não foram identificadas discrepâncias significativas na taxa de clivagem, taxa ideal de embriões e taxa ideal de blastocisto.
No geral, os resultados representativos indicam que a remoção parcial imediata do OCCC reduz significativamente os tempos de operação em procedimentos de inseminação de curto prazo sem comprometer os principais resultados da fertilização in vitro, como taxa de clivagem, taxa ideal de embriões e taxa ideal de blastocisto. Essa técnica facilita a detecção do segundo corpo polar, afrouxando o OCCC restante ao redor dos oócitos, o que provavelmente contribui para reduzir os tempos de operação. No contexto dos procedimentos tradicionais de fertilização in vitro, embora tenha sido observada uma tendência para tempos de operação mais curtos com a remoção parcial imediata do OCCC, a diferença não foi estatisticamente significativa, potencialmente devido à variabilidade inerente na adesão das células do cumulus após o armazenamento noturno. Essas descobertas sugerem que, embora a remoção parcial imediata do OCCC possa aumentar a eficiência do procedimento, particularmente em contextos de inseminação de curto prazo, seu impacto nos cronogramas tradicionais de fertilização in vitro pode ser menos pronunciado.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66951/66951fig01.jpg"> 
Figura 1: Preparação da pipeta Pasteur usando um queimador de álcool. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66951/66951fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66951/66951fig02.jpg"> 
Figura 2: Imagem típica do OCCC que precisa ser processada. Os oócitos típicos com diâmetro superior a 2,5 mm de (A e B) de duas pacientes foram removidos parcialmente ao longo da linha tracejada vermelha delineada. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66951/66951fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66951/66951fig03.jpg"> 
Figura 3: Micrografias típicas que descrevem as características morfológicas da fertilização 4-6 h após a co-incubação com espermatozóides. Oócito típico (A) com ou (B) sem remoção parcial de OCCC. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66951/66951fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66951/66951fig04.jpg"> 
Figura 4: Micrografias típicas que descrevem as características morfológicas da avaliação dos pronúcleos 18-20 h após a co-incubação com espermatozóides. Oócito típico (A) com ou (B) sem remoção parcial de OCCC. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66951/66951fig04large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td>Remoção parcial do grupo OCCC</td>
			<td>Grupo controle</td>
			<td>Valor de p</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pacientes (n)</td>
			<td>26</td>
			<td>21</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Idade (y)</td>
			<td>32.04 ± 4.11</td>
			<td>33,33 ± 3,41</td>
			<td>0.193</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Não. de oócitos recuperados</td>
			<td>12.85 ± 9.02</td>
			<td>11.38 ± 5.32</td>
			<td>0.493</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4 h tempo de procedimento (min)</td>
			<td>4,42 ± 1,68</td>
			<td>9.29 ± 5.04</td>
			<td>&lt;0,001</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taxa de clivagem, n (%)</td>
			<td>98,89 ± 0,04, 24</td>
			<td>100.00 ± 0.00, 19</td>
			<td>0.221</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taxa ideal de embriões, n (%)</td>
			<td>71.38 ± 35.46, 24</td>
			<td>72,14 ± 35,72, 19</td>
			<td>0.945</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taxa ideal de blastócitos, n (%)</td>
			<td>58.13 ± 28.29, 19</td>
			<td>65.18 ± 28.09, 12</td>
			<td>0.504</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 1: Comparação dos resultados da fertilização entre os dois grupos com ou sem a remoção parcial imediata de OCCC submetidos a procedimentos curtos de co-incubação.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td>Remoção parcial do grupo OCCC</td>
			<td>Grupo controle</td>
			<td>Valor de p</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pacientes (n)</td>
			<td>29</td>
			<td>39</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Idade (y)</td>
			<td>32.21 ± 4.11</td>
			<td>32.72 ± 4.25</td>
			<td>0.619</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Não. de oócitos recuperados</td>
			<td>12.93 ± 7.00</td>
			<td>12.44 ± 7.26</td>
			<td>0.777</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 h tempo de operação (min)</td>
			<td>4,93 ± 0,80</td>
			<td>6,54 ± 7,77</td>
			<td>0.207</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taxa de clivagem, n (%)</td>
			<td>98,81 ± 0,04, 28</td>
			<td>95,93 ± 0,17,37</td>
			<td>0.39</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taxa ideal de embriões, n (%)</td>
			<td>72.07 ± 36.75, 28</td>
			<td>72.62 ± 30.01,36</td>
			<td>0.948</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taxa ideal de blastócitos, n (%)</td>
			<td>62.93 ± 28.30, 21</td>
			<td>63.36 ± 24.61, 28</td>
			<td>0.955</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 2: Comparação dos resultados da fertilização entre os dois grupos com ou sem a remoção parcial imediata de OCCC submetida à fertilização in vitro tradicional (FIV).

A remoção parcial imediata de complexos cumulus-oócitos: uma abordagem refinada para observação rápida da fertilização in vitro

Despite the rapid advancements in clinical and laboratory technologies for in vitro fertilization (IVF), a significant proportion (10%-15%) of patients ...

the-immediate-partial-removal-cumulus-oocyte-complexes-refined

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