Name: Cirurgia de transferência de embriões por laparotomia em leitoas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-18T13:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 41 s
Description: Aprenda a técnica de transferência de embriões por laparotomia em leitoas para produção de suínos geneticamente modificados. Este protocolo detalhado auxilia pesquisadores a realizar cirurgias seguras e eficazes.

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<meta charset="utf8"></head><body>Otimizando a transferência de embriões ovidutais em porcos clonados

<ol><li>Lunney, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Importance+of+the+pig+as+a+human+biomedical+model%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Importance of the pig as a human biomedical model.</a> Sci Transl Med. 13 (621), 5758(2021).</li>
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<li>Wieczorek, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laparoscopic+embryo+transfer+in+pigs+-+comparison+of+different+variants+and+efficiencies+of+the+method%5BTitle%5D)+AND+%22Pol+J+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Laparoscopic embryo transfer in pigs - comparison of different variants and efficiencies of the method.</a> Pol J Vet Sci. 26 (2), 295-306 (2023).</li>
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<li>Lins, R. D. A. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+cyanoacrylate+in+the+coaptation+of+edges+of+surgical+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22An+Bras+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Use of cyanoacrylate in the coaptation of edges of surgical wounds.</a> An Bras Dermatol. 87 (6), 871-876 (2012).</li>
<li>Horvath-Pereira, B. deO., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Case+report%3A+An+innovative+non-invasive+technique+to+manage+shell+injuries+in+C.+carbonarius%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Case report: An innovative non-invasive technique to manage shell injuries in C. carbonarius.</a> Front Vet Sci. 9, 930419(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,25 mL de canudo</td><td></td> <td>genérico-Material cirúrgico</td><td></td></tr> <tr><td>Seringa de 1 mL</td><td>Descarpack</td><td>341001</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Seringa de 10 mL</td><td>Descarpack</td><td>324601</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Seringa de 20 mL</td><td>Descarpack</td><td>324801</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Seringa de 3 mL</td><td>Descarpack</td><td>324201</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Seringa de 5 mL</td><td>Descarpack</td><td>324401</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Seringa de 60 mL</td><td>Descarpack</td><td>323201</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Tubo endotraqueal de 9 mm</td><td>Rusch</td><td>112482-000090</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Allis fórceps</td><td>genérico-Instrumento</td><td></td> <td>cirúrgico</td></tr><tr><td>Amox LA</td><td>JA Sa&uacute; de Animal</td><td>Registro MAPA: 8.781/2004</td><td>Medicamento farmacêutico</td></tr><tr><td>Fórceps Bakhaus</td><td></td> <td>genérico-Instrumento</td> <td>cirúrgico</td></tr><tr><td>Cateter 20G</td><td>Descarpack</td><td>362401</td><td>Cateter para acesso intravenoso</td></tr><tr><td>Cetamina</td><td>Agener Uni&atilde; o</td><td>Registro no MAPA: SP-000292-5.000011&nbsp;</td><td>anestésico</td></tr><tr><td>Gel clínico condutor</td><td>RMC</td><td>Registro ANVISA: 80122200013</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Dipirona D-500</td><td>Zoetis</td><td>Registro MAPA: SP0000728-46</td><td>Medicamento farmacêutico</td></tr><tr><td>Bisturi descartável n. 22</td><td>Wiltex</td><td>Registro ANVISA: 10150470565</td><td>Instrumento cirúrgico</td></tr><tr><td>Escova-esponja estéril descartável</td><td>Rioquimica</td><td>7.89778E+12</td><td>Assepsia cirúrgica</td></tr><tr><td>Easy-Scan:Go</td><td>IMV</td><td>ESCG01</td><td>Ultrassom</td></tr><tr><td>Endozime AW Plus</td><td>Ruhof</td><td>34514</td><td>Detergente para instrumentos cirúrgicos</td></tr><tr><td>Fentanil (Fentanest)</td><td>Crist&aacute; lia</td><td>Registro ANVISA: 1029800810159</td><td>Anestésico</td></tr><tr><td>Afastador Gosset</td><td></td> <td>genérico-Instrumento</td> <td>cirúrgico</td></tr><tr><td>Halstead-mosquito pinça hemostática</td><td>genérico-Instrumento</td><td></td> <td>cirúrgico</td></tr><tr><td>Pomada cicatrizante - Unguento Pearson</td><td>Pearson SA</td><td>Registro MAPA: SP0000094-16</td><td>Medicamento farmacêutico</td></tr><tr><td>solução de peróxido de hidrogênio</td><td>Rioquimica</td><td>Registro na ANVISA: 218690015</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Isofluorano</td><td>Bioquímico</td><td>Registro na ANVISA: 100630222</td><td>Anestésico</td></tr><tr><td>IV Conjunto de gotejamento extensor</td><td></td><td></td> <td>genérico-Fluidoterapia</td></tr><tr><td>IV Conjunto de gotejamento</td><td>macro Descarpack</td><td>410301</td><td>Fluidoterapia</td></tr><tr><td>Lactofur (ceftiofur)</td><td>Ourofino SA</td><td>Registro MAPA: SP0000051-50</td><td>Laringoscópio de medicamento farmacêutico</td></tr><tr><td></td><td>-</td><td>-</td><td>Instrumento cirúrgico</td></tr><tr><td>Maxicam 2%</td><td>Ourofino SA</td><td>Registro MAPA: SP0000051-69</td><td>Medicamento farmacêutico</td></tr><tr><td>Adesivo microporo 5 cm x 10 cm&nbsp;</td><td>genérico</td><td>1530</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Midazolam</td><td>Hipolabor</td><td>Registro ANVISA: 1134301430035</td><td></td></tr><tr><td>Conjunto de Infusão IV Multidirecional</td><td>Anestésico Descarpack</td><td>413201</td><td>Agulha de Fluidoterapia</td></tr><tr><td>40 mm x 1,2 mm</td><td>Descarpack</td><td>353601</td><td>Agulha estéril para aplicação de medicamentos e anestésicos.</td></tr><tr><td>Agulha 40 mm x 1,6 mm</td><td>Registro</td><td>Wiltex ANVISA: 10150470664</td><td>Agulha estéril para aplicação de medicamentos e anestésicos.</td></tr><tr><td>Porta-agulha</td><td></td> <td>genérico-Instrumento</td> <td>cirúrgico</td></tr><tr><td>Nylon 2 sutura trhead</td><td>Shalon Medical</td><td>N502CTI40</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Caneta comum</td><td></td> <td>genérico-Caneta</td> <td>regular para fazer anotações</td></tr><tr><td>Solução fisiológica 0,9% saco de 500 mL</td><td>JP Farma</td><td>MS:1.0491.0070</td><td>Fluidoterapia</td></tr><tr><td>Ácido poliglicólico 2 fio de sutura</td><td>Atramat</td><td>G4099-75H</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Cloreto de potássio</td><td>Samtec</td><td>Registro ANVISA: 1559200010139</td><td>Medicamento parenteral</td></tr><tr><td>Luvas de procedimento</td><td>Descarpack</td><td>122401</td><td>Equipamento de Proteção Individual (EPI)</td></tr> <tr><td>Propofol (Provive)</td> <td>Uni&atilde; o Qu&iacute; mica</td><td>Registro ANVISA: 1049714490057</td><td>Anestésico</td></tr><tr><td>Ringer solução de lactato 500 mL saco</td><td>JP Farma</td><td>MS:1.0491.0061</td><td>Fluidoterapia</td></tr><tr><td>Riohex 0,5% clorexidina álcool solução</td><td>Rioquimica</td><td>218690356</td><td>Assepsia cirúrgica</td></tr><tr><td>Riohex 2% solução de clorexidina com surfactante</td><td>Rioquimica</td><td>218690356</td><td>Assepsia cirúrgica</td></tr><tr><td>Couro cabeludo 21 G</td><td>Descarpack</td><td>421201</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Capas de sapato</td><td>genérico-Equipamento</td><td></td> <td>de Proteção Individual (EPI)</td></tr><tr><td>Compressas estéreis</td><td>Cremer</td><td>Registro ANVISA: 10071150065</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Compressa estéril Compressa</td><td>Procitex</td><td>Registro ANVISA: 80245210083</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Campos cirúrgicos estéreis 140 cm x 90 cm&nbsp;</td><td>Venkuri</td><td>7010003</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Campos cirúrgicos estéreis 150 cm x 190 cm&nbsp;</td><td>PolarFix</td><td>F00208</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Luvas cirúrgicas estéreis</td><td>Mucambo</td><td>CA: 39.317</td><td>Equipamento de Proteção Individual (EPI)</td></tr><tr><td>Estetoscópio</td><td></td> <td>genérico-Equipamento cirúrgico</td><td></td></tr> <tr><td>Touca cirúrgica</td><td>Descarpack</td><td>93201</td><td>Equipamento de Proteção Individual (EPI)</td></tr><tr><td>Bata cirúrgica</td><td>Descarpack</td><td>231101</td><td>Equipamento de Proteção Individual (EPI)</td></tr><tr><td>Máscara cirúrgica</td><td>Descarpack</td><td>110701</td><td>Equipamento de Proteção Individual (EPI)</td></tr><tr><td>Tesoura cirúrgica sem corte</td><td></td> <td>genérico-Instrumento cirúrgico</td><td></td></tr> <tr><td>Tesoura cirúrgica afiada-afiada</td><td>genérica-Instrumento</td><td></td> <td>cirúrgico</td></tr><tr><td>Grampeador cirúrgico</td><td>Tradevet-Material</td><td></td> <td>cirúrgico</td></tr><tr><td>Super cola</td><td>Tekbond Tek</td><td>Bond 78072720030</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Termômetro</td><td></td> <td>genérico-Equipamento</td> <td>cirúrgico</td></tr><tr><td>Torneira de três vias</td><td>Solidor</td><td>374</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Tramadol hidroclorito</td><td>Agener Uni&atilde; o</td><td>Registro MAPA: SP-000292-5.000002</td><td>Anestésico</td></tr><tr><td>Curativo de filme transparente</td><td>Skinupper</td><td>Registro ANVISA: 82307460014</td><td>Material cirúrgico</td></tr><tr><td>Adesivo impermeável 10 cm x 4,5 cm&nbsp;</td><td>364828</td><td>genéricos Material cirúrgico</td><td></td></tr></tbody></table>

cirurgia de transferência de embriões por laparotomia em leitoas

Embryo Transfer Surgery via Laparotomy in Gilts

Este artigo tem como objetivo demonstrar a cirurgia de laparotomia para transferência de embriões clonados para o oviduto de leitoas. Todos os animais permaneceram em plano anestésico adequado, sem incidentes ou complicações intraoperatórias durante a recuperação anestésica. As leitoas levaram, em média, 2-3 h para se levantar após o término da cirurgia.
Todos os procedimentos cirúrgicos duraram, em média, 44 min. Nove leitoas foram submetidas à cirurgia, com uma média de 185 embriões clonados transferidos por leitoa, totalizando 1.664 embriões transferidos bilateralmente (Tabela 1). A localização dos ovários, sua exteriorização e a introdução do cateter Tomcat contendo os embriões no óstio do oviduto corresponderam aos momentos mais delicados da cirurgia. Os ovários de todas as leitoas foram inspecionados durante a cirurgia, e todos apresentaram folículos hemorrágicos recém-ovulados, condizente com o esperado para o protocolo de sincronização do estro realizado, que teve como objetivo realizar transferências embrionárias logo após a ocorrência da ovulação. Todos os procedimentos ocorreram sem incidentes intraoperatórios.
Nenhum animal apresentou sinais de dor intensa após a cirurgia, com escore médio de dor de 0,33, 0,33, 3,67, 1,33, 0,33, 1,33, 4,67, 2,00 e 0,33 na escala de dor (variando de 0 a 18) realizada nos 3 dias de pós-operatório para cada uma das leitoas operadas (Tabela 2). Apenas 1 das leitoas operadas apresentou acúmulo de líquido subcutâneo (seroma) no12º dia de pós-operatório, com sinais de infecção e inflamação localizados próximos à ferida operatória. Após drenar o líquido com agulha de 40 mm x 1,6 mm guiada por ultrassom, aplicar compressas frias na área inflamada por 30 minutos diários por 7 dias, administrar ceftiofur (3 injeções intramusculares, com intervalo de 72 h entre as injeções) e meloxicam a 2% (0,4 mg/kg SID, por via intramuscular, por 3 dias), a ferida fistulou e drenou o conteúdo mucopurulento remanescente, resultando em melhoria completa do animal. As demais leitoas operadas permaneceram com o curativo cirúrgico por 5 dias sem a necessidade de troca ou retirada para limpeza da ferida, que só foi realizada do6º ao 10º dia de pós-operatório.
Nas leitoas 2, 8 e 9, não foi observado acúmulo de líquido e formação de vesículas embrionárias no lúmen uterino (Figura 1A). Portanto, o diagnóstico gestacional desses animais foi considerado negativo. As demais leitoas apresentaram acúmulo de líquido intrauterino e formação de vesículas embrionárias visualizadas como estruturas arredondadas anecoicas bem definidas (Figura 1B-D). Foi possível identificar, em duas das leitoas receptoras, uma região hiperecogênica em relação à estrutura embrionária na fase inicial de desenvolvimento no interior das vesículas embrionárias no32º dia de gestação (Figura 1E,F).
Após diagnóstico gestacional negativo ou não progressão da gestação, as leitoas foram eutanasiadas e o sistema reprodutor foi analisado. Aderências em regiões de ovários, ovidutos e cornos uterinos em menor ou maior grau foram observadas nas leitoas 1, 2, 3 e 4, e cistos ovarianos foram observados na leitoa 8 (Figura 2). Quatro estruturas embrionárias, com idade gestacional compatível com aproximadamente 12 a 20 dias de gestação, foram obtidas do útero da leitoa 3, e uma estrutura foi obtida da leitoa 7 (Figura 3). A análise de fragmentos de tecido embrionário resultou em resultados negativos para a detecção de Parvovírus, Leptospira sp., Erysipelothrix rhusiopathiae e Circovírus Suíno tipos 2 e 3 (PCV2/PCV3), que podem causar morte embrionária ou abortos.
<img alt="Sequência de ultrassom, análise da estrutura renal, imagens médicas, procedimento diagnóstico, estudo renal." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66984/66984fig01.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> Figura 1: Imagens ultrassonográficas do útero de leitoas receptoras de embriões 30 dias após o procedimento cirúrgico. (A) O útero da leitoa 2 sem a presença de líquido em seu interior, caracterizando um diagnóstico gestacional negativo. O útero gravídico da marrã 1 (B), marrã 3 (C) e marrã 4 (D) contendo vesículas embrionárias com fluido no interior (asteriscos). O útero gravídico da leitoa 3 (E) e da leitoa 7 (F) apresentando uma estrutura hiperecogênica (seta) no interior da vesícula embrionária, indicando formação fetal na fase inicial aos 32 dias de gestação. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66984/66984fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Processo de dissecação, estudo anatômico, segmentos de espécimes marcados, diagrama de pesquisa educacional." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66984/66984fig02.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> Figura 2: Análise do sistema reprodutivo. Imagens de úteros, ovários e ovidutos após a necropsia da leitoa 1 (A), leitoa 2 (B), leitoa 3 (C), leitoa 4 (D), leitoa 5 (E), leitoa 6 (F), leitoa 7 (G), marrã 8 (H) e marrã 9 (I). As setas destacam aderências nos cornos uterinos, ovários e ovidutos, e as pontas das setas destacam os cistos ovarianos. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66984/66984fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Imagens de dissecção mostrando amostras de tecido biológico e amostra em placa de Petri para estudo anatômico." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66984/66984fig03.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> Figura 3: Diagnóstico gestacional. Embriões em estágio inicial removidos da leitoa 3 (A-D) e da leitoa 7 (E) apresentam diagnóstico gestacional positivo e estruturas hiperecogênicas no interior das vesículas embrionárias ao exame ultrassonográfico. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66984/66984fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Tabela 1: Número e tipo de embriões transferidos por leitoa, gestações diagnosticadas e número de embriões obtidos após necropsia das leitoas operadas. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66984/66984_Table%201.xlsx" target="_blank">Clique aqui para baixar esta tabela.</a>
Tabela 2: Valores atribuídos a cada uma das leitoas operadas quanto à apresentação dos sinais de dor. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66984/66984_Table%202.xlsx" target="_blank">Clique aqui para baixar esta tabela.</a>

Cirurgia de transferência de embriões por laparotomia em leitoas

This protocol aims to demonstrate the surgical technique for transferring cloned pig embryos to the oviduct, a method widely used in the production of ...

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Medicine

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