Name: Técnica de natação horizontal em forma de U para preparar espermatozóides de alta qualidade com baixo índice de fragmentação de DNA (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T12:45:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: Aprenda a técnica UHS para selecionar espermatozoides de alta qualidade com baixo índice de fragmentação de DNA. Este método utiliza microfluídica e timotaxia para separar células móveis de impurezas, reduzindo etapas manuais em comparação com a centrifugação por gradiente de densidade.

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<ol><li>Villeneuve, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spermatozoa+isolation+with+Felix+outperforms+conventional+density+gradient+centrifugation+preparation+in+selecting+cells+with+low+DNA+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Andrology%22%5BJournal%5D)">Spermatozoa isolation with Felix outperforms conventional density gradient centrifugation preparation in selecting cells with low DNA damage.</a> Andrology. 11 (8), 1593-1604 (2023).</li>
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<li>Fernandes, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+sperm+recovery+rate+after+density+gradient+centrifugation+with+two+media+for+in+vitro+fertilization%5BTitle%5D)+AND+%22JBRA+Assist+Reprod%22%5BJournal%5D)">Comparative sperm recovery rate after density gradient centrifugation with two media for in vitro fertilization.</a> JBRA Assist Reprod. 27 (1), 25-28 (2023).</li>
<li>Dai, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sperm+enrichment+from+poor+semen+samples+by+double-density+gradient+centrifugation+in+combination+with+swim-up+for+IVF+cycles%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Sperm enrichment from poor semen samples by double-density gradient centrifugation in combination with swim-up for IVF cycles.</a> Sci Rep. 10 (1), 2286(2020).</li>
<li>Hoa, N. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effectiveness+of+sperm+preparation+using+density+mini-gradient+and+single-layer+centrifugation+for+oligospermia+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Inform+Med%22%5BJournal%5D)">The effectiveness of sperm preparation using density mini-gradient and single-layer centrifugation for oligospermia samples.</a> Acta Inform Med. 30 (2), 100-104 (2022).</li>
<li>Le, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+sperm+preparation+techniques+on+sperm+survivability+and+DNA+fragmentation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Int+Med+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of sperm preparation techniques on sperm survivability and DNA fragmentation.</a> J Int Med Res. 50 (5), 1-11 (2022).</li>
<li>Baldini, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+fast+and+safe+technique+for+sperm+preparation+in+ICSI+treatments+within+a+randomized+controlled+trial+%28RCT%29%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Biol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">A fast and safe technique for sperm preparation in ICSI treatments within a randomized controlled trial (RCT).</a> Reprod Biol Endocrinol. 18 (88), 1-9 (2020).</li>
<li>Gode, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+microfluid+sperm+sorting+chip+and+density+gradient+methods+for+use+in+intrauterine+insemination+cycles%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Comparison of microfluid sperm sorting chip and density gradient methods for use in intrauterine insemination cycles.</a> Fertil Steril. 112 (5), 842-848.e1 (2019).</li>
<li>Simchi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selection+of+high-quality+sperm+with+thousands+of+parallel+channels%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Selection of high-quality sperm with thousands of parallel channels.</a> Lab Chip. 21 (12), 2464-2475 (2021).</li>
<li>Shapouri, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+between+the+Felix+electrophoretic+system+of+sperm+isolation+and+conventional+density+gradient+centrifugation%3A+a+multicentre+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Assist+Reprod+Gen%22%5BJournal%5D)">A comparison between the Felix electrophoretic system of sperm isolation and conventional density gradient centrifugation: a multicentre analysis.</a> J Assist Reprod Gen. 40 (1), 83-95 (2023).</li>
<li>De los Santos, M. J., et al. Revised guidelines for good practice in IVF laboratories. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDe+los+Santos%2C+MJ+%22Human+Reproduction%22">Human Reproduction</a>. 31 (4), ESHRE Guideline Group on Good Practice in IVF Labs. 685-686 (2015).</li>
<li>Montag, M., Morbeck, D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMontag%2C+M+%22Principles+of+IVF+Laboratory+Practice%3A+Optimizing+performance+and+outcomes%22">Principles of IVF Laboratory Practice: Optimizing performance and outcomes</a>. , Cambridge University Press. Cambridge, UK. (2017).</li>
<li>Duan Li, F., Li, X., Ma, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sperm+DNA+fragmentation+index+affects+pregnancy+outcomes+and+offspring+safety+in+assisted+reproductive+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Sperm DNA fragmentation index affects pregnancy outcomes and offspring safety in assisted reproductive technology.</a> Sci Rep. 14 (1), 356(2024).</li>
<li>Denissenko, P., Kantsler, V., Smith, D. J., Kirkman-Brown, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+spermatozoa+migration+in+microchannels+reveals+boundary-following+navigation%5BTitle%5D)+AND+%22P+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Human spermatozoa migration in microchannels reveals boundary-following navigation.</a> P Natl Acad Sci USA. 109 (21), 8007-8010 (2012).</li>
<li>Ahmadkhani, N., Saadatmand, M., Kazemnejad, S., Abdekhodaie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Qualified+sperm+selection+based+on+the+rheotaxis+and+thigmotaxis+in+a+microfluidic+system%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Eng+Lett%22%5BJournal%5D)">Qualified sperm selection based on the rheotaxis and thigmotaxis in a microfluidic system.</a> Biomed Eng Lett. 13 (4), 671-680 (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Solução de Polivinil pirrolidona 7%</td><td>Vitrolife Suécia AB</td><td>10111</td><td>Aspirador ICSI</td></tr><tr><td></td><td>LABOTECT-Aspirador</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Bancada de limpeza biológica</td><td>Suzhou Antai&nbsp;</td><td>-</td><td>Bancada de trabalho biológica</td></tr><tr><td>limpa Meio de cultura de blastocisto</td><td>Vitrolife Suécia AB</td><td>10132</td><td>Meio de cultura de blastocisto</td></tr><tr><td>Meio de cultura de clivagem&nbsp;</td><td>Vitrolife Suécia AB</td><td>10128</td><td>Meio de cultura de clivagem&nbsp;</td></tr><tr><td>CO2 incubadora Incubadora</td><td>Thermo</td> <td>Scientific-CO2</td><td></td></tr> <tr><td>Óleo de cultura</td><td>Vitrolife Suécia AB</td><td>10029</td><td>OVOIL</td></tr><tr><td>Pipeta de transferência de plástico descartável</td><td>BD Falcon</td><td>357575</td><td>pipeta de transferência de plástico descartável</td></tr><tr><td>Meio de fertilização</td><td>Vitrolife Suécia AB</td><td>10136</td><td>G-IVF PLUS</td></tr><tr><td>ICSI prato de operação</td><td>BD Placa</td><td>de</td><td>Petri</td>Falcon 351006</tr><tr><td>Hialuronidase instantânea</td><td>Vitrolife Suécia AB</td><td>10017</td><td>Hialuronidase instantânea</td></tr><tr><td>Microscópio invertido</td><td>NIKON&nbsp;</td><td>-</td>Estação de trabalho de fertilização in vitro de <td>microscópio invertido</td></tr><tr><td></td><td>Dinamarca K-SYSTEM-IVF</td> Estação <td>de</td> <td>trabalho</td></tr><tr><td>Câmara de contagem Makler</td><td>Sefi Medical Instruments</td><td></td><td>Câmara de contagem Makler</td></tr><tr><td>Sistema operacional micro</td><td>NIKON&nbsp;</td><td>-</td><td>Sistema operacional micro</td></tr><tr><td>Meio de processamento de oócitos</td><td>Vitrolife Suécia AB</td><td>10130</td><td>G-MOPS PLUS</td></tr><tr><td>Microscópio óptico</td><td>OLYMPUS-Microscópio</td><td></td> <td>óptico</td></tr><tr><td>Microscópio de contraste de fase&nbsp;</td><td>NIKON-Microscópio</td> <td>de</td> <td>contraste de fase&nbsp;</td></tr><tr><td>Placa de Contagem de Esperma</td><td>Placa de Contagem de Esperma Markler-Sperm</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solução de separação de gradiente de esperma</td><td>Vitrolife Suécia AB</td><td>10138</td><td>SpermGrad</td></tr><tr><td>Kit de integridade de DNA de núcleo de esperma</td><td>Shenzhen HuaKang&nbsp;</td><td>-Kit de</td> <td>Integridade do DNA do Núcleo do Esperma (SCD)</td></tr> <tr><td>Microscópio estereoscópico&nbsp;</td><td>NIKON-Microscópio</td><td></td> <td>estereoscópico&nbsp;</td></tr><tr><td>Centrífuga de mesa</td><td>HETTICH-Centrífuga</td><td></td> de <td>mesa</td></tr><tr><td>Suporte para tubos de ensaio termostáticos</td><td>GRANT-Suporte</td><td></td> <td>para tubos de ensaio termostáticos</td></tr><tr><td>Incubadora Tri-gas</td><td>ASTEC-Incubadora</td><td></td> <td>Tri-gas</td></tr></tbody></table>

técnica de natação horizontal em forma de u para preparar espermatozóides de alta qualidade com baixo índice de fragmentação de dna

U-Shaped Horizontal Swimming Technique for Preparing High-Quality Sperm with Low DNA Fragmentation Index

Os métodos UHS e DGC foram utilizados para otimizar o tratamento de 21 amostras e comparar o índice de fragmentação do DNA espermático entre os dois métodos. O método que usa a trilha UHS na placa ICSI pode substituir o DGC, o que pode causar danos aos espermatozoides. Espermatozoides de alta qualidade com boa motilidade progressiva nadam suavemente ao longo da borda da trilha em forma de U (Figura 2), tornando mais fácil para a agulha ICSI agarrá-los individualmente. Os espermatozoides de a...

Técnica de natação horizontal em forma de U para preparar espermatozóides de alta qualidade com baixo índice de fragmentação de DNA

Human semen is a complex mixture comprising progressively motile spermatozoa, non-progressively motile spermatozoa, immotile spermatozoa, cell debris, and ...

u-shaped-horizontal-swimming-technique-for-preparing-high-quality

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Este é um high-throughput protocolo de criopreservação de esperma para zebrafish. Espermatozóides criopreservados utilizando este protocolo tem uma média de fertilidade de 25% na fertilização in vitro subseqüentes e é estável durante muitos anos.

Um método de alta taxa de transferência para Zebrafish criopreservação de espermatozóides e In Vitro Fertilização

Este vídeo-artigo descreve, passo a passo, como processar uma amostra de sêmen para alcançar boa qualidade de...

Fluorescência In situ Hybridization (FISH) Protocolo no esperma humano

Descrevemos métodos de manipulação de oócitos imaturos de Xenopus laevis, maturação in vitro de oócitos em óvulos e injeção intracitoplasmática de espermatozoides. Este protocolo permite a degradação de algumas proteínas maternas e a superexpressão de genes de interesse na fertilização e, portanto, é valioso para estudar papéis de fatores específicos no desenvolvimento embrionário inicial.

Manipulação e<em&gt; In Vitro</em&gt; Maturação<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Oócitos, seguido de injeção intracitoplasmática de espermatozóide, para estudar o desenvolvimento embrionário

Um protocolo modificado para a manipulação ploidy usa um choque de calor para induzir uma tenda de um ciclo na citocinese no embrião. Este protocolo é demonstrado no peixe-zebra, mas podem ser aplicados a outras espécies.

Manipulação de ploidia de embriões Zebrafish com choque térmico 2 Tratamento

Protocolos de criopreservação de maturação e esperma de enguia Europeia foram melhorados nos últimos anos. Este artigo descreve o melhor protocolo disponível usando gonadotrofina coriônica humana (hCG) para induzir a maturação e metanol como crioprotetor.

Manipulação e tratamento de macho Europeu enguias (Anguilla anguilla) para maturação Hormonal e criopreservação de esperma

Aqui, apresentamos metodologias para avaliar a integridade de membrana spermatozoan, uma celular característica associada com a competência de fertilização do espermatozoide. Nós descrevemos três técnicas para a avaliação de fluorimétrica de membranas de esperma: coloração simultânea com sondas fluorescentes específicas, microscopia de fluorescência e citometria de fluxo avançado dedicada ao esperma. Também são apresentados exemplos de combinar as metodologias.

Fluorimétrica técnicas para a avaliação das membranas de esperma

Neste trabalho, pretendemos descrever o desempenho da técnica de centrifugação gradiente de densidade e sua aplicação na investigação de fisiologia de esperma.

Coleção de esperma de qualidade diferencial usando centrifugação gradiente de densidade

Os spreads de superfície nuclear são uma ferramenta indispensável para estudar eventos cromossomos durante a meiose. Aqui demonstramos um método para preparar e visualizar cromossomos meioóticos durante a profase I de espermatotatocitos de zebrafish.

Preparação do Cromossomo Meioético Se espalha de espermatocitocitos de zebrafish

Este protocolo descreve como realizar registros elétricos de espermatozóides de mamíferos em uma configuração de célula inteira, com o objetivo de registrar diretamente a atividade do canal iônico. O método tem sido fundamental na descrição dos perfis eletrofisiológicos de vários canais iônicos do esperma e ajudou a revelar sua identidade e regulação molecular.

Registro de correntes elétricas através da membrana plasmática de espermatozóides de mamíferos

Aqui, apresentamos um método para realizar a injeção redonda de espermátides (ROSI) em camundongos, uma técnica com aplicações clínicas promissoras e utilidade para investigar os mecanismos subjacentes ao desenvolvimento embrionário.

Injeção de espermátide redonda em camundongo

Aprenda a técnica UHS para selecionar espermatozoides de alta qualidade com baixo índice de fragmentação de DNA. Este método utiliza microfluídica e timotaxia para separar células móveis de impurezas, reduzindo etapas manuais em comparação com a centrifugação por gradiente de densidade.

Técnica de natação horizontal em forma de U para preparar espermatozóides de alta qualidade com baixo índice de fragmentação de DNA (Vídeo) | JoVE Journal

Técnica de natação horizontal em forma de U para preparar espermatozóides de alta qualidade com baixo índice de fragmentação de DNA

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