Name: Caracterização da transferência de elétrons extracelular mediada em bactérias do ácido lático com um sistema bioeletroquímico de três eletrodos e duas câmaras (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-08-23T14:50:00.000+00:00
Duration: 10 min 23 s
Description: Aprenda a caracterizar a transferência de elétrons extracelular mediada em Lactiplantibacillus plantarum utilizando um sistema bioeletroquímico de três eletrodos e duas câmaras. Este método avança aplicações em biossensores e fermentação eletroquímica.

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<meta charset="utf8"></head><body>Análise cronoamperométrica de EET em Lactiplantibacillus plantarum com DHNA

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Os sistemas bioeletroquímicos fazem interface de micróbios com eletrodos, permitindo a investigação de mecanismos de transferência de elétrons extracelulares (EET) e fornecendo abordagens renováveis para bioeletrocatálise 1,2,3. Os micróbios que realizam EET naturalmente são conhecidos como exoeletrogênios, que transferem elétrons derivados do metabolismo para aceptores de elétrons terminais extracelulares, por exemplo, óxidos de ferro (hidr) e eletrodos1. Caracterizadas pela primeira vez nas espécies Geobacter e Shewanella 4,5, as vias EET foram identificadas em muitas bactérias. Esses exoeletrógenos desempenham um papel central em várias tecnologias eletroquímicas microbianas, como a geração de energia elétrica a partir de fluxos de resíduos, a fixação de CO2 e a produção de produtos químicos valiosos por meio da eletrossíntese 1,6,7,8,9,10,11,12.
Um desses exoeletrogênios é o Lactiplantibacillus plantarum, uma bactéria do ácido lático gram-positivo13. L. plantarum é uma bactéria probiótica nômade que reside em uma ampla variedade de ambientes, incluindo o intestino de humanos e outros vertebrados, bem como muitos tipos de alimentos, como carne, cereais, vegetais e alimentos e bebidas fermentados 14,15,16,17. Seu genoma codifica um metabolismo heterofermentativo flexível, permitindo uma adaptação bem-sucedida nesses diversos ambientes. É bem estudado, amplamente utilizado nas indústrias de alimentos e saúde e geralmente reconhecido como seguro pela Food and Drug Administration18,19. Como tal, L. plantarum tem o potencial de servir como uma plataforma útil para tecnologias baseadas em EET.
Pesquisas recentes em L. plantarum identificaram um operon multigênico que codifica uma via complexa de EET originalmente caracterizada em Listeria monocytogenes13,20. Em L. plantarum, as proteínas sintetizadas a partir deste operon facilitam o EET em um sistema bioeletroquímico (BES) quando fornecido o ácido quinona 1,4-dihidroxi-2-naftóico (DHNA) como mediador eletrônico13. A primeira proteína essencial nesta via é uma NADH-quinona oxidorredutase ligada à membrana (Ndh2), que oxida o NADH e reduz o DHNA. O DHNA fornece elétrons diretamente a um eletrodo ou indiretamente por meio da proteína acessória PplA (Figura 1) 13 , 21 , 22 . Pesquisas recentes indicam que L. plantarum também pode usar outras quinonas que são estruturalmente semelhantes ao DHNA como mediadores eletrônicos; no entanto, L. plantarum é incapaz de produzir DHNA ou essas quinonas alternativas, portanto, os mediadores devem estar exogenamente presentes no ambiente para que o EET ocorra 13,22,23.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67204/67204fig01.jpg"> 
Figura 1: Fluxo de elétrons em Lactiplantibacillus plantarum EET. Ndh2 passa elétrons do NADH para a quinona DHNA. Os elétrons são transportados para o eletrodo para produzir corrente, diretamente pela quinona reduzida ou indiretamente através da proteína acessória PplA. Abreviaturas: FAD = Dinucleotídeo flavina adenina; FMN = mononucleotídeo de flavina; EET = transferência de elétrons extracelulares; NADH = dinucleotídeo de nicotinamida adenina reduzido; Ndh2 = NADH-quinona oxidorredutase; DHNA = ácido 1,4-dihidroxi-2-naftóico; PplA = fosfolipase A. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67204/67204fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Neste artigo, fornecemos um protocolo abrangente para o uso de um método baseado em BES para caracterizar EET mediado por DHNA em L. plantarum. Um sistema de três eletrodos e duas câmaras confina as bactérias ao eletrodo de trabalho, permitindo o controle preciso do potencial aplicado às bactérias, evitando a diafonia entre o eletrodo de trabalho e o contra-eletrodo. Apresentamos um protocolo abrangente de 5 dias, que abrange a preparação pré-experimento, montagem do BES, análise EET utilizando cronoamperometria (CA) e voltametria cíclica (CV) e análise de amostra pós-experimento. Este protocolo pode ser aplicado para desvendar os mecanismos das vias de EET e construir sistemas para eletrofermentação e eletrocatálise.

<table><tbody><tr><td>1,4-Ácido Dihidroxi-2-naftóico (DHNA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>281255-25G</td><td></td></tr><tr><td>Fio de titânio de 1,0 mm</td><td>de diâmetro Thermo Fisher Scientific</td><td>045485.BY</td><td>Corte sob medida para eletrodos de trabalho e contra-eletrodos</td></tr><tr><td>Folhas de Óxido de Alumínio 120-C 9" x 11"</td><td>Johnson Abrasives</td><td>10108-15</td><td></td></tr><tr><td>Seringas de plástico de 3 mL</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>14955457</td><td></td></tr><tr><td>Solução 3M KCl saturada com cloreto de prata</td><td>Millipore Sigma</td><td>60137-250ML</td><td></td></tr><tr><td>feltro de carbono de 6,35 mm de espessura</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>043200.RF</td><td>Corte em rodadas de 16 cm2</td></tr><tr><td>eletrodo de referência Ag/AgCl</td><td>CH Instruments</td><td>CH111</td><td></td></tr><tr><td>Air-Tite Premium Agulhas Hipodérmicas</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>14-817-102</td><td></td></tr><tr><td>AlK(SO)4 * 12H2O</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>237086-100G</td><td></td></tr><tr><td>Citrato de amônio tribásico</td><td>Centrífuga Millipore Sigma</td><td>A1332</td><td></td></tr><tr><td>Avanti J-15R</td> Agulha de Precisão <td>Beckman Coulter</td><td>B99517</td><td></td></tr><tr><td>BD, 18 G x 1 polegada</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>14-826-5G</td><td></td></tr><tr><td>BD Agulha de Precisão de Deslizamento, 21 G x 2 polegadas</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>14-821-13N</td><td></td></tr><tr><td>Bel-Art SP Scienceware Cleanware Aqua-Clear Water Condtioner</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>23-278339</td><td></td></tr><tr><td>Biotina</td><td>Millipore Sigma</td><td>B4639</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2</td><td>Millipore Sigma</td><td>C4901</td><td></td></tr><tr><td>Cálcio D-(+)-pantotenato</td><td>Millipore</td><td>Sigma 1087009</td><td></td></tr> Membranas de membrana de troca catiônica <tr><td>Millipore Sigma</td><td>2240-OP</td><td></td>de ácidos <td>Casamino</td></tr><tr><td></td><td>International</td><td>CMI-7000</td><td>Corte em círculos adequados ao O-ring BES</td></tr><tr><td>CoCl2 * 6H2O</td><td>Millipore Sigma</td><td>C8661</td><td></td></tr><tr><td>CuSO4 * 5H2O</td><td>Millipore Sigma</td><td>C8027</td><td></td></tr><tr><td>Cisteína-HCl * H2O</td><td>Millipore Sigma</td><td>30129</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Millipore Sigma</td><td>5439001000</td><td></td></tr><tr><td>DS-11+ Espectrofotômetro</td><td>Denovix</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>EC-Lab Software</td><td>BioLogic</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>ECO E 4 S termostato de aquecimento</td><td>Lauda-Brinkmann</td><td>Cat. Nº 115 V; 60 Hz : L001191</td><td></td></tr><tr><td>FeSO4 * 7H2O</td><td>Millipore Sigma</td><td>215422</td><td></td></tr><tr><td>Ácido fólico</td><td>Millipore</td><td>Sigma F8758</td><td></td></tr><tr><td>H3BO3</td><td>Millipore Seringas de insulina Sigma</td><td>B6768</td><td></td></tr><tr><td>com agulha BD Micro-Fine IV</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>14-829-1A</td><td></td></tr><tr><td>Lactiplantibacillus plantarum NCIMB8826</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Referência: Tejedor-Sanz et al., 2022</td></tr><tr><td>Caldo Lactobacillus MRS</td><td>HiMedia</td><td>M369</td><td></td></tr><tr><td>M9 Caldo</td><td>Milliport Sigma</td><td>63011</td><td></td></tr><tr><td>Sulfato de magnésio anidro</td><td>Millipore Sigma</td><td>208094</td><td></td></tr><tr><td>Sulfato de manganês monohidratado</td><td>Millipore Sigma</td><td>221287</td><td></td></tr><tr><td>manitol</td><td>Millipore Sigma</td><td>M1902-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Mettler Toledo FiveEasy Medidor de pH de Bancada</td><td>Hogentogler</td><td>F20-KIT</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2 * 6H2O</td><td>Millipore Sigma</td><td>M9272</td><td></td></tr><tr><td>MgSO4 * 7H2O</td><td>Millipore Sigma</td><td>M2773</td><td></td></tr><tr><td>Millex - GV 0.22 & Micro; m Unidade de filtro de membrana PVDF</td><td>Millipore Sigma</td><td>SLGV004SL</td><td></td></tr><tr><td>MnCl2 * 4H2O</td><td>Millipore Sigma</td><td>203734</td><td></td></tr><tr><td>MnSO4 * H2O</td><td>Millipore Sigma</td><td>221287</td><td></td></tr><tr><td>MOPS</td><td>Millipore Sigma</td><td>M1442</td><td></td></tr><tr><td>N2 gás</td><td>Airgas</td>Filtro <td>NI UHP300</td><td>antes de usar</td></tr><tr><td>Na2MoO4 * 2H2O</td><td>Millipore Sigma</td><td>331058</td><td></td></tr><tr><td>Na2SO4</td><td>Millipore Sigma</td><td>238597</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Millipore Sigma</td><td>S9888</td><td></td></tr><tr><td>NH4Cl</td><td>Millipore Sigma</td><td>A9434</td><td></td></tr><tr><td>Ácido nicotínico</td><td>Millipore Sigma</td><td>N-0761</td><td></td></tr><tr><td>Ácido nitrilotriacético (NTA)</td><td>Millipore Sigma</td><td>72560</td><td></td></tr><tr><td>Ácido p-aminobenzóico</td><td>Millipore Sigma</td><td>P9879</td><td></td></tr><tr><td>Solução salina tamponada com fosfato, solução 10x</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>BP399-1</td><td></td></tr><tr><td>Fosfato de potássio dibásico</td><td>Millipore Sigma</td><td>P8281</td><td></td></tr><tr><td>potenciostato</td><td>BioLogic</td><td>VMP-300</td><td></td></tr><tr><td>Protease peptona #3</td><td>Bacto</td><td>211693</td><td></td></tr><tr><td>Piridoxina HCl</td><td>Millipore Sigma</td><td>P6280</td><td></td></tr><tr><td>Riboflavina</td><td>Millipore Sigma</td><td>555682</td><td></td></tr><tr><td>Plataforma de barra de agitação magnética RO10</td><td>IKA</td><td>3691000</td><td></td></tr><tr><td>Acetato de sódio trihidratado</td><td>Millipore Sigma</td><td>935700</td><td></td></tr><tr><td>Barra de agitação, em forma de ovo</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>14-512-121</td><td>Coloque na câmara anódica de BES</td></tr><tr><td>Tiamina HCl</td><td>Millipore Sigma</td><td>V-014</td><td></td></tr><tr><td>Ácido tióctico (&alfa;-ácido lipóico)</td><td>Millipore Sigma</td><td>T-1395</td><td></td></tr><tr><td>Triptofano</td><td>Millipore Sigma</td><td>9136</td><td></td></tr><tr><td>Tween80</td><td>Millipore Sigma</td><td>P4780</td><td></td></tr><tr><td>Vitamina B12</td><td>Millipore Sigma</td><td>V6629</td><td></td></tr><tr><td>Conjunto MCF revestido, 100 ml, NW25, 2 x porta GL14</td><td>Adams & Chittenden Scientific Glass</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Extrato de levedura</td> personalizado <td>Millipore Sigma</td><td>Y1625</td><td></td></tr><tr><td>ZnSO4 * 7H2O</td><td>Millipore Sigma</td><td>Z0251</td><td></td></tr></tbody></table>

caracterização da transferência de elétrons extracelular mediada em bactérias do ácido lático com um sistema bioeletroquímico de três eletrodos e duas câmaras

Characterizing Mediated Extracellular Electron Transfer in Lactic Acid Bacteria with a Three-Electrode, Two-Chamber Bioelectrochemical System

Análise de cronoamperometria O EET de L. plantarum pode ser observado através dos dados de cronoamperometria (CA) representados na Figura 3, na qual o traço de densidade de corrente visualiza a transferência de elétrons de L. plantarum para o eletrodo de trabalho. Monitoramos a densidade de corrente (j) versus tempo, mantendo um potencial constante de +200 mV versus Ag/AgCl por 24 h. Ao injetar 20 μg / mL de DHNA na solução eletrolítica agitadora, foi observado um pico de oxidação abiótico de DHNA, seguido por um rápido aumento na densidade de corrente biótica com pico de 132,0 ± 2,47 μA / cm2 aproximadamente no ponto de tempo de 8 h. Por outro lado, a injeção de DMSO resultou em densidade de corrente insignificante. Esses resultados enfatizam a importância do DHNA como um mediador necessário e eficiente para facilitar a transferência de elétrons entre L. plantarum e o eletrodo. Os usuários podem ajustar a saída de corrente ajustando a concentração de DHNA no BES. Pesquisas anteriores também indicam que L. plantarum responde ao DHNA de maneira dose-dependente em uma ampla gama de concentrações de DHNA, produzindo corrente significativa na presença de concentrações de DHNA tão baixas quanto 0,01 μg / mL13,22.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67204/67204fig03v5.jpg"> 
Figura 3: Análise cronoamperométrica de Lactiplantibacillus plantarum EET mediada por DHNA. DHNA (20 μg/mL) ou DMSO foi injetado em eletrólitos mCDM (pH~ 6,5) com tempo de injeção identificado como t = 0. j representa a densidade de corrente em função da área do eletrodo de trabalho. Os experimentos foram conduzidos a 200 mV versus Ag/AgCl com eletrodo de feltro de carbono (16cm2) e agitação. Os valores são representados graficamente como ± média sd obtidos em reatores BES triplicados. Abreviaturas: EET = transferência de elétrons extracelulares; DHNA = ácido 1,4-dihidroxi-2-naftóico; DMSO = dimetilsulfóxido; mCDM = Meio quimicamente definido com manitol. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67204/67204fig03largev5.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Análise de voltametria cíclica Para avaliar melhor o EET mediado por DHNA em L. plantarum, realizamos voltametria cíclica 24 h após a injeção de DHNA. Aqui mostramos traços CV para três condições: L. plantarum com 20 μg/mL DHNA, L. plantarum com DMSO e meio com 20 μg/mL DHNA. Conforme mostrado na Figura 4A, a presença de 20 μg / mL de DHNA em reatores contendo L. plantarum resultou em um aumento distinto na corrente oxidativa a 50 mV que não ocorreu apenas na presença de DMSO. Esses dados confirmam que a adição do mediador redox DHNA é necessária para facilitar a transferência de elétrons entre L. plantarum e o ânodo. Embora tenhamos observado vários picos redox menores no traço L. plantarum + DMSO, esses picos foram semelhantes ao traço de controle de mídia e provavelmente são atribuídos a componentes redox-ativos no mCDM (Figura Suplementar S1). Na Figura 4B, comparamos traços de DHNA em condições bióticas (L. plantarum + DHNA) versus DHNA em condições abióticas (Meio + DHNA). Embora ambos os traços exibissem um pico oxidativo distinto de DHNA em torno de 50 mV, observamos um aumento sustentado na corrente além de 50 mV apenas em condições bióticas. O pico catalítico atingiu uma densidade de corrente de 129 μA/cm2 a 300 mV, representando um aumento de 256% em relação ao traço abiótico. Este perfil CV de turnover é característico do EET27 microbiano, indicando re-redução de DHNA por células de L. plantarum na presença de uma fonte de elétrons (manitol) após a oxidação de DHNA no ânodo. Além disso, o traço abiótico exibiu novos picos oxidativos em torno de -240 mV e -180 mV. Pesquisas anteriores indicam que o aparecimento desses picos pode ser devido à degradação do DHNA em ACNQ (2-amino-3-carboxi-1,4-naftoquinona)21,28. Não observamos esses picos no traço biótico, indicando que a interação das células de L. plantarum com o DHNA pode estabilizar o DHNA e prevenir a degradação. Um ponto a ser observado é que o traço de 24 h para meios com 20 μg/mL de DHNA foi realizado separadamente de acordo com este protocolo, sem adição de células.
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67204/67204fig04.jpg"> 
Figura 4: Traços representativos de voltametria cíclica. Todos os experimentos CV foram realizados em mCDM usando feltro de carbono (16 cm2) como eletrodo de trabalho a uma taxa de varredura de 2 mV / s enquanto agitava a solução. (A) Traços CV para Lactiplantibacillus plantarum com DHNA (20 μg/mL) ou DMSO em t = 24 h. (B) Traços CV de 20 μg/mL de DHNA em L. plantarum (condições bióticas) ou mCDM apenas (condições abióticas) em t = 24 h. Abreviaturas: CV = voltametria cíclica; mCDM = Meio Quimicamente Definido com manitol; DHNA = ácido 1,4-dihidroxi-2-naftóico; DMSO = dimetilsulfóxido. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67204/67204fig04large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Análise de pH A atividade de EET em L. plantarum resultou em uma queda notável no pH ao longo de 24 h. Conforme mostrado na Figura 5, o pH médio da amostra de L. plantarum exposta ao DHNA caiu para 3,33 ± 0,01 (p = 6,85 × 10-6, n = 3), enquanto o pH médio da amostra de L. plantarum exposta ao DMSO caiu para 6,50 ± 0,06 (p = 0,0409, n = 3). Conforme exibido em pesquisas anteriores, essa queda é atribuída a um aumento no metabolismo fermentativo que ocorre quando L. plantarum realiza EET13. L. plantarum normalmente metaboliza manitol por meio de glicólise e vias fermentativas, que produzem acetato, lactato e etanol como produtos de fermentação final e geram ATP por meio da fosforilação em nível de substrato29. Sob condições de EET, o fluxo metabólico através da fermentação aumenta, aumentando assim a produção de produtos de fermentação final no meio BES13. Essa mudança metabólica faz com que o pH do meio caia mais rapidamente nos reatores com DHNA em comparação com os reatores de controle DMSO.
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67204/67204fig05.jpg"> 
Figura 5: Análise de pH do sistema bioeletroquímico de Lactiplantibacillus plantarum . As amostras foram coletadas em t = 0 e t = 24 h durante a cronoamperometria. Os valores são representados graficamente como ± média sd obtidos em reatores BES triplicados. A significância foi determinada por um teste t unicaudal. DHNA: Valor de p = 6,85 × 10-6. DMSO: Valor de p = 0,0409. Abreviaturas: DHNA = ácido 1,4-dihidroxi-2-naftóico; DMSO = dimetilsulfóxido. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67204/67204fig05large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Tabela 1: Ingredientes para preparação de mídia mMRS24. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67204/67204_Table%201_%20mMRS%20recipe.xlsx" target="_blank">Clique aqui para baixar esta tabela.</a>
Tabela 2: Ingredientes para preparação de mídia mCDM. Essa tabela foi extraída de Tejedor-Sanz et al.13 e Aumiller et al.25. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67204/67204_Table%202_%20mCDM%20recipe.xlsx" target="_blank">Clique aqui para baixar esta tabela.</a>
Tabela 3: Ingredientes para preparação de meios M9. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67204/Table%203_%20M9%20Media.xlsx" target="_blank">Clique aqui para baixar esta tabela.</a>
Tabela 4: Configurações de parâmetros EC-Lab para técnicas OCV, CA e CV. Abreviaturas: OCV = tensão de circuito aberto; AC = cronoamperometria; CV = voltametria cíclica. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67204/Table%204_EC-Lab%20Parameter%20Settings.xlsx" target="_blank">Clique aqui para baixar esta tabela.</a>
Figura suplementar S1: Traços representativos de voltametria cíclica de Lactiplantibacillus plantarum com DMSO e mCDM sozinhos. Traços CV para L. plantarum com DMSO em t = 24 h e mCDM sozinho em t = 0 h. Todos os experimentos CV foram realizados usando feltro de carbono (16 cm2) como eletrodo de trabalho a uma taxa de varredura de 2 mV / s durante a agitação da solução. Abreviaturas: CV = voltametria cíclica; mCDM = Meio Quimicamente Definido com manitol; DHNA = ácido 1,4-dihidroxi-2-naftóico; DMSO = dimetilsulfóxido. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67204/JoVE_SupplementalFig1.zip" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>

Caracterização da transferência de elétrons extracelular mediada em bactérias do ácido lático com um sistema bioeletroquímico de três eletrodos e duas câmaras

Many bacteria perform extracellular electron transfer (EET), whereby electrons are transferred from the cell to an extracellular terminal electron ...

characterizing-mediated-extracellular-electron-transfer-lactic-acid

Research

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Biochemistry

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Enriquecimento de Bactérias Respiradoras de Ânodo Usando um Sistema Eletroquímico no Local

Fonte: Tokunou, Y. et al., Detecção Eletroquímica do Efeito Cinético de Isótopos de Deutério no Transporte Extracelular de Elétrons em Shewanella oneidensis MR-1. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra a montagem e operação de um modelo de reator eletroquímico projetado para simular a formação de biofilmes em superfícies de eletrodos. A estimulação eletroquímica controlada promove a adesão microbiana, levando ao desenvolvimento gradual de um biofilme bacteriano monocamada.

Desenvolvendo um biofilme monocamada bacteriano usando um reator eletroquímico

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Demonstramos a extração de amônio de um fluxo rico em amônio usando um sistema eletroquímico e um bioeletroquímico. A configuração, operação e análise de dados do reator são discutidas.

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Traduzindo atividades de transferência de elétrons extracelulares com transistores eletroquímicos orgânicos

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Utilizando o composto libertador de etileno, ácido 2-cloroetilfosfônico, como uma ferramenta para estudar a resposta do etileno em bactérias

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Caracterização da transferência de elétrons extracelular mediada em bactérias do ácido lático com um sistema bioeletroquímico de três eletrodos e duas câmaras (Vídeo) | JoVE Journal

Caracterização da transferência de elétrons extracelular mediada em bactérias do ácido lático com um sistema bioeletroquímico de três eletrodos e duas câmaras

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