Name: Quantificação de leucócitos aderentes induzidos por diabetes na vasculatura retiniana (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-24T13:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 54 s
Description: Aprenda a quantificar leucócitos aderentes na vasculatura retiniana de camundongos diabéticos usando microscopia de fluorescência. Esta técnica permite avaliar a eficácia de terapias anti-inflamatórias.

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</ol>

<table><tbody><tr>Seringa <td></td><td></td><td></td><td>de 10 mL</td></tr><tr><td>Torneira de 4 vias Luer lock I.V. válvula de linha</td><td>Baxter</td><td>2C6204</td><td></td></tr><tr><td>Concanavalin A solução</td><td>Vector&nbsp;</td><td>FL-1001</td><td>Prepare em PBS 1 mg/mL</td></tr><tr>Conjunto <td></td><td></td><td>de ferramentas de dissecação</td><td>Inclui hemostatos, tesouras e fórceps</td></tr><tr><td>Software FIJI</td><td></td><td></td><td>para processamento de imagem</td></tr><tr><td>Microscópio de fluorescência</td><td>Pinça Nikon</td><td>Eclipse Ni</td><td></td></tr><tr><td>, Dumont #5, ponta de grau biológico</td><td>Microscopia Eletrônica Sciences (EMS)</td><td>72700-D</td><td></td></tr><tr><td>Agulha de Gavagem 1,25 mm OD ponta do barril x 30 mm</td><td>Fine Science</td><td>18060-20</td><td></td></tr><tr><td>Halstead Mosquito Forceps</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-812-10</td><td></td></tr><tr><td>I.V. Conjunto de cateter com braçadeira reguladora 70 polegadas</td><td>Baxter</td><td>2C5417s</td><td></td></tr><tr><td>I.V. Pole Tecido</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>livre de fiapos</td><td>Kimpwipes é uma opção</td></tr><tr><td>Tesoura de mola de micro dissecação, Vannas, 3 mm reta</td><td>ROBOZ</td><td>RS-5620</td><td></td></tr><tr><td>Micro espátula</td><td>Ferramentas de Belas Ciências (FST)</td><td>10091-12</td><td></td></tr><tr><td>Nikon</td><td></td><td>NIS-Elements (AR 5.30.03 64-bit)</td><td>Software para aquisição de imagem</td></tr><tr><td>Placa de Petri (100 mmx15 mm)</td><td>Corning</td><td>351029</td><td></td></tr><tr><td>Solução salina tamponada com fosfato (PBS)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cera dental rosa</td><td>Microscopia Eletrônica Ciências ( EMS)</td><td>72670</td><td></td></tr><tr><td>Infusor de pressão</td><td>Infusurge</td><td>4010</td><td></td></tr><tr><td>Lâminas de barbear, aço inoxidável de borda única GEM, revestido de Teflon</td><td>Microscopia Eletrônica Sciences (EMS)</td><td>71970</td><td></td></tr><tr><td>Solução salina 0,9%, grau veterinário, 1000 mL</td><td>Baxter</td><td>04925-04-10</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura de dissecação pequena, extremidade cega curva 22 mm</td><td>ROBOZ</td><td>RS 5983</td><td></td></tr></tbody></table>

quantificação de leucócitos aderentes induzidos por diabetes na vasculatura retiniana

Quantification of Diabetes-induced Adherent Leukocytes in Retinal Vasculature

Um protocolo de perfusão e coloração bem executado mostrará a vasculatura retiniana completa delineada com concanavalina A (Figura 1). A má perfusão do camundongo impede a marcação de toda a árvore vascular e a subsequente análise dos leucócitos aderentes ao lúmen (Figura 2), enquanto a pressão excessiva de um aperto rápido de uma seringa (menos de 30-35 s) pode causar permeabilidade vascular e ruptura dos vasos sanguíneos (Figura 3...

Quantificação de leucócitos aderentes induzidos por diabetes na vasculatura retiniana

Leukostasis refers to the attachment of leukocytes to the luminal wall of the vasculature. This interaction of leukocytes with the wall of blood vessels ...

quantification-diabetes-induced-adherent-leukocytes-retinal

Research

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Medicine

Medicina

Fonte: Lani-Louzada, R., et al. Cauterização de círculo completo do plexo vascular límbico para glaucoma induzido cirurgicamente em roedores. J. Vis. Exp. (2022). Este vídeo demonstra a quantificação de células ganglionares da retina de retinas de ratos quimicamente fixadas submetidas à cauterização de círculo completo do plexo vascular límbico. O processo inclui permeabilização, coloração de anticorpos e contracoloração nuclear, seguida de visualização sob um microscópio de epifluorescência...

Quantificação de células ganglionares da retina após hipertensão ocular induzida por cauterização 

A microscopia intravital pode ser usada em animais para visualizar e medir diâmetros vasculares da retina, velocidades da corrente sanguínea e fluxo sanguíneo total da retina.

Medições de microscopia de vídeo intravital do fluxo sanguíneo retiniano em camundongos

Relatamos um método in vitro que permite a quantificação do número real de células adesivas dentro de uma monocamada de células endoteliais.

A quantificação da Adesividade celular endotelial<em&gt; In Vitro</em

A retina partes proeminentes semelhanças com o cérebro e, portanto, representa uma janela única para estudar vasculatura e estrutura neuronal no cérebro de forma não-invasiva. Este protocolo descreve um método para estudar a demência usando técnicas de imagem da retina. Esse método potencialmente pode ajudar no diagnóstico e avaliação de riscos de demência.

Utilizando imagens da retina para estudar a demência

Aqui, vamos discutir um protocolo do método que permite uma análise fácil da vasculatura da retina tg(fli:EGFP) adulto zebrafish como uma leitura rápida em configurações de longo prazo patologias vasculares relacionadas a neoangiogênese e mudanças estruturais.

Estudando a Diabetes através dos olhos de um peixe: Microdissection, visualização e análise do tg(fli:EGFP) adulto vasculatura da retina de Zebrafish

Vamos demonstrar três técnicas de preparação de tecidos diferentes para visualização de imuno-histoquímica de pericitos microvascular da retina do rato, ou seja, crio-seções, todo-montagens e hipotônica isolamento da rede vascular.

Cryo-seções da retina, todo-montagens e hipotônica vasculatura isolada preparações para visualização de imuno-histoquímica de pericitos Microvascular

Este estudo tem como objetivo desenvolver um novo modelo de cultura de retina organotípica humana (HORC) que previne comprometer a integridade da retina durante o manuseio da explant. Isso é conseguido através da cultura da retina com o vítreo sobrelada e o pigmento de retina subjacente epitélio-coroide (RPE-choroid) e esclera.

Caracterização de uma nova técnica de cultura de retina organotipípica humana

A retinopatia diabética é uma das principais causas de cegueira. Histologia, ensaio de quebra da barreira hemorrânica e angiografia de fluorescência são técnicas valiosas para entender a fisiopatologia da retina, o que poderia aumentar ainda mais o rastreamento eficiente de drogas contra a retinopatia diabética.

Avaliação fisiofisiológica da retina em um modelo de rato

Este artigo descreve um ensaio bem estabelecido e reprodutível de manchas de lectina para toda a preparação da retina do montagem e os protocolos necessários para a medição quantitativa dos parâmetros vasculares frequentemente alterados em retinopatias proliferativas e não proliferativas.

Quantificação de Parâmetros Vasculares em Retinas inteiras de Camundongos com Retinopatias Não Proliferativas e Proliferativas

O modelo de feridas diabéticas induzidas por estreptozotocina em ratos machos com SD é atualmente o modelo mais amplamente utilizado para estudar a cicatrização de feridas no diabetes mellitus tipo I. Este protocolo descreve os métodos usados para construir este modelo. Também apresenta e aborda potenciais desafios e examina a progressão e as características angiogênicas das feridas diabéticas.

Um Protocolo para a Construção de um Modelo de Ferida em Rato de Diabetes Tipo 1

Um ensaio de proteção foi desenvolvido para monitorar a resiliência da vasculatura retiniana à morte por diabetes/insultos relacionados à retinopatia diabética, como estresse oxidativo e citocinas.

Um ensaio para detectar a proteção da vasculatura retiniana contra a morte relacionada ao diabetes em camundongos

Aprenda a quantificar leucócitos aderentes na vasculatura retiniana de camundongos diabéticos usando microscopia de fluorescência. Esta técnica permite avaliar a eficácia de terapias anti-inflamatórias.

Quantificação de leucócitos aderentes induzidos por diabetes na vasculatura retiniana

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