Name: Quantificando a modulação da atividade da enzima elastase por meio de análise colorimétrica (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 30 s
Description: Aprenda a quantificar a atividade da elastase por meio de análise colorimétrica para avaliar compostos naturais. Este método in vitro supera desafios da coloração de extratos vegetais e oferece simplicidade e sensibilidade.

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<meta charset="utf8"></head><body>Medindo a modulação da elastase: um ensaio colorimétrico para insights terapêuticos

<ol><li>Imokawa, G., Ishida, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+mechanisms+underlying+the+ultraviolet+radiation-induced+formation+of+skin+wrinkling+and+sagging+I%3A+Reduced+skin+elasticity%2C+highly+associated+with+enhanced+dermal+elastase+activity%2C+triggers+wrinkling+and+sagging%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Biological mechanisms underlying the ultraviolet radiation-induced formation of skin wrinkling and sagging I: Reduced skin elasticity, highly associated with enhanced dermal elastase activity, triggers wrinkling and sagging.</a> Int J Mol Sci. 16 (4), 7753-7775 (2015).</li>
<li>Voynow, J. A., Shinbashi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+elastase+and+chronic+lung+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Biomolecules%22%5BJournal%5D)">Neutrophil elastase and chronic lung disease.</a> Biomolecules. 11 (8), 11081065(2021).</li>
<li>Whitcomb, D. C., Lowe, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+pancreatic+digestive+enzymes%5BTitle%5D)+AND+%22Dig+Dis+Sci%22%5BJournal%5D)">Human pancreatic digestive enzymes.</a> Dig Dis Sci. 52 (1), 1-17 (2007).</li>
<li>Heinz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastic+fibers+during+aging+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Ageing+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Elastic fibers during aging and disease.</a> Ageing Res Rev. 66, 101255(2021).</li>
<li>Antonicelli, F., Bellon, G., Debelle, L., Hornebeck, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastin-elastases+and+inflamm-aging%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Top+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Elastin-elastases and inflamm-aging.</a> Curr Top Dev Biol. 79, 99-155 (2007).</li>
<li>Desmiaty, Y., Faizatun, F., Noviani, Y., Ratih, H., Ambarwati, N. S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+of+natural+products+in+inhibiting+premature+skin+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Appl+Pharm%22%5BJournal%5D)">Potential of natural products in inhibiting premature skin aging.</a> Int J Appl Pharm. 14 (Special Issue 3), 1-5 (2022).</li>
<li>Bhatiya, M., Pathak, S., Jothimani, G., Duttaroy, A. K., Banerjee, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comprehensive+study+on+the+anti-cancer+effects+of+quercetin+and+its+epigenetic+modifications+in+arresting+progression+of+colon+cancer+cell+proliferation%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Immunol+Ther+Exp+%28Warsz%29%22%5BJournal%5D)">A comprehensive study on the anti-cancer effects of quercetin and its epigenetic modifications in arresting progression of colon cancer cell proliferation.</a> Arch Immunol Ther Exp (Warsz). 71 (1), 6(2023).</li>
<li>Shen, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computational+analysis+of+curcumin-mediated+alleviation+of+inflammation+in+periodontitis+patients+with+experimental+validation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Computational analysis of curcumin-mediated alleviation of inflammation in periodontitis patients with experimental validation in mice.</a> J Clin Periodontol. 51 (6), 787-799 (2024).</li>
<li>Yücel, Ç, Karatoprak, G. Ş, Yalçıntaş, S., Böncü, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethosomal+%28%E2%88%92%29-epigallocatechin-3-gallate+as+a+novel+approach+to+enhance+antioxidant%2C+anti-collagenase+and+anti-elastase+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Beilstein+J+Nanotechnol%22%5BJournal%5D)">Ethosomal (−)-epigallocatechin-3-gallate as a novel approach to enhance antioxidant, anti-collagenase and anti-elastase effects.</a> Beilstein J Nanotechnol. 13, 491-502 (2022).</li>
<li>Wojtkiewicz, A. M., Oleksy, G., Malinowska, M. A., Janeczko, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enzymatic+synthesis+of+a+skin+active+ingredient+-+glochidone+by+3-ketosteroid+dehydrogenase+from+Sterolibacterium+denitrificans%5BTitle%5D)+AND+%22J+Steroid+Biochem+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Enzymatic synthesis of a skin active ingredient - glochidone by 3-ketosteroid dehydrogenase from Sterolibacterium denitrificans.</a> J Steroid Biochem Mol Biol. 241, 106513(2024).</li>
<li>Amnuaykan, P., Juntrapirom, S., Kanjanakawinkul, W., Chaiyana, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+antioxidant%2C+anti-aging%2C+anti-tyrosinase%2C+and+anti-inflammatory+properties+of+Vanda+coerulea+griff.+ex+lindl.+protocorm+through+elicitations+with+chitosan%5BTitle%5D)+AND+%22Plants%22%5BJournal%5D)">Enhanced antioxidant, anti-aging, anti-tyrosinase, and anti-inflammatory properties of Vanda coerulea griff. ex lindl. protocorm through elicitations with chitosan.</a> Plants. 13 (13), 13131770(2024).</li>
<li>Petcharaporn, K., Thongkao, K., Thongmuang, P., Sudjaroen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nutritional+composition%2C+capsaicin+content+and+enzyme+inhibitory+activities+from+%26%2334%3BBang+Chang%26%2334%3B+thai+cultivar+chili+pepper+%28capsicum+annuum+var.+acuminatum%29+after+drying+process%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm+Qual+Assur%22%5BJournal%5D)">Nutritional composition, capsaicin content and enzyme inhibitory activities from &#34;Bang Chang&#34; thai cultivar chili pepper (capsicum annuum var. acuminatum) after drying process.</a> Int J Pharm Qual Assur. 14 (3), 707-711 (2023).</li>
<li>Jeon, D. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antioxidant+activity+and+inhibitory+effects+of+whitening+and+wrinkle-related+enzymes+of+Polyozellus+multiplex+extracts%5BTitle%5D)+AND+%22J+Food+Meas+Charact%22%5BJournal%5D)">Antioxidant activity and inhibitory effects of whitening and wrinkle-related enzymes of Polyozellus multiplex extracts.</a> J Food Meas Charact. 17 (2), 1279-1288 (2023).</li>
<li>Putri, I. R., Handayani, R., Elya, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-elastase+activity+of+rumput+teki+%28Cyperus+rotundus+L.%29+rhizome+extract%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacogn+J%22%5BJournal%5D)">Anti-elastase activity of rumput teki (Cyperus rotundus L.) rhizome extract.</a> Pharmacogn J. 11 (4), 754-758 (2019).</li>
<li>Liyanaarachchi, G. D., Samarasekera, J. K. R. R., Mahanama, K. R. R., Hemalal, K. D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tyrosinase%2C+elastase%2C+hyaluronidase%2C+inhibitory+and+antioxidant+activity+of+Sri+Lankan+medicinal+plants+for+novel+cosmeceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Ind+Crops+Prod%22%5BJournal%5D)">Tyrosinase, elastase, hyaluronidase, inhibitory and antioxidant activity of Sri Lankan medicinal plants for novel cosmeceuticals.</a> Ind Crops Prod. 111, 597-605 (2018).</li>
<li>Apraj, V. D., Pandita, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+skin+anti-aging+potential+of+Citrus+reticulata+blanco+peel%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacogn+Res%22%5BJournal%5D)">Evaluation of skin anti-aging potential of Citrus reticulata blanco peel.</a> Pharmacogn Res. 8 (3), 160-168 (2016).</li>
<li>Pandey, B. P., Pradhan, S. P., Adhikari, K., Nepal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bergenia+pacumbis+from+Nepal%2C+an+astonishing+enzymes+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Complement+Med+Ther%22%5BJournal%5D)">Bergenia pacumbis from Nepal, an astonishing enzymes inhibitor.</a> BMC Complement Med Ther. 20 (1), 198(2020).</li>
<li>Dharwal, V., Sandhir, R., Naura, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PARP-1+inhibition+provides+protection+against+elastase-induced+emphysema+by+mitigating+the+expression+of+matrix+metalloproteinases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">PARP-1 inhibition provides protection against elastase-induced emphysema by mitigating the expression of matrix metalloproteinases.</a> Mol Cell Biochem. 457 (1-2), 41-49 (2019).</li>
<li>Jugniot, N., Voisin, P., Bentaher, A., Mellet, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+elastase+activity+imaging%3A+Recent+approaches+in+the+design+and+applications+of+activity-based+probes+and+substrate-based+probes%5BTitle%5D)+AND+%22Contrast+Media+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Neutrophil elastase activity imaging: Recent approaches in the design and applications of activity-based probes and substrate-based probes.</a> Contrast Media Mol Imaging. 2019, (2019).</li>
<li>Stone, P. J., Morris, S. M., Thomas, K. M., Schuhwerk, K., Mitchelson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repair+of+elastase-digested+elastic+fibers+in+acellular+matrices+by+replating+with+neonatal+rat-lung+lipid+interstitial+fibroblasts+or+other+elastogenic+cell+types%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Repair of elastase-digested elastic fibers in acellular matrices by replating with neonatal rat-lung lipid interstitial fibroblasts or other elastogenic cell types.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 17 (3), 289-301 (1997).</li>
<li>Weiss, F. U., Budde, C., Lerch, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specificity+of+a+polyclonal+fecal+elastase+ELISA+for+CELA3%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Specificity of a polyclonal fecal elastase ELISA for CELA3.</a> PLoS ONE. 11 (7), 0159363(2016).</li>
<li>Thring, T. S. A., Hili, P., Naughton, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-collagenase%2C+anti-elastase+and+anti-oxidant+activities+of+extracts+from+21+plants%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Complement+Altern+Med%22%5BJournal%5D)">Anti-collagenase, anti-elastase and anti-oxidant activities of extracts from 21 plants.</a> BMC Complement Altern Med. 9 (1), 27(2009).</li>
<li>Donà, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+restraint+by+green+tea%3A+Inhibition+of+inflammation%2C+associated+angiogenesis%2C+and+pulmonary+fibrosis+1%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Neutrophil restraint by green tea: Inhibition of inflammation, associated angiogenesis, and pulmonary fibrosis 1.</a> J Immunol. 170, 4335-4341 (2003).</li>
<li>Michailidis, D., Angelis, A., Nikolaou, P. E., Mitakou, S., Skaltsounis, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploitation+of+vitis+vinifera%2C+foeniculum+vulgare%2C+cannabis+sativa+and+punica+granatum+by-product+seeds+as+dermo-cosmetic+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Exploitation of vitis vinifera, foeniculum vulgare, cannabis sativa and punica granatum by-product seeds as dermo-cosmetic agents.</a> Molecules. 26 (3), 26030731(2021).</li>
<li>Suzuki, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Curcumin+attenuates+elastase-+and+cigarette+smoke-induced+pulmonary+emphysema+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Curcumin attenuates elastase- and cigarette smoke-induced pulmonary emphysema in mice.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 296 (4), L614-L623 (2009).</li>
<li>Brás, N. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+pancreatic+elastase+by+polyphenolic+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22J+Agric+Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Inhibition of pancreatic elastase by polyphenolic compounds.</a> J Agric Food Chem. 58 (19), 10668-10676 (2010).</li>
<li>Álvarez-Martínez, F. J., Díaz-Puertas, R., Barrajón-Catalán, E., Micol, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plant-derived+natural+products+for+the+treatment+of+bacterial+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Handbook+of+Experimental+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Plant-derived natural products for the treatment of bacterial infections.</a> Handbook of Experimental Pharmacology. , (2024).</li>
<li>Álvarez-Martínez, F. J., Barrajón-Catalán, E., Herranz-López, M., Micol, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibacterial+plant+compounds%2C+extracts+and+essential+oils%3A+An+updated+review+on+their+effects+and+putative+mechanisms+of+action%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Antibacterial plant compounds, extracts and essential oils: An updated review on their effects and putative mechanisms of action.</a> Phytomedicine. 90, 153626(2021).</li>
<li>Saganuwan, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+modified+Michaelis-Menten+equations+for+determination+of+enzyme+inducing+and+inhibiting+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Pharmacol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Application of modified Michaelis-Menten equations for determination of enzyme inducing and inhibiting drugs.</a> BMC Pharmacol Toxicol. 22 (1), 57(2021).</li>
<li>AlShaikh-Mubarak, G. A., Kotb, E., Alabdalall, A. H., Aldayel, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+survey+of+elastase-producing+bacteria+and+characteristics+of+the+most+potent+producer%2C+Priestia+megaterium+gasm32%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">A survey of elastase-producing bacteria and characteristics of the most potent producer, Priestia megaterium gasm32.</a> PLoS ONE. 18, 0282963(2023).</li>
<li>Sánchez-Moreiras, A. M., Reigosa, M. J. Advances in plant ecophysiology techniques. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aS%C3%A1nchez-Moreiras%2C+AM+%22Adv+Plant+Ecophysiol+Tech%22">Adv Plant Ecophysiol Tech</a>. , Springer International Publishing. (2018).</li>
<li>Dharwal, V., Sandhir, R., Naura, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PARP-1+inhibition+provides+protection+against+elastase-induced+emphysema+by+mitigating+the+expression+of+matrix+metalloproteinases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">PARP-1 inhibition provides protection against elastase-induced emphysema by mitigating the expression of matrix metalloproteinases.</a> Mol Cell Biochem. 457 (1-2), 41-49 (2019).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+molecular+probes+for+in+vivo+near-infrared+fluorescence%2Fphotoacoustic+duplex+imaging+of+human+neutrophil+elastase%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Engineering molecular probes for in vivo near-infrared fluorescence/photoacoustic duplex imaging of human neutrophil elastase.</a> Anal Chem. 94 (7), 3227-3234 (2022).</li>
<li>Ahn, C. M., Sandler, H., Saldeen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+lung+hyaluronan+in+a+model+of+ARDS+in+the+rat%3A+Effect+of+an+inhibitor+of+leukocyte+elastase%5BTitle%5D)+AND+%22Ups+J+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Decreased lung hyaluronan in a model of ARDS in the rat: Effect of an inhibitor of leukocyte elastase.</a> Ups J Med Sci. 117 (1), 1-9 (2012).</li>
<li>Vanga, R. R., Tansel, A., Sidiq, S., El-Serag, H. B., Othman, M. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+performance+of+measurement+of+fecal+elastase-1+in+detection+of+exocrine+pancreatic+insufficiency%3A+Systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Diagnostic performance of measurement of fecal elastase-1 in detection of exocrine pancreatic insufficiency: Systematic review and meta-analysis.</a> Clin Gastroenterol Hepatol. 16 (8), 1220-1228 (2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Placa de cultura celular de 96 poços</td><td>Corning Incorporated</td><td>3599</td><td>Fundo plano com tampa, poliestireno</td></tr><tr><td>Leitor multimodo de imagem celular</td><td>Agilent</td><td>BioTek Cytation 1</td><td>Usado com o software Gen5</td></tr><tr><td>Elastase do pâncreas suíno</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E7885</td><td>CAS 39445-21-1; 25,9 kDa</td></tr><tr><td>Isopropanol 99,5%</td> <td>Fisher Scientific</td><td>AC184130010</td><td>CAS 67-63-0; C3H8O; 60,10 g/mol</td></tr><tr><td>N-Succinil-(Ala)3-nitroanilida</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S4760</td><td>CAS 52299-14-6; C19H25N5O8 ; Medidor de pH de 451,43 g/mol</td></tr><tr><td></td><td>Hach Lange</td><td>sensION+ PH31</td><td>Com agitador magnético e suporte</td></tr><tr><td>do sensor Fluoreto de fenilmetanossulfonilo</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P7626</td><td>CAS 329-98-6; C7H7FO2S; 174,19 g/mol</td></tr><tr><td>Tris para Biologia Molecular</td><td>PanReac AppliChem</td><td>A2264</td><td>CAS 77-86-1; C4H11NO3; 121,14 g/mol</td></tr></tbody></table>

quantificando a modulação da atividade da enzima elastase por meio de análise colorimétrica

Quantifying the Modulation of Elastase Enzyme Activity Through Colorimetric Analysis

Uma vez concluído o protocolo, os dados de absorbância necessários para realizar os cálculos pertinentes e quantificar a capacidade das amostras de modular a atividade da elastase podem ser obtidos. A Figura 3 destaca a localização dos poços com os diferentes controles e amostras. No caso de amostras coloridas, como a utilizada neste exemplo, é necessário adicionar controles de cores para minimizar a interferência espectrofotométrica, pois a cor pode interferir na medição da cor amarela do p...

Quantificando a modulação da atividade da enzima elastase por meio de análise colorimétrica

Elastase, a serine protease, plays an essential role in elastin degradation. Elastin is an extracellular protein that helps maintain tissue elasticity in ...

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Research

JoVE Journal

Biochemistry

Bioquímica

O Kit de Detecção de Protease fluorescente é projetado para a medição da atividade da protease usando fluorometria. Também é adequado para a detecção de vestígios de contaminação protease. O método é baseado no hydroysis proteolítica de uma formulação de um substrato de caseína FITC-rotulados.

Uso do Kit de Detecção de Protease Fluorescente para determinar a atividade de protease

Um protocolo para detectar tricotecenos (micotoxinas de interesse para a saúde humana), utilizando um método de triagem recém-desenvolvido com base em um método imunoquímico competitiva e uma detecção eletroquímica final é demonstrada.

ELIME Método (Enzyme Linked Immuno Magnetic eletroquímica) para Detecção de micotoxinas

Neste vídeo, realizamos zimografia, uma técnica eletroforética, para analisar a atividade proteolítica em amostras biológicas.

Zimografia de peptídeos fluorescentes: uma técnica modificada para detectar a atividade da protease usando substratos fluorogênicos em géis de zimograma

Este vídeo demonstra um ensaio in vitro para quantificar a atividade da serina protease de neutrófilos em amostras de escarro. A amostra contendo protease secretada é incubada com um repórter fluorescente com um motivo de reconhecimento. A clivagem do motivo pela protease permite a emissão de fluorescência individual pelo fluoróforo doador e aceitador do repórter, indicando a atividade da protease na amostra.

Um ensaio in vitro para medir a atividade da serina protease de neutrófilos usando um repórter fluorescente

Este vídeo demonstra o ensaio de liberação de corante para quantificar a atividade enzimática de proteínas antimicrobianas. A proteína antimicrobiana degrada a parede celular marcada com corante da bactéria e libera as moléculas de corante tornando a solução azul. A absorbância da solução se correlaciona com a atividade enzimática da proteína antimicrobiana.

Um ensaio de liberação de corante para quantificar a atividade enzimática de proteínas antimicrobianas

Descrevemos um ensaio colorimétrico simples e quantitativo que mede especificamente a atividade proteolítica da Granzyme B (GzmB) humana, de camundongo ou de rato. Este protocolo pode ser facilmente adaptado para determinar a atividade da protease de outras proteases de serina de grânulos pela hidrólise de outros substratos peptídicos sintéticos com uma sequência de reconhecimento apropriada.

Um ensaio colorimétrico que mede Especificamente granzima B Actividade proteolítica: Hidrólise de Boc-Ala-Ala-Asp-S-Bzl

Aqui, apresentamos protocolos para rastrear e caracterizar rapidamente enzimas quanto à atividade antimicrobiana. O ensaio de difusão em microlâminas e o ensaio de liberação de corante utilizam substratos bacterianos alvo para avaliação qualitativa e quantitativa da atividade enzimática.

Qualitativos e quantitativos Os ensaios para a detecção e caracterização de antimicrobianos Proteína

Aqui, apresentamos um protocolo detalhado para uma técnica modificada de zymographic na qual fluorescentes peptídeos são usados como substrato degradável no lugar de proteínas nativas. Eletroforese de amostras biológicas em Zimogramas peptídeo fluorescente permite a detecção de uma gama maior de proteases que as técnicas de zymographic anterior.

Deteção da atividade de Protease por zimografia peptídeo fluorescente

Os protocolos aqui descritos fornecem um guia para visualizar e quantificar a atividade de proteases neutrófilos na escarro humana. As aplicações dessa análise abrangem desde a avaliação de tratamentos anti-inflamatórios, até validação de biomarcadores, triagem de medicamentos e grandes estudos clínicos de coorte.

Monitoramento de Elastase e Cathepsin G Atividade em Amostras de Espiuma Humana

Neste trabalho, são apresentados métodos ecotoxicológicos padronizados para a avaliação de biomarcadores em espécies de anuros neotropicais. Especificamente, este artigo detalha várias metodologias em diferentes escalas de avaliação ecotoxicológica, como os níveis genético, celular-histológico, bioquímico, morfológico e individual.

Metodologias ecotoxicológicas para avaliação de biomarcadores em diferentes escalas em anuros neotropicais

Este estudo apresenta um ensaio FRET raciométrico simples e fácil de usar para a detecção e avaliação quantitativa da atividade da DNase e demonstra sua aplicação na análise de uma nuclease fraca.

Avaliação da atividade da DNase por transferência de energia de ressonância de fluorescência raciométrica

Aprenda a quantificar a atividade da elastase por meio de análise colorimétrica para avaliar compostos naturais. Este método in vitro supera desafios da coloração de extratos vegetais e oferece simplicidade e sensibilidade.

Quantificando a modulação da atividade da enzima elastase por meio de análise colorimétrica

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