Estudando a exposição crônica de camundongos à radiação ultravioleta B

O protocolo descreve um estudo dos efeitos sistêmicos e locais da exposição ao ultravioleta B na pele em camundongos.

Estamos investigando os efeitos sistêmicos da exposição da pele à radiação UVB de baixa dose, especificamente em níveis abaixo disso que causam eritema. Nosso protocolo permitirá uma compreensão dos efeitos sistêmicos da exposição a UVB em baixas doses além dos efeitos diretos ou locais na pele. Nosso método imita de perto a exposição crônica de baixo grau ao UVB abaixo dos níveis de eritema. Assim, podemos estudar os efeitos endógenos do UVB.

[Narrador] Para começar, coloque o mouse anestesiado em uma plataforma de trabalho e raspe 50 a 60% de sua região dorsal. Depois de remover o pelo usando creme depilatório, coloque o mouse em uma gaiola de recuperação limpa e seca com cama de gaiola. Deixe o rato descansar na gaiola doméstica com comida e água ad libitum. Para começar, use uma camisa de mangas compridas, calças, jaleco, sapatos fechados, luvas duplas e um protetor facial para garantir a segurança pessoal. Realize a irradiação ultravioleta B dentro de um capuz biológico com a tampa de plexiglass de 10 milímetros abaixada e uma tela de proteção colocada. Coloque a lâmpada ultravioleta B na câmara de plexiglass transparente. Ligue a lâmpada ultravioleta B e deixe-a operar até que a intensidade se estabilize. Em seguida, ligue o radiômetro Ultraviolet X, equipado com um cabeçote de medição Ultraviolet B para monitorar a intensidade. Coloque a câmara de exposição limpa dentro da câmara de plexiglass transparente com duas câmaras enquanto a lâmpada ultravioleta está ligada ou desligada para as respectivas exposições ultravioleta ou simuladas. Use uma calculadora para determinar o tempo necessário para expor o mouse à intensidade ultravioleta B desejada. Transfira o mouse da gaiola doméstica para a câmara de exposição pelo tempo de exposição desejado. Exponha o camundongo a uma dose ultravioleta B de 50 milijoules por centímetro quadrado, que é uma dose sub-eritemática. Para validar a eficiência da radiação, meça a pigmentação da orelha e da cauda usando um espectrofotômetro dérmico. Calibre o dispositivo espectrofotômetro definindo a linha de base com papel branco limpo e comum. Quando a calibração estiver concluída, posicione o sensor de medição na orelha ou na cauda do mouse e registre as leituras de intensidade de melanina. Aumentos graduais e significativos nos níveis de melanina foram observados em camundongos machos e fêmeas expostos à radiação ultravioleta B ao longo de quatro semanas em comparação com os controles, confirmando a indução bem-sucedida da pigmentação da pele.