Name: Aproveitando o poder das cargas de microRNA em pequenas vesículas extracelulares liberadas de seções do cérebro humano recém-congeladas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-08T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Aprenda a extrair vesículas extracelulares pequenas de tecido cerebral humano recém-congelado para identificar biomarcadores de microRNA em distúrbios neurológicos. Este método eficiente e acessível permite diagnóstico precoce de doenças como demência.

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<meta charset="utf8"></head><body>Isolamento eficiente de sEVs cerebrais de tecido mínimo para descoberta de biomarcadores

<ol><li>Jia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+extracellular+vesicles+isolation+and+separation%3A+Current+techniques%2C+pending+questions+and+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Small extracellular vesicles isolation and separation: Current techniques, pending questions and clinical applications.</a> Theranostics. 12 (15), 6548-6575 (2022).</li>
<li>Fornari, S., Schäfer, A., Jucker, M., Goriely, A., Kuhl, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prion-like+spreading+of+Alzheimer%27s+disease+within+the+brain%27s+connectome%5BTitle%5D)+AND+%22J+R+Soc+Interface%22%5BJournal%5D)">Prion-like spreading of Alzheimer's disease within the brain's connectome.</a> J R Soc Interface. 16 (159), 20190356(2019).</li>
<li>Zhang, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor-derived+small+extracellular+vesicles+in+cancer+invasion+and+metastasis%3A+molecular+mechanisms%2C+and+clinical+significance%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer%22%5BJournal%5D)">Tumor-derived small extracellular vesicles in cancer invasion and metastasis: molecular mechanisms, and clinical significance.</a> Mol Cancer. 23 (1), 18(2024).</li>
<li>Constantinides, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CSF+A%CE%B242+and+A%CE%B242%2F+A%CE%B240+ratio+in+Alzheimer%27s+disease+and+frontotemporal+dementia%5BTitle%5D)+AND+%22Diagnostics%22%5BJournal%5D)">CSF Aβ42 and Aβ42/ Aβ40 ratio in Alzheimer's disease and frontotemporal dementia.</a> Diagnostics. 13 (4), 783(2023).</li>
<li>Cheng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+serum+miRNA+biomarkers+associated+with+Alzheimer%27s+disease+shows+concordance+with+neuropsychological+and+neuroimaging+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Prognostic serum miRNA biomarkers associated with Alzheimer's disease shows concordance with neuropsychological and neuroimaging assessment.</a> Mol Psychiatry. 20 (10), 1188-1196 (2015).</li>
<li>Roser, A. E., Caldi Gomes, L., Schünemann, J., Maass, F., Lingor, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circulating+miRNAs+as+diagnostic+biomarkers+for+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Circulating miRNAs as diagnostic biomarkers for Parkinson's disease.</a> Front Neurosci. 12, 625(2018).</li>
<li>Jackson, N., Guerrero-Muñoz, M. J., Castillo-Carranza, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prion-like+transmission+of+tau+oligomers+via+exosomes%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Aging+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The prion-like transmission of tau oligomers via exosomes.</a> Front Aging Neurosci. 14, 974414(2022).</li>
<li>Vella, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rigorous+method+to+enrich+for+exosomes+from+brain+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J+Extracell+Vesicles%22%5BJournal%5D)">A rigorous method to enrich for exosomes from brain tissue.</a> J Extracell Vesicles. 6 (1), 1348885(2017).</li>
<li>Yousif, G., Qadri, S., Parray, A., Akhthar, N., Shuaib, A., Haik, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exosomes+derived+neuronal+markers%3A+Immunoaffinity+isolation+and+characterization%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromolecular+Med%22%5BJournal%5D)">Exosomes derived neuronal markers: Immunoaffinity isolation and characterization.</a> Neuromolecular Med. 24 (3), 339-351 (2022).</li>
<li>Kumar, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+microfluidic+approaches+for+the+isolation+and+detection+of+exosomes%5BTitle%5D)+AND+%22TRAC-Trend+Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Recent advances in microfluidic approaches for the isolation and detection of exosomes.</a> TRAC-Trend Anal Chem. 159, 116912(2023).</li>
<li>Ransom, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+brain+small+extracellular+vesicles+contain+selectively+packaged%2C+full-length+mRNA%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Human brain small extracellular vesicles contain selectively packaged, full-length mRNA.</a> Cell Rep. 43 (4), 114061(2024).</li>
<li>Gomes, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+isolation+method+for+spontaneously+released+extracellular+vesicles+from+brain+tissue+and+its+implication+for+stress-driven+brain+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Commun+Signal%22%5BJournal%5D)">A novel isolation method for spontaneously released extracellular vesicles from brain tissue and its implication for stress-driven brain pathology.</a> Cell Commun Signal. 21 (1), 35(2023).</li>
<li>Welsh, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimal+information+for+studies+of+extracellular+vesicles+%28MISEV+2023%29%3A+From+basic+to+advanced+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22J+Extracell+Vesicles%22%5BJournal%5D)">Minimal information for studies of extracellular vesicles (MISEV 2023): From basic to advanced approaches.</a> J Extracell Vesicles. 13 (2), e12404(2023).</li>
<li>Théry, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimal+information+for+studies+of+extracellular+vesicles+2018+%28MISEV2018%29%3A+a+position+statement+of+the+International+Society+for+Extracellular+Vesicles+and+update+of+the+MISEV2014+guidelines%5BTitle%5D)+AND+%22J+Extracell+Vesicles%22%5BJournal%5D)">Minimal information for studies of extracellular vesicles 2018 (MISEV2018): a position statement of the International Society for Extracellular Vesicles and update of the MISEV2014 guidelines.</a> J Extracell Vesicles. 7 (1), 1535750(2018).</li>
<li>Pirisinu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+long+journey+of+extracellular+vesicles+towards+global+scientific+acclamation%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Pharm+Bull%22%5BJournal%5D)">The long journey of extracellular vesicles towards global scientific acclamation.</a> Adv Pharm Bull. 13 (3), 489-501 (2023).</li>
<li>Bender, A., Sullivan, B. P., Lillis, L., Posner, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enzymatic+and+chemical-based+methods+to+inactivate+endogenous+blood+ribonucleases+for+nucleic+acid+diagnostics%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Diagn%22%5BJournal%5D)">Enzymatic and chemical-based methods to inactivate endogenous blood ribonucleases for nucleic acid diagnostics.</a> J Mol Diagn. 22 (8), 1030-1040 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Albumina de soro bovino</td><td>Merck</td><td>A9418-100G</td><td></td></tr><tr><td>Máscara celular Mancha de membrana plasmática laranja</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C10045</td><td></td></tr><tr><td>Colagenase tipo III</td><td>StemCell Technologies</td><td>07422</td><td></td></tr><tr><td>Colunas ExoSpin e sistemas</td><td>de orientação de células tampão Ltd.</td><td>EX01-50</td><td>Este kit contém colunas SEC usadas neste experimento, buffer de precipitação e PBS livre de EV.</td></tr><tr><td>Coquetel Inibidor de Protease Halt (100x)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>78429</td><td></td></tr><tr><td>Hibernate-E Medium</td> Tampão <td>de Amostra Laemmli A1247601</td><td></td><td>ThermoFisher</td></tr><tr><td>Scientific (4x)</td><td>BioRad</td><td>1610747</td><td></td></tr><tr><td>Lexogen Small RNA-Seq Library Prep Kit</td><td>Lexogen</td><td>052.24</td><td>Este kit contém uma pequena caixa de preparação de RNA com placa de primer i7 Index.&nbsp;</td></tr><tr><td>miRNeasy Micro Kit (50)</td><td>Qiagen</td><td>217084</td><td>Este kit contém reagente de lise de recuperação de RNA de alta qualidade (Qiazol), colunas de isolamento de RNA, tampões de isolamento (RWT, RPE) e água livre de RNase.</td></tr><tr><td>Kit de Reagentes MiSeq v3</td><td>Illumina</td><td>MS-102-3001</td><td>Este é o Kit de Preparação Illumina</td></tr><tr><td>Membrana de Nitrocelulose, 0.45 &mu; m</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>88018</td><td></td></tr><tr><td>PE / Dazzle 594 anticorpo CD63</td> humano <td>BioLegend</td><td>143914</td><td>usado para análise fNTA</td></tr><tr><td>PE / Dazzle 594 anticorpo CD81 humano</td><td>BioLegend</td><td>349520</td><td>usado para análise fNTA</td></tr><tr><td>PE / Dazzle 594 anticorpo CD9 humano</td><td>BioLegend</td><td>312118</td><td>usado para análise fNTA</td></tr><tr><td>PhosSTOP</td><td>Merck</td><td></td><td></td></tr><tr><td>4906845001 Pierce BCA Protein Assay Kit</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>23225</td><td></td></tr><tr><td>Proteinase K</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>25530049</td><td></td></tr><tr><td>Qubit Kit de ensaio de microRNA</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Q32880</td><td></td></tr><tr><td>Qubit 1X dsDNA HS kit de ensaio</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Q33230</td><td></td></tr><tr><td>Qubit 3.0 Fluorômetro</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Q33216</td><td></td></tr><tr><td>RIPA Lise e Tampão de Extração</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>89901</td><td></td></tr><tr><td>RNase A</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>EN0531</td><td></td></tr><tr><td>SuperSignal West Femto Substrato de Sensibilidade Máxima</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>34094</td><td></td></tr></tbody></table>

aproveitando o poder das cargas de microrna em pequenas vesículas extracelulares liberadas de seções do cérebro humano recém-congeladas 

Harnessing the Power of MicroRNA Cargoes in Small Extracellular Vesicles Released from Fresh-Frozen Human Brain Sections

Para confirmar a presença de BDsEVs, foram utilizadas três técnicas: western blotting, NTA e TEM (Figura 3). Os resultados do Western blot (Figura 3A e Arquivo Suplementar 1) mostram a presença de todos os cinco marcadores positivos (CD9, CD63, CD81, Flot-1 e TSG101) e a ausência de Calnexina em sEVs (usado como controle negativo), confirmando que não há contaminação com conteúdo celular. Como esperado, os homogeneizados cerebrais (BH) apresentam mais proteína do que a observada nos sEVs para os marcadores testados. As imagens TEM confirmaram a morfologia dos BDsEVs e seu tamanho relativo dentro da amostra ( Figura 3B ), o que foi confirmado pela análise de rastreamento de nanopartículas ( Figura 3C ).
A Figura 3C (painel superior) mostra os tamanhos de partículas isoladas entre 50-200 nm. A partir dos dados do NTA, tomando o resultado de dispersão como 100% das partículas representadas, o CMO representa cerca de 52,35% das partículas (Figura 3C, painel inferior) a ter uma bicamada lipídica. Dessas partículas coradas com CMO, 34,66% continham CD9, 15,49% continham CD63 e 12,01% continham CD81. Consulte o Arquivo Suplementar 2 para obter dados de controle NTA.
Os dados de quantificação do RNA isolado (Tabela 2) mostram níveis variando de 3,24-8,76 (ng/μL), valores que foram normalizados ao gerar as bibliotecas de cDNA. Os resultados do ensaio TapeStation (Figura 4) mostram picos principais de cerca de 120-160 pb, com picos menores abaixo disso de cerca de 50 pb e outros picos menores que são mais altos de cerca de 484 pb.
As verificações de qualidade para os dados de sequenciamento de próxima geração mostram leituras de altíssima qualidade após o corte do adaptador (Figura 5A). Todas as posições de sequência mostram uma pontuação Phred de &gt;30, indicando taxas de erro inferiores a 1 em 1000 nucleotídeos. A Figura 5B mostra que a maioria das sequências tem cerca de 21-22 pb, correspondendo à faixa de tamanho esperada para microRNAs. Por meio de mapeamento adicional a jusante (usando BowTie2), usando a ferramenta biológica de análise flagstat da Samtools, de 1.304.100 sequências alinhadas, 1.116.264 (85%) foram mapeadas para as regiões de microRNA no genoma humano (build hg38; Tabela 3).
Do total de miRNAs, 808 miRNAs foram expressos em todas as 3 amostras, com 344 miRNAs compartilhados entre as três amostras (~ 43%), 5 compartilhados entre o controle 1 e o controle 2, 183 compartilhados entre o controle 1 e o controle 3 e 16 compartilhados entre o controle 2 e o controle 3 (Figura 6). A partir desses dados, o miRNA mais expresso em todos os três BDsEVs são has-let-7b-5p, has-miR-143-3p, has-miR-30a-5p, has-miR-221-3p e has-let7i-5p. Da mesma forma, os 5 principais miRNAs menos diferencialmente expressos entre as amostras de BDsEVs (lê-se &gt;10) são has-miR-128-2-5p, has-miR-182-5p, has-miR-193b-5p, has-miR-448 e has-miR-505-3p. Todas as contagens de leitura brutas e normalizadas são fornecidas no Arquivo Suplementar 3.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67379/67379fig01.jpg"> 
Figura 1: Fluxo de trabalho de processamento de tecidos. A figura mostra o processo passo a passo para o isolamento de sEVs derivados do cérebro (BDsEVs) de seções cerebrais recém-congeladas usando cromatografia de exclusão de tamanho. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67379/67379fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67379/67379fig02.jpg"> 
Figura 2: Fluxo de trabalho de isolamento de RNA de BDsEVs. A figura mostra o processo passo a passo de isolamento do RNA total dos BDsEVs, incluindo a etapa de pré-tratamento de remoção de qualquer RNA extracelular usando proteinase K e RNase A. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67379/67379fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67379/67379fig03.jpg"> 
Figura 3: Fluxo de trabalho de caracterização do BDsEV. A figura mostra vários métodos para caracterizar os BDsEVs. (A) Western blot para detectar marcadores de proteína específicos do sEV. BH Homogeneizado cerebral. A calnexina é um controle negativo para sEVs - ausência em sEV e presença em BH confirmam a pureza da amostra de sEV. Para outros marcadores, como esperado, a quantidade de proteína é maior em BH do que nas amostras de sEV (20 μg de proteína carregada por poço). (B) Imagem representativa de microscopia eletrônica de transmissão (TEM) para BDsEVs na escala de 200 μM, confirmando a morfologia esperada com uma membrana de bicamada lipídica. (C) Gráfico de distribuição de tamanho para análise de rastreamento de nanopartículas (NTA) para todas as partículas (painel superior). Cada ponto de dados representa a variação entre três replicações. Proporções normalizadas para partículas biológicas (sEVs) e proporções relativas para marcadores de superfície específicos (painel inferior) (dados mostrados como média ± SEM de poços triplicados (n = 3)). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67379/67379fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67379/67379fig04.jpg"> 
Figura 4: Verificação de qualidade para preparação de biblioteca de cDNA. Análise de fita para amostras individuais após a preparação da biblioteca de cDNA. Os picos exibidos em cada gráfico exibem o tamanho de cada preparação (eixo horizontal, em pb) e a respectiva intensidade de cada pico (eixo vertical, FU). A pequena biblioteca de RNA esperada atinge picos em torno de 120-160 pb, como visto na figura. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67379/67379fig04large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67379/67379fig05.jpg"> 
Figura 5: Verificação de qualidade para sequenciamento do miRnome. (A) Gráfico FASTQC para qualidade de leitura para as amostras individuais após o corte do adaptador. O eixo horizontal é para a posição do nucleotídeo e o eixo vertical é para as pontuações do Phred. Os gráficos de caixa para cada posição mostram a distribuição da pontuação do Phred em todas as leituras de cada posição. Todas as distribuições dentro da zona verde confirmam dados de altíssima qualidade (&gt;Q30) que implicam uma preparação de amostra de alta qualidade. (B) A distribuição do comprimento da sequência para cada amostra mostra que, para todas as três amostras, a maioria das leituras foi em torno de 21-22 nucleotídeos - a faixa de tamanho esperada para microRNA. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67379/67379fig05large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67379/67379fig06.jpg"> 
Figura 6: Sobreposição da expressão de MicroRNA em todas as amostras. O número de miRNAs detectados em cada amostra (contagem de leitura ≥ 10) e microRNAs específicos compartilhados em mais de uma amostra são mostrados no diagrama de Venn. Todas as leituras brutas e normalizadas são mostradas no Arquivo Suplementar 3. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67379/67379fig06large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Epítopo de anticorpo</td>
			<td>Fator de diluição do anticorpo </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Anti-CD9</td>
			<td>1:2000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Anti-CD63</td>
			<td>1:2000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rato Anti-CD81</td>
			<td>1:2000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Flotilina 1 do rato</td>
			<td>1:2000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rato Anti-TSG101</td>
			<td>1:1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Anti-Calnexina</td>
			<td>1:10 000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anticorpo secundário anti-camundongo</td>
			<td>1:3000</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 1: Epítopos de anticorpos usados para a caracterização de BDsEVs e seus respectivos fatores de diluição. 
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Amostra</td>
			<td>Concentração de miRNA (ng/μL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1</td>
			<td>8.76</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2</td>
			<td>3.24</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3</td>
			<td>5.33</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 2: Dados de quantificação do RNA isolado.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Amostra</td>
			<td>Sequências alinhadas</td>
			<td>MiRNA mapeado</td>
			<td>Porcentagem (%)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amostra de controle 1</td>
			<td>1 444 665</td>
			<td>1 133 437</td>
			<td>78.46</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amostra de controle 2</td>
			<td>442 808</td>
			<td>381 631</td>
			<td>86.18</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amostra de controle 3</td>
			<td>2 024 828</td>
			<td>1 983 726</td>
			<td>97.97</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Média</td>
			<td>1 304 100.33</td>
			<td>1 166 264.67</td>
			<td>89.43</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 3: Quantidade de sequências de miRNA alinhadas e mapeadas com sucesso. 
Arquivo Suplementar 1: Dados suplementares de análise de western blot. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67379/Supplementary%20File%201.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo Suplementar 2: Dados suplementares de controle NTA. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67379/Supplementary%20File%202.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo Suplementar 3: Contagens de leitura brutas e normalizadas da análise de expressão de miRNA. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67379/Supplementary%20File%203.xlsx" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo Suplementar 4: Dados suplementares de concentração de proteínas. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67379/Supplementary%20File%204.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>

Aproveitando o poder das cargas de microRNA em pequenas vesículas extracelulares liberadas de seções do cérebro humano recém-congeladas 

Small extracellular vesicles (sEVs) are crucial mediators of cell-cell communication, transporting diverse cargoes like proteins, lipids, and nucleic ...

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JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

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Uma alternativa simples para injeção estereotáxica para Brain Knockdown específico de miRNA

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Isolamento, expansão e nucleofecção de células-tronco neurais da zona subventricular murina adulta

Aprenda a extrair vesículas extracelulares pequenas de tecido cerebral humano recém-congelado para identificar biomarcadores de microRNA em distúrbios neurológicos. Este método eficiente e acessível permite diagnóstico precoce de doenças como demência.

Aproveitando o poder das cargas de microRNA em pequenas vesículas extracelulares liberadas de seções do cérebro humano recém-congeladas (Vídeo) | JoVE Journal

Aproveitando o poder das cargas de microRNA em pequenas vesículas extracelulares liberadas de seções do cérebro humano recém-congeladas

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