Name: Contenção para induzir estresse em camundongos e ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-12-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 48 s
Description: Aprenda a induzir estresse por contenção em camundongos e ratos para estudar mecanismos neurobiológicos e alterações noradrenérgicas. Este método ajuda pesquisadores a investigar transtornos de uso de substâncias.

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<meta charset="utf8"></head><body>Impacto do estresse de contenção na fisiologia e neurobiologia em modelos de roedores

<table><tbody><tr><td>Tubo cônico de tampa de rosca de uso geral de 50 mL</td> Bacia de pipeta descartável <td>Globe Scientific</td><td>6288</td><td></td></tr> Kit ELISA <tr><td></td><td>Fisher Scientific</td><td>13-681-500</td><td></td></tr><tr>para <td>ensaios de mandril</td><td>de corticosterona</td><td>K014-H</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de retenção de cauda</td><td>Braintree Scientific</td><td>RTV</td><td></td></tr></tbody></table>

contenção para induzir estresse em camundongos e ratos

Restraint to Induce Stress in Mice and Rats

Em um estudo publicado anteriormente21, os procedimentos de estresse de contenção descritos neste manuscrito foram usados para avaliar o impacto do estresse de contenção na regulação do cortisol e da norepinefrina, enquadrando-se nas amplas possibilidades de alterações na neurobiologia induzidas pelo estresse mencionadas no protocolo 3.3. Neste estudo, utilizamos o protocolo descrito acima para a contenção de camundongos. Detalhes adicionais que estão além do escopo do foco de restrição deste artigo, por exemplo, a justificativa para a região do cérebro, parâmetros de estimulação optogenética ou FSCV, podem ser encontrados no manuscrito referenciado.
Usamos camundongos transgênicos machos e fêmeas (DBH:Cre+/-::Ai32+/-) expressando canalrodopsina seletivamente em neurônios noradrenérgicos e medimos a liberação estimulada de norepinefrina no núcleo do leito da estria terminal (BNST) com FSCVex vivo 21. Os camundongos foram contidos conforme descrito no protocolo 1 agudamente (2 h) e cronicamente (2 h/dia por 5 dias) ou controle em gaiola doméstica. Após a exposição, foi coletado sangue de alguns indivíduos para análise de corticosterona, conforme descrito no protocolo 3.1. Imediatamente após o estresse agudo de contenção, os camundongos mostraram níveis elevados de corticosterona, mas a resposta foi atenuada após estresse repetido (ver Figura 1). Camundongos adicionais foram usados para avaliar o impacto do estresse de contenção na liberação de norepinefrina. 24 horas após a exposição final ao estresse, o tecido cerebral foi rapidamente colhido e fatiado para registrar a liberação de norepinefrina no BNST. Curiosamente, a contenção aguda não afetou a liberação estimulada de norepinefrina, mas a exposição repetida ao estresse causou um aumento significativo na liberação estimulada de norepinefrina em todos os parâmetros de estimulação (ver Figura 2). Esses resultados convergem com investigações anteriores sobre o impacto do estresse de contenção na liberação de norepinefrina em ratos usando as abordagens descritas no protocolo 217,22.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67387/67387fig1.jpg"> 
Figura 1: Corticosterona no plasma de controles domésticos (ingênuos) e após estresse agudo (único) e crônico (repetido) de contenção. Após uma única sessão de 2 horas de estresse agudo de contenção, os níveis plasmáticos de corticosterona foram elevados em comparação com indivíduos com estresse ingênuo e repetido. Os resultados são expressos como média ± SEM. N = 5-6 camundongos por grupo. **p &lt; 0,05, ***p &lt; 0,005. Essa figura foi modificada com permissão de Schmidt et al.21. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67387/67387fig1large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67387/67387fig2.jpg"> 
Figura 2: A liberação de norepinefrina estimulada optogeneticamente é aumentada após estresse crônico (repetido) de contenção. No dia seguinte à exposição final ao estresse, a voltametria cíclica de varredura rápida ex vivo foi realizada para medir a liberação de norepinefrina estimulada optogeneticamente no núcleo do leito da estria terminal de camundongos. (A) Variações de frequência (Hz) de 20 pulsos (20 P) de estímulos liberaram mais norepinefrina no grupo de estresse repetido. (B, C) Variações no número de pulsos (2-20) em uma frequência de estimulação de 5 Hz (B) ou 10 Hz (C) indicaram maior liberação de norepinefrina no grupo de estresse repetido. Média ± SEM; n = 5−6 camundongos/grupo fornecendo 7−8 fatias/grupo. *p &lt; 0,05, **p &lt; 0,05, ***p &lt; 0,005 e ****p &lt; 0,0001. Essa figura foi modificada com permissão de Schmidt et al.21. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67387/67387fig2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>

Contenção para induzir estresse em camundongos e ratos

Across all animal species, exposure to stressful conditions induces stress responses. One method to study the effects of stress using rodent models is the ...

restraint-to-induce-stress-in-mice-and-rats

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

Trabalhar com segurança e de forma humana com roedores de investigação exige uma competência central em métodos de manipulação e contenção. Este artigo irá apresentar os princípios básicos necessários para lidar com segurança e efetivamente administrar compostos para camundongos e ratos.

Restrição manual e rotas de Administração composto comum em camundongos e ratos

Este vídeo demonstra o método de indução de estresse crônico em um camundongo por meio de imobilização repetida, levando à liberação de corticosterona e redução da atividade do receptor de glutamato nos neurônios, o que resulta em comportamento semelhante à depressão.

Induzindo comportamento semelhante à depressão em um camundongo por meio do estresse de imobilização

Aqui nós apresentamos o protocolo imprevisíveis stress leve crônica em ratos. Este protocolo induz um fenótipo de depressivo, como a longo prazo e permite avaliar a eficácia dos antidepressivos putativos em reverter os défices de depressiva como comportamentais e neuromolecular.

O protocolo de estresse suave crônico imprevisível para induzir Anhedonia em ratos

Este artigo fornece um protocolo simplificado e estandardizado para a indução do comportamento depressivo-como em ratos cronicamente imobilizados usando um restringidor. Além disso, explicam-se comportamentos e técnicas fisiológicas para verificar a indução da depressão.

Um protocolo de estresse de imobilização crônica para induzir o comportamento semelhante à depressão em camundongos

Eventos de vida estressantes prejudicam a função cognitiva, aumentando o risco de transtornos psiquiátricos. Este protocolo ilustra como o estresse afeta a flexibilidade cognitiva usando uma estratégia de operante automatizada que muda paradigma em ratos de Sprague Dawley masculino e feminino. Áreas cerebrais específicas subjacentes a comportamentos particulares são discutidas, e a relevância translacional dos resultados é explorada.

Avaliação dos efeitos do estresse na flexibilidade cognitiva usando um paradigma de mudança de estratégia operante

A tarefa da barreira do labirinto Y é um teste de comportamento que examina a motivação para gastar esforço para recompensa. Aqui, discutimos o teste de múltiplos estressores crônicos bem validados, incluindo corticosterona crônica e estresse de derrota social com esse comportamento, bem como o novo estresse crônico de derrota social não discriminatória (CNSDS), que é eficaz nas mulheres.

Estresse crônico muda comportamento de escolha relacionado ao esforço em uma tarefa de barreira y-maze em camundongos

O paradigma do estresse psicossocial crônico (CGS) emprega estressores clinicamente relevantes durante a gravidez em camundongos para modelar transtornos psiquiátricos de mães e bebês. Aqui, fornecemos um procedimento passo-a-passo de aplicação do paradigma CGS e avaliações a jusante para validar esse modelo.

Usando um modelo murino de estresse psicossocial na gravidez como um paradigma transcanalmente relevante para transtornos psiquiátricos em mães e bebês

Este artigo descreve uma técnica de manuseio em camundongos, a técnica de manuseio 3D, que facilita o manuseio rotineiro reduzindo comportamentos semelhantes à ansiedade e apresenta detalhes sobre duas técnicas relacionadas existentes (manuseio de túneis e caudas).

Técnicas de manuseio para reduzir o estresse em camundongos

A maioria dos experimentos de comportamento para roedores foi originalmente concebida para ratos. Devido às diferenças comportamentais entre ratos e camundongos, às vezes são necessárias modificações para camundongos. Apresentamos um método para testar a memória de trabalho espacial em camundongos, minimizando o estresse durante a tarefa de memória de trabalho.

Uma tarefa apetitiva de memória de trabalho espacial para camundongos em um labirinto radial semiautomatizado de 8 braços, reduzindo a associação de memória de medo no labirinto

O labirinto Lashley III é uma tarefa rota-aprendizagem que não depende de estímulos aversivos ou estímulos visuais. É, portanto, uma opção altamente atraente para avaliar a aprendizagem ea memória, especialmente em ratos do envelhecimento ou de outra forma, onde o stress é uma consideração.

Baixa tensão de Aprendizagem Route Usando o Lashley Maze III em Ratos

Aprenda a induzir estresse por contenção em camundongos e ratos para estudar mecanismos neurobiológicos e alterações noradrenérgicas. Este método ajuda pesquisadores a investigar transtornos de uso de substâncias.

Contenção para induzir estresse em camundongos e ratos

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