Name: Imagem tridimensional de tecidos aórticos na aterosclerose (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-25T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 55 s
Description: Aprenda técnicas de limpeza de tecidos e imagem 3D para estudar a aterosclerose em modelos murinos. Este método revela interações entre o sistema nervoso periférico e placas ateroscleróticas em alta resolução.

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<meta charset="utf8"></head><body>Protocolos otimizados de limpeza de tecidos para imagens 3D da aorta murina

<ol><li>Libby, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+changing+landscape+of+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The changing landscape of atherosclerosis.</a> Nature. 592 (7855), 524-533 (2021).</li>
<li>Mohanta, S., Yin, C., Weber, C., Hu, D., Habenicht, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aorta+atherosclerosis+lesion+analysis+in+hyperlipidemic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Aorta atherosclerosis lesion analysis in hyperlipidemic mice.</a> Bio Protoc. 6 (11), e1833(2016).</li>
<li>Yin, C., Mohanta, S. K., Srikakulapu, P., Weber, C., Habenicht, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Artery+tertiary+lymphoid+organs%3A+Powerhouses+of+atherosclerosis+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Artery tertiary lymphoid organs: Powerhouses of atherosclerosis immunity.</a> Front Immunol. 7, 387(2016).</li>
<li>Mohanta, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Artery+tertiary+lymphoid+organs+contribute+to+innate+and+adaptive+immune+responses+in+advanced+mouse+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Artery tertiary lymphoid organs contribute to innate and adaptive immune responses in advanced mouse atherosclerosis.</a> Circ Res. 114 (11), 1772-1787 (2014).</li>
<li>Carmeliet, P., Tessier-Lavigne, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Common+mechanisms+of+nerve+and+blood+vessel+wiring%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Common mechanisms of nerve and blood vessel wiring.</a> Nature. 436 (7048), 193-200 (2005).</li>
<li>Mohanta, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroimmune+cardiovascular+interfaces+control+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Neuroimmune cardiovascular interfaces control atherosclerosis.</a> Nature. 605 (7908), 152-159 (2022).</li>
<li>Mohanta, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+brain+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular brain circuits.</a> Circ Res. 132 (11), 1546-1565 (2023).</li>
<li>Hu, D., Yin, C., Luo, S., Habenicht, A. J. R., Mohanta, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+smooth+muscle+cells+contribute+to+atherosclerosis+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Vascular smooth muscle cells contribute to atherosclerosis immunity.</a> Front Immunol. 10, 1101(2019).</li>
<li>Newland, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type-2+innate+lymphoid+cells+control+the+development+of+atherosclerosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Type-2 innate lymphoid cells control the development of atherosclerosis in mice.</a> Nat Commun. 8, 15781(2017).</li>
<li>Grabner, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphotoxin+beta+receptor+signaling+promotes+tertiary+lymphoid+organogenesis+in+the+aorta+adventitia+of+aged+Apoe-%2F-+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Lymphotoxin beta receptor signaling promotes tertiary lymphoid organogenesis in the aorta adventitia of aged Apoe-/- mice.</a> J Exp Med. 206 (1), 233-248 (2009).</li>
<li>Mai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-body+cellular+mapping+in+mouse+using+standard+igg+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Whole-body cellular mapping in mouse using standard igg antibodies.</a> Nat Biotechnol. 42 (4), 617-627 (2024).</li>
<li>Molbay, M., Kolabas, Z. I., Todorov, M. I., Ohn, T. L., Erturk, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+guidebook+for+disco+tissue+clearing%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Syst+Biol%22%5BJournal%5D)">A guidebook for disco tissue clearing.</a> Mol Syst Biol. 17 (3), e9807(2021).</li>
<li>Tainaka, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-body+imaging+with+single-cell+resolution+by+tissue+decolorization%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Whole-body imaging with single-cell resolution by tissue decolorization.</a> Cell. 159 (4), 911-924 (2014).</li>
<li>Tian, T., Yang, Z., Li, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+clearing+technique%3A+Recent+progress+and+biomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anat%22%5BJournal%5D)">Tissue clearing technique: Recent progress and biomedical applications.</a> J Anat. 238 (2), 489-507 (2021).</li>
<li>Adolfs, Y., Raj, D. D. A., Brignani, S., Pasterkamp, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+tissue+clearing+and+3d+analysis+of+dopamine+neurons+in+the+developing+mouse+midbrain%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for tissue clearing and 3d analysis of dopamine neurons in the developing mouse midbrain.</a> STAR Protoc. 2 (3), 100669(2021).</li>
<li>Power, R. M., Huisken, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+guide+to+light-sheet+fluorescence+microscopy+for+multiscale+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">A guide to light-sheet fluorescence microscopy for multiscale imaging.</a> Nat Methods. 14 (4), 360-373 (2017).</li>
<li>Sun, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+clearing+approaches+in+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Tissue clearing approaches in atherosclerosis.</a> Methods Mol Biol. 2419, 747-763 (2022).</li>
<li>Chistiakov, D. A., Ashwell, K. W., Orekhov, A. N., Bobryshev, Y. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innervation+of+the+arterial+wall+and+its+modification+in+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Auton+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Innervation of the arterial wall and its modification in atherosclerosis.</a> Auton Neurosci. 193, 7-11 (2015).</li>
<li>Cao, Y., Wang, H., Wang, Q., Han, X., Zeng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+volume+fluorescence-imaging+of+vascular+plasticity+in+adipose+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Metab%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional volume fluorescence-imaging of vascular plasticity in adipose tissues.</a> Mol Metab. 14, 71-81 (2018).</li>
<li>Kirst, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+the+fine-scale+organization+and+plasticity+of+the+brain+vasculature%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Mapping the fine-scale organization and plasticity of the brain vasculature.</a> Cell. 180 (4), 780-795.e25 (2020).</li>
<li>Todorov, M. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Machine+learning+analysis+of+whole+mouse+brain+vasculature%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Machine learning analysis of whole mouse brain vasculature.</a> Nat Methods. 17 (4), 442-449 (2020).</li>
<li>Bhatia, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+proteomics+in+three-dimensional+intact+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Spatial proteomics in three-dimensional intact specimens.</a> Cell. 185 (26), 5040-5058.e19 (2022).</li>
<li>Mai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scalable+tissue+labeling+and+clearing+of+intact+human+organs%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Scalable tissue labeling and clearing of intact human organs.</a> Nat Protoc. 17 (10), 2188-2215 (2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2,2'-tiodietanol (TDE)</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>166782</td><td>Reagente de limpeza</td></tr><tr><td>Amira</td><td>Thermo Fisher Software de visualização 3D científico</td><td></td><td>; Software de processamento de imagem usado para segmentação manual e rastreamento em imagens 3D</td></tr><tr><td>Álcool benzílico</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>W213713</td><td>Reagente de limpeza</td></tr><tr><td>Benzoato de benzila</td><td>Sigma</td><td>B6630</td><td>Reagente de limpeza</td></tr><tr><td>CD16/32</td><td>eBioscience</td><td>14-0161-82</td><td>Solução de bloqueio</td></tr><tr><td>Microscópio confocal de varredura a laser&nbsp;</td><td>Leica Microsystems</td><td>TCS- SP8 3X</td><td>Dispositivo de imagem para imagens multidimensionais de alta resolução de tecidos biológicos intactos ou seções com alta especificidade em resolução subcelular.</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Invitrogen</td><td>D3571</td><td>Marcador de Núcleos</td></tr><tr><td>Diclorometano (DCM)</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>270997</td><td>Reagente de limpeza</td></tr><tr><td>Dissecando cera pan-preta&nbsp;</td><td>Thermo Scientific&nbsp;</td><td>S17432</td><td>Dissecção e fixação da aorta&nbsp;</td></tr><tr><td>Estereomicroscópio de dissecção</td><td>Leica Microsystems&nbsp;</td><td>Stemi 2000</td><td>Dissecção de órgãos de camundongo</td></tr><tr><td>Etanol&nbsp;</td><td>Deserção</td> <td>Sigma</td><td>E7023</td></tr><tr><td>Ácido etilenodiaminotetracético (EDTA)</td><td>Roth&nbsp;</td><td>8040.1</td><td>Tampão de perfusão&nbsp;</td></tr><tr><td>Fiji</td><td>(ImageJ, NIH)</td><td></td><td>Software de processamento de imagem de código aberto para imagens 2D e 3D</td></tr><tr><td>IgG anti-hamster de cabra, Cy3</td><td>Dianova&nbsp;</td><td>127-165-099</td><td>Anticorpo secundário</td></tr><tr><td>IgG anti-coelho de cabra, Alexa Fluor 680</td><td>Thermo Fisher Scientific / Invitrogen</td><td>A-21109</td><td>Anticorpo secundário&nbsp;</td></tr><tr><td>IgG anti-rato de cabra, Cy5</td><td>Dianova</td><td>712-175-150</td><td>Anticorpo secundário</td></tr><tr><td>para hamster anti-CD3e&nbsp;</td><td>BD Bioscience</td><td>145-2C11&nbsp;</td><td>Marcador de célula Pan-T</td></tr><tr><td>Huygens Professional</td><td>Scientific Volume Imaging, Holanda</td><td>Versão 19.10</td><td>Software de restauração de imagem; Software de processamento de imagem usado principalmente para deconvolução de imagens 2D e 3D</td></tr><tr><td>Estação de trabalho de processamento de imagem</td><td>MIFCOM&nbsp;</td>Estação de trabalho de processamento de imagem <td>MIFCOM X5</td><td>equipada com todos os softwares de processamento de imagem, incluindo Leica application suite X, Fiji e Imaris para pós-processamento de imagens adquiridas por microscópios confocais, multifotônicos e de folha de luz Software</td></tr><tr>de análise de imagem<td>Imaris</td><td>Bitplane</td><td>versão 8.4</td><td>; Software de processamento de imagem usado para segmentação automatizada de imagens 3D</td></tr><tr><td>Incubadora e rotador&nbsp;</td><td>Marshall Scientific&nbsp;</td><td>Innova 4230</td><td>Dispositivo de incubação e rotação durante a limpeza do tecido </td></tr><tr><td>iSpacer</td><td>Sunjin Lab</td><td>IS4020</td><td>Retangular bem como o suporte de amostra</td></tr><tr><td>Ketamine</td><td>Livisto</td><td></td><td>Anestésico</td></tr><tr><td>Leica Application Suite X (LAS-X)&nbsp;</td><td>Leica Microsystems</td><td>Versão 3.5</td><td>Software de processamento de imagem para as imagens adquiridas com o microscópio Leica</td></tr><tr><td>Microscópio de luz</td><td>Leica Microsystems</td><td>DM LB</td><td>Dispositivo de imagem para imagem de campo brilhante</td></tr><tr><td>Folha de luz</td> microscópio <td>LaVision BioTech</td><td>Ultramicroscope II</td><td>Técnica de imagem para imagens rápidas e de alta resolução de grandes espécimes biológicos ou camundongos inteiros com baixa exposição à luz, adquirindo rapidamente imagens de seções ópticas finas.</td></tr><tr><td>Microscopia multifotônica</td><td>Leica Microsystems</td><td>TCS-SP5II MP&nbsp;</td><td>Modalidade de imagem para imagens multidimensionais e de alta resolução de tecidos biológicos intactos e viáveis em nível subcelular e molecular por períodos prolongados de tempo, profundamente na amostra e com invasão mínima.</td></tr><tr><td>Soro de cabra normal&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>G9023</td><td>Solução de bloqueio</td></tr><tr><td>de paraformaldeído (PFA)&nbsp;</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>P-6148&nbsp;</td><td>Fixação&nbsp;</td></tr><tr><td>Solução salina tamponada com fosfato (PBS)</td> <td>Sigma&nbsp;</td><td>P4417-100TAB&nbsp;</td><td>Tampão de lavagem</td></tr><tr><td>Gelatina para pele suína</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>G1890</td><td>Tampão de incubação</td></tr><tr><td>Quadrol</td><td>Sigma</td><td>122262</td><td>Reagente de limpeza CUBIC</td></tr><tr><td>Rabbit Anti-NF200</td><td>Sigma</td><td>N4142</td><td>Marcador pan-neuronal</td></tr><tr><td>Rato Anti-B220&nbsp;</td><td>BD Bioscience</td><td>RA3-6B2</td><td>Marcador de células Pan-B</td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>90M003524V&nbsp;</td><td>Desidratação&nbsp;</td></tr><tr><td>Sytox</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>S11380</td><td>Marcador de núcleos</td></tr><tr><td>Tetrahidrofurano</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>401757</td><td>Reagente de limpeza&nbsp;</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Roth&nbsp;</td><td>3051.1</td><td></td></tr><tr><td>Penetração Ureia</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>U5128</td><td>Reagente de limpeza CUBIC</td></tr><tr><td>Xileno&nbsp;</td><td>Fisher Chemical&nbsp;</td><td>x/0250/17&nbsp;</td><td>Anestésico&nbsp;</td></tr></tbody></table>

imagem tridimensional de tecidos aórticos na aterosclerose

Three-Dimensional Imaging of Aortic Tissues in Atherosclerosis

Para demonstrar a microanatomia da aorta intacta saudável e doente e revelar as conectividades físicas entre o sistema imunológico, o sistema nervoso e o sistema cardiovascular em modelos de aterosclerose em camundongos, usamos duas abordagens complementares de limpeza de tecidos: limpeza TDE da aorta isolada e limpeza iDISCO de todo o camundongo (Figura 1). Após a imunocoloração total, a aorta da face foi limpa com uma série de soluções de trabalho TDE. O IR é combinado em 1,4-1,5, dependendo da concentração de TDE da etapa final, para obter a transparência ideal do tecido aórtico sem alterar seu volume (Figura 1A). Ao contrário da limpeza de TDE, o protocolo de limpeza iDISCO inclui etapas de descoloração e permeabilização antes da imunocoloração de montagem total, seguida de deslipidação e desidratação usando diferentes solventes químicos e a correspondência de RI em 1,56 (Figura 1B). A limpeza iDISCO permite a visualização de tecido de tamanho grande e até mesmo de todo o corpo do camundongo devido ao encolhimento do tecido.
A imagem 3D confocal e multifotônica da aorta facial inteira com TDE permite a visualização de estruturas, incluindo placas íntimas, celularidade da adventícia e projeções neuronais da adventícia, entre outras estruturas, enquanto a imagem de folha de luz do camundongo iDISCO permite a visualização e a reconstrução da árvore arterial junto com o tecido adiposo perivascular, linfonodos renais e os componentes neurais associados, incluindo nervos e gânglios (Figura 1C). Por exemplo, a imagem confocal da aorta aterosclerótica eliminada por TDE detectou múltiplas células T coradas com CD3e na placa e extensa neogênese de fibras nervosas coradas com NF200 de diferentes diâmetros em ATLOs, enquanto a imagem multifotônica de aorta abdominal doente de montagem inteira de camundongos Apoe-/- envelhecidos mostrou territorialidade do brotamento de axônios que expressam NF200 em áreas de células T B220 negativas dentro de ATLOs (Figura 2A). Por outro lado, a imagem de folha de luz do abdômen inteiro do camundongo limpo pelo iDISCO visualizou a relação espacial entre a aorta e os gânglios simpáticos adjacentes. A segmentação de imagens 3D e o rastreamento de axônios individuais dos gânglios até a superfície da aorta revelaram uma reestruturação neuronal robusta, incluindo axônios corados com NF200 recém-formados na adventícia da aorta adjacente à placa aterosclerótica (Figura 2B).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67400/67400fig01.jpg"> 
Figura 1: Fluxo de trabalho do estudo. (A) Limpeza de TDE aquosa da aorta enfaced . (B) Limpeza iDISCO à base de solvente de todo o mouse. (C). 3D imagens volumétricas e processamento de imagens de aorta isolada opticamente limpa ou amostras inteiras de camundongos. Essa figura foi modificada com permissão de Sun et al.17. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67400/67400fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67400/67400fig02v2.jpg"> 
Figura 2: Exemplo de imagens 3D de tecidos limpos de TDE e iDISCO. (A) Imagem 3D de TDE limpa na aorta da face . Painel superior: Imagens confocais mostraram células T CD3e+ (vermelho, seta) na placa intimal e axônios nervosos NF200+ (verde) na adventícia aterosclerótica da aorta (ATLO); Painel inferior: Imagens multifotônicas mostraram axônios nervosos NF200+ (verde, pontas de setas), células B B220+ (vermelho, triângulo aberto), geração de segundo harmônico derivada de colágeno (SHG, branco) em ATLOs de camundongos Apoe-/- machos de 78 semanas de idade. Sytox (azul) e DAPI (azul) mostraram os núcleos. (B) Imagens reconstruídas e segmentadas em 3D do abdômen de camundongo iDISCO limpas inteiras. Reconstrução, segmentação e rastreamento 3D de folha de luz de nervos e axônios NF200+ (setas, verde) e sua relação espacial com os gânglios simpáticos (pontas de setas) da aorta abdominal intacta. O triângulo aberto indicava um axônio recém-formado adjacente às placas ateroscleróticas. A autofluorescência (auto) foi usada para obter imagens da aorta e do tecido conjuntivo, incluindo placa (ciano) e linfonodo renal (RLN, azul). GC, gânglios celíacos, SycG, gânglios da cadeia simpática. Essa figura foi modificada com permissão de Mohanta et al.6 e Sun et al.17. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67400/67400fig02largev2.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>

Imagem tridimensional de tecidos aórticos na aterosclerose

Recent research has advanced the understanding of atherosclerosis as a transmural chronic inflammatory disease involving all three layers of the arterial ...

three-dimensional-imaging-of-aortic-tissues-in-atherosclerosis

Research

JoVE Journal

Biology

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Detalhamos um novo infravermelho próximo de fluorescência cateter (NIRF) para 2-dimensional imagem intravascular molecular da biologia...

In vivo Near Infrared fluorescência de imagem intravascular (NIRF) Molecular da placa inflamatória, uma Abordagem Multimodal para imagem da Aterosclerose

A análise ex vivo de lesões arteriais de modelos animais de doenças cardiovasculares classicamente depende de técnicas histológicas e imuno-histoquímicas. Estes fornecem medições bidimensionais em lesões tridimensionais. Este manuscrito descreve a geração de lesões arteriais para análise quantitativa em 3 dimensões usando tomografia de projeção óptica.

Geração e quantificação 3-Dimensional de Arterial lesões em ratos por meio de tomografia óptica de Projeção

Descrevemos procedimentos para quantificar e caracterizar lesões ateroscleróticas em modelos de camundongos usando secção de precisão do seio aórtico e da aorta ascendente combinada com análise histoquímica e imuno-histoquímica.

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Aqui, apresentamos um protocolo para usar três dimensionais modelos de impressos para planejamento pré-operatório e reorganização intra-operatória de complicado vasculares locais ao manusear uma anomalia congênita da aorta.

Impressão tridimensional de uma anomalia complexa da aorta

Ultra-sonografia tornou-se uma modalidade comum para determinar as dimensões luminal dos aneurismas da aorta torácicas e abdominais em ratos. Este protocolo descreve o procedimento para adquirir imagens de ultrassom bidimensional confiável e reprodutível da aorta ascendente e abdominal em ratos.

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Análise de interação biomecânica de fluido-estrutura biomecânica baseada em coerência óptica da progressão da aterosclerose coronária

A angiografia dinâmica computada (CTA) fornece valor diagnóstico adicional na caracterização do endoleaks aórtico. Este protocolo descreve uma abordagem qualitativa e quantitativa usando a análise da curva de atenuação do tempo para caracterizar o endoleaks. A técnica de integração de imagens CTA dinâmicas com fluoroscopia usando fusão de imagem 2D-3D é ilustrada para melhor orientação de imagem durante o tratamento.

Angiografia de tomografia computadorizada dinâmica e resolvida por tempo para caracterização de endoleaks aórticos e orientação de tratamento via 2D-3D Fusion-Imaging

A ecocardiografia intracardíaca (ECI) precisa mostra acurácia significativa na estimativa da estrutura atrial esquerda, um método prospectivo e promissor de estimativa da estrutura cardíaca. Propomos um protocolo de modelagem tridimensional do átrio esquerdo e das veias pulmonares com EIC e remodelamento rápido do cateter de mapeamento anatômico (FAM).

Modelagem Tridimensional do Átrio Esquerdo e das Veias Pulmonares com Abordagem Precisa do Ecocardiograma Intracardíaco

Este protocolo apresenta um pipeline abrangente para analisar amostras obtidas de corações humanos que abrangem as escalas microscópica e macroscópica.

Pipeline para estudo anatômico tridimensional em várias escalas do coração humano

Descrevemos uma plataforma baseada em chip para o cultivo tridimensional de células em micro-biorreatores. Um chip pode abrigar até 10 milhões. células que podem ser cultivadas sob condições estritamente definidas em relação ao fluxo de fluidos, etc tensão de oxigênio em um circuito de circulação estéril, fechado.

Chip baseado em Cultura de Células tridimensional em perfundidos Micro-biorreatores

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Imagem tridimensional de tecidos aórticos na aterosclerose

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