Name: Aumentando a eficiência e os rendimentos de radiomarcação de radioligantes de carbono-11 para pesquisa clínica usando o método de loop (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-12-20T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 8 s
Description: Aprenda a otimizar a síntese de radiotraçadores de carbono-11 usando o método de loop para imagem molecular por PET. Este protocolo demonstra maior eficiência, rendimento e atividade molar em comparação com métodos tradicionais.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Síntese eficiente de radiotraçadores de carbono-11 usando a metilação do método de loop

<ol><li>Bailey, D. L., Townsend, D. W., Valk, P. E., Maisey, M. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBailey%2C+DL+%22Positron+emission+tomography%3A+Basic+sciences%22">Positron emission tomography: Basic sciences</a>. , Springer. 223-231 (2005).</li>
<li>Berger, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+does+it+work%3F+Positron+emission+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ%22%5BJournal%5D)">How does it work? Positron emission tomography.</a> BMJ. 326 (7404), 1449(2003).</li>
<li>Seeram, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computed+tomography%3A+A+technical+review%5BTitle%5D)+AND+%22Radiol+Technol%22%5BJournal%5D)">Computed tomography: A technical review.</a> Radiol Technol. 89 (3), 279CT-302CT (2018).</li>
<li>Grover, V. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+resonance+imaging%3A+Principles+and+techniques%3A+Lessons+for+clinicians%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Exp+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Magnetic resonance imaging: Principles and techniques: Lessons for clinicians.</a> J Clin Exp Hepatol. 5 (3), 246-255 (2015).</li>
<li>Rowe, S. P. P., Martin, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging+in+oncology%3A+Current+impact+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22CA+Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging in oncology: Current impact and future directions.</a> CA Cancer J Clin. 72 (4), 333-352 (2022).</li>
<li>Ziessman, H. A., O'Malley, J. P., Thrall, J. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aZiessman%2C+HA+%22Nuclear+medicine%3A+The+requisites%22">Nuclear medicine: The requisites</a>. , Fourth edn, Saunders. (2014).</li>
<li>Cochran, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determining+glucose+metabolism+kinetics+using+18F-FDG+micro-PET%2FCT%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Determining glucose metabolism kinetics using 18F-FDG micro-PET/CT.</a> J Vis Exp. (123), e55184(2017).</li>
<li>Pantel, A. R., Bae, S. -W., Li, E. J., O′Brien, S. R., Manning, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+imaging+of+metabolism%2C+perfusion%2C+and+hypoxia%3A+FDG+and+beyond%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+J.+%28Philadelphia%2C+PA%2C+U.+S.%29%22%5BJournal%5D)">PET imaging of metabolism, perfusion, and hypoxia: FDG and beyond.</a> Cancer J. (Philadelphia, PA, U. S.). 30 (3), 159-169 (2024).</li>
<li>Hansen, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+neurotransmitter+systems+to+the+structural+and+functional+organization+of+the+human+neocortex%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mapping neurotransmitter systems to the structural and functional organization of the human neocortex.</a> Nat Neurosci. 25 (11), 1569-1581 (2022).</li>
<li>Valenta, I. S., Thomas, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET-determined+myocardial+perfusion+and+flow+in+coronary+artery+disease+characterization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Imaging+Radiat+Sci%22%5BJournal%5D)">PET-determined myocardial perfusion and flow in coronary artery disease characterization.</a> J Med Imaging Radiat Sci. 55 (2S), S44-S50 (2024).</li>
<li>Nerella, S. G., Singh, P., Sanam, T., Digwal, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+Molecular+Imaging+in+Drug+Development%3A+The+Imaging+and+Chemistry+Perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Med+%28Lausanne%29%22%5BJournal%5D)">PET Molecular Imaging in Drug Development: The Imaging and Chemistry Perspective.</a> Front Med (Lausanne). 9, 812270(2022).</li>
<li>Dolle, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon-11+and+fluorine-18+chemistry+devoted+to+molecular+probes+for+imaging+the+brain+with+positron+emission+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Label+Compd+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Carbon-11 and fluorine-18 chemistry devoted to molecular probes for imaging the brain with positron emission tomography.</a> J Label Compd Radiopharm. 56 (3-4), 65-67 (2013).</li>
<li>Wilson, A. A., Garcia, A., Jin, L., Houle, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiotracer+synthesis+from+%5B11C%5D-iodomethane%3A+A+remarkably+simple+captive+solvent+method%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Radiotracer synthesis from [11C]-iodomethane: A remarkably simple captive solvent method.</a> Nucl Med Biol. 27 (6), 529-532 (2000).</li>
<li>Bruton, L., Scott, P. J., Kilbourn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+synthesis+modules+for+PET+radiochemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Handb+Radiopharm.+%282nd+Ed.%29%22%5BJournal%5D)">Automated synthesis modules for PET radiochemistry.</a> Handb Radiopharm. (2nd Ed.). , 437-456 (2021).</li>
<li>Studenov, A. R., Jivan, S., Adam, M. J., Ruth, T. J., Buckley, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+of+the+mechanism+of+the+in-loop+synthesis+of+radiopharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">Studies of the mechanism of the in-loop synthesis of radiopharmaceuticals.</a> Appl Radiat Isot. 61 (6), 1195-1201 (2004).</li>
<li>Jewett, D. M., Ehrenkaufer, R. L., Ram, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+captive+solvent+method+for+rapid+radiosynthesis%3A+application+to+the+synthesis+of+%5B1-11C%5Dpalmitic+acid%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">A captive solvent method for rapid radiosynthesis: application to the synthesis of [1-11C]palmitic acid.</a> Int J Appl Radiat Isot. 36 (8), 672-674 (1985).</li>
<li>Watkins, G. L., Jewett, D. M., Mulholland, G. K., Kilbourn, M. R., Toorongian, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+captive+solvent+method+for+rapid+N-%5B11C%5Dmethylation+of+secondary+amides%3A+application+to+the+benzodiazepine%2C+4%27-chlorodiazepam+%28RO5-4864%29%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">A captive solvent method for rapid N-[11C]methylation of secondary amides: application to the benzodiazepine, 4'-chlorodiazepam (RO5-4864).</a> Appl Radiat Isot. 39 (5), 441-444 (1988).</li>
<li>Iwata, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+loop+method+for+the+automated+preparation+of+%5B11C%5Draclopride+from+%5B11C%5Dmethyl+triflate%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">A simple loop method for the automated preparation of [11C]raclopride from [11C]methyl triflate.</a> Appl Radiat Isot. 55 (1), 17-22 (2001).</li>
<li>Iwata, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On-line+%5B11C%5Dmethylation+using+%5B11C%5Dmethyl+iodide+for+the+automated+preparation+of+11C-radiopharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">On-line [11C]methylation using [11C]methyl iodide for the automated preparation of 11C-radiopharmaceuticals.</a> Appl Radiat Isot. 43 (9), 1083-1088 (1992).</li>
<li>Mccarron, J. A., Turton, D. R., Pike, V. W., Poole, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remotely-controlled+production+of+the+5-HT1A+receptor+radioligand+%5Bcarbonyl-11C%5DWAY-100635%5BTitle%5D)+AND+%22J+Labelled+Compd+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Remotely-controlled production of the 5-HT1A receptor radioligand [carbonyl-11C]WAY-100635.</a> J Labelled Compd Radiopharm. 38 (10), 941-953 (1996).</li>
<li>Shao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highlighting+the+versatility+of+the+Tracerlab+synthesis+modules.+Part+2%3A+fully+automated+production+of+%5B11C%5D-labeled+radiopharmaceuticals+using+a+Tracerlab+FXC-Pro%5BTitle%5D)+AND+%22J+Labelled+Compd+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Highlighting the versatility of the Tracerlab synthesis modules. Part 2: fully automated production of [11C]-labeled radiopharmaceuticals using a Tracerlab FXC-Pro.</a> J Labelled Compd Radiopharm. 54 (14), 819-838 (2011).</li>
<li>Dahl, K., Halldin, C., Schou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+methodologies+for+the+preparation+of+carbon-11+labeled+radiopharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transl+Imaging%22%5BJournal%5D)">New methodologies for the preparation of carbon-11 labeled radiopharmaceuticals.</a> Clin Transl Imaging. 5 (3), 275-289 (2017).</li>
<li>Shao, X., Schnau, P. L., Fawaz, M. V., Scott, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+radiosyntheses+of+%5BC%5Draclopride+and+%5BC%5DDASB+using+ethanolic+loop+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Enhanced radiosyntheses of [C]raclopride and [C]DASB using ethanolic loop chemistry.</a> Nucl Med Biol. 40 (1), 109-116 (2013).</li>
<li>Milicevic Sephton, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+radiosynthesis+of+%5B11C%5DUCB-J+for+imaging+synaptic+density+by+positron+emission+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Label+Compd+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Automated radiosynthesis of [11C]UCB-J for imaging synaptic density by positron emission tomography.</a> J Label Compd Radiopharm. 63 (3), 151-158 (2020).</li>
</ol>

Dentre as modalidades de imagem molecular, a tomografia por emissão de pósitrons (PET) é distinta na forma de resolução dos processos bioquímicos associados a alvos fisiológicos específicos ou regiões de interesse 1,2. A sensibilidade característica e a natureza não invasiva da PET são aproveitadas para a visualização in vivo e quantificação da fisiopatologia da doença, muitas vezes revelando alvos invisíveis por técnicas de imagem mais anatômicas, como tomografia computadorizada (TC)3 ou ressonância magnética (RM)4. A imagem molecular contemporânea vê a combinação de PET com TC ou RM (PET/CT ou PET/RM, respectivamente), aproveitando a resolução de alto contraste e os parâmetros de imagem quantificáveis do PET para fornecer mapas de correção de atenuação (PET/CT) altamente precisos e resolução espacial aprimorada (PET/RM)5, superando alguns obstáculos apresentados pela variabilidade nas energias cinéticas mais altas dos pósitrons de radionuclídeos como o gálio-68 e o rubídio-826. Essas técnicas de imagem de dupla modalidade canalizam os atributos característicos de cada modalidade individual, fornecendo aos médicos ou pesquisadores uma riqueza de insights anatômicos e bioquímicos co-registrados sobre o sujeito do estudo5.
A aplicabilidade clínica dessa técnica de imagem é vasta, oferecendo visualização e mensuração de processos fisiológicos em nível molecular tão diversos quanto o metabolismo da glicose 7,8, a ligação ao receptor de neurotransmissor9, a perfusão miocárdica10 e várias condições neurológicas11. Fora do uso clínico, os atributos inerentes do PET estão alinhados para desempenhar um papel integral no desenvolvimento de medicamentos diagnósticos e terapêuticos, permitindo a quantificação de parâmetros como potencial de ligação (PA), biodistribuição, volume de distribuição (VT) e ocupação do receptor do medicamento (RO%) por observação direta da interação da farmacologia, farmacocinética e farmacodinâmica. Isso, por sua vez, contribui para determinações, incluindo se um composto atinge um alvo em uma concentração de dose efetiva (ED50), a extensão da penetração efetiva da barreira hematoencefálica, a integridade metabólica do composto e a dose apropriada e o intervalo de dosagem11.
No desenvolvimento de uma sonda útil para imagens PET, após a identificação de um biomarcador apropriado e a seleção de um ligante associado, a radiomarcação da biomolécula com um radionuclídeo PET adequado produz a sonda radiotraçadora para o estudo PET. Entre os radionuclídeos PET para investigar questões biológicas, farmacológicas ou médicas, o carbono-11 oferece uma combinação de versatilidade sintética e características físicas favoráveis que permitem seu uso generalizado em diversas biomoléculas e ligantes elegíveis6. Com uma emissão de pósitrons de 99,8% e meia-vida de 20,4 minutos12, o carbono-11 permite a administração repetida a indivíduos em intervalos curtos, enquanto ainda permite sínteses em várias etapas. No entanto, essas vantagens exigem uma instalação com recursos de ciclotron e radioquímica no local5.
Tais instalações requerem métodos de metilação confiáveis, poderosos e reprodutíveis que permitam a radiomarcação de moléculas precursoras, muitas vezes com o substrato eletrofílico [11C]iodometano ([11C]CH3I) ou [11C]metil triflato ([11C]CH3OTf)13. Um módulo de radiossíntese, fornecido pelo fabricante, é normalmente configurado para uma abordagem de vaso de reação para reações de metilação [11C]14. Isso envolve resfriar o recipiente para retenção efetiva de [11C] iodometano ou [11C] triflato de metila na entrega, selar e aquecer o recipiente para efetuar a reação, extinguir e, em seguida, transferir o conteúdo reagido para um sistema de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) para purificação semipreparativa13. Embora eficaz15, essa técnica apresenta vários pontos potenciais de falha estrutural, envolvendo septos frascos, agulhas e linhas de transferência associadas.
A necessidade de um método de metilação mais confiável e reprodutível orientou a investigação e a busca de uma modificação de solvente cativo em muitos de nossos protocolos de síntese de radioligantes de carbono-11. Essa abordagem visa abordar as limitações do método convencional de vasos de reação, mantendo ou melhorando a eficiência da radiomarcação.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig2.jpg"> 
Figura 2: Projeto e fluxo da síntese do vaso de reação e método de loop. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig1large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
A química do solvente cativo oferece a promessa de aprisionamento eficiente e reação com o reagente de radiomarcação por meio do espalhamento da solução precursora sobre uma grande área de um material ou estrutura de suporte e, em seguida, direcionando o reagente de marcação gasosa para contato com o material revestido16,17. Isso aumenta a extensão e a qualidade do contato entre as duas fases do reagente16,18. Numerosas implementações e variações dessa técnica foram documentadas já em 1985 16,17,18,19,20, e ela encontrou aplicação com [11C] iodeto de metila, [11C] triflato de metila, bem como reações de radiomarcação de dióxido de carbono do reagente de Grignard [11C] 20. Um refinamento adicional foi apresentado pela discussão da química do "método de loop" de solvente cativo, originalmente descrita por Wilson et al., que não requer nenhum suporte adicional ao já oferecido pelo loop de purificação de HPLC, nem aquecimento ou resfriamento do ambiente de reação13. Descobriu-se que a radiomarcação do "método de loop" com solvente cativo transmite reações de metila e triflato de metila [11C] com as virtudes de perda mínima de transferência, alto rendimento radioquímico, alta atividade molar, diminuição do tempo de reação e simplicidade 7,21,22,23.
Aqui, descrevemos a implementação de nosso grupo do "método de loop" [11C] técnica de metilação originalmente descrita por Wilson13, e outras posteriormente 14,15,18,21,22,23, (ver Figura 2) por meio de modificação mecânica (ver Figura 3) para nosso módulo de síntese (doravante referido como o Módulo). Seguindo o mais próximo possível do ethos aspiracional de simplicidade, essas modificações mecânicas foram mínimas e acessíveis, resultando em uma redução geral da complexidade da engenharia e apenas na adição de componentes essenciais aos já instalados pelo fabricante do módulo, associados a um arranjo de radiomarcação de vaso de reação padrão. Isso se reflete na decisão de utilizar o circuito de purificação de HPLC de aço inoxidável já fornecido e pré-instalado pelo fabricante do módulo, conforme descrito abaixo, que se mostrou compatível e eficaz com as sínteses examinadas. Discutimos, em detalhes, o protocolo de radiomarcação do método de loop completo e validado utilizado na produção de pesquisa clínica para a síntese do radiotraçador [11C]-(R)-N-sec-butil-4-(2-clorofenil)-N-metilquinazolina-2-carboxamida,[11C]ER-176 (1), usando iodometano de carbono-11. Além disso, comparamos vários atributos relacionados à eficiência da radiomarcação conduzida pelo método do reator e pelo método de loop em três radioligantes adicionais, que incluem (S, S) - [11C] metilreboxetina ([11C] MRB (2)), [11C] -meta-hidroxiefedrina ([11C] mHED (3)) e 2- [4- [(11C) metilamino] fenil] -1,3-benzotiazol-6-ol ([11C] PiB (4)) desenvolvido em nosso serviço, conforme determinado pela análise de lotes sintetizados (ver Tabela 1 eFigura 1 ). Essa comparação ilustra o claro benefício para parâmetros como rendimento radioquímico e atividade molar associados à implementação da radiomarcação "método de loop", proporcionada por modificações de módulo simples e acessíveis de custo mínimo para o laboratório de radioquímica.

<table><tbody><tr><td>2- (4'-aminofenil) -6-hidroxibenzotiazol</td><td>ABX</td><td>5101</td><td>Precursor para a síntese de PiB (6-OH-BTA-0)</td></tr> <tr><td>(2S, 3S) -Desetilreboxetina</td><td>ABX</td><td>4407</td><td>Precursor para síntese de MRB</td></tr><tr><td>Ácido acético</td><td>Sigma Aldrich</td><td>695092</td><td>Reagente usado para a síntese de [11C]PiB</td></tr><tr><td>Acetona-d6</td><td>Sigma Aldrich</td><td>444863</td><td>Solvente utilizado para a síntese de [11C]PiB</td></tr><tr><td>Acetonitrila, Sigma</td><td>Aldrich</td><td>34998</td> de grau HPLC <td>Várias concentrações utilizadas na fase móvel para a produção de radiotraçadores</td></tr><tr><td>Acetonitrila-d3</td><td>Sigma Aldrich</td><td>151807</td><td>Solvente utilizado para a síntese de [11C]mHED</td></tr><tr><td>Formato de amónio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>798568</td><td>Reagente usado para a síntese de [11C]MRB</td></tr><tr><td>Hidróxido de amônio</td><td>Ricca Chemical</td><td>642-16</td><td>Reagente usado para a síntese de [11C]ER-176</td></tr><tr><td>Balança analítica</td><td>Mettler Toledo&nbsp;</td><td>Balança M-XS104</td><td>usada para pesar materiais para produções</td></tr><tr><td>Ascarite II</td><td>Thermo Fisher</td><td>CN-C049U90</td><td>Usada em colunas de secagem para o Módulo FxC Pro</td></tr><tr><td>Gabinete de Biossegurança</td><td>Comecer&nbsp;</td><td>M-BH4</td><td>Usado para montagem FPV</td></tr> <tr><td>(R) -N-sec-Butil-4- (2-clorofenil) -quinazolina-2-carboxamida</td><td>ABX</td><td>1665.0001</td><td>ER-176 precursor</td></tr><tr><td>C18 Light Sep-Pak cartucho</td><td>WATERS</td><td>WAT023501</td><td>Cartucho de extração em fase sólida usado na síntese de radiotraçadores de carbono-11</td></tr><tr><td>Carboxen, 60 - 80 mesh</td><td>Supelco</td><td>CN-10478-U</td><td>Usado no Módulo FxC Pro</td></tr><tr><td>Compactado - NOS (99% de nitrogênio/1% de oxigênio)</td><td>Airgas&nbsp;</td><td>CN-X02NI99C3003091</td><td>Gás alvo usado no bombardeio de ciclotron</td></tr><tr><td>Dispensando célula quente (DHC)</td><td>Comecer&nbsp;</td><td>M-MIP1-1390</td><td>Dispensador de radiotraçadores</td></tr><tr><td>Calibrador de dose&nbsp;</td><td>Capintec</td><td>M-CRC-55t</td><td>Medindo a atividade dos radiotraçadores</td></tr><tr><td>Endosafe nexgen-PTS</td><td>Charles River&nbsp;</td><td>PTS150</td><td>Endosafe PTS, sistema de teste portátil</td></tr><tr><td>Endotoxina PTS - Cartucho de Teste de Limulus Amebocyte Lysate (LAL)</td><td>Charles River&nbsp;</td><td>Cartuchos PTS20F</td><td>LAL usados para testar os níveis de endotina em radiotraçadores</td></tr><tr><td>Etanol, 200 provas, grau HPLC</td><td>Sigma Aldrich</td><td>459828</td><td>Usado para&nbsp; produto final e&nbsp; fase móvel de ER, MRB, mHED e</td></tr><tr><td>PiB Gas Chromatogram 2030</td><td>Shimadzu</td><td>M-GC-2030</td><td>Meça excipientes de produções de radiotraçadores</td></tr><tr><td>Graphpac</td><td>Supelco, Millipore Sigma</td><td>10258</td><td>Usado no módulo FxC Pro para a síntese de [11C]ER-176, [11C]MRB, [11C]mHED e [11C]PiB</td></tr><tr><td>Hélio, Airgas de grau de pesquisa</td><td>&nbsp;</td>Tanque de hélio <td>CN-HER-300</td><td>, 99,9999% (tanque de grau de pesquisa)</td></tr><tr><td>Série Shimadzu LC-20&nbsp;</td><td>Shimadzu</td><td>Vários&nbsp;</td><td>Sistema de HPLC analítico</td></tr><tr><td>Hidrogênio, grau de pureza ultra alta &nbsp;</td><td>Airgas&nbsp;</td><td>CN-HYUHP-300</td><td>Tanque de hidrogênio usado para o módulo FxC Pro</td></tr><tr><td>Iodo</td><td>Thermo Fisher</td><td>I35</td><td>Usado no módulo FxC Pro, conversão de [11C]CH4 para [11C]CH3I</td></tr><tr><td>Luna 10 mm C18 (2) 100 &Aring; coluna de 250 x 10 mm</td><td>Phenomenex</td><td>00G-4253-N0</td><td>Coluna de semi-preparação para síntese</td></tr> <tr><td>de MRBLuna 5 mm C18 (2) 100 &Aring; Coluna de 250 x 10 mm</td><td>Phenomenex</td><td>00G-4252-N0</td><td>Coluna de semi-preparação para síntese de PiB</td></tr><tr><td>Macherey-Nagel MN VP 250/10 Nucleosil 100-5 C18 Coluna de Nautilus</td><td>Macherey-Nagel</td><td>715412.1</td><td>Coluna de semi-preparação para síntese de mHED</td></tr><tr><td>Metaraminol (base livre)</td><td>ABX</td><td>3380.0001</td><td>Precursor utilizado na produção de [11C]mHED</td></tr><tr><td>Milli-Q Direct 8 DI system</td><td>Millipore</td><td>M-ZROQ00800</td><td>Sistema de água desionizada</td></tr><tr><td>N,N-Dimetilformamida-d7</td><td>Sigma Aldrich</td><td>189979</td><td>Solvente usado para a síntese de [11C]MRB</td></tr><tr><td>Agulha, 18 G x 1</td><td>Becton Dickinson</td><td>BD 305195</td><td>Agulhas usadas em vários estágios da configuração de produção</td></tr><tr><td>Agulha, 20 G x 1-1/2"</td><td>Agulhas Becton Dickinson</td><td>BD 305176</td><td>usadas em vários estágios de configuração de produção</td></tr><tr><td>Agulha, 22 G x 4", Spinal&nbsp;</td><td>Produtos Air-Tite</td><td>N224</td><td>Agulhas utilizadas em várias fases da configuração de produção</td></tr><tr><td>Ónix Monolítico C18 Coluna de 100 x 10 mm</td><td>Phenomenex</td><td>CH0-7878</td><td>Coluna de semi-preparação para síntese ER-176</td></tr><tr><td>Pentóxido de fósforo com indicador Sicapent</td><td>Sigma Aldrich</td><td>79610</td><td>Utilizado na síntese Módulos para a produção de radiotraçadores de carbono-11</td></tr><tr><td>Porapak N</td><td>Waters</td><td>WAT027047</td><td>Material usado para embalar a coluna MeI no Módulo FxC Pro</td></tr><tr><td>Manômetro</td><td>Omega</td><td>M-DPG1100B-100G</td><td>Usado para teste de integridade do filtro</td></tr><tr><td>Shimalite-Ni</td><td>Shimadzu Corporation</td><td>221-66062</td><td>Material embalado em forno CH4 do Módulo FxCPro para conversão de [11C]CO2 para [11C]CH4</td></tr><tr><td>Siemens Eclipse 11-MeV cíclotron</td><td>Siemens</td><td>RDS 111</td><td>Acelerador de partículas usado para gerar gás [11C]CO2 para produções de carbono-11 Silver</td></tr><tr><td>Triflate</td><td>Sigma Aldrich</td><td>483346</td><td>Material embalado em coluna triflate do FxC Pro Module para a produção de [11C]mHED e [11C]PiB</td></tr><tr><td>Injeção de cloreto de sódio (solução salina, 0,9%), 50 mL</td><td>de solução salina Hospira</td><td>0409-4888-50</td><td>usada no processo de formulação de radiotraçadores Injeção de</td></tr><tr><td>cloreto de sódio (solução salina, 0,9%), 500 mL</td><td>de reagente Braun</td><td>L8001</td><td>usado na síntese de [11C]mHED e fase móvel.</td></tr><tr><td>Reagente de hidróxido de sódio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>221465</td><td>usado na síntese de [11C]ER-176 e outros componentes em diferentes concentrações.</td></tr><tr><td>Detector de iodeto de sódio</td><td>Eckert & Detector Ziegler</td><td>PMT/Na-BFC3200</td><td>Gamma usado em linha com a unidade de HPLC</td></tr><tr><td>Frasco estéril, 50 mL</td><td>ALK Allergy</td><td>SEV50</td><td>Frascos estéreis de 50 mL usados como o&nbsp;</td></tr><tr><td>Loop de injeção de HPLC</td><td>GE</td><td>980314/IEG-005118</td> de aço inoxidável <td>a 1,5 mL possuindo um OD 1/16", ID: 1 mm.</td></tr><tr><td>Seringa, 1 mL</td><td>Braun</td><td>NJ-9166017-02</td><td>Seringa usada em vários estágios de configuração de produção</td></tr><tr><td>Seringa, Seringa</td><td>Henke Sass Wolf</td><td>4100-X00V0</td> de 10 mL <td>usada em vários estágios de configuração de produção</td></tr><tr><td>Seringa,</td> Seringa <td>Henke Sass Wolf</td><td>4200-X00V0</td> de 20 mL <td>usada em vários estágios de configuração de produção</td></tr><tr><td>Seringa, 5 mL</td><td>Becton Dickinson</td><td>309632</td><td>Seringa usada em vários estágios de configuração de produção</td></tr><tr><td>Módulo TracerLab FX2C&nbsp;</td><td>GE</td><td>M-P5360QB</td><td>Módulo automatizado de produção de radiotraçadores de carbono-11</td></tr><tr><td>Trietilamina</td><td>Sigma Aldrich</td><td>471283</td><td>Reagente usado para a síntese de seringa de tuberculina [11C]PiB</td></tr><tr><td>, com agulha de 21 G x 1, descartável, estéril (1 mL)</td>Seringa <td>de 309624 Becton Dickinson</td><td>BD</td><td>usada em frascos de produto final pré-montados</td></tr></tbody></table>

aumentando a eficiência e os rendimentos de radiomarcação de radioligantes de carbono-11 para pesquisa clínica usando o método de loop

Enhancing Efficiency and Radiolabeling Yields of Carbon-11 Radioligands for Clinical Research Using the Loop Method

O grupo de radioquímica da New York University Langone Health (NYULH) fornece vários radiotraçadores de carbono-11, flúor-18 e gálio-68 usados para pesquisas em humanos e aplicações pré-clínicas. Vários métodos são utilizados para a produção dos radiotraçadores PET. Nossa equipe emprega o método de loop para a síntese de (1), (2), (3) e (4) (ver Figura 1 e Figura 8). Após a conclusão da produção, uma alíquota é removida do frasco estéril do produto final. Esta amostra é usada para a inoculação da solução do produto final (em meio de caldo de soja tríptico (TSB) e meio fluido de tioglicolato (FTM) como uma amostra de esterilidade), bem como uma amostra representativa da solução a granel para testes de CQ. Cada radiotraçador é submetido a testes de CQ antes de o produto ser libertado para administração (ver Tabela 2).
Os testes de controle de qualidade incluem a visualização da aparência do produto, verificação da integridade do filtro, determinação da identidade radionuclídica, pH, identidade radioquímica (radio-HPLC), pureza radioquímica (radio-HPLC), pureza química (HPLC), atividade molar, resistência, solvente residual, endotoxinas e esterilidade (ver Tabela 2). Os seguintes resultados foram obtidos a partir da produção clínica de cada radiotraçador acima mencionado (ver Tabela 1).
Para um cromatograma HPLC analítico representativo, consulte a Figura 7 e o Arquivo Suplementar 1. Cada radiotraçador é obrigado a passar por todas as especificações de controle de qualidade (ver Tabela 2) antes de poder ser liberado e administrado a um sujeito.
Consulte o Arquivo Suplementar 1 para quantidades de precursores e reagentes, bem como os cromatogramas analíticos de HPLC de [11C]MRB (2) (Figura Suplementar 1), [11C]mHED (3) (Figura Suplementar 2) e [11C]PiB (4) (Figura Suplementar 3).
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Composto</td>
			<td>Parâmetros</td>
			<td>Método de loop (média ± std)</td>
			<td>Método do reator (média ± padrão)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="7">[11C]ER-176</td>
			<td>Número de produções</td>
			<td>25</td>
			<td>6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Início da Síntese</td>
			<td>86 ± 5,0 GBq</td>
			<td>52 ± 25,7 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fim da Síntese</td>
			<td>5,4 ± 2,2 GBq</td>
			<td>1,6 ± 0,5 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pureza radioquímica</td>
			<td>99,6 ± 0,6%</td>
			<td>99,9 ± 0,1%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Concentração ER-176</td>
			<td>1,1 ± 0,5 μg/mL</td>
			<td>0,63 ± 0,37 μg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atividade molar</td>
			<td>194 ± 66 GBq/μmol</td>
			<td>132 ± 78 GBq/μmol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tempo Total de Síntese</td>
			<td>36 ± 3 min</td>
			<td>44 ± 6 min</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="7">[11C]MRB</td>
			<td>Número de produções</td>
			<td>70</td>
			<td>6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Início da Síntese</td>
			<td>84 ± 5,4 GBq</td>
			<td>39 ± 11,9 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fim da Síntese</td>
			<td>3,0 ± 1,2 GBq</td>
			<td>1,9 ± 0,7 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pureza radioquímica</td>
			<td>99,5 ± 0,5%</td>
			<td>99,7 ± 0,8%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Concentração de MRB</td>
			<td>0,52 ± 0,24 μg/mL</td>
			<td>0,68 ± 0,41 μg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atividade molar</td>
			<td>190 ± 50 GBq/μmol</td>
			<td>99 ± 55 GBq/μmol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tempo Total de Síntese</td>
			<td>35 ± 3 min</td>
			<td>42 ± 3 min</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="7">[11C]mHED</td>
			<td>Número de produções</td>
			<td>5</td>
			<td>11</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Início da Síntese</td>
			<td>69 ± 10,5 GBq</td>
			<td>82 ± 4,3 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fim da Síntese</td>
			<td>5,5 ± 1,3 GBq</td>
			<td>3,3 ± 1,0 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pureza radioquímica</td>
			<td>98,2 ± 1,3%</td>
			<td>99,1 ± 0,7%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Concentração de mHED</td>
			<td>0,40 ± 0,10 μg/mL</td>
			<td>0,52 ± 0,37 μg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atividade molar</td>
			<td>301 ± 48 GBq/μmol</td>
			<td>155 ± 77 GBq/μmol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tempo Total de Síntese</td>
			<td>27 ± 4 min</td>
			<td>32 ± 2 min</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="7">[11C]PiB</td>
			<td>Número de produções</td>
			<td>51</td>
			<td>10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Início da Síntese</td>
			<td>86 ± 5,4 GBq</td>
			<td>57 ± 17,2 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fim da Síntese</td>
			<td>3,2 ± 0,8 GBq</td>
			<td>1,4 ± 0,2 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pureza radioquímica</td>
			<td>97,0 ± 1,5%</td>
			<td>99,1 ± 1,4%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Concentração de PiB</td>
			<td>0,22 ± 0,51 μg/mL</td>
			<td>0,30 ± 0,24 μg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atividade molar</td>
			<td>201 ± 68 GBq/μmol</td>
			<td>207 ± 124 GBq/μmol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tempo Total de Síntese</td>
			<td>35 ± 2 min</td>
			<td>36 ± 5 min</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Quadro 1: Resultados da produção de [11C]ER-176 (1), [11C]MRB (2), [11C] m HED (3) e [11C]PiB (4) por meio do método de loop ou método de recipiente de reação. Todos os valores são relatados no final da síntese. Abreviaturas: [11C]ER-176 = [11C]-(R)-N-sec-butil-4-(2-clorofenil)-N-metilquinazolina-2-carboxamida; [11C]MRB = (S,S)-[11C]metilreboxetina; [11C]mHED = [11C]-meta-hidroxiefedrina; [11C]PiB = 2-[4-[(11C)metilamino]fenil]-1,3-benzotiazol-6-ol.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig1.jpg"> 
Figura 1: Estruturas de [11C]ER-176 (1), [11C]MRB (2), [11C] m HED (3) e [11C]PiB (4). Abreviaturas: [11C]ER-176 = [11C]-(R)-N-sec-butil-4-(2-clorofenil)-N-metilquinazolina-2-carboxamida; [11C]MRB = (S,S)-[11C]metilreboxetina; [11C]mHED = [11C]-meta-hidroxiefedrina; [11C]PiB = 2-[4-[(11C)metilamino]fenil]-1,3-benzotiazol-6-ol. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig1large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig3.jpg"> 
Figura 3: Modificações feitas no Módulo automatizado. Em vermelho representa o encanamento do módulo de síntese para incorporar o loop para a produção de radiotraçadores PET por meio da metilação do carbono-11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig3large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig4.jpg"> 
Figura 4: Encanamento e reencanamento do módulo para incorporar o método de loop para metilação de carbono-11 de radiotraçadores PET. (A) Loop de injeção de HPLC com conectores de união. (B) Método do recipiente de reação. A seta vermelha mostrando a conexão V8. (C) Reencanamento do método de loop, contornando o vaso do reator. Note-se que a ligação V8 à entrada de HPLC contorna o recipiente de reacção, permitindo o acesso directo ao [11C]iodometano ou ao [11C]metiltriflato ao circuito de HPLC. (D) Colocação da união em relação ao vaso do reator. Observe a conexão ao loop de HPLC de aço inoxidável. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig4large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig5.jpg"> 
Figura 5: Perfis de HPLC semi-preparados de ER-176 e [11C]ER-176 com produção pelo método de loop. (A) Perfil de HPLC semi-prep para ER-176 (1) por meio de produção de método de loop em UV = 235 nm; tR = 13,2 min. (B) Perfil de radio-HPLC semi-preparado para [11C]ER-176 (1); tR = 12,4 min. Condições: fase móvel de acetonitrila 37:63 (v/v): hidróxido de amônio 20 mM a uma vazão de 5,0 mL/min. Abreviatura: [11C]ER-176 = [11C]-(R)-N-sec-butil-4-(2-clorofenil)-N-metilquinazolina-2-carboxamida. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig5large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig6.jpg"> 
Figura 6: Perfis de HPLC semi-preparados de ER-176 e [11C]ER-176 com produção de métodos de reactores. (A) Perfis de HPLC semi-preparados para ER-176 (1) através da produção de métodos de reactores a UV = 235 nm; tR = 9,8 min. (B) Perfil de radio-HPLC semi-preparada para [11C]ER-176 (1); tR = 9,2 min. Condições: fase móvel de acetonitrila 37:63 (v/v): hidróxido de amônio 20 mM a uma vazão de 5,5 mL/min. Abreviaturas: [11C]ER-176 = [11C]-(R)-N-sec-butil-4-(2-clorofenil)-N-metilquinazolina-2-carboxamida; tR = tempo de retenção. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig6large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig7.jpg"> 
Figura 7: Perfis analíticos de HPLC para ER-176. (A) Perfil analítico de HPLC dos espectros UV para ER-176 (1) a 235 nm; tR = 6,10 min. (B) Perfil analítico de HPLC do radiotraçador para [11C]ER-176 (1); tR = 6,36 min. Condições: 10 μm C18 (2) 100 <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/67406/67406eq1.jpg" style="font-size: 14px;"> LC Coluna 250 x 4,6 mm; metanol/água 74/26 com uma vazão de 1,5 mL/min. Abreviatura: [11C]ER-176 = [11C]-(R)-N-sec-butil-4-(2-clorofenil)-N-metilquinazolina-2-carboxamida; tR = tempo <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig7large.jpg" target="_blank">de retenção Clique aqui para ver uma versão ampliada desta figura.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig8.jpg"> 
Figura 8: Esquema Sintético para Síntese de Compostos de Carbono-11. (i) A formação de [11C]CH3I e [11C]CH3OTf, e (iia.) a radiomarcação de [11C]ER-176 (1), (iib.) [11C]MRB (2), (iic.)[11C]mHED (3) e (iid.) [11C]PiB (4). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig8large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Teste/Parâmetros</td>
			<td>Especificações</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aparência (inspeção visual)</td>
			<td>Solução límpida, incolor e isenta de partículas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Integridade do filtro de membrana</td>
			<td>≥ 50 psi</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ph</td>
			<td>4.5 - 8.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Identidade radionuclídica (meia-vida)</td>
			<td>19.3 - 21.3 min</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Identidade radioquímica (radio-HPLC)</td>
			<td>0,90 ≤ tR Prod / t R Std ≤ 1,10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pureza radioquímica (radio-HPLC)</td>
			<td>≥ 95,0%†</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Concentração do medicamento (HPLC)</td>
			<td>ver notas*</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Impurezas químicas totais (HPLC)</td>
			<td>ver notas**</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atividade molar (@ EOS)</td>
			<td>&gt; 9,25 GBq/μmol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrila residual (GC)</td>
			<td>≤ 410 ppm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetona residual (GC)</td>
			<td>≤ 5.000 ppm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimetilsulfóxido residual (GC)</td>
			<td>≤ 5.000 ppm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Etanol residual (GC)</td>
			<td>≤ 10% (v/v)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metanol residual (GC)</td>
			<td>≤ 3.000 ppm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-dimetilformamida residual (GC)</td>
			<td>≤ 880 ppm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Limulus Lisado de Amebócitos (LAL)</td>
			<td>≤ 17,5 EU/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Esterilidade (iniciar em 30 h)</td>
			<td>Estéril (14 dias)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Registros de preparação</td>
			<td>Completo e preciso</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rótulos</td>
			<td>Completo, preciso, reconciliado</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 2: Critérios de controle de qualidade para a aprovação ou rejeição de radiotraçadores de carbono-11. † A pureza radioquímica ≥ 90,0% para [11C]mHED; * Concentração da droga: [11C]ER-176 ≤ 10 μg/dose; [11C]MRB ≤ 10 μg/dose; [11C]mHED ≤ 50 μg/dose; [11C]PiB ≤ 13,4 μg/dose; ** Impurezas químicas totais: [11C]ER-176 ≤ 1,0 μg/dose; [11C]MRB ≤ 1,0 μg/dose; [11C]mHED ≤ 5,0 μg/dose; [11C]PiB ≤ 1,34 μg/dose. Abreviaturas: [11C]ER-176 = [11C]-(R)-N-sec-butil-4-(2-clorofenil)-N-metilquinazolina-2-carboxamida; [11C]MRB = (S,S)-[11C]metilreboxetina; [11C]mHED = [11C]-meta-hidroxiefedrina; [11C]PiB = 2-[4-[(11C)metilamino]fenil]-1,3-benzotiazol-6-ol; EOS = fim da síntese; GC = cromatografia gasosa; LAL = lisado de amebócitos de Limulus.
Arquivo Suplementar 1: Produtos químicos e materiais, reagentes usados para o método de loop ou vaso de reator, testes de controle de qualidade, cromatogramas analíticos de HPLC. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406_JoVe_Supplementary%20File_Final_CarberryEdit.zip" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>

Aumentando a eficiência e os rendimentos de radiomarcação de radioligantes de carbono-11 para pesquisa clínica usando o método de loop

A successful positron emission tomography imaging program involving carbon-11 radiotracers demands fast, efficient, and reliable synthesis methods, ...

enhancing-efficiency-radiolabeling-yields-carbon-11-radioligands-for

Research

JoVE Journal

Chemistry

Química

Este vídeo descreve a técnica de radioimunoterapia pré-direcionada ou PRIT, na qual imunoconjugados seguidos de radioligantes são administrados para o tratamento de tumores. Esta radioimunoterapia reduz as doses de radiação para tecidos saudáveis e utiliza radionuclídeos com meias-vidas muito baixas, incompatíveis com vetores baseados em anticorpos.

Radioimunoterapia pré-direcionada: um método para entrega direcionada de radionuclídeos terapêuticos a tumores

Devido à sua meia-vida radioativa de vários dias e propriedades de decaimento favoráveis, o radiometal emissor de pósitrons 89Zr é extremamente adequado para uso em radiofármacos baseados em anticorpos para imagens PET. Neste protocolo, serão descritas a bioconjugação, radiossíntese e aplicação pré-clínica de 89anticorpos marcados com Zr.

O bioconjugação e radiossíntese de<sup&gt; 89</sup&gt; Anticorpos Zr-DFO-rotulados

Um procedimento pormenorizado para a síntese de uma azida marcado com 125I e a radiomarcação de dibenzocyclooctyne (DBCO) -Grupo-conjugados, nanopartículas de ouro de 13 nm de tamanho, utilizando uma reacção de clique sem cobre é descrito.

Um protocolo otimizado para a radiomarcação eficiente de nanopartículas de ouro usando um<sup&gt; 125</sup&gt; Marcado com Eu Azida grupo prostético

Aqui, descrevemos um protocolo para radiomarcação e teste in vivo de derivados tridentados de quelato de 99mTc(I) e tetrazina para pré-direcionamento e química bio-ortogonal.

Preparação e Avaliação de<sup&gt; 99m</sup&gt; Tc-rotulados tridentadas Quelatos de Pré-alvo Usando Bioorthogonal Química

Seguindo a preparação de um anticorpo monoclonal 64 Cu-modificados se ligar a um receptor de células T de murino transgico, as células T são radiomarcados in vivo, analisadas para a viabilidade, funcionalidade, estabilidade rotulagem e apoptose, e transferidas adoptivamente para ratinhos com uma via aérea hipersensibilidade de tipo retardado reacção para imagem não invasivo por tomografia de emissão de positrões / tomografia computadorizada (PET / CT).

Murino Linfócitos Rotulagem por<sup&gt; 64</sup&gt; Cu-Antibody Receptor Segmentação para<em&gt; In Vivo</em&gt; Tráfico celular por PET / CT

Aqui, nós representamos um protocolo para o radioolabelling totalmente automatizado de [11C] SNAP-7941 e a análise da cinética em tempo real deste Pet-Tracer em P-GP expressando e não-expressando pilhas.

Aspecto técnico da síntese automatizada e avaliação cinética em tempo real de [11C] SNAP-7941

Relatamos uma técnica eficiente de radiorotulagem de carbono-11 para produzir traçadores clinicamente relevantes para tomografia por emissão de pósitrons (PET) usando cartuchos de extração de fase sólida. 11 O agente c-metilante é passado através de um cartucho pré-carregado com precursor e a elução sucessiva com etanol aquoso fornece traçadores quimicamente e radioquimly puros do PET em rendimentos radioquímicos elevados.

Fase sólida 11C-metilação, purificação e formulação para a produção de traçadores PET

Este método descreve o uso de uma nova metodologia de alta produtividade, baseada em reações químicas de gotículas, para a rápida e econômica otimização dos radiofarmacêuticos usando quantidades de nanomole de reagentes.

Otimização de reações radioquímicas usando Arrays droplet

Apresentamos aqui um protocolo para radiomarcar células com um radioisótopo de tomografia por emissão de pósitrons (PET), 89 Zr (t1/2 78,4 h), usando um sintetizador de radiomarcação pronto para uso, [89 Zr]Zr-p-isothiocyanatobenzyl-desferrioxamine ([89Zr]Zr-DBN). A radiomarcação de células com [89Zr]Zr-DBN permite rastreamento não invasivo e imagens de células radiomarcadas administradas no corpo com PET por até 7 dias após a administração.

Imagem por Tomografia por Emissão de Pósitrons do Tráfico Celular: Um Método de Radiomarcação Celular

Este artigo descreve a radiossíntese, formulação, controle de qualidade de uma nova sonda radiomarcada (ou seja, nanocorpo NM-02 marcado com 68Ga) e seu uso para imagens de PET/CT de pequenos animais em um modelo de xenoenxerto.

Radiossíntese, controle de qualidade e imagens de tomografia por emissão de pósitrons de pequenos animais de 68nanomoléculas marcadas com Ga

Aprenda a otimizar a síntese de radiotraçadores de carbono-11 usando o método de loop para imagem molecular por PET. Este protocolo demonstra maior eficiência, rendimento e atividade molar em comparação com métodos tradicionais.

Aumentando a eficiência e os rendimentos de radiomarcação de radioligantes de carbono-11 para pesquisa clínica usando o método de loop (Vídeo) | JoVE Journal

Aumentando a eficiência e os rendimentos de radiomarcação de radioligantes de carbono-11 para pesquisa clínica usando o método de loop

Explorar mais vídeos