Name: Registro de correntes retificadoras internas de K+ em células musculares lisas da artéria basilar recém-isoladas pela técnica de patch clamp (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-07T12:40:00.000+00:00
Duration: 7 min 19 s
Description: Aprenda a isolar células musculares lisas da artéria basilar de ratos e registrar correntes de potássio retificadoras internas usando a técnica de patch clamp. Este método permite estudar propriedades eletrofisiológicas em pesquisa cardiovascular.

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<ol><li>Goins, R. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lower+body+functioning+and+correlates+among+older+american+indians%3A+The+cerebrovascular+disease+and+its+consequences+in+american+indians+study%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Geriatrics%22%5BJournal%5D)">Lower body functioning and correlates among older american indians: The cerebrovascular disease and its consequences in american indians study.</a> BMC Geriatrics. 18 (1), 1-9 (2018).</li>
<li>Mattle, H. P., Arnold, M., Lindsberg, P. J., Schonewille, W. J., Schroth, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Basilar+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Neurol%22%5BJournal%5D)">Basilar artery occlusion.</a> Lancet Neurol. 10 (11), 1002-1014 (2011).</li>
<li>Morales, A., Parry, P. V., Jadhav, A., Jovin, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+route+of+revascularization+in+basilar+artery+occlusion+and+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ+Case+Reports%22%5BJournal%5D)">A novel route of revascularization in basilar artery occlusion and review of the literature.</a> BMJ Case Reports. , 1-6 (2015).</li>
<li>Ghantous, C. M., Azrak, Z., Rahman, F. A., Itani, H. A., Zeidan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+basilar+artery+reactivity+in+stroke+and+subarachnoid+hemorrhage+using+wire+myograph%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Assessment of basilar artery reactivity in stroke and subarachnoid hemorrhage using wire myograph.</a> Methods Mol Biol. 34, 625-643 (2016).</li>
<li>Tykocki, N. R., Boerman, E. M., Jackson, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smooth+muscle+ion+channels+and+regulation+of+vascular+tone+in+resistance+arteries+and+arterioles%5BTitle%5D)+AND+%22Compr+Physiol%22%5BJournal%5D)">Smooth muscle ion channels and regulation of vascular tone in resistance arteries and arterioles.</a> Compr Physiol. 7 (2), 485-581 (2017).</li>
<li>Wu, B. -N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyposmotic+challenge+inhibits+inward+rectifying+K%2B+channels+in+cerebral+arterial+smooth+muscle+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Hyposmotic challenge inhibits inward rectifying K+ channels in cerebral arterial smooth muscle cells.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 292 (2), H1085-H1094 (2007).</li>
<li>Jackson, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ion+channels+and+vascular%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Ion channels and vascular.</a> Hypertension. 35 (2), 173-178 (2000).</li>
<li>Jackson, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potassium+channels+in+the+peripheral+microcirculation%5BTitle%5D)+AND+%22Microcirculation%22%5BJournal%5D)">Potassium channels in the peripheral microcirculation.</a> Microcirculation. 12 (1), 113-127 (2005).</li>
<li>Dogan, M. F., Yildiz, O., Arslan, S. O., Ulusoy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potassium+channels+in+vascular+smooth+muscle%3A+A+pathophysiological+and+pharmacological+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Fundam+Clin+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Potassium channels in vascular smooth muscle: A pathophysiological and pharmacological perspective.</a> Fundam Clin Pharmacol. 33 (5), 504-523 (2019).</li>
<li>Daghbouche-Rubio, N., López-López, J. R., Pérez-García, M. T., Cidad, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+smooth+muscle+ion+channels+in+essential+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Vascular smooth muscle ion channels in essential hypertension.</a> Front Physiol. 13, 1-9 (2022).</li>
<li>Sahranavard, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+potassium+in+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">The role of potassium in atherosclerosis.</a> Eur J Clin Invest. 51 (3), 1-19 (2020).</li>
<li>Crecelius, A. R., Dinenno, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+regulation+via+kir+channels+and+Na%2B%2FK%2B-ATPase%5BTitle%5D)+AND+%22Channels%22%5BJournal%5D)">Vascular regulation via kir channels and Na+/K+-ATPase.</a> Channels. 9 (4), 171-172 (2015).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prostanoids+contribute+to+regulation+of+inwardly+rectifying+K%2B+channels+in+intrarenal+arterial+smooth+muscle+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Prostanoids contribute to regulation of inwardly rectifying K+ channels in intrarenal arterial smooth muscle cells.</a> Life Sci. 250, 1-9 (2020).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Luteolin-induced+coronary+arterial+relaxation+involves+activation+of+the+myocyte+voltage-gated+K%2B+channels+and+inward+rectifier+K%2B+channels%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Luteolin-induced coronary arterial relaxation involves activation of the myocyte voltage-gated K+ channels and inward rectifier K+ channels.</a> Life Sci. 221, 233-240 (2019).</li>
<li>Guo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+hypercontractility+to+acidosis+owes+to+the+greater+activity+of+tmem16a%2Fano1+in+the+arterial+smooth+muscle+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Coronary hypercontractility to acidosis owes to the greater activity of tmem16a/ano1 in the arterial smooth muscle cells.</a> Biomed Pharmacother. 139, 1-14 (2021).</li>
<li>Jing, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apigenin+relaxes+rat+intrarenal+arteries%2C+depresses+Ca2%2B-activated+Cl%E2%88%92+currents+and+augments+voltage-dependent+K%2B+currents+of+the+arterial+smooth+muscle+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Apigenin relaxes rat intrarenal arteries, depresses Ca2+-activated Cl− currents and augments voltage-dependent K+ currents of the arterial smooth muscle cells.</a> Biomed Pharmacother. 115, 1-9 (2019).</li>
<li>Manz, K. M., Siemann, J. K., Mcmahon, D. G., Grueter, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patch-clamp+and+multi-electrode+array+electrophysiological+analysis+in+acute+mouse+brain+slices%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protocols%22%5BJournal%5D)">Patch-clamp and multi-electrode array electrophysiological analysis in acute mouse brain slices.</a> STAR Protocols. 2 (2), 1-30 (2021).</li>
<li>Hamill, O. P., Marty, A., Neher, E., Sakmann, B., Sigworth, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+patch-clamp+techniques+for+high-resolution+current+recording+from+cells+and+cell-free+membrane+patches%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Arch%22%5BJournal%5D)">Improved patch-clamp techniques for high-resolution current recording from cells and cell-free membrane patches.</a> Pflugers Arch. 391 (2), 85-100 (1981).</li>
<li>Langton, P. D., Standen, N. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calcium+currents+elicited+by+voltage+steps+and+steady+voltages+in+myocytes+isolated+from+the+rat+basilar+artery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Calcium currents elicited by voltage steps and steady voltages in myocytes isolated from the rat basilar artery.</a> J Physiol. 469 (0), 535-548 (1993).</li>
<li>Kittiwoot, T. -O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+intrapulmonary+artery+and+smooth+muscle+cells+to+investigate+vascular+responses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation of intrapulmonary artery and smooth muscle cells to investigate vascular responses.</a> J Vis Exp. (184), e63686(2022).</li>
<li>Trask, A. J., Lucchesi, P. A., Mccallinhart, P. E., Zhang, X., Husarek, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+murine+coronary+vascular+smooth+muscle+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation of murine coronary vascular smooth muscle cells.</a> J Vis Exp. 111, e53983(2016).</li>
<li>Ribeiro, M. P., Relvas, R., Chiquita, S., Correia, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+human+umbilical+arterial+smooth+muscle+cells+%28HUASMC%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation of human umbilical arterial smooth muscle cells (HUASMC).</a> J Vis Exp. (41), e1940(2010).</li>
<li>Kim, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+inward+rectifier+K%2B+current+of+coronary+artery+smooth+muscle+cells+in+spontaneously+hypertensive+rats%3B+partial+compensation+of+the+attenuated+endothelium-dependent+relaxation+via+Ca2%2B-activated+K%2B+channels%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Pharmacol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Increased inward rectifier K+ current of coronary artery smooth muscle cells in spontaneously hypertensive rats; partial compensation of the attenuated endothelium-dependent relaxation via Ca2+-activated K+ channels.</a> Clin Exp Pharmacol Physiol. 47 (1), 38-48 (2019).</li>
<li>Qiao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kir2.1+regulates+rat+smooth+muscle+cell+proliferation%2C+migration%2C+and+post-injury+carotid+neointimal+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Kir2.1 regulates rat smooth muscle cell proliferation, migration, and post-injury carotid neointimal formation.</a> Biochem Biophys Res Commun. 477 (4), 774-780 (2016).</li>
<li>Tykocki, N. R., Bonev, A. D., Longden, T. A., Heppner, T. J., Nelson, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+vascular+smooth+muscle+inward-rectifier+K%2Bchannels+restores+myogenic+tone+in+mouse+urinary+bladder+arterioles%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Inhibition of vascular smooth muscle inward-rectifier K+channels restores myogenic tone in mouse urinary bladder arterioles.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 312 (5), F836-F847 (2017).</li>
<li>Ko, E. A., Han, J., Jung, I. D., Park, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiological+roles+of+K%2B+channels+in+vascular+smooth+muscle+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Smooth+Muscle+Res%22%5BJournal%5D)">Physiological roles of K+ channels in vascular smooth muscle cells.</a> Smooth Muscle Res. 44 (2), 65-81 (2008).</li>
<li>Standen, N. B., Quayle, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((K%2B+channel+modulation+in+arterial+smooth+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol+Scand%22%5BJournal%5D)">K+ channel modulation in arterial smooth muscle.</a> Acta Physiol Scand. 164, 549-557 (1998).</li>
<li>Smith, P. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kir+channels+function+as+electrical+amplifiers+in+rat+vascular+smooth+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Kir channels function as electrical amplifiers in rat vascular smooth muscle.</a> J Physiol. 586 (4), 1147-1160 (2008).</li>
<li>Kanda, H., Tonomura, S., Dai, Y., Gu, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+pressure-clamped+patch-clamp+recording+at+the+node+of+Ranvier+of+rat+myelinated+nerves%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protocols%22%5BJournal%5D)">Protocol for pressure-clamped patch-clamp recording at the node of Ranvier of rat myelinated nerves.</a> STAR Protocols. 2 (1), 1-12 (2021).</li>
<li>Witchel, H. J., Milnes, J. T., Mitcheson, J. S., Hancox, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Troubleshooting+problems+with+in+vitro+screening+of+drugs+for+qt+interval+prolongation+using+HERG+K%2B+channels+expressed+in+mammalian+cell+lines+and+Xenopus+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Toxicol+Methods%22%5BJournal%5D)">Troubleshooting problems with in vitro screening of drugs for qt interval prolongation using HERG K+ channels expressed in mammalian cell lines and Xenopus oocytes.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 48 (2), 65-80 (2002).</li>
<li>Kodandaramaiah, S. B., Franzesi, G. T., Chow, B. Y., Boyden, E. S., Forest, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+whole-cell+patch-clamp+electrophysiology+of+neurons+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Automated whole-cell patch-clamp electrophysiology of neurons in vivo.</a> Nat Methods. 9 (6), 585-587 (2012).</li>
<li>Park, W. S., Han, J., Earm, Y. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiological+role+of+inward+rectifier+K%2B+channels+in+vascular+smooth+muscle+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Arch%22%5BJournal%5D)">Physiological role of inward rectifier K+ channels in vascular smooth muscle cells.</a> Pflugers Arch. 457 (1), 137-147 (2008).</li>
<li>Thomas, C., Svehla, L., Moffett, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sodium+nitroprusside+induced+cyanide+toxicity+in+pediatric+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin+Drug+Saf%22%5BJournal%5D)">Sodium nitroprusside induced cyanide toxicity in pediatric patients.</a> Expert Opin Drug Saf. 8 (5), 599-602 (2009).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Albumina de soro bovino</td><td>Sigma, EUA</td><td>B2064</td><td></td></tr><tr><td>Cloreto de bário</td><td>Macklin Biochemical Co., Ltd., Xangai, China</td><td>B861682</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, China</td><td>A501330</td><td></td></tr><tr><td>Câmera</td><td>Hamamatsu, Japão</td><td>C11440</td><td></td></tr><tr><td>Software da câmera</td><td>Image J, EUA</td><td>Micro-gerente 2.0.0-gammal</td><td></td></tr><tr><td>Collagenase F</td><td>Sigma, EUA</td><td>C7926</td><td></td></tr><tr><td>Collagenase H</td><td>Sigma, EUA</td><td>C8051</td><td></td></tr><tr><td>Computador</td><td>Lenovo, China</td><td>~</td><td></td></tr><tr><td>Software de aquisição de dados</td><td>Molecular Devices, EUA</td><td>Clampex 10.4</td><td></td></tr><tr><td>Software de análise de dados</td><td>Axon, EUA</td><td>clampfit 10.4</td><td></td></tr><tr><td>D-glicose</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, China</td><td>A610219</td><td></td></tr><tr><td>Conversor digital-analógico</td><td>Molecular Devices, EUA</td><td>Axon digidata 1550B</td><td></td></tr><tr><td>Dithiothreitol</td><td>Sigma, USA</td><td>D0632</td><td></td></tr><tr><td>Software de desenho</td><td>San Diego, Califórnia, EUA</td><td>GraphPad&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>EGTA</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, China</td><td>A600077</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de vidro</td><td>DL Naturegene Life Sciences.USA</td><td>B150-86-10</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China</td><td>S3872</td><td></td></tr><tr><td>KCl</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, China</td><td>A100395</td><td></td></tr><tr><td>KH2PO4</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, China</td><td>A100781</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2&middot; 6H2O</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China</td><td>A100288</td><td></td></tr><tr><td>Micromanipulador</td><td>sutter, EUA</td><td>MP285A</td><td></td></tr><tr><td>Micropipeta extrator</td><td>sutter, EUA</td><td>P1000</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio</td><td>Olympus, Japão</td><td>IX73</td><td></td></tr><tr><td>Na2-ATP</td><td>Sigma, EUA</td><td>A26209</td><td></td></tr><tr><td>Na2HPO4</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, China</td><td>A610404</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, China</td><td>A100241</td><td></td></tr><tr><td>NaH2PO4</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, China</td><td>A600878</td><td></td></tr><tr><td>NaHCO3</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, China</td><td>A100865</td><td></td></tr><tr><td>NaOH</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, China</td><td>A100173</td><td></td></tr><tr><td>Papaína</td><td>Sigma, EUA</td><td>P4762</td><td></td></tr><tr><td>Potássio-D-gluconato</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, China</td><td>A507810</td><td></td></tr><tr><td>Amplificador de sinal</td><td>Molecular Devices, EUA</td><td>Axon MutiClamp 700B</td><td></td></tr><tr><td>Software amplificador de sinal</td><td>Molecular Devices, EUA</td><td>MultiClamp Commander software</td><td></td></tr><tr><td>Nitroprussiato de sódio</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, China</td><td>A600867</td><td></td></tr><tr><td>Software de análise estatística</td><td>San Diego, Califórnia, EUA</td><td>GraphPad&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

registro de correntes retificadoras internas de k+ em células musculares lisas da artéria basilar recém-isoladas pela técnica de patch clamp

Recording of Inward Rectifying K+ Currents in Freshly Isolated Basilar Artery Smooth Muscle Cells by Patch Clamp Technique

Isolamento das células do músculo liso arterial A primeira seção do procedimento detalha o processo de isolamento das células musculares lisas da artéria basilar cerebral do rato. Esse processo é ilustrado na Figura 1. O procedimento envolve digestão enzimática e etapas de separação celular para liberar células musculares lisas da artéria.
Imagens representativas de células musculares lisas isoladas A segunda seção apresenta...

Registro de correntes retificadoras internas de K+ em células musculares lisas da artéria basilar recém-isoladas pela técnica de patch clamp

Cerebrovascular disease is a prevalent condition among the elderly, with its incidence steadily rising. The basilar artery is a critical cerebral vessel ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Este destina-se como uma introdução para o patch clamp de gravação a partir de oócitos Xenopus laevis. Abrange vitelínico remoção da membrana, a formação de um selo gigaohm (gigaseal), ea conversão opcional do patch para a topologia de fora-out.

Gravação de patch-clamp de canais iônicos Expresso em Oócitos Xenopus

Medidas do KV7 atividade do canal (KCNQ) de potássio em miócitos isolados arteriais (usando patch braçadeira técnicas eletrofisiológicas) em paralelo com medidas de constritores / dilatador respostas (usando Miografia pressão) pode revelar informações importantes sobre os papéis do KV7 canais em fisiologia do músculo liso vascular e farmacologia.

Explorando Arterial Músculo Liso KV7 função dos canais de potássio utilizando electrofisiologia patch clamp e Miografia Pressão

O objectivo deste vídeo é demonstrar os procedimentos para a obtenção de células ciliadas saudáveis, intactas a partir dos órgãos do ouvido interno de peixes-zebra adultos e, em seguida, utilizando-os para os estudos de patch clamp para caracterização das propriedades biofísicas dos seus canais dependentes da voltagem.

Gravações patch clamp em células ciliadas da orelha interna Isolado de Zebrafish

Este vídeo demonstra o exame da excitabilidade dos neurônios sensoriais nos gânglios da raiz dorsal usando a técnica de patch clamp para medir o potencial reobase e de membrana, analisando as respostas dos neurônios a injeções de corrente incremental.

Gravações de grampo de remendo de células inteiras em gânglios intactos da raiz dorsal de ratos

Kv canal disfunção está associada a arritmias cardíacas. Para estudar os mecanismos moleculares que conduzem à ocorrência de arritmias tais que utilizam um protocolo sistemático para o isolamento dos cardiomiócitos atriais e ventriculares do canal Kv auxiliares ratinhos knockout de subunidade. Cardiomiócitos isolados podem então ser imediatamente utilizados para celulares estudos eletrofisiológicos, bioquímicos ou imunofluorescência (IF) ensaios.

Isolamento e gravações de canais Kv em Murino cardiomiócitos atriais e ventriculares

Descrevemos o isolamento de miócitos atriais humanos, que podem ser utilizados para a intracelular de...

Isolamento de miócitos atriais humanos para Medições Simultâneas de Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; Transitórios e correntes de membrana

Descrito aqui é um procedimento para a obtenção de longos trechos de gravação atual de um canal iônico com a técnica de patch-clamp anexado à célula. Este método permite observar, em tempo real, o padrão de open-close conformações dos canais que estão na base do sinal biológico. Estes dados informar sobre as propriedades dos canais nas membranas biológicas não perturbadas.

Um canal de gravação de patch-clamp anexado-Cell

Este manuscrito descreve como preparar gânglios da raiz dorsal intactos para gravações de patch clamp. Esta preparação mantém o microambiente para neurônios e células gliais satélites, evitando assim as alterações fenotípicas e funcionais observadas usando neurônios DRG dissociados.

Remendo Recordings Grampo na Intact gânglios das raízes dorsais de ratos adultos

Este protocolo demonstra como executar de células inteiras de gravação patch-clamp em neurônios da retina a partir de uma preparação flat-mount.

Patch-clamp gravação de células Starburst Amácrinas em um monte de Luxo Preparação de Deafferentated mouse Retina

O objetivo deste protocolo é descrever uma câmara de fluxo de placa paralela modificada para uso na investigação da ativação em tempo real de canais de íons mecanosensíveis por tensão de cisalhamento.

Gravações electrofisiológicas de correntes do íon da único-pilha o esforço de tesoura bem definido

O presente protocolo descreve um método eficiente para a aquisição dinâmica e em tempo real de correntes de canal de potássio dependentes de voltagem (Kv) em cardiomiócitos H9c2 usando a técnica de patch-clamp de células inteiras.

Registro de Corrente de Potássio Dependente de Voltagem em Cardiomiócitos H9c2 através da Técnica de Patch-Clamp de Células Inteiras

Aprenda a isolar células musculares lisas da artéria basilar de ratos e registrar correntes de potássio retificadoras internas usando a técnica de patch clamp. Este método permite estudar propriedades eletrofisiológicas em pesquisa cardiovascular.

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Registro de correntes retificadoras internas de K⁺ em células musculares lisas da artéria basilar recém-isoladas pela técnica de patch clamp

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