18 de abril de 2025
Aqui, apresentamos um protocolo para estabelecer um modelo de camundongo de cardiomiopatia diabética e um dispositivo de fixação de eletroacupuntura de camundongo para o uso de eletroacupuntura em camundongos, que pode fixar os camundongos de forma mais suave durante o tratamento.
O escopo de nossa pesquisa é a eletroacupuntura para o tratamento da cardiomiopatia diabética. Apresentamos um dispositivo de fixação por eletroacupuntura nivelada para camundongos. Nosso dispositivo de fixação por eletroacupuntura em camundongos é mais fácil de fixar em camundongos, mais seguro e não cruza secretamente com camundongos durante o tratamento com eletroacupuntura em comparação com outras tecnologias. Nosso laboratório continuará a se concentrar na eletroacupuntura para o tratamento de doenças metabólicas, como obesidade, diabetes, cardiomiopatia diabética, etc.
[Narrador] Para começar, verifique a integridade do tubo de plástico oco em um dispositivo de fixação por eletropuntura montado. Instale as abas de fechamento. Mova as abas de fechamento ao longo do corpo do tubo enquanto os parafusos deslizam nas ranhuras, garantindo que o comprimento de fixação possa ser ajustado para se adequar ao tamanho do mouse. Agora ligue o instrumento de terapia de eletroacupuntura e certifique-se de que esteja operacional. Pressione cada botão uma vez para verificar sua funcionalidade. Coloque o instrumento de terapia de eletroacupuntura próximo aos tubos de plástico ocos para realizar tratamentos de eletroacupuntura em camundongos. Em seguida, segure um rato pela cauda com a mão direita e remova-o da gaiola. Coloque o mouse na superfície da gaiola e puxe suavemente sua cauda para fora. Imobilize o mouse com a mão esquerda e vire-o para expor o abdômen. Injete o camundongo por via intraperitoneal usando a mão direita com uma seringa de um mililitro pré-carregada com a quantidade apropriada de solução de estreptozotocina a 1%. Para realizar a acupuntura, primeiro selecione pontos de acupuntura de acordo com a Teoria do Ponto de Acupuntura Biao Ben, incluindo PC6 e ST36 bilaterais. Agora segure o mouse, aperte sua cauda e coloque-o na superfície da gaiola. Posicione a boca do tubo de plástico oco de acrílico em um ângulo de 30 graus em relação ao plano horizontal, garantindo que o pequeno orifício no centro esteja voltado para o chão e a boca do tubo esteja alinhada com a cabeça do mouse. Gire lentamente a cabeça do mouse no tubo usando movimento voluntário e um leve empurrão. Bata suavemente nas nádegas do mouse para incentivá-lo a entrar completamente no tubo. Ajuste as abas de fechamento e levante a cauda do mouse para fora da ranhura. Aperte a porca e use as abas de fechamento nas extremidades superior e inferior para restringir o movimento do mouse. Use uma pinça para puxar suavemente os quatro membros do mouse através dos pequenos orifícios em cada lado do tubo. Assim que os membros estiverem expostos, prenda-os suavemente na parte externa do corpo do tubo. Localize os pontos de acupuntura PC6 e ST36 tocando os membros do mouse com o dedo médio da mão direita. Em seguida, pique suavemente a pele do rato com a ponta da agulha estéril. Insira rapidamente a agulha obliquamente a uma profundidade de aproximadamente três milímetros. Em seguida, remova a mão direita. Agora ligue a máquina de terapia de eletroacupuntura e ajuste-a para onda intermitente de um hertz. Prenda o clipe energizado da máquina de terapia de eletroacupuntura ao cabo da agulha, garantindo um clipe por agulha. Em seguida, ajuste a corrente, com o clipe conectado a um miliampere. Após 15 minutos, observe o estado dos camundongos durante o pré-tratamento com eletroacupuntura. O tecido miocárdico no grupo controle exibiu uma estrutura intacta com cardiomiócitos regularmente dispostos, e nenhuma lesão aparente foi observada. No grupo modelo, as células miocárdicas estavam dispostas de forma irregular, com algumas células apresentando danos e desintegração, juntamente com infiltração significativa de células inflamatórias no espaço intersticial. No grupo pré-tratamento, a estrutura do tecido miocárdico era clara, com um pequeno número de células danificadas e desintegradas, mas sem outras lesões significativas. Os índices de função cardíaca da ecocardiografia mostraram que o diâmetro diastólico final do ventrículo esquerdo e o diâmetro sistólico final do ventrículo esquerdo estavam significativamente aumentados no grupo modelo, enquanto a fração de ejeção do ventrículo esquerdo e a fração de encurtamento do ventrículo esquerdo estavam significativamente reduzidas. No grupo pré-tratamento, o diâmetro diastólico final do ventrículo esquerdo e o diâmetro sistólico final do ventrículo esquerdo foram significativamente reduzidos, enquanto a fração de ejeção do ventrículo esquerdo e o encurtamento fracionário do ventrículo esquerdo foram significativamente aumentados em comparação com o grupo modelo. Os níveis de glicose no sangue foram significativamente elevados no grupo modelo em comparação com o grupo controle no dia 36. Após o tratamento com eletroacupuntura, os níveis de glicose no sangue no grupo pré-tratamento foram significativamente reduzidos no dia 49 em comparação com o grupo modelo.
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Este estudo apresenta um protocolo para estabelecer um modelo de camundongo de cardiomiopatia diabética e introduz um novo dispositivo de fixação para eletroacupuntura projetado para camundongos. O dispositivo aumenta a segurança e facilidade de uso durante os tratamentos de eletroacupuntura.
Reliable fixation and quantitative monitoring are critical for preclinical evaluation of electroacupuncture interventions in metabolic disease models. The described mouse fixation device enables standardized, reproducible electroacupuncture pretreatment in diabetic cardiomyopathy models, supporting robust assessment of cardiac and metabolic endpoints. This capability strengthens predictive confidence in early-stage therapeutic hypothesis testing and informs translational research on non-pharmacological interventions.
This fixation device and workflow integrate into the early discovery and preclinical continuum for metabolic and cardiovascular disease research.