Name: Colheita de órgãos-alvo vestibulares sob condições fisiológicas durante a labirintectomia (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-29T14:50:00.000+00:00
Duration: 3 min 8 s
Description: Aprenda a colher órgãos vestibulares humanos durante labirintectomia em condições fisiológicas. Esta técnica subaquática permite visualização endoscópica e análise direta de tecido do ouvido interno para estudo de distúrbios como a doença de Ménière.

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<ol><li>Monsanto, R. D. C., Pauna, H. F., Paparella, M. M., Cureoglu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Otopathology+in+the+United+States%3A+History%2C+Current+Situation%2C+and+Future+Perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Otol+Neurotol%22%5BJournal%5D)">Otopathology in the United States: History, Current Situation, and Future Perspectives.</a> Otol Neurotol. 39 (9), 1210-1214 (2018).</li>
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<li>Swartz, J. D., Loevner, L. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSwartz%2C+JD+%22Imaging+of+the+Temporal+Bone%22">Imaging of the Temporal Bone</a>. , 4th edition, Thieme Medical Pubs. Stuttgart. (2009).</li>
<li>Nagururu, N. V., Akbar, A., Ward, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+magnetic+resonance+imaging+to+improve+diagnosis+of+peripheral+vestibular+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Sci%22%5BJournal%5D)">Using magnetic resonance imaging to improve diagnosis of peripheral vestibular disorders.</a> J Neurol Sci. 439, 120300(2022).</li>
<li>Hızlı, Ö, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+vestibular+labyrinthine+otopathology+in+temporal+bones+with+vestibular+schwannoma%5BTitle%5D)+AND+%22Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Quantitative vestibular labyrinthine otopathology in temporal bones with vestibular schwannoma.</a> Otolaryngol Head Neck Surg. 154 (1), 150-156 (2016).</li>
<li>Sans, A., Bartolami, S., Fraysse, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathology+of+the+peripheral+vestibular+system+in+small+vestibular+schwannomas%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Otol%22%5BJournal%5D)">Histopathology of the peripheral vestibular system in small vestibular schwannomas.</a> Am J Otol. 17 (2), 326-324 (1996).</li>
<li>Johnson Chacko, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+and+cellular+patterning+during+fetal+human+inner+ear+development+studied+by+a+correlative+imaging+approach%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Growth and cellular patterning during fetal human inner ear development studied by a correlative imaging approach.</a> BMC Dev Biol. 19 (1), 11(2019).</li>
<li>Taylor, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regenerating+hair+cells+in+vestibular+sensory+epithelia+from+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Regenerating hair cells in vestibular sensory epithelia from humans.</a> Elife. 7, e34817(2018).</li>
<li>Warchol, M. E., Lambert, P. R., Goldstein, B. J., Forge, A., Corwin, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regenerative+proliferation+in+inner+ear+sensory+epithelia+from+adult+guinea+pigs+and+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Regenerative proliferation in inner ear sensory epithelia from adult guinea pigs and humans.</a> Science. 259 (5101), 1619-1622 (1993).</li>
<li>Aaron, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selection+criteria+optimal+for+recovery+of+inner+ear+tissues+from+deceased+organ+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Otol+Neurotol%22%5BJournal%5D)">Selection criteria optimal for recovery of inner ear tissues from deceased organ donors.</a> Otol Neurotol. 43 (4), e507-e514 (2022).</li>
<li>Vaisbuch, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+Approach+for+rapid+and+minimally+traumatic+recovery+of+human+inner+ear+tissues+from+deceased+organ+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Otol+Neurotol%22%5BJournal%5D)">Surgical Approach for rapid and minimally traumatic recovery of human inner ear tissues from deceased organ donors.</a> Otol Neurotol. 43 (4), e519-e525 (2022).</li>
<li>Wang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+transcriptomic+atlas+reveals+increased+regeneration+in+diseased+human+inner+ear+balance+organs%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Single-cell transcriptomic atlas reveals increased regeneration in diseased human inner ear balance organs.</a> Nat Commun. 15 (1), 4833(2024).</li>
<li>Creighton, F. X., Zhang, L., Ward, B., Carey, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+outcomes+for+an+underwater+endoscopic+technique+for+transmastoid+repair+of+superior+semicircular+canal+dehiscence%5BTitle%5D)+AND+%22Otol+Neurotol%22%5BJournal%5D)">Hearing outcomes for an underwater endoscopic technique for transmastoid repair of superior semicircular canal dehiscence.</a> Otol Neurotol. 42 (10), e1691-e1697 (2021).</li>
<li>Schoo, W. W., Schoo, D. P., Chen, J. X., Carey, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Underwater+plugging+of+superior+canal+dehiscence+via+the+middle+cranial+fossa+is+possible%5BTitle%5D)+AND+%22Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Underwater plugging of superior canal dehiscence via the middle cranial fossa is possible.</a> Otolaryngol Head Neck Surg. 169 (6), 1702-1703 (2023).</li>
<li>Basura, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+practice+guideline%3A+M%C3%A9ni%C3%A8re%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Clinical practice guideline: Ménière's disease.</a> Otolaryngol Head Neck Surg. 162 (2_suppl), S1-S55 (2020).</li>
<li>Chandrasekhar, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+practice+guideline%3A+Sudden+hearing+loss+%28Update%29%5BTitle%5D)+AND+%22Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Clinical practice guideline: Sudden hearing loss (Update).</a> Otolaryngol Head Neck Surg. 161 (1_suppl), S1-S45 (2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>10x Estoque de Solução Salina Tamponada com Fosfato</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5493</td><td></td></tr><tr><td>32% Solução de Estoque de Paraformaldeído</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>50-980-495</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 Anticorpo Secundário Anti-Coelho</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>111545144</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 568 Anticorpo Secundário Anti-Camundongo</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>115575146</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 Anti-Goat Anti-Goat Secondary</td> Solution de Sal <td>Balanceado 705607003</td><td></td><td>de Imunopesquisa</td></tr><tr><td></td><td>Jackson ThermoFisher Scientific</td><td>14040117</td><td></td></tr><tr><td>Albumina de Soro Bovino</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>10711454001</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio Confocal</td><td>Nikon A1&nbsp;</td><td>Vidro de cobertura A1</td><td></td></tr><tr><td>(18 mm x 18 mm, espessura #1.5 )</td><td>Corning&nbsp;</td><td>2850-18</td><td></td></tr><tr><td>Endo-Scrub 2 Bainha de limpeza de lentes</td><td>Medtronic</td><td>IPCES2SYSKIT</td><td></td></tr><tr><td>Solução ácida de etilenodiaminotetracético (EDTA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E8008</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo anti-oncomodulina de cabra</td><td>R & D Systems</td><td>AF6345</td><td></td></tr><tr><td>Hopkins Telescópio de 0 Graus</td><td>Karl Storz</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mouse Anti-calretinina Anticorpo</td><td>BD Biosciences</td><td>610908</td><td></td></tr><tr><td>ProLong Gold reagente anti-desbotamento</td><td>Invitrogen</td><td>P10144</td><td></td></tr><tr><td>Coelho Anti-tenascina C Anticorpo</td><td>Millipore</td><td>AB19013</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>9036-19-5</td><td></td></tr></tbody></table>

colheita de órgãos-alvo vestibulares sob condições fisiológicas durante a labirintectomia

Harvest of Vestibular End-Organs under Physiologic Conditions during Labyrinthectomy

Usando essa técnica, o utrículo humano e as ampolas do canal lateral e superior foram colhidos intactos com trauma mínimo (Figura 2). Como pode ser visto na Figura 2, as ampolas podem ser colhidas com uma porção substancial do ducto membranoso. A marcação imunofluorescente com antitenascina-C (proteína da matriz extracelular) e anti-oncomodulina (pequena proteína ligadora de cálcio da família das proteínas parvalbumina) mostrou células ciliadas vestibulares tipo 1 intactas (Figura 3). A densidade de células ciliadas foi de 82 por 10.000 μm2. Esses resultados demonstram a utilidade dessa técnica para a coleta de tecido da orelha interna humana com trauma mínimo no neuroepitélio.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67523/67523fig01.jpg"> 
Figura 1: Ilustração da configuração cirúrgica. Ilustração do conjunto cirúrgico: A cavidade mastóidea esquerda é mostrada com os canais semicirculares lateral, superior e posterior. A cavidade mastóidea é submersa em solução salina balanceada e um endoscópio de zero grau é usado para visualizar a cavidade mastóidea, enquanto uma broca de diamante é usada para abrir o labirinto. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67523/67523fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67523/67523fig02.jpg"> 
Figura 2: Labirinto membranoso. O utrículo humano colhido e as ampolas do canal lateral e (B) superior foram colhidas sob um estereomicroscópio de luz com aumento de 5x. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67523/67523fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67523/67523fig03.jpg"> 
Figura 3: Utrículo. Projeções de intensidade máxima de marcação imunofluorescente do utrículo humano com ampliação de 40x tiradas com um microscópio confocal. As fendas sinápticas do cálice são marcadas com anticorpos anti-tenascina-C (verde). As células vestibulares do tipo 1 são coradas com anti-oncomodulina (vermelho). Barra de escala: 50 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67523/67523fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão ampliada desta figura.</a>

Colheita de órgãos-alvo vestibulares sob condições fisiológicas durante a labirintectomia

The living human inner ear is challenging to study because it is encased within dense otic capsule bone that limits access to biological tissue. ...

harvest-vestibular-end-organs-under-physiologic-conditions-during

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Este vídeo mostra como cirurgicamente obstruem o ducto endolinfático cobaia para produzir hydrops endolinfático.

Indução cirúrgica da hidropisia endolinfática por obliteração do ducto endolinfático

Análise da função das células ciliadas vestibular é complicada por sua localização profunda na parte mais difícil do crânio, no osso temporal petroso. A maioria dos estudos com células capilares funcionais têm utilizado intensamente as células ciliadas isoladas. Aqui nós descrevemos uma preparação semi-intactos do epitélio vestibular rato para estudos eletrofisiológicos e de microscopia de dois fótons.

Uma preparação semi-intactas isolada do Rato Vestibular epitélio sensorial de Eletrofisiologia e de alta resolução Microscopia de dois fótons

A disfunção mitocondrial é uma característica da senescência celular. Este trabalho usa não-invasivo do infravermelho próximo (NIR) de tratamento para melhorar a função mitocondrial no rato epitélio sensorial vestibular de envelhecimento.

Infravermelho Próximo (NIR) Luz aumenta a expressão de um marcador da função mitocondrial no mouse Vestibular Sensorial Epithelium

O objetivo deste protocolo é descrever a coleta e processamento de amostras cirúrgicas humanas para múltiplas aplicações a jusante no schwannoma vestibular e na pesquisa de células de Schwann.

Um quadro metodológico unificado para pesquisa de Schwannoma vestibular

Culturas organotypic tridimensional do utrículo murino e cóclea em opticamente clara colágeno eu geles preservar tecido inata morfologia, permitam a estimulação mecânica através do ajuste da rigidez da matriz e permitam a entrega de genes mediada por vírus.

Culturas Organotypic tridimensional de órgãos sensoriais auditivas e vestibulares

Este protocolo descreve o vestibulotóxicos cirúrgico de um rato, que é um método útil para o estudo do sistema vestibular.

Vestibulotóxicos cirúrgico do rato para estudar o sistema Vestibular

Este artigo demonstra uma abordagem extradural para obliterar o saco endoglifático da cobaia e ferir o ducto endoglicêtico com uma picareta fina, a fim de induzir hidrops endolímfaticos experimentais.

Uma abordagem cirúrgica revisada para induzir hidrops endoglicêsticos na Cobaia

O bloqueio do ducto endolinfático é um método cirúrgico relativamente novo para pacientes que sofrem da doença de Ménière. Após uma mastoidectomia regular, o ducto endolinfático é identificado e ligado usando um hemoclipe de titânio regular. A efetividade desse procedimento está sendo avaliada em um estudo randomizado.

Bloqueio do Ducto Endolinfático como Opção de Tratamento Cirúrgico da Doença de Ménière

Discutimos as características clínicas e radiológicas dos tumores do saco endolinfático e relatamos a metodologia e os resultados de uma remoção cirúrgica em um caso atendido em nosso centro de referência otológica.

Tratamento cirúrgico de um tumor do saco endolinfático

Carcinogênese é um processo que envolve as interações entre células cancerosas e microambiente do câncer. Para dissecar os eventos moleculares, é necessário para isolar populações de células diferentes em diferentes estágios durante o desenvolvimento do cancro. Usando um modelo de rato para o carcinoma basocelular, nós descrevemos um protocolo para análises celulares durante a carcinogênese.

Análises população de células da pele Durante Carcinogênese

Aprenda a colher órgãos vestibulares humanos durante labirintectomia em condições fisiológicas. Esta técnica subaquática permite visualização endoscópica e análise direta de tecido do ouvido interno para estudo de distúrbios como a doença de Ménière.

Colheita de órgãos-alvo vestibulares sob condições fisiológicas durante a labirintectomia

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