Name: Avaliação da sinalização de morte celular por imunofluorescência em um modelo de rato de AVC isquêmico (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-03T15:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 32 s
Description: Aprenda a avaliar a sinalização de morte celular por imunofluorescência em modelo de AVC isquêmico em ratos. Este método permite analisar alterações moleculares e arquitetura celular após oclusão da artéria cerebral média.

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<meta charset="utf8"></head><body>Coloração por imunofluorescência para estudar a morte celular em modelos de AVC MCAO de rato

<table><tbody><tr><td>Akoya Vectra Polaris</td><td>Akoya Biosciences</td><td>N/A</td><td>Sistema de imagem multiespectral Vectra Polaris&nbsp;</td></tr><tr><td>Etanol anidro</td><td>Chengdu Jinshan Chemical Reagent Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina</td><td>West China Hospital</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Carprofeno</td> West <td>China Hospital</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Cathepsin-B anticorpo</td><td>Abcam</td><td>Ab214428</td><td></td></tr><tr><td>Cryostat</td><td>LEICA&nbsp;</td><td>LEICA CM 1950</td><td></td></tr><tr><td>Câmera digital</td><td>OLYMPUS</td><td>TG-7</td><td></td></tr><tr><td>Goat Anti-Rat IgG (H+L) (FITC conjugado)</td><td>Elabscience</td><td>&nbsp; E-AB-1021</td><td></td></tr><tr><td>Soro de cabra</td><td>Solarbio</td><td>SL038</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism 10 software</td><td>N/A</td><td>https://www.graphpad-prism.cn/?c=i&a=prismdownload_cn</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>N/A</td><td>https://imagej.net/ij/</td><td></td></tr> <tr><td>Caneta de imuno-histoquímica</td><td>Biosharp</td><td>http://www.biosharp.cn/index/product/details/language/en/product_id/2828.html</td><td></td></tr><tr><td>Software InForm</td><td>Akoya Biosciences</td><td>Versão 2.6.0</td><td>software de sistema para o sistema de imagem multiespectral&nbsp;</td></tr><tr><td>Solução desinfetante</td><td>Iodophor Huatian Technology Industry Co.</td><td>N / A</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>RWD Life Science Co.</td><td>https://www.rwdstco.com/inhalation-anesthesia-solutions/</td><td></td></tr> <tr><td>Meio de montagem contendo DAPI</td><td>Solarbio</td><td>S2110</td><td></td></tr><tr><td>Monofilamento de nylon</td><td>RWD Life Science Co.</td><td>https://www.rwdstco.com/</td><td></td></tr> <tr><td>Composto de temperatura de corte ideal (OCT)</td><td>Epredia</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldeído</td><td>Biosharp</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Solução tampão de fosfato (PBS)</td><td>Solarbio</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Prism</td><td>GraphPad&nbsp;</td><td>Versão 10</td><td></td></tr><tr><td>Proteinase K</td><td>Tiangen</td><td>RT403-02</td><td></td></tr><tr><td>Salina</td><td>Kelun Co.</td><td>N / A</td><td></td></tr><tr><td>Sprague-Dawley ratos</td><td>Huafukang Co.</td><td>N / A</td><td></td></tr><tr><td>Sacarose</td><td>BioFroxx</td><td>1245GR500</td><td></td></tr><tr><td>Instrumentos cirúrgicos</td><td>RWD Life Science Co.</td><td>Agente</td> biológico transparente tipo TO <td></td></tr><tr><td> &nbsp;</td><td>Pequim Solarbio Ciência & Fornecedor:Tecnology Co., Ltd.</td><td>http://www.solarbio.net/</td><td></td></tr> Solução de <tr><td>cloreto de trifeniltetrazólio (TTC)</td><td>Solarbio</td><td>G3005</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>BioFroxx</td><td>1139ML100</td><td></td></tr><tr><td>TUNEL kit</td><td>Elabscience</td><td>&nbsp; E-CK-A321</td><td></td></tr></tbody></table>

avaliação da sinalização de morte celular por imunofluorescência em um modelo de rato de avc isquêmico

Evaluating Cell Death Signaling by Immunofluorescence in a Rat Model of Ischemic Stroke

Os ratos são submetidos a isquemia de 120 min durante a OCM, seguida de reperfusão de 22 horas. A taxa de mortalidade foi mínima durante a cirurgia de MCAO e ficou em torno de 25% no período de reperfusão. Danos cerebrais significativos foram observados no grupo MCAO, enquanto nenhum infarto foi observado no cérebro do grupo Sham (24,87 ± 1,21% vs. 0% da soma da área do infarto em toda a área do cérebro; MCAO [n = 3] vs. Sham [n = 3], P &lt; 0,001; Figura 1A,B). No ...

Avaliação da sinalização de morte celular por imunofluorescência em um modelo de rato de AVC isquêmico

Stroke is a leading cause of death and disability worldwide. Most cases of stroke are ischemic and result from the occlusion of the middle cerebral artery ...

evaluating-cell-death-signaling-immunofluorescence-rat-model-ischemic

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

Indução cirúrgica de uma lesão cerebral isquêmico no rato é um modelo amplamente utilizado para a pesquisa acidente vascular cerebral. Aqui nós demonstram a indução de isquemia cerebral focal por oclusão da artéria cerebral média. Visualização do infarto resultantes de coloração histológica e ressonância magnética também é mostrada.

Modelo de isquemia focal cerebral por oclusão Suture Endovascular da artéria cerebral média no Rat

Vários modelos animais de isquemia cerebral foi desenvolvido para simular a condição humana de acidente vascular cerebral. Este protocolo descreve a endotelina-1 (ET-1) induzida por oclusão da artéria cerebral média do modelo (MCAO) para acidente vascular cerebral isquêmico em ratos. Além disso, considerações importantes, vantagens e inconvenientes deste modelo são discutidos.

Endotelina-1 Induzida Médio modelo de oclusão da artéria cerebral para AVC isquêmico com Laser Orientação Fluxometria Doppler em ratos

Oclusão carotídea bilateral juntamente com hipotensão sistêmica produz isquemia cerebral em ratos, resultando em danos ao hipocampo com gravidade reproduzível. Assuntos animais são prejudicados com padrões previsíveis de danos cerebrais, eles se recuperam expediente, e as taxas de mortalidade são comparativamente baixas.

2-oclusão do vaso / hipotensão: um modelo de rato de isquemia cerebral

Monitorização da perfusão cerebral foi demonstrada para melhorar a precisão em modelos de isquemia AVC. Dificuldades técnicas, muitas vezes limitam o uso desta ferramenta essencial para a pesquisa vascular cerebral. Neste vídeo, um sistema optimizado é mostrado para obter um controlo único ou multi-local hemodinâmicas durante a oclusão da artéria cerebral média intraluminal em ratos.

Sistema otimizado para Monitorização de perfusão cerebral no modelo do rato do curso de oclusão da artéria cerebral média intraluminal

Nós apresentamos uma nova técnica de fluorescência para seletiva marcação in situ de células fagocíticas ativos, o que claro off corpos celulares em acidente vascular cerebral. A abordagem é importante para a avaliação da reacção à isquemia cerebral uma vez que só uma pequena proporção de fagócitos presentes no cérebro isquémico participar na depuração de morte celular.

Avaliando Clearance fagocítica de morte celular em Curso Experimental de Ligatable fluorescentes Sondas

Os danos cerebrais resultantes da isquemia cerebral podem ser visualizados de forma não invasiva e estudados em ratos usando tomografia pré-clínica por emissão de pósitrons acoplada à sonda radioativa injetável, 18F-fluorodesoxiglicose. Além disso, o uso de ferramentas de software modernas que incluem modelos cerebrais de volume de interesse (VOI) aumenta drasticamente as informações quantitativas obtidas nesses estudos.

Imagem não invasivo e Análise de Isquemia Cerebral em Ratos de Vida Usando Positron Emission Tomography com<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG

Um método para fornecer células-tronco neurais, adaptáveis para soluções ou suspensões injetáveis, através da artéria carótida comum (mouse) ou artéria carótida externa (rato) após o derrame isquêmico ser relatado. As células injetadas são distribuídas amplamente por todo o parenchyma cerebral e podem ser detectadas até 30 d após o parto.

Entrega intra-arterial de células-tronco neurais ao cérebro de ratos e ratos: aplicação à isquemia cerebral

Aqui, apresentamos um protocolo para avaliar a função das células imunes após AVC isquêmico usando análise de citometria de fluxo em um modelo de mini-AVC. Este método permite o exame detalhado das interações neuroimunes e pode ser adaptado para estudar outras doenças neurodegenerativas, aprimorando nossa compreensão das respostas imunes na patologia do AVC.

Isolamento e Avaliação por Citometria de Fluxo de Interações Neuroimunes em Modelo Murino Mini-AVC

Responder por sinais de alimentos ou drogas emparelhados aumenta ao longo de um período de abstinência e esta pode estar relacionada com uma susceptibilidade aumentada a comportamentos recaída. Aqui detalhamos um procedimento para avaliar este "incubação de desejo" em ratos que têm auto-administrado de sacarose.

Um método geral para a avaliação de Incubação de Craving Sacarose em Ratos

Culturas neuronais embrionárias primárias dissociadas do hipocampo são úteis para investigar os mecanismos de sinalização envolvidos na morte dos neurônios. A sexagem dos embriões antes do isolamento e dissociação do hipocampo permite a preparação de culturas masculinas e femininas separadas, o que permite ao pesquisador identificar e investigar a sinalização celular específica do sexo.

Culturas neuronais estratificadas por sexo para estudar vias de morte celular isquêmica

Aprenda a avaliar a sinalização de morte celular por imunofluorescência em modelo de AVC isquêmico em ratos. Este método permite analisar alterações moleculares e arquitetura celular após oclusão da artéria cerebral média.

Avaliação da sinalização de morte celular por imunofluorescência em um modelo de rato de AVC isquêmico

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