Name: Quantificação do comportamento de aliciamento de Drosophila melanogaster para avaliação de fenótipos de aliciamento excessivo (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-21T13:10:00.000+00:00
Duration: 5 min 8 s
Description: Aprenda a quantificar comportamentos de aliciamento em Drosophila melanogaster usando mutantes RNAi de Atg8a. Este método manual permite analiar padrões comportamentais relevantes para estudos de distúrbios neurodesenvolvimentais.

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<ol><li>Mueller, J. M., Zhang, N., Carlson, J. M., Simpson, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variation+and+variability+in+Drosophila+grooming+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Variation and variability in Drosophila grooming behavior.</a> Front Behav Neurosci. 15, 769372(2022).</li>
<li>Szebenyi, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cleaning+behaviour+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Behav%22%5BJournal%5D)">Cleaning behaviour in Drosophila melanogaster.</a> Anim Behav. 17 (4), 641-651 (1969).</li>
<li>Seeds, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+suppression+hierarchy+among+competing+motor+programs+drives+sequential+grooming+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">A suppression hierarchy among competing motor programs drives sequential grooming in Drosophila.</a> Elife. 3, e02951(2014).</li>
<li>Ringo, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+do+flies+keep+clean%3F+Head+grooming+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ethol%22%5BJournal%5D)">How do flies keep clean? Head grooming in Drosophila.</a> J Ethol. 38, 167-172 (2020).</li>
<li>Feusner, J. D., Hembacher, E., Phillips, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+who+couldn%27t+stop+washing%3A+pathologic+grooming+in+animals+and+humans%5BTitle%5D)+AND+%22CNS+Spectr%22%5BJournal%5D)">The mouse who couldn't stop washing: pathologic grooming in animals and humans.</a> CNS Spectr. 14 (9), 503-513 (2009).</li>
<li>Berridge, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sequential+super-stereotypy+of+an+instinctive+fixed+action+pattern+in+hyper-dopaminergic+mutant+mice%3A+a+model+of+obsessive+compulsive+disorder+and+Tourette%27s%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Biol%22%5BJournal%5D)">Sequential super-stereotypy of an instinctive fixed action pattern in hyper-dopaminergic mutant mice: a model of obsessive compulsive disorder and Tourette's.</a> BMC Biol. 3, 4(2005).</li>
<li>Russo, A., Diantonio, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wnd%2FDLK+is+a+critical+target+of+FMRP+responsible+for+neurodevelopmental+and+behavior+defects+in+the+Drosophila+model+of+Fragile+X+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Wnd/DLK is a critical target of FMRP responsible for neurodevelopmental and behavior defects in the Drosophila model of Fragile X syndrome.</a> Cell Rep. 28, 2581-2593.e5 (2019).</li>
<li>Andrew, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+motor-behavior+abnormalities+in+two+Drosophila+models+of+neurodevelopmental+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurogenet%22%5BJournal%5D)">Spontaneous motor-behavior abnormalities in two Drosophila models of neurodevelopmental disorders.</a> J Neurogenet. 35 (1), 1-22 (2021).</li>
<li>Tian, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GABA-+and+acetylcholine-related+gene+expression+in+blood+correlate+with+tic+severity+and+microarray+evidence+for+alternative+splicing+in+Tourette+syndrome%3A+a+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">GABA- and acetylcholine-related gene expression in blood correlate with tic severity and microarray evidence for alternative splicing in Tourette syndrome: a pilot study.</a> Brain Res. 1381, 228-236 (2011).</li>
<li>Barradale, F., Sinha, K., Lebestky, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+Drosophila+grooming+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Quantification of Drosophila grooming behavior.</a> J Vis Exp. 125, e55231(2017).</li>
<li>Morris, B. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PiSpy%3A+an+affordable%2C+accessible%2C+and+flexible+imaging+platform+for+the+automated+observation+of+organismal+biology+and+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">PiSpy: an affordable, accessible, and flexible imaging platform for the automated observation of organismal biology and behavior.</a> PLoS One. 17 (10), e0276652(2022).</li>
<li>ELAN (Version 6.8) [Computer software]. Nijmegen: Max Planck Institute for Psycholinguistics, The Language Archive. , Nijmegen: Max Planck Institute for Psycholinguistics, The Language Archive. At 
 <a target="_blank" href="https://archive.mpi.nl/tla/elan&#34">https://archive.mpi.nl/tla/elan&#34</a> (2024).</li>
<li>Müller, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tourette%27s+syndrome%3A+clinical+features%2C+pathophysiology%2C+and+therapeutic+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Dialogues+Clin+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Tourette's syndrome: clinical features, pathophysiology, and therapeutic approaches.</a> Dialogues Clin Neurosci. 9 (2), 161-171 (2007).</li>
<li>Southall, T. D., Elliott, D. A., Brand, A. H. The GAL4 system: a versatile toolkit for gene expression in Drosophila. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSouthall%2C+TD+%22Cold+Spring+Harb+Protoc%22">Cold Spring Harb Protoc</a>. 2008, (2008).</li>
<li>Hatfield, T., Johnson, S. Knockdown of the GABARAP ortholog Atg8a elicits deficits in learning and promotes obsessive behaviors in Drosophila melanogaster. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHatfield%2C+T+%22MicroPubl+Biol%22">MicroPubl Biol</a>. 2024, (2024).</li>
<li>Bartholomew, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+climbing+and+flight+behaviour+in+Drosophila+melanogaster+following+carbon+dioxide+anaesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Impaired climbing and flight behaviour in Drosophila melanogaster following carbon dioxide anaesthesia.</a> Sci Rep. 5, 15298(2015).</li>
<li>Sindhurakar, A., Butensky, S. D., Carmel, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+forelimb+tasks+for+rodents%3A+current+advantages+and+limitations%2C+and+future+promise%5BTitle%5D)+AND+%22Neurorehabil+Neural+Repair%22%5BJournal%5D)">Automated forelimb tasks for rodents: current advantages and limitations, and future promise.</a> Neurorehabil Neural Repair. 33 (7), 503-512 (2019).</li>
<li>Qiao, B., Li, C., Allen, V. W., Shirasu-Hiza, M., Syed, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+analysis+of+long-term+grooming+behavior+in+Drosophila+using+a+k-nearest+neighbors+classifier%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Automated analysis of long-term grooming behavior in Drosophila using a k-nearest neighbors classifier.</a> Elife. 7, e34497(2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Cartão Micro SD de 16 GB</td><td>Adafruit</td><td>1294</td><td>Para uso na introdução do sistema operacional</td></tr><tr><td>Display</td><td>Adafruit</td><td>3578</td><td>Qualquer monitor que possa ser conectado por HDMI ou cabo flexível é suficiente</td></tr><tr><td>Drosophila Atg8a-RNAi Linha UAS</td><td>Bloomington Stock Center</td><td>34340</td><td>Linha usada em dados representativos</td></tr><tr><td>Drosophila Ok6 Driver</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Linha usada em dados representativos</td></tr><tr><td>Lâminas de vidro</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-A3</td><td>Mantém as moscas em contenção</td></tr><tr><td>Dissipadores de calor</td><td>Adafruit</td><td></td><td>Previne o superaquecimento do computador</td></tr><tr><td>Lente</td><td>Adafruit</td><td>4563</td><td>Usado apenas com câmera HD</td></tr><tr><td>PiCamera</td><td>Adafruit</td><td>4561</td><td>A versão HD foi usada aqui, mas uma câmera padrão pode ser usada sob restrições orçamentárias</td></tr><tr><td>Raspberry pi 4</td><td>Computador Adafruit</td><td>4292</td><td>PiSpy é executado no</td></tr><tr><td>cabo Ribbion</td><td>Adafruit</td><td>1648</td><td>Para uso na conexão de componentes de câmera e display</td></tr><tr><td>SB Case</td><td>Adafruit</td><td>4301</td><td>Protege o computador</td></tr><tr><td>Placa de Spot</td><td>Fisher Scientific</td><td>S99406</td><td>As versões Pyrex já estavam disponíveis para nosso uso, mas placas de cultura de células ou placas de plástico também são suficientes</td></tr><tr><td>Tripé</td><td>Best Buy</td><td>6355959</td><td>Para suspensão e posicionamento da câmera, qualquer aparelho capaz disso é suficiente</td></tr><tr><td>Fonte de alimentação USB C</td><td>Adafruit</td><td>1995</td><td>Fornece energia para o computador</td></tr></tbody></table>

quantificação do comportamento de aliciamento de drosophila melanogaster para avaliação de fenótipos de aliciamento excessivo

Quantification of Drosophila melanogaster Grooming Behavior for Evaluation of Excessive Grooming Phenotypes

Este ensaio produz dados quantitativos que medem o tempo e a frequência dos comportamentos de higiene a partir de imagens anotadas. Uma imagem representativa da configuração e como os comportamentos são definidos é descrita na Figura 2. Dada a subjetividade introduzida pela análise de vídeo, todas as anotações de vídeos devem ser cegas para o pesquisador que realiza a análise.
Este método foi usado para avaliar o papel que o gene Atg8a da Drosophila <...

Quantificação do comportamento de aliciamento de Drosophila melanogaster para avaliação de fenótipos de aliciamento excessivo

Observable changes in stereotyped grooming are applied translationally in model organisms. These changes are representative of pathologies that elicit ...

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Neuroscience

Neurociência

Drosophila melanogaster é um sistema modelo de genética e comportamentalmente tratável que tem sido usada para compreender a base molecular e celular de muitos processos biológicos importantes para mais de um século 1. Drosophila tem sido bem explorado para obter insights sobre a base genética do comportamento da mosca.

Métodos de Ensaio para Drosophila Comportamento

Para identificar novas mutações que afetam a mecanosensação, projetamos um ensaio que mede a resposta comportamental à estimulação tátil de cerdas de moscas em clones mutantes gerados pelo método MARCM. A combinação de técnicas permite a identificação de mutações mecanossensíveis que, de outra forma, seriam letais.

Clones em um ensaio comportamental para Mechanosensation de MarcM baseada em<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Este protocolo descreve uma técnica de ensaio de higiene pessoal escalável em Drosophila que produz dados robustos e quantitativos para medir o comportamento de limpeza. O método baseia-se na comparação da diferença na acumulação de corantes nos corpos de animais não preparados versus groomed durante um período de tempo definido.

Quantificação do comportamento de higienização da Drosophila

Este trabalho apresenta um método para quantificar rápida e precisamente a pigmentação abdominal de Drosophila melanogaster usando a análise de imagem digital. Este método simplifica os procedimentos entre aquisição de fenótipo e análise de dados e inclui montagem de espécimes, aquisição de imagem, extração de valor de pixel e medição de características.

Quantificando pigmentação abdominal em<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Aqui, fornecemos protocolos para realizar três ensaios simples de degeneração de axôntoinduzidos induzidos por lesões (morte de axônto) em Drosophila melanogaster para avaliar a preservação morfológica e funcional de axôntos cortados e suas sinapses.

Avaliação morfológica e funcional de Axons e suas sinapses durante a morte de Axon em Drosophila melanogaster

Este trabalho descreve um simples paradigma comportamental que permite a análise da aprendizagem associativa aversiva em moscas de frutas adultas. O método baseia-se na supressão do comportamento geotaxis negativo inato devido à associação formada entre um contexto ambiental específico e um choque elétrico.

Drosófila Comportamento de evasão passiva como um novo paradigma para estudar aprendizagem aversiva associativa

O Transtorno do Espectro do Autismo (TEA) está associado ao comportamento social e comunicativo prejudicado e ao surgimento de comportamento repetitivo. Para estudar a inter-relação entre genes de TEA e déficits comportamentais no modelo de Drosophila , cinco paradigmas comportamentais são descritos neste artigo para testar o espaçamento social, agressão, namoro, aliciamento e comportamento de habituação.

Paradigmas para Avaliação Comportamental no Modelo de Drosophila de Transtorno do Espectro do Autismo

Modelos de roedores são ferramentas valiosas para estudar comportamentos centrais relacionados ao transtorno do espectro do autismo (TEA). Neste artigo, expomos dois testes comportamentais para modelar as principais características do TEA em camundongos: auto-limpeza, que avalia o comportamento repetitivo, e o teste de interação social de três câmaras, que documenta deficiências sociais.

Estratégias para avaliar comportamentos semelhantes aos autistas em camundongos

O sistema ocular de Drosophila é uma ferramenta útil para estudar vários processos biológicos, particularmente doenças neurodegenerativas humanas. No entanto, a quantificação manual de fenótipos de olhos ásperos pode ser tendenciosa e não confiável. Aqui descrevemos um método pelo qual ilastik e Flynotyper são usados para quantificar o fenótipo ocular de forma imparcial.

Quantificando os fenótipos oculares de Drosophila melanogaster : uma abordagem computacional integrando ilastik e Flynotyper

Aqui, apresentamos um fluxo de trabalho rápido e de baixo custo para imagens de alta resolução de olhos adultos de Drosophila para quantificar defeitos de padronização e crescimento. Descrevemos nosso protocolo para preparação de amostras por montagem em ponto, aquisição de imagem de alta resolução e análise de imagem.

Um fluxo de trabalho rápido e simples para quantificação de estruturas externas de Drosophila adulta

Aprenda a quantificar comportamentos de aliciamento em Drosophila melanogaster usando mutantes RNAi de Atg8a. Este método manual permite analiar padrões comportamentais relevantes para estudos de distúrbios neurodesenvolvimentais.

Quantificação do comportamento de aliciamento de Drosophila melanogaster para avaliação de fenótipos de aliciamento excessivo

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