Name: Determinando quatro componentes em um sistema de entrega de RNA de nanopartículas lipídicas por cromatografia líquida combinada com detector de espalhamento de luz evaporativa (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-30T12:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: Aprenda a analisar componentes de nanopartículas lipídicas por cromatografia líquida com detector de espalhamento de luz evaporativa. Este método oferece separação eficiente e alta sensibilidade para sistemas de entrega de RNA.

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<ol><li>Zong, Y., Lin, Y., Wei, T., Cheng, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+nanoparticle+%28LNP%29+enables+mRNA+delivery+for+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Mater%22%5BJournal%5D)">Lipid nanoparticle (LNP) enables mRNA delivery for cancer therapy.</a> Adv Mater. 35 (51), e2303261(2023).</li>
<li>Vlatko, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-immunotherapy+application+of+LNP-mRNA%3A+Maximizing+efficacy+and+safety%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicines%22%5BJournal%5D)">Non-immunotherapy application of LNP-mRNA: Maximizing efficacy and safety.</a> Biomedicines. 9 (5), 530(2021).</li>
<li>Eygeris, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemistry+of+lipid+nanoparticles+for+RNA+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Acc+Chem+Res%22%5BJournal%5D)">Chemistry of lipid nanoparticles for RNA delivery.</a> Acc Chem Res. 55 (1), 2-12 (2021).</li>
<li>Sun, D., Lu, Z. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+function+of+cationic+and+ionizable+lipids+for+nucleic+acid+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Structure and function of cationic and ionizable lipids for nucleic acid delivery.</a> Pharm Res. 40 (1), 27-46 (2023).</li>
<li>Rebecca, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+nanoparticle+formulations+for+enhanced+co-delivery+of+siRNA+and+mRNA%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Lett%22%5BJournal%5D)">Lipid nanoparticle formulations for enhanced co-delivery of siRNA and mRNA.</a> Nano Lett. 18 (6), 3814-3822 (2018).</li>
<li>Maugeri, M., Nawaz, M., Papadimitriou, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Linkage+between+endosomal+escape+of+LNP-mRNA+and+loading+into+EVs+for+transport+to+other+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Linkage between endosomal escape of LNP-mRNA and loading into EVs for transport to other cells.</a> Nat Commun. 10, 4333(2019).</li>
<li>Renee, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+PEGylation+on+LNP+based+mRNA+delivery+to+the+eye%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The effects of PEGylation on LNP based mRNA delivery to the eye.</a> PLoS One. 15 (10), e0241006(2020).</li>
<li>Benedicto, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+phospholipid+chemistry+for+improved+lipid+nanoparticle+%28LNP%29+delivery+of+messenger+RNA+%28mRNA%29%5BTitle%5D)+AND+%22Biomater+Sci%22%5BJournal%5D)">Optimization of phospholipid chemistry for improved lipid nanoparticle (LNP) delivery of messenger RNA (mRNA).</a> Biomater Sci. 10 (2), 549-559 (2022).</li>
<li>Kamanzi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+visualization+of+lipid+nanoparticle+fusion+as+a+function+of+formulation+and+process+parameters%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Quantitative visualization of lipid nanoparticle fusion as a function of formulation and process parameters.</a> ACS Nano. 18 (28), 18191-18201 (2024).</li>
<li>Melissa, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+lipid+nanoparticles+for+the+delivery+of+nebulized+therapeutic+mRNA+to+the+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Optimization of lipid nanoparticles for the delivery of nebulized therapeutic mRNA to the lungs.</a> Nat Biomed Eng. 5 (9), 1059-1068 (2021).</li>
<li>Packer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mechanism+for+the+loss+of+mRNA+activity+in+lipid+nanoparticle+delivery+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A novel mechanism for the loss of mRNA activity in lipid nanoparticle delivery systems.</a> Nat Commun. 12 (1), 6777(2021).</li>
<li>Snyder, L. R., Kirkland, J. J., Dolan, J. W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSnyder%2C+LR+%22Introduction+to+Modern+Liquid+Chromatography%22">Introduction to Modern Liquid Chromatography</a>. , John Wiley & Sons. Hoboken, NJ. (2010).</li>
<li>Zhang, L. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+mRNA-LNP+components+of+two+globally+marketed+COVID-19+vaccines+on+efficacy+and+stability%5BTitle%5D)+AND+%22NPJ+Vaccines%22%5BJournal%5D)">Effect of mRNA-LNP components of two globally marketed COVID-19 vaccines on efficacy and stability.</a> NPJ Vaccines. 8 (1), 156(2023).</li>
<li>Zhang, Y., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+comparison+of+different+ELSD+detectors+in+pharmaceutical+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Methods%22%5BJournal%5D)">Performance comparison of different ELSD detectors in pharmaceutical analysis.</a> Anal Methods. 7 (12), 4800-4807 (2015).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Ácido acético</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc.</td><td>CAEQ-4-000319-0050</td><td></td></tr><tr><td>Equilíbrio</td><td>Shimadzu (Xangai) Global Laboratory Consumables Co.,Ltd</td><td>AP135W</td><td></td></tr><tr><td>Coluna</td><td>Shimadzu (Xangai) Global Laboratory Consumables Co.,Ltd</td><td>ShimNex WP C4(380-01235-74)</td><td></td></tr><tr><td>ELSD</td><td>Shimadzu (China) CO.,LTD</td><td>ELSD-LT III(228-65900-46)</td><td></td></tr><tr><td>LabSolutions Software</td><td>Shimadzu (China) CO.,LTD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LC</td><td>Shimadzu (China) CO., LTD</td><td>LC40D XR</td><td></td></tr><tr><td>Metanol</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (Xangai) Inc.</td><td>CAEQ-4-003302-4000</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta-100 &micro; L</td><td>Shimadzu (Shanghai) Global Laboratory Consumables Co.,Ltd</td><td>00-NAR-100</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta-1000 &micro; L</td><td>Shimadzu (Shanghai) Global Laboratory Consumables Co., Ltd</td><td>00-NAR-1000</td><td></td></tr><tr><td>TEA</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc.</td><td>CAEQ-4-012190-0250</td><td></td></tr><tr><td>Sistema de Água Ultra-pura</td> Misturador <td>de</td> Vórtice ZIQ7000T0C <td></td><td>Millipore</td></tr><tr><td></td><td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc.</td><td>VM-B</td><td></td></tr></tbody></table>

determinando quatro componentes em um sistema de entrega de rna de nanopartículas lipídicas por cromatografia líquida combinada com detector de espalhamento de luz evaporativa

Determining Four Components in a Lipid Nanoparticle RNA Delivery System by Liquid Chromatography Combined with Evaporative Light Scattering Detector

A análise da solução padrão LNP usando este método alcançou um grau de separação maior que 1,5 para os quatro componentes, realizando a separação da linha de base. Além disso, não foram observados resíduos em soluções padrão de alta concentração, conforme ilustrado na Figura 1. Uma curva de calibração foi estabelecida dentro de uma faixa de concentração de 5 a 250 μg/mL, exibindo coeficientes de correlação todos superiores a 0,999, indicando uma ampla faixa linear e excelente linearidade. A ...

Determinando quatro componentes em um sistema de entrega de RNA de nanopartículas lipídicas por cromatografia líquida combinada com detector de espalhamento de luz evaporativa

This article presents a method for the analysis of lipid nanoparticle (LNP) components. LNP, serving as a pivotal vector for RNA-based drugs, primarily ...

determining-four-components-lipid-nanoparticle-rna-delivery-system

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Bioquímica

Este protocolo descreve um método de extrusão para a preparação de vesículas lipídicas de sub-micron tamanhos com um elevado grau de homogeneidade. Este método utiliza um sistema de pressão controlada, com taxas de azoto controlados de fluxo para a preparação de lipossomas. A preparação de...

Método de extrusão constante pressão controlada para a Preparação de vesículas lipídicas nanométricas

Um protocolo para a análise de nanopartículas de seguimento (NTA) e de alto rendimento de citometria de fluxo para avaliar as nanopartículas poliméricas entrega de genes é descrito. NTA é utilizada para caracterizar a distribuição do tamanho de partícula das nanopartículas e a distribuição de partículas por plasmídeo. De alto rendimento de citometria de fluxo permite a avaliação da eficácia de transfecção quantitativo para uma biblioteca de biomateriais de entrega de genes.

Avaliação de Entrega Gene Polimérico Nanopartículas por Análise Nanoparticle Rastreamento e alta capacidade de Citometria de Fluxo

Neste estudo, foi descrito um método para sintetizar populações ultrapequenas de nanopartículas biocompatíveis, bem como vários métodos in vitro para avaliar suas interações celulares.

Nanopartículas Lipídicas Sólidas (NLS) para intracelular Segmentação Aplicações

O protocolo apresentado descreve a análise do transporte mediado por proteínas de membrana no nível do transportador único usando bicamadas lipídicas livres de solvente que abrangem os poros. Isso é alcançado pela criação de chips de matriz de nanoporos produzidos em massa, combinados com aquisição e análise de dados altamente paralelas, permitindo o estabelecimento futuro de telas efetoras de proteínas de membrana.

Membrane Transport processos analisados ​​por um Sistema Nanopore Chip altamente paralelos na resolução Protein Individual

gotículas lipídicas são organelos importantes para a replicação de vários agentes patogénicos, incluindo o vírus da hepatite C (HCV). Descreve-se um método para isolar gotículas lipídicas para a espectrometria de massa quantitativa de proteínas associadas; ele pode ser utilizado sob uma variedade de condições, tais como infecção por vírus, stress ambiental, ou tratamento com droga.

Isolamento de gotículas de gordura para análise quantitativa Espectrometria de Massa

Este artigo descreve o encapsulamento de falcarindiol em revestidos de lipídeos 74 nm nanopartículas. A absorção celular das nanopartículas por células-tronco humanas em gotículas lipídicas é monitorada por imagem fluorescente e confocal. Nanopartículas são fabricadas pelo método de injeção rápida do solvente de movimento, e seu tamanho é medido com a técnica de espalhamento de luz dinâmica.

Captação de novas nanopartículas revestidos de lipídeos contendo Falcarindiol por células-tronco mesenquimais humanas

Este protocolo descreve a fabricação de lipossomas e como estes podem ser imobilizados em uma superfície e imagemindividualmente de uma forma paralela maciça usando microscopia de fluorescência. Isso permite a quantificação do tamanho e inhomogeneidade composicional entre os lipossomos únicos da população.

Um ensaio de liposcopia única baseado em microscopia quantitativa para detectar a inhomogeneidade composicional entre lipossomos individuais

As nanopartículas lipídicas são desenvolvidas usando uma abordagem de plataforma de mistura microfluida para encapsulamento de mRNA e DNA.

Formulando e caracterizando nanopartículas lipídicas para entrega de genes usando uma plataforma de mistura microfluida

Demonstramos como usar um novo instrumento de análise de rastreamento de nanopartículas para estimar a distribuição de tamanho e concentração total de partículas de vesículas extracelulares isoladas do tecido adiposo de camundongos e plasma humano.

Análise de rastreamento de nanopartículas para a quantificação e determinação de tamanho de vesículos extracelulares

Aqui, um protocolo para a formulação de nanopartículas lipídicas (LNPs) que encapsulam RNAm que codifica a luciferase do vagalume é apresentado. Esses LNPs foram testados quanto à sua potência in vitro em células HepG2 e in vivo em camundongos C57BL/6.

Testando a Eficiência In Vitro e In Vivo de Nanopartículas de RNAm-Lipídios Formuladas por Mistura Microfluídica

Um protocolo detalhado para sintetizar nanopartículas lipídicas (LNPs) usando tecnologias de misturador de jato de impacto confinado (CIJ), incluindo um CIJ de dois jatos e um misturador de vórtice de entrada múltipla de quatro jatos (μMIVM), é demonstrado. Os misturadores CIJ geram ambientes de micromistura turbulentos e reprodutíveis, resultando na produção de LNPs monodispersos.

Sintetizando Nanopartículas Lipídicas por Fluxo Turbulento em Misturadores de Jato de Impacto Confinado

Aprenda a analisar componentes de nanopartículas lipídicas por cromatografia líquida com detector de espalhamento de luz evaporativa. Este método oferece separação eficiente e alta sensibilidade para sistemas de entrega de RNA.

Determinando quatro componentes em um sistema de entrega de RNA de nanopartículas lipídicas por cromatografia líquida combinada com detector de espalhamento de luz evaporativa (Vídeo) | JoVE Journal

Determinando quatro componentes em um sistema de entrega de RNA de nanopartículas lipídicas por cromatografia líquida combinada com detector de espalhamento de luz evaporativa

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