Name: Metodologia aprimorada para estudar a osteogênese pós-natal via ossificação intramembranosa em um modelo de lesão da medula óssea murina (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-07T13:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 10 s
Description: Aprenda a metodologia de lesão da medula óssea murina para estudar osteogênese pós-natal via ossificação intramembranosa. Este protocolo controlado permite avaliar respostas celulares e formação de novo osso em modelos de reparo ósseo.

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<meta charset="utf8"></head><body>Modelo aprimorado de lesão da medula óssea para estudos de reparo ósseo intramembranoso

<ol><li>Bahney, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+biology+of+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular biology of fracture healing.</a> J Orthop Res. 37 (1), 35-50 (2019).</li>
<li>Ko, F. C., Sumner, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+faithfully+does+intramembranous+bone+regeneration+recapitulate+embryonic+skeletal+development%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">How faithfully does intramembranous bone regeneration recapitulate embryonic skeletal development.</a> Dev Dyn. 250 (3), 377-392 (2021).</li>
<li>Patt, H. M., Maloney, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+marrow+regeneration+after+local+injury%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Hematol%22%5BJournal%5D)">Bone marrow regeneration after local injury: a review.</a> Exp Hematol. 3 (2), 135-148 (1975).</li>
<li>Chitnis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long+bone+fractures%3A+treatment+patterns+and+factors+contributing+to+use+of+intramedullary+nailing%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev+Med+Devices%22%5BJournal%5D)">Long bone fractures: treatment patterns and factors contributing to use of intramedullary nailing.</a> Expert Rev Med Devices. 17 (7), 731-737 (2020).</li>
<li>Singaram, S., Naidoo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+physical+impact+of+long+bone+fractures+on+adults+in+KwaZulu-Natal%5BTitle%5D)+AND+%22S+Afr+J+Physiother%22%5BJournal%5D)">The physical impact of long bone fractures on adults in KwaZulu-Natal.</a> S Afr J Physiother. 76 (1), 1393(2020).</li>
<li>Kim, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthopedic+implants+and+devices+for+bone+fractures+and+defects%3A+past%2C+present+and+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Eng+Regen%22%5BJournal%5D)">Orthopedic implants and devices for bone fractures and defects: past, present and perspective.</a> Eng Regen. 1, 6-18 (2020).</li>
<li>Marsell, R., Einhorn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+biology+of+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Injury%22%5BJournal%5D)">The biology of fracture healing.</a> Injury. 42 (6), 551-555 (2011).</li>
<li>Katagiri, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((morphogenetic+protein-induced+heterotopic+bone+formation%3A+what+have+we+learned+from+the+history+of+a+half+century%5BTitle%5D)+AND+%22Jpn+Dent+Sci+Rev%22%5BJournal%5D)">morphogenetic protein-induced heterotopic bone formation: what have we learned from the history of a half century.</a> Jpn Dent Sci Rev. 51 (2), 42-50 (2015).</li>
<li>Wise, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+gene+expression+profiling+during+rat+femoral+marrow+ablation-induced+intramembranous+bone+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Temporal gene expression profiling during rat femoral marrow ablation-induced intramembranous bone regeneration.</a> PLoS One. 5 (10), e12987(2010).</li>
<li>Chen, X. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biglycan-deficient+mice+have+delayed+osteogenesis+after+marrow+ablation%5BTitle%5D)+AND+%22Calcified+Tissue+Int%22%5BJournal%5D)">Biglycan-deficient mice have delayed osteogenesis after marrow ablation.</a> Calcified Tissue Int. 72 (5), 577-582 (2003).</li>
<li>Moran, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intramembranous+bone+regeneration+differs+among+common+inbred+mouse+strains+following+marrow+ablation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Intramembranous bone regeneration differs among common inbred mouse strains following marrow ablation.</a> J Orthop Res. 33 (9), 1374-1381 (2015).</li>
<li>Jeffery, E. C., Mann, T. L. A., Pool, J. A., Zhao, Z., Morrison, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+marrow+and+periosteal+skeletal+stem%2Fprogenitor+cells+contribute+distinct+to+bone+maintenance+and+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Bone marrow and periosteal skeletal stem/progenitor cells contribute distinct to bone maintenance and repair.</a> Cell Stem Cell. 29 (11), 1547-1561.e6 (2022).</li>
<li>Loopmans, S., Stockmans, I., Carmeliet, G., Stegen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+in+vitro+characterization+of+murine+young-adult+long+bone+skeletal+progenitors%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Isolation and in vitro characterization of murine young-adult long bone skeletal progenitors.</a> Front Endocrinol. 13, 930358(2022).</li>
<li>Chan, C. K. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+specification+of+the+mouse+skeletal+stem+cell%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Identification and specification of the mouse skeletal stem cell.</a> Cell. 160 (1-2), 285-298 (2015).</li>
<li>Moran, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intramembranous+bone+regeneration+in+diversity+outbred+mice+is+heritable%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Intramembranous bone regeneration in diversity outbred mice is heritable.</a> Bone. 164, 116524(2022).</li>
<li>Lybrand, K., Bragdon, B., Gerstenfeld, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+bone+healing%3A+fracture%2C+marrow+ablation%2C+and+distraction+osteogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Mouse+Biol%22%5BJournal%5D)">Mouse models of bone healing: fracture, marrow ablation, and distraction osteogenesis.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 5 (1), 35-49 (2015).</li>
<li>Cooper, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testing+the+critical+size+in+calvarial+bone+defects%3A+revisiting+the+concept+of+a+critical-size+defect%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Testing the critical size in calvarial bone defects: revisiting the concept of a critical-size defect.</a> Plast Reconstr Surg. 125 (6), 1685-1692 (2010).</li>
<li>Yu, Y., Bahney, C., Hu, D., Marcucio, R. S., Miclau, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creating+rigidly+stabilized+fractures+for+assessing+intramembranous+ossification%2C+distraction+osteogenesis%2C+or+healing+of+critical+sized+defects%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Creating rigidly stabilized fractures for assessing intramembranous ossification, distraction osteogenesis, or healing of critical sized defects.</a> J Vis Exp. (62), e3552(2012).</li>
<li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+calvarial+defects+repair+with+PDGF-BB+mimetic+peptide+hydrogels%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Enhancing calvarial defects repair with PDGF-BB mimetic peptide hydrogels.</a> J Control Release. 370, 277-286 (2024).</li>
<li>Stanton, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+calvarial+defect+model+for+the+investigation+of+the+osteogenic+potential+of+newborn+umbilical+cord+mesenchymal+stem+cells+in+bone+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">A murine calvarial defect model for the investigation of the osteogenic potential of newborn umbilical cord mesenchymal stem cells in bone regeneration.</a> Plast Reconstr Surg. 153 (3), 637-646 (2023).</li>
<li>Manassero, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+segmental+femoral+critical-size+defect+model+in+mice+stabilized+by+plate+osteosynthesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Establishment of a segmental femoral critical-size defect model in mice stabilized by plate osteosynthesis.</a> J Vis Exp. (116), e52940(2016).</li>
<li>Petersen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+biomaterial+with+a+channel-like+pore+architecture+induces+endochondral+healing+of+bone+defects%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A biomaterial with a channel-like pore architecture induces endochondral healing of bone defects.</a> Nat Commun. 9 (1), 4430(2018).</li>
<li>Xiao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+transcriptomic+interrogation+of+the+murine+bone+marrow+signaling+landscape%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Res%22%5BJournal%5D)">Spatial transcriptomic interrogation of the murine bone marrow signaling landscape.</a> Bone Res. 11 (1), 59(2023).</li>
<li>Yu, V. W. C., Scadden, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterogeneity+of+the+bone+marrow+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Hematol%22%5BJournal%5D)">Heterogeneity of the bone marrow niche.</a> Curr Opin Hematol. 23 (4), 331-338 (2016).</li>
<li>Matsushita, Y., Ono, W., Ono, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+plate+skeletal+stem+cells+and+their+transition+from+cartilage+to+bone%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Growth plate skeletal stem cells and their transition from cartilage to bone.</a> Bone. 136, 115359(2020).</li>
<li>Mizuhashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resting+zone+of+the+growth+plate+houses+a+unique+class+of+skeletal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Resting zone of the growth plate houses a unique class of skeletal stem cells.</a> Nature. 563 (7730), 254-258 (2018).</li>
<li>Muruganandan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+FoxA2%2B+long-term+stem+cell+population+is+necessary+for+growth+plate+cartilage+regeneration+after+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A FoxA2+ long-term stem cell population is necessary for growth plate cartilage regeneration after injury.</a> Nat Commun. 13 (1), 2515(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Solução de Formalina a 10%&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HT501128</td><td></td></tr><tr><td>25 G 0.625 in Agulha Hipodérmica Air-tite EZ Flo</td><td>Ait Tite/ Fisher Scientific</td><td>14-817-239; ref #NEZ25058</td><td></td></tr><tr><td>26 G 1/2" Agulhas Hipodérmicas Descartáveis</td><td>Exel International/ Fisher Scientific</td><td>14-840-83; ref #26402</td><td>Qualquer agulha de 26 G pode ser substituída, deve ser destacável da seringa&nbsp;</td></tr><tr><td>Seringa Estéril de 3 mL</td><td>Fisherbrand/ Fisher Scientific&nbsp;</td><td>14-955-457</td><td></td></tr><tr><td>AB Almofada Estéril</td><td>McKesson/ Fisher Scientific</td><td>NC0593755</td><td>Alternativamente, pode usar almofadas absorventes autoclaváveis&nbsp;</td></tr><tr><td>Ácido Acético,</td><td>Milipore Glacial Sigma</td><td>AX0073</td><td>Precisa ser diluído para 1%</td></tr><tr><td>Cloreto de Amônio-Potássio (ACK) Tampão de Lise</td><td>Gibco/ Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>A1049201</td><td>Usado para lise de glóbulos vermelhos em preparação para citometria de fluxo&nbsp;</td></tr><tr><td>Câmara de Indução de Anestesia 2 L</td><td>VetEquip</td><td>941444</td><td></td></tr><tr><td>Solução de Betadine (Providona-Iodo)</td><td>Penn Veterinary Supply Inc/ Fisher Scientific</td><td>NC0158124</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina HCL Injeção 0.3 mg/mL&nbsp;</td><td>Genérico/ Covetrus</td><td>59122</td><td>Deve obter licença estadual e federal da DEA para comprar substância controlada</td></tr><tr><td>Calcein-AM</td><td>Sigma Aldrich</td><td>206700-1MG</td><td></td></tr><tr><td>Collagenase P&nbsp;</td><td>Roche</td><td>11249002001</td><td>Usado para digerir</td></tr><tr><td>cotonetes de osso e Aplicadores</td><td>Fisherbrand/ Fisher Scientific&nbsp;</td><td>22-363-172</td><td></td></tr><tr><td>Cryofilm Tipo II C(10), Laboratório de Seção de 3,5 cm</td><td>, Japão</td> Solução de Coloração <td>CFS 105</td><td></td></tr><tr><td>DAPI&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>ab228549</td><td></td></tr><tr><td>Balança Digital</td><td>Toprime/ Amazon</td><td>B06X6LW4V9</td><td>Pode usar qualquer marca de balança para pesar ratos</td></tr><tr><td>Pinça de Dissecação&nbsp;</td><td>Marca Fisher/ Fisher Scientific&nbsp;</td><td>08-953E; 08-953F</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura de Dissecação&nbsp;</td><td>Marca Fisher/ Fisher Scientific&nbsp;</td><td>08-940</td><td></td></tr><tr><td>Lâminas de criostato/micrótomo</td> de perfil baixo <td>Endure Tanner Scientific</td><td>TNR315LP</td><td></td></tr><tr><td>Ethiqa XR Buprenorfina de liberação prolongada 1,3 mg/mL</td><td>Ethiqa XR/ Cevetrus</td><td>72117</td><td>Deve obter licença estadual e federal da DEA para compra de substância controlada</td></tr><tr><td>Fast Green, 0,2%</td><td>Electron Miscroscopy Sciences EMS</td><td>50-319-57</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum heat </td><td>Gibco/ Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td> inativado;<td>A5256801</td><td>Usado para fazer Mídia de Coloração FACS (FSM)</td></tr><tr><td>Solução de Montagem Fluoromount-G&nbsp;</td><td>Biotecnologia do Sul&nbsp;</td><td>0100-01</td><td></td></tr><tr><td>GLUSEAL Adesivo Tópico para Pele&nbsp;</td><td>AD Surgical&nbsp;</td><td>GLU-550</td><td></td></tr><tr><td>Cabra anti-Coelho Alexa 647</td><td>Thermo Fisher</td><td>A21244</td><td>Diluição 1:300</td></tr><tr><td>Hanks' Balanced Salt Solution (HBSS)</td><td>Gibco/ Thermo Fisher Scientific</td><td>14065056</td><td>Usado para fazer Mídia de Coloração FACS (FSM)</td></tr><tr><td>Almofada de Aquecimento (grande)</td><td>Boncare/ Amazon</td><td>B0CLHSWXSX</td><td>Pode usar qualquer almofada de aquecimento de marca, remova a capa de pano&nbsp;</td></tr><tr><td>Hematoxilina</td><td>MilliporeSigma/ Fisher Scientific</td><td>M1051740500</td><td></td></tr><tr><td>Hialuronidase</td><td>MilliporeSigma</td><td>HX0514</td><td>Usado para digerir ossos</td></tr><tr><td>Sistema de Anestesia Animal Isoflurano</td><td>VetEquip</td><td>901810</td><td></td></tr><tr><td>KUBTEC Parâmetro 2D Sistema de Raios</td><td>X OncoMed Solutions</td><td>N/A</td><td>Qualquer sistema de imagem de gabinete de raios X pode ser usado</td></tr><tr><td>Microcentrífuga Tubos</td><td>Corning/ Thomas Scientific&nbsp;</td><td>8600A52</td><td></td></tr><tr><td>Vidro de Cobertura para Microscópio, 18 mm x 18 mm, Espessura # 1 Globe</td><td>Scientific</td><td>1414-10</td><td></td></tr><tr><td>N-2-hidroxietilpiperazina-N-2-etano ácido sulfônico HEPES (1M)&nbsp;</td><td>Gibco/ Thermo Fisher Scientific</td><td>156300-80</td><td>Usado para fazer Mídia de Coloração FACS (FSM)</td></tr><tr><td>Adesivo óptico Norland NO61</td><td>Edmund Optical</td><td>37-322</td><td>Usado para aderir seções de criofilme a uma lâmina&nbsp;</td></tr><tr><td>Anticorpo Monoclonal Coelho Osterix&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>ab209484</td><td>diluição 1:500</td></tr><tr><td>Peroxigard Pronto para Uso Desinfetante de Uma Etapa</td><td>Virox Technologies</td><td>29101</td><td>Pode ser substituído por qualquer outro desinfetante de grau clínico/laboratorial</td></tr><tr><td>Iodeto de Propídio (PI)&nbsp;</td><td>Invitrogen/ Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>P1304MP</td><td>Mancha fluorescente nuclear usada para detectar células mortas para contagens de viabilidade</td></tr><tr><td>Aparador elétrico recarregável</td><td>Wahl/ Amazon</td><td>B001FWXKUE</td><td>Qualquer aparador pode ser usado, um aparador de tamanho menor facilitará a depilação de animais menores</td></tr><tr><td>Cone de nariz de roedor</td><td>VetEquipar</td><td>921609</td><td></td></tr><tr><td>Safranin O, 85% puro, certificado</td><td>Fisher Scientific</td><td>AC419211000</td><td></td></tr><tr><td>O quadrado de Seal'N Freeze Cryotray molda</td><td>o elétron Miscroscopy Sciences EMS</td><td>62642-01</td><td>Usado para encaixar, outros moldes de encaixe podem ser usados. Este modelo específico tem um molde mais profundo, bem como uma tampa para selar o bloco&nbsp;</td></tr><tr><td>Nitrato de prata</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S6506</td><td>Nitrato de prata para coloração de von Kossa</td></tr><tr><td>Solução salina tamponada com fosfato estéril (PBS)</td> <td>Gibco / Thermo Fisher Scientific</td><td>10010023</td><td>Alternativamente, PBS recém-preparado que foi filtrado e autoclavado pode ser usado</td></tr><tr><td>Bisturis padrão estéreis</td><td>Integra Miltex / Fisher Scientific</td><td>12-460-455</td><td></td></tr><tr><td>Bisturis</td> <td>padrão estéreisIntegra Miltex/ Fisher Scientific</td><td>12-460-455</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose em Pó 1 KG</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>036508-A1</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost Plus Lâminas de Miscroscópio</td><td>Fisherbrand/ Fisher Scientific&nbsp;</td><td>1255015</td><td>Lâminas adesivas</td></tr><tr><td>Sure-Tek Casettes de Processamento/ Incorporação de Tecidos</td><td>Fisherbrand Histosette/ Fisher Scientific</td><td>22-048-141</td><td></td></tr><tr><td>Tecido Plus Temperatura de Corte Ótima O.C.T Composto Fisher</td><td>Scientific</td><td>23-730-571</td><td></td></tr><tr><td>Esponjas de Tecido</td><td>Epredia/ Fisher Scientific</td><td>84-53</td><td>As esponjas de tecido protegem os tecidos de excesso de processamento&nbsp;</td></tr><tr><td>Toluidina Azul</td><td>Fisher AC348600050</td><td></td><td></td> Científica</tr></tbody></table>

metodologia aprimorada para estudar a osteogênese pós-natal via ossificação intramembranosa em um modelo de lesão da medula óssea murina

Improved Methodology for Studying Postnatal Osteogenesis via Intramembranous Ossification in a Murine Bone Marrow Injury Model

O sucesso do procedimento mecânico de ablação da medula óssea (MO) foi validado por radiografia, enquanto a agulha 26G foi inserida na cavidade medular (Figura 2A). Quando a imagem de raios-X indicou que a agulha foi inserida em um ângulo impróprio ou penetrou através do osso, a agulha foi reinserida no ângulo adequado e refeita para confirmar o posicionamento preciso. Quando uma posição de sucesso não pôde ser alcançada, o animal foi excluído da análise. Embora a imagem radiográfica bidimen...

Metodologia aprimorada para estudar a osteogênese pós-natal via ossificação intramembranosa em um modelo de lesão da medula óssea murina

Long bone injuries heal through either endochondral or intramembranous bone formation pathways. Unlike the endochondral pathway that requires a cartilage ...

improved-methodology-for-studying-postnatal-osteogenesis-via

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Este artigo descreve um método para a estabilização de fracturas de ossos longos que é baseado na aplicação de fixadores externos modificados...

Criando Fraturas rigidamente estabilizadas para a Avaliação ossificação intramembranosa, Distração Osteogênica, ou Cura de defeitos críticos Sized

A medida quantitativa da função progenitor óssea na consolidação da fratura requer alta resolução tecnologia de imagens em série. Aqui, os protocolos são fornecidos para o uso de microscopia intravital e rastreamento osteo-linhagem sequencialmente imagem e quantificar a migração, proliferação e diferenciação de células-tronco / progenitoras osteogênicas endógenos no processo de reparação de fratura óssea.

Seqüente<em&gt; In vivo</em&gt; Imagem de osteogênicas células-tronco / progenitoras durante o reparo de fratura

Modelos animais são frequentemente empregados para mimetizar lesões ósseas graves em pesquisas biomédicas. Devido ao seu pequeno tamanho, o estabelecimento de lesões ósseas estabilizadas em camundongos está além das capacidades da maioria dos grupos de pesquisa. Aqui, descrevemos um método simples para estabelecer e analisar defeitos femorais experimentais em camundongos.

Um Defeito modelo simples Critical porte Femoral em Ratos

Embora os modelos de camundongos sejam ferramentas inestimáveis para a engenharia de tecidos ósseos, os modelos de defeitos de ossos longos são escassos. Essa necessidade motivou o desenvolvimento do presente protocolo, que utiliza uma placa bloqueada com quatro parafusos e um gabarito dedicado para realizar e estabilizar um defeito reprodutível, femoral, de tamanho crítico e com baixa morbidade.

Estabelecimento de um Defeito Modelo segmentar Femoral Critical-size em Ratos estabilizada por osteossíntese Placa

Microscopia de fluorescência intravital (IVFM) da calvária é aplicada em combinação com modelos de animais geneticamente para estudar o homing e enxertia das células hematopoiéticas em nichos de medula óssea (BM).

Combinando a microscopia Intravital fluorescente (IVFM) com modelos genéticos para estudar a dinâmica de enxertia das células hematopoiéticas para nichos de medula óssea

Este protocolo descreve uma técnica de osteossíntese usando uma haste intramedular bloqueada para fixação padronizada de osteotomias de fêmur, que pode ser usada para analisar a cicatrização óssea normal e defeituosa em camundongos.

Uma haste intramedular de bloqueio para Padronizado Fixação do fêmur Osteotomias para analisar normal e defeituosa cicatrização óssea em ratos

A avaliação do desenvolvimento do tecido no calo de fratura durante a cicatrização de osso endocondral é essencial para monitorar o processo de cicatrização. Aqui, nós relatamos o uso de uma ressonância magnética (MRI)-fixador externo compatível para o fêmur do mouse para permitir MRI varreduras durante a regeneração óssea em ratos.

Na Vivo Avaliação do desenvolvimento de calo de fratura durante a consolidação óssea em ratos usando um dispositivo de osteossíntese compatível com MRI para o fêmur de Mouse

Este protocolo descreve uma técnica de osteossíntese minimamente invasiva usando um parafuso de haste intramedular padronizada estabilização de fraturas de fêmur, o que pode ser usado para analisar endocondral consolidação óssea em ratos.

Um modelo minimamente invasivo para analisar a fratura endocondral cura em ratos sob condições biomecânicas padronizadas

O modelo murino fratura fechada do fêmur é uma plataforma poderosa para estudar a consolidação da fratura e novas estratégias terapêuticas para acelerar a regeneração óssea. O objetivo do presente protocolo cirúrgico é gerar fraturas femorais fechadas unilaterais em camundongos, usando uma haste intramedular aço para estabilizar o fêmur.

A geração de fraturas fechadas de fêmur em ratos: um modelo para estudar a consolidação óssea

Este protocolo descreve um procedimento cirúrgico para o estabelecimento de uma fratura diafisária no fêmur de camundongos, que é estabilizada com um fio intramedular, para estudos de consolidação da fratura.

Estabelecimento de um Modelo de Fratura Diafisária do Fêmur em Camundongos

Este protocolo apresenta um método abrangente e eficiente para análise do reparo ósseo mandibular. Descrevemos uma técnica reprodutível para fratura mandibular não estabilizada em modelo de camundongo, permitindo a análise do processo de reparo ósseo endocondral com mínimo dano tecidual e perda óssea.

Técnica menos invasiva para fratura mandibular não estabilizada em modelos de camundongos

Aprenda a metodologia de lesão da medula óssea murina para estudar osteogênese pós-natal via ossificação intramembranosa. Este protocolo controlado permite avaliar respostas celulares e formação de novo osso em modelos de reparo ósseo.

Metodologia aprimorada para estudar a osteogênese pós-natal via ossificação intramembranosa em um modelo de lesão da medula óssea murina (Vídeo) | JoVE Journal

Metodologia aprimorada para estudar a osteogênese pós-natal via ossificação intramembranosa em um modelo de lesão da medula óssea murina

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