Name: In vitro Teste de trombose para dispositivos de assistência ventricular (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-21T13:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 15 s
Description: Aprenda a desenvolver um protocolo de bancada para identificar pontos de trombogenicidade em dispositivos de assistência ventricular. Este método padronizado permite avaliar a tromboresistência antes dos testes em animais.

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<ol><li>Kirklin, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eighth+annual+INTERMACS+report+Special+focus+on+framing+the+impact+of+adverse+events%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">Eighth annual INTERMACS report Special focus on framing the impact of adverse events.</a> J Heart Lung Transplant. 36 (10), 1080-1086 (2017).</li>
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<li>Anand, M., Rajagopal, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+short+review+of+advances+in+the+modelling+of+blood+rheology+and+clot+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Fluids%22%5BJournal%5D)">A short review of advances in the modelling of blood rheology and clot formation.</a> Fluids. 2 (3), 35(2017).</li>
<li>Belyaev, A. V., Dunster, J. L., Gibbins, J. M., Panteleev, M. A., Volpert, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+thrombosis+in+silico%3A+Frontiers%2C+challenges%2C+unresolved+problems+and+milestones%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Life+Rev%22%5BJournal%5D)">Modeling thrombosis in silico: Frontiers, challenges, unresolved problems and milestones.</a> Phys Life Rev. 26- 27, 57-95 (2018).</li>
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<li>Méndez Rojano, R., Lai, A., Zhussupbekov, M., Burgreen, G. W., Cook, K., Antaki, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+fibrin+enhanced+thrombosis+model+for+medical+devices+operating+at+low+shear+regimes+or+large+surface+areas%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Comput+Biol%22%5BJournal%5D)">A fibrin enhanced thrombosis model for medical devices operating at low shear regimes or large surface areas.</a> PLoS Comput Biol. 18 (10), e1010277(2022).</li>
<li>Taylor, J. O., Meyer, R. S., Deutsch, S., Manning, K. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+computational+model+for+macroscopic+predictions+of+device-induced+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Biomech+Model+Mechanobiol%22%5BJournal%5D)">Development of a computational model for macroscopic predictions of device-induced thrombosis.</a> Biomech Model Mechanobiol. 15 (6), 1713-1731 (2016).</li>
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<li>Wu, W. -T., Jamiolkowski, M. A., Wagner, W. R., Aubry, N., Massoudi, M., Antaki, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-constituent+simulation+of+thrombus+deposition%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Multi-constituent simulation of thrombus deposition.</a> Sci Rep. 7 (1), 42720(2017).</li>
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<li>Sin, D., Kei, H., Miao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface+coatings+for+ventricular+assist+devices%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev+Med+Devices%22%5BJournal%5D)">Surface coatings for ventricular assist devices.</a> Expert Rev Med Devices. 6 (1), 51-60 (2009).</li>
<li>Zhang, M., Tansley, G. D., Dargusch, M. S., Fraser, J. F., Pauls, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface+coatings+for+rotary+ventricular+assist+devices%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22ASAIO+J%22%5BJournal%5D)">Surface coatings for rotary ventricular assist devices: A systematic review.</a> ASAIO J. 68 (5), 623-632 (2022).</li>
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<li>Jamiolkowski, M. A., Pedersen, D. D., Wu, W., Antaki, J. F., Wagner, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+and+analysis+of+biomaterial-centered+thrombus+formation+within+a+defined+crevice+under+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Visualization and analysis of biomaterial-centered thrombus formation within a defined crevice under flow.</a> Biomaterials. 96, 72-83 (2016).</li>
<li>Zhussupbekov, M., Wu, W. -T., Jamiolkowski, M. A., Massoudi, M., Antaki, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+shear+rate+and+surface+chemistry+on+thrombus+formation+in+micro-crevice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech%22%5BJournal%5D)">Influence of shear rate and surface chemistry on thrombus formation in micro-crevice.</a> J Biomech. 121, 110397(2021).</li>
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<li>Borovetz, H. S., Olia, S. E., Antaki, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toward+the+Development+of+the+PediaFlowTM+Pediatric+Ventricular+Assist+Device%3A+Past%2C+Present%2C+Future%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Eng+Sci%22%5BJournal%5D)">Toward the Development of the PediaFlowTM Pediatric Ventricular Assist Device: Past, Present, Future.</a> Appl Eng Sci. 11, 100113(2022).</li>
<li>Herbertson, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multilaboratory+study+of+flow-induced+hemolysis+using+the+FDA+benchmark+nozzle+model%5BTitle%5D)+AND+%22Artif+Organs%22%5BJournal%5D)">Multilaboratory study of flow-induced hemolysis using the FDA benchmark nozzle model.</a> Artif Organs. 39 (3), 237-248 (2015).</li>
<li>Olia, S. E., Herbertson, L. H., Malinauskas, R. A., Kameneva, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reusable%2C+compliant%2C+small+volume+blood+reservoir+for+in+vitro+hemolysis+testing%5BTitle%5D)+AND+%22Artif+Organs%22%5BJournal%5D)">A reusable, compliant, small volume blood reservoir for in vitro hemolysis testing.</a> Artif Organs. 41 (2), 175-178 (2017).</li>
<li>Doherty, T. M., Shavelle, R. M., French, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducibility+and+variability+of+activated+clotting+time+measurements+in+the+cardiac+catheterization+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22Catheter+Cardiovasc+Interv%22%5BJournal%5D)">Reproducibility and variability of activated clotting time measurements in the cardiac catheterization laboratory.</a> Catheter Cardiovasc Interv. 65 (3), 330-337 (2005).</li>
<li>Chia, S., Van Cott, E. M., Raffel, C. O., Jang, I. -K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+activated+clotting+times+obtained+using+Hemochron+and+Medtronic+analysers+in+patients+receiving+anti-thrombin+therapy+during+cardiac+catheterisation%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Comparison of activated clotting times obtained using Hemochron and Medtronic analysers in patients receiving anti-thrombin therapy during cardiac catheterisation.</a> Thromb Haemost. 101 (03), 535-540 (2009).</li>
<li>Li, H., Serrick, C., Rao, V., Yip, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparative+analysis+of+four+activated+clotting+time+measurement+devices+in+cardiac+surgery+with+cardiopulmonary+bypass%5BTitle%5D)+AND+%22Perfusion%22%5BJournal%5D)">A comparative analysis of four activated clotting time measurement devices in cardiac surgery with cardiopulmonary bypass.</a> Perfusion. 36 (6), 610-619 (2021).</li>
<li>Hastings, S. M., Ku, D. N., Wagoner, S., Maher, K. O., Deshpande, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sources+of+circuit+thrombosis+in+pediatric+extracorporeal+membrane+oxygenation%5BTitle%5D)+AND+%22ASAIO+J%22%5BJournal%5D)">Sources of circuit thrombosis in pediatric extracorporeal membrane oxygenation.</a> ASAIO J. 63 (1), 86-92 (2017).</li>
<li>Starling, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unexpected+abrupt+increase+in+left+ventricular+assist+device+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Unexpected abrupt increase in left ventricular assist device thrombosis.</a> N Engl J Med. 370 (1), 33-40 (2014).</li>
<li>Hastings, S. M., Deshpande, S. R., Wagoner, S., Maher, K., Ku, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombosis+in+centrifugal+pumps%3A+Location+and+composition+in+clinical+and+in+vitro+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Artif+Organs%22%5BJournal%5D)">Thrombosis in centrifugal pumps: Location and composition in clinical and in vitro circuits.</a> Int J Artif Organs. 39 (4), 200-204 (2016).</li>
<li>Patel, M., Jamiolkowski, M. A., Vejendla, A., Bentley, V., Malinauskas, R. A., Lu, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+temperature+on+thrombogenicity+testing+of+biomaterials+in+an+in+vitro+dynamic+flow+loop+system%5BTitle%5D)+AND+%22ASAIO+J%22%5BJournal%5D)">Effect of temperature on thrombogenicity testing of biomaterials in an in vitro dynamic flow loop system.</a> ASAIO J. 69 (6), 576-582 (2023).</li>
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<li>Patel, M., Serna, C., Parrish, A., Gupta, A., Jamiolkowski, M., Lu, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alternative+anticoagulant+strategy+to+improve+the+test+sensitivity+of+ASTM+F2888-19+standard+for+platelet+and+leukocyte+count+assay%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Mater+Res+B+Appl+Biomater%22%5BJournal%5D)">Alternative anticoagulant strategy to improve the test sensitivity of ASTM F2888-19 standard for platelet and leukocyte count assay.</a> J Biomed Mater Res B Appl Biomater. 112 (12), e35514(2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Tubos de ensaio de 14 mL</td><td>Falcon</td><td>352059</td><td>Tubos de ensaio de polipropileno de fundo redondo com tampa de pressão</td></tr><tr><td>Torneira de 1 via</td><td>Qosina</td><td>99759</td><td>Luer Lock, Luer Macho com Spin Lock</td></tr><tr><td>Torneira de 3 vias</td><td>Qosina</td><td>99771</td><td>2 Luer Locks Fêmea, Cuvetes Luer Lock</td></tr><tr><td>ACT+ Macho Rotativo para Hemochron</td><td>Werfen</td><td>000JACT+</td><td>45/Caixa</td></tr><tr><td>Multiuso limpador/desengordurante</td><td>Simple Green</td><td>2710200613005</td><td>Simple Green Cleaner and Degreaser. Use solução a 1%.</td></tr><tr><td>Conectores farpados</td><td>Qosina</td><td>73311</td><td>Material: policarbonato; &frac14; &rdquo; x &frac14; &rdquo; conector reto</td></tr><tr><td>Conectores farpados com trava luer</td><td>Qosina</td><td>73316</td><td>Material: policarbonato; &frac14; &rdquo; x &frac14; &rdquo; conector reto com trava luer</td></tr><tr><td>Albumina de soro bovino (BSA)</td><td>Thermo Scientific Chemicals</td><td>AAJ6465522</td><td>Ou</td></tr><tr><td>equivalente Cloreto de cálcio, CaCl2</td><td>Thermo Scientific Chemicals</td><td>AA89866-30</td><td>Anidro, &ge; 96,0% ACS</td></tr><tr><td>Escopo de dissecação (recomendado)</td><td>Olympus</td><td>https://www.olympus-lifescience.com/en/technology/museum/micro/1984/</td> <td>Olympus SZH10 (ampliação de zoom contínuo 7x - 70x) ou</td></tr><tr><td>DPBS semelhante (sem cálcio e magnésio)</td><td>Gibco</td><td>14200075</td><td>solução salina tamponada com fosfato da Dulbecco, sem cálcio, sem magnésio, 10X (deve ser diluído para 1X antes do uso)</td></tr><tr><td></td><td>EDTA Quality Biológico</td><td>351-027-721EA</td><td>0.5 M, pH 7.0&ndash; 8.0 (Ácido etilenodiaminotetracético)</td></tr><tr><td>Câmera de endoscópio/boroscópio/otoscópio (opcional)</td><td>Bebird</td><td>https://bebird.com/products/earsight-pro-ear-wax-removers</td><td>3&ndash; Diâmetro da sonda de 4 mm</td></tr><tr><td>Detergente em pó enzyme-active</td><td>Alconox</td><td>1304-1</td><td>Alconox Tergazyme. Use solução a 1%.</td></tr><tr><td>Linha de Extensão, 30"</td><td>Qosina&nbsp;</td><td>36218</td><td>30" de comprimento,&nbsp; luer lock fêmea para luer lock macho</td></tr><tr><td>Linha de Extensão, 6"</td><td>Qosina&nbsp;</td><td>36212</td><td>6" de comprimento,&nbsp; trava luer fêmea para trava luer macho</td></tr><tr><td>Trava luer fêmea, farpado</td><td>Qosina</td><td>11548</td><td>Serve para tubulação ID de 1/8 de polegada; material: policarbonato;</td></tr><tr><td>Medidor de vazão</td><td>Transônico</td><td>https://www.transonic.com/t402-t403-consoles</td><td>Módulo Transônico TS410</td></tr><tr><td>Hemostat</td><td>Fisherbrand</td><td>13-820-004</td><td>Hemostático de travamento com pelo menos 5 cm de comprimento da ponta</td></tr><tr><td>Heparina Sódica</td><td>McKesson Serviços de Embalagem</td><td>949513</td><td>concentração de 1000 U/mL</td></tr><tr><td>Braçadeira Hoffman</td><td>Humboldt</td><td>H8720</td> Bolsa IV de <td>pinça de rosca fina</td></tr><tr><td> (reservatório de sangue compatível)</td><td>Qosina</td><td>51494</td><td>Material: PVC, 2 portas de tubo 0.258" ID. O saco de 100 ml é modificado usando um selador de calor</td></tr><tr><td>Toalhetes sem fiapos</td><td>Kimberly-Clark Professional</td><td>34120</td><td>Kimtech Science Wipers</td></tr><tr><td>Agitador magnético</td><td>INTLLAB</td><td>MS-500</td><td>Ou similar</td></tr><tr><td>Fechadura luer macho, farpado</td><td>Qosina</td><td>11549</td><td>Serve para tubulação de 1/8 de polegada ID; material: policarbonato;</td></tr><tr><td>Manômetro (digital)</td><td>Sper Scientific</td><td>840081</td><td>SPER-840081 ou</td></tr><tr><td>similar Malha filtrante de nylon</td><td>McMaster-Carr</td><td>9318T21</td><td>100-&mu; m (0.0039") tamanho da abertura</td></tr><tr><td>Sangue ovino</td><td>Lampire</td><td>7209004</td><td>Doador sangue total, anticoagulado com ACD 14:86, enviado durante a noite</td></tr><tr><td>Seladora térmica de saco plástico</td><td>Uline</td><td>H-190</td><td>Uline H-190 ou similar (sem cortador)</td></tr><tr><td>Adesivo de borracha de silicone</td><td>Smooth-On&nbsp;</td><td>B00IRC1YI0</td><td>Seringa Sil-Poxy ou similar</td></tr><tr><td>com trava luer, 1 mL</td><td>Seringa manual Fisher Scientific</td><td>14-955-646</td><td>Fisherbrand sem agulha para fins de pesquisa</td></tr><tr><td>Seringa com trava luer, 3 mL</td><td>Seringa manual Fisher Scientific</td><td>14-955-457</td><td>Fisherbrand sem agulha para fins de pesquisa</td></tr><tr><td>Seringa com trava luer, 60 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-955-461</td><td>Seringa manual da marca Fisherbrand sem agulha para fins de pesquisa</td></tr><tr><td>Filtro de transfusão</td><td>Haemonetics Corporation&nbsp;</td><td>SQ40S/SQ40NS</td><td>Haemonetics Corporation SQ40S filtro de transfusão de sangue de nuvem</td></tr><tr><td>TRIS Buffered Saline</td><td>Thermo Scientific Chemicals</td><td>AAJ62938K2</td><td>TBS 10x (deve ser diluído para 1X antes do uso), pH 7.4</td></tr><tr><td>Tubulação</td><td>Tygon</td><td>ADF00017</td><td>Tubulação Tygon ND-100-65 (grau médico)</td></tr><tr><td>Sensor de fluxo ultrassônico</td><td></td><td>Transonic https://www.transonic.com/hqxl-flowsensors</td><td>Selecione o modelo de sensor de fluxo apropriado para o tamanho da tubulação usada. O sensor de fixação ME6PXL se encaixa no sensor de 3/8" Tubulação OD. O sensor é calibrado pela Transonic para o fluido de teste (por exemplo, sangue a 24C) e grau de tubulação (por exemplo, Tygon ND-100-65)</td></tr> <tr><td>Sonicador ultrassônico (opcional)</td> <td>Ultrassônico Branson</td><td>CPX952238R</td><td>Branson CPX2800H ou</td></tr><tr><td>similar Sistema VAD</td><td>PediaFlow</td><td>PF5</td><td>O sistema VAD a ser testado; inclui a bomba e o controlador</td></tr><tr><td>Sistema de Coagulação de Sangue Total</td><td>Werfen</td><td>https://www.werfen.com/na/en/point-of-care-testing-devices/ACT-machine-hemochron-signature-elite</td><td>Hemochron Signature Elite ou Signature Jr</td></tr></tbody></table>

in vitro teste de trombose para dispositivos de assistência ventricular

In Vitro Thrombosis Test for Ventricular Assist Devices

A execução bem-sucedida deste protocolo permite a identificação de áreas localizadas de deposição de plaquetas, revelando pontos problemáticos dentro do caminho de fluxo da bomba. A aplicação consistente deste protocolo permite melhorias incrementais ao abordar esses "pontos críticos" identificados.
Por exemplo, durante o desenvolvimento do PediaFlow PF5 VAD, encontramos desafios no polimento manual do lado da pressão das palhetas do estator devido ao tamanho em miniatura dos componentes. Os t...

In vitro Teste de trombose para dispositivos de assistência ventricular

The risk of thrombosis remains a significant concern in the development and clinical use of ventricular assist devices (VADs). Traditional assessments of ...

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Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioengenharia

A indução eletrolítico de ativação endotelial na superfície interna da Vena Cava Inferior resultados na formação venosa tipo trombo devido à ativação endotelial e parciais a estagnação do sangue, dois componentes da tríade de Virchow.

Eletrolítico Veia Cava Inferior Model (EIM) de trombose venosa

Um método para semeadura de titânio de sangue entrar em contato com biomateriais com células autólogas e biocompatibilidade teste é descrito. Este método utiliza células progenitoras endoteliais e tubos de titânio, semeadas em poucos minutos de implante cirúrgico em suínos as cavas. Esta técnica é adaptável a muitas outras implantáveis ​​dispositivos biomédicos.

Autólogas progenitoras endoteliais Cell Technology Semear e Teste de biocompatibilidade para dispositivos Cardiovascular em Modelo Animal Grande

Um protocolo de passo-a-passo para a colocação inter-posicional de engenharia de tecidos Vessels (TEVs) na artéria carótida de um carneiro usando anastomose end-to-end e avaliação digital em tempo real, in vivo até o sacrifício animal.

Técnica Cirúrgica para a Implantação de engenharia de tecidos enxertos vasculares e Subsequente<em&gt; In Vivo</em&gt; Monitoring

Aqui, apresentamos um protocolo utilizando duas bombas centrífugas como um substituto do coração artificial.

Uso de dois dispositivos de Assistência Ventricular Intracorporeal como um coração Artificial

Este protocolo descreve uma avaliação abrangente da hemocompatibilidade de dispositivos de contato com o sangue usando implantes neurovasculares cortados a laser. Um modelo de loop de fluxo com sangue humano fresco e heparinizado é aplicado para imitar o fluxo sanguíneo. Após a perfusão, vários marcadores hematológicos são analisados e comparados aos valores obtidos diretamente após a coleta de sangue para avaliação da hemocompatibilidade dos dispositivos testados.

Teste de hemocompatibilidade de implantes de contato com o sangue em um modelo de loop de fluxo imitando o fluxo sanguíneo humano

Apresentamos um modelo de doença vascular in vitro para investigar interações sanguíneas inteiras com o endotélio derivado do paciente. Este sistema permite o estudo de propriedades trombogênicas das células endoteliais primárias em várias circunstâncias. O método é especialmente adequado para avaliar em trombogenicidade situ e terapia anticoagulação durante diferentes fases de coagulação.

Modelo de doença microfluida in vitro para estudar interações endoteliais de sangue inteiro e dinâmica do coágulo sanguíneo em tempo real

Apresentado aqui é um protocolo para um modelo de loop hemodinâmico in vitro padronizado. Este modelo permite testar a hemocompatibilidade de tubos de perfusão ou stents vasculares de acordo com a norma ISO (Organização Internacional para Padronização) 10993-4.

Um modelo de loop hemodinâmico in vitro para investigar a hemocitocompatibilidade e ativação celular hospedeira de dispositivos médicos vasculares

Dispositivos de assistência ventricular percutânea estão sendo cada vez mais utilizados em pacientes com infarto agudo do miocárdio e choque cardiogênico. Aqui, discutimos o mecanismo de ação e os efeitos hemodinâmicos desses dispositivos. Também revisamos algoritmos e melhores práticas para a implantação, gerenciamento e desmaseamento desses dispositivos complexos.

Utilizando dispositivos de assistência ventricular percutânea em infarto agudo do miocárdio complicado por choque cardiogênico

O artigo a seguir descreve o procedimento passo a passo para a colocação de um dispositivo (por exemplo, Tandemheart) em choque cardiogênico (SC) que é um dispositivo de assistência ventricular esquerda percutâneo (pLVAD) e um sistema de bypass de artéria femoral esquerdo (LAFAB) que contorna e suporta o ventrículo esquerdo (LV) em CS.

Uso de um dispositivo de assistência ventricular percutâneo/átrio esquerdo para o sistema de bypass da artéria femoral para choque cardiogênico

Este protocolo investiga o uso de plasma rico em vesículas extracelulares (VE) como indicador da capacidade coagulativa da VE. O plasma rico em EV é obtido através de um processo de centrifugação diferencial e subsequente recalcificação.

Determinação da atividade pró-coagulante de vesículas extracelulares (EV) utilizando o tempo de coagulação ativado por EV (EV-ACT)

Aprenda a desenvolver um protocolo de bancada para identificar pontos de trombogenicidade em dispositivos de assistência ventricular. Este método padronizado permite avaliar a tromboresistência antes dos testes em animais.

In vitro Teste de trombose para dispositivos de assistência ventricular

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