Name: Otimizando a entrega de vesículas extracelulares usando um andaime bioimpresso em 3D com bainha central para tratamento de feridas crônicas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-28T14:20:00.000+00:00
Duration: 9 min 17 s
Description: Aprenda a fabricar andaimes bioimpressos em 3D com bainha central para liberação controlada de vesículas extracelulares no tratamento de feridas crônicas. Este método melhora a cicatrização tecidual.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>23 g de precisão roxa cônico</td><td>bico cellink</td><td>KT0000002000</td><td>Para fornecer extrusão precisa de bioinks com o mínimo de entupimento</td></tr><tr><td>Alginato liase (AlgLiase)</td> <td>Sigma Aldrich</td><td>A1603-100MG</td><td>Algyase é uma enzima que degrada o alginato.</td></tr><tr><td>Filtro Ultra Centrífugo Amicon, 30 kDa MWCO</td><td>Merck</td><td>UFC9030</td><td>Usado para lavar PKH-26 rotulado-EVs Kit de</td></tr><tr><td>ensaio BCA</td><td>Thermo Scientific</td><td>10678484</td><td>Para determinar a concentração de proteína/EVs</td></tr><tr><td>Sistema de Bioimpressão</td><td>Regemat</td><td>V1</td><td>Para fabricar andaime de bainha de núcleo</td></tr><tr><td>Albumina de soro bovino (BSA)</td><td>sigma-aldrich</td><td>05470-5G</td><td>Para parar a reação PKH 26&nbsp;</td></tr><tr><td>Cloreto de cálcio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C3306-100G</td><td>Para reticulação e estabilização de bioinks em engenharia de tecidos</td></tr><tr><td>Centrífuga</td><td>Sigma</td><td>2-16P</td><td>Usada para isolamento de EVs</td></tr><tr><td>Centrífuga 5810 R</td><td>Eppendorf</td><td>22625101</td><td>Usada para cultura de células</td></tr><tr><td>Gabinete de Segurança Biológica Classe II Telstar</td><td></td><td>Bio II Advance</td><td>Cell culture</td></tr><tr><td>CryoCube&nbsp; Série F570 - ULT Freezer</td><td>Eppendorf</td><td>F571240035</td><td>Para armazenar EVs</td></tr><tr><td>microscópio fluorescente</td><td>OLYMPUS&nbsp;</td><td>IX73P1F&nbsp;</td><td>Usado para verificar o PKH-26 residual no filtrado</td></tr><tr><td>Gentamicina (50 mg/mL)</td><td>Antibiótico Thermofisher</td><td>15750</td><td>para meios de cultura celular</td></tr><tr><td>GlutaMAX-I CTS, (100X), líquido</td><td>Suplemento de meios de cultura celular</td><td>Thermofisher</td><td>A12860</td></tr><tr><td>HCl</td><td>Sigma Aldrich</td><td>7647-01-0</td><td>Preparação de tampão&nbsp;</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Carl Roth</td><td>Art. Não.&nbsp; 6763.3</td><td>Preparação de tampão&nbsp;</td></tr><tr><td>Carboximetilcelulose de alta viscosidade (CMCh)</td><td>BDH</td><td>27929 4T</td><td>CMCh é um derivado de celulose solúvel em água.</td></tr><tr><td>Incubadora</td><td>New Brunswick</td><td>&nbsp; NB-170R</td><td>Cultura de células</td></tr><tr><td>Imagem Invivo</td><td>PerkinElmer</td><td>IVIS Lumina XRMS Série III&nbsp;</td><td>Para rastrear o lançamento de EVs, in vivo</td></tr><tr><td>Agitador de ímã</td><td>SalvisLAB</td><td>MC35</td><td>Para preparação de biotintas</td></tr><tr><td>miRCURY Kits de exossomos para isolamento de exossomos</td><td>Qiagen</td><td>76743</td><td>Evs isolamento</td></tr><tr><td>NaOh</td><td>Daejung</td><td>1310-73-2</td><td>Preparação de tampão&nbsp;</td></tr><tr><td>solução salina tamponada com fosfato (PBS)</td> <td>Thermo Scientific</td><td>J61196. AP</td><td>Cultura de células</td></tr><tr><td>PKH 26</td><td>MCE</td><td>154214-55-8</td><td>Corante fluorescente vermelho para rotular os EVs</td></tr><tr><td>Alginato de sódio (Alg)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A0682-100G</td><td>Polissacarídeo natural derivado de algas marrons.</td></tr><tr><td>Cloreto de sódio (NaCl)</td><td>Carl Roth</td><td>Art-Nr-P029.1</td><td>Preparação de tampão&nbsp;</td></tr><tr><td>Células-tronco mesenquimais StemPro BM</td><td>Thermofisher</td><td>A1382901</td><td>Células-tronco mesenquimais</td></tr><tr><td>StemPro MSC SFM XenoFree</td><td>Thermofisher</td><td>A1067501</td><td>Meios de cultura celular</td></tr><tr><td>Tripsina 0,25%</td> <td>Thermofisher</td><td>25050014</td><td>Dissociação celular</td></tr><tr><td>Misturador de vórtice</td><td>Daihan Scientific</td><td>VM-10</td><td>Usado para misturar tampão de precipitação com o meio condicionado</td></tr></tbody></table>

otimizando a entrega de vesículas extracelulares usando um andaime bioimpresso em 3d com bainha central para tratamento de feridas crônicas

Optimizing Extracellular Vesicle Delivery Using a Core-Sheath 3D-Bioprinted Scaffold for Chronic Wound Management

A liberação in vivo de EVs dos andaimes Alg-EVs/CMCh e Alg-EVs/CMCh-AlgLiase é representada na Figura 1B,C. Como previsto, o andaime Alg-EVs/CMCh-AlgLiase exibiu um perfil de liberação mais rápida em comparação com Alg-EVs/CMCh, particularmente nos pontos de tempo de 2 h e 4 h. A liberação de EVs dos hidrogéis é governada por uma combinação de mecanismos físico-químicos, incluindo difusão, inchaço, erosão e degradação20. Ao alavancar o Alglya...

Otimizando a entrega de vesículas extracelulares usando um andaime bioimpresso em 3D com bainha central para tratamento de feridas crônicas

This study outlines a detailed protocol for the fabrication of core-sheath 3D-bioprinted scaffolds designed to enhance chronic wound healing. The protocol ...

optimizing-extracellular-vesicle-delivery-using-core-sheath-3d

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioengenharia

Para a criação de estruturas altamente organizadas de tecidos complexos, deve-se montar vários tipos de materiais e células em um composto integrado.  Este projeto combinatório incorpora folhas de células em camadas específicas de órgãos com dois materiais distintos derivados biologicamente contendo uma forte base de matriz fibrosa e células endoteliais para aumentar a formação de novos vasos.

Engenharia de Tecidos: Construção de um multicelular 3D andaime para a entrega de camadas celulares Sheets

Uma bioimpressora cartesiana foi projetada e fabricada para permitir a deposição de vários materiais em geometrias precisas e reprodutíveis, ao mesmo tempo em que permite o controle de fatores ambientais. Utilizando a bioimpressora tridimensional, construções complexas e viáveis podem ser impressas e facilmente reproduzidas.

Viabilidade de Bioprinted celulares Construções Usando uma impressora cartesiano Dispenser Três

Nós fornecemos um protocolo generalizado, baseado em uma estratégia de bioprinting microfluidic para engenharia uma cama vascular microfibrous, onde um tipo da pilha secundária poderia ser mais propagado para o espaço intersticial dessa estrutura microfibrous para gerar organoids e tecidos vascularizados.

Vascularizado de microfluidic Bioprinting para a engenharia de tecidos e Organoids

Este artigo demonstra a técnica de expansão de uma esteira de nanofibras tradicional, duas dimensões (2D) electrospun em um andaime de três dimensões (3D) através da despressurização subcrítico CO2 líquido. Estes andaimes aumentadas são 3D, pistas perto imitar nanotopographic celular e preservar as funções de moléculas biológicas encapsuladas dentro de nanofibras.

Expansão de duas dimensões Electrospun nanofibras esteiras em três dimensões andaimes

Apresentado aqui é um simples de usar, Core/Shell, tridimensional bioprinting set-up para uma etapa de fabricação de andaimes ocas, adequado para a engenharia de tecidos vasculares e outras estruturas tubulares.

Núcleo/Shell impressão scaffolds para engenharia de tecidos de estruturas tubulares

Os tecidos projetados dependem fortemente de redes vasculares adequadas para fornecer nutrientes e gases vitais e remover resíduos metabólicos. Neste trabalho, um protocolo de semeadura passo a passo de células endoteliais e células de suporte cria redes vasculares altamente organizadas em uma plataforma de alta produtividade para estudar o desenvolvimento do comportamento da embarcação em um ambiente 3D controlado.

Semeadura de células stepwise em andaimes tesavendados para estudar vasos sanguíneos brotando

Neste manuscrito, demonstramos a preparação de uma biotinta hidrogel biohíbrida contendo grafeno para uso em engenharia de tecidos periféricos. Utilizando este material biohíbrido 3D, é realizado o protocolo de diferenciação neural de células-tronco. Este pode ser um passo importante para trazer biomateriais semelhantes para a clínica.

Preparação e caracterização de biotinta de hidrogel biohíbrido 3D à base de grafeno para neuroengenharia periférica

Retalhos projetados requerem uma rede vascular funcional incorporada. Neste protocolo, apresentamos um método de fabricação de um retalho de tecido impresso em 3D contendo uma rede vascular hierárquica e suas anastomosas microcirúrgicas diretas para a artéria femoral de rato.

Fabricação de retalhos vasculares projetados usando tecnologias de impressão 3D

Este trabalho descreve um protocolo para a impressão 3D embutida em forma livre de células-tronco neurais dentro de compósitos de matriz extracelular com partículas revencíveis auto-reparáveis. O protocolo permite a padronização programável de construções de tecido neural humano interconectadas com alta fidelidade.

Suporte composto de matriz extracelular microgel para impressão 3D incorporada de construções neurais humanas

Apresentamos um protocolo para produção de alto rendimento de canais vasculares com tamanhos flexíveis e padrões desejados em uma placa padrão de seis poços usando a tecnologia de bioimpressão 3D, conhecida como vasos em uma placa (VOP). Esta plataforma tem o potencial de avançar no desenvolvimento de terapêuticas para os distúrbios associados ao endotélio comprometido.

Método de bioimpressão de alto rendimento para modelagem da permeabilidade vascular em placas padrão de seis poços com flexibilidade de tamanho e padrão

Aprenda a fabricar andaimes bioimpressos em 3D com bainha central para liberação controlada de vesículas extracelulares no tratamento de feridas crônicas. Este método melhora a cicatrização tecidual.

Otimizando a entrega de vesículas extracelulares usando um andaime bioimpresso em 3D com bainha central para tratamento de feridas crônicas (Vídeo) | JoVE Journal

Otimizando a entrega de vesículas extracelulares usando um andaime bioimpresso em 3D com bainha central para tratamento de feridas crônicas

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