Name: Reconstituição individualizada da microbiota do leite humano: uma abordagem viável em ambientes do mundo real (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 16 s
Description: Aprenda a reconstituir a microbiota individualizada do leite humano pasteurizado usando leite materno próprio. Este protocolo viável melhora o perfil nutricional para recém-nascidos em bancos de leite.

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<meta charset="utf8"></head><body>Restaurando a microbiota do leite doado pasteurizado usando o próprio leite materno

<ol><li>Szyller, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioactive+components+of+human+milk+and+their+impact+on+child%27s+health+and+development%2C+Literature+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">Bioactive components of human milk and their impact on child's health and development, Literature Review.</a> Nutrients. 16 (10), 1487(2024).</li>
<li>Fernández, L., Rodríguez, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+milk+microbiota%3A+Origin+and+potential+uses%5BTitle%5D)+AND+%22Nestle+Nutr+Inst+Workshop+Ser%22%5BJournal%5D)">Human milk microbiota: Origin and potential uses.</a> Nestle Nutr Inst Workshop Ser. 94, 75-85 (2020).</li>
<li>Fernández, L., Ruiz, L., Jara, J., Orgaz, B., Rodríguez, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategies+for+the+preservation%2C+restoration+and+modulation+of+the+human+milk+microbiota.+Implications+for+human+milk+banks+and+neonatal+intensive+care+units%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Strategies for the preservation, restoration and modulation of the human milk microbiota. Implications for human milk banks and neonatal intensive care units.</a> Front Microbiol. 9, 2676(2018).</li>
<li>Meier, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((More+evidence%3A+Mothers%27+own+milk+is+personalized+medicine+for+very+low+birthweight+infants%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep+Med%22%5BJournal%5D)">More evidence: Mothers' own milk is personalized medicine for very low birthweight infants.</a> Cell Rep Med. 3 (8), 100710(2022).</li>
<li>Fewtrell, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+expressed+breast+milk+volume+in+mothers+expressing+milk+for+their+preterm+infant%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Dis+Child+Fetal+Neonatal+Ed%22%5BJournal%5D)">Predictors of expressed breast milk volume in mothers expressing milk for their preterm infant.</a> Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 101 (6), F502-F506 (2016).</li>
<li>Abrams, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donor+human+milk+for+the+high-risk+infant%3A+Preparation%2C+safety%2C+and+usage+options+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Donor human milk for the high-risk infant: Preparation, safety, and usage options in the United States.</a> Pediatrics. 139 (1), e20163440(2017).</li>
<li>Brasil é referência em doação de leite materno. , Serviços e Informações do Brasil. At
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<li>Landers, S., Updegrove, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacteriological+screening+of+donor+human+milk+before+and+after+holder+pasteurization%5BTitle%5D)+AND+%22Breastfeed+Med%22%5BJournal%5D)">Bacteriological screening of donor human milk before and after holder pasteurization.</a> Breastfeed Med. 5 (3), 117-121 (2010).</li>
<li>Cacho, N. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Personalization+of+the+microbiota+of+donor+human+milk+with+mother%27s+own+milk%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Personalization of the microbiota of donor human milk with mother's own milk.</a> Front Microbiol. 8, 1470(2017).</li>
<li>Pumping breast milk. , Centers for Disease Control and Prevention - CDC. 
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<li>Expressing and storing breast milk. , NHS UK. 
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<li>Arslanoglu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+the+establishment+and+operation+of+a+donor+human+milk+bank%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr+Rev%22%5BJournal%5D)">Recommendations for the establishment and operation of a donor human milk bank.</a> Nutr Rev. 81 (Supplement_1), 1-28 (2023).</li>
<li>Moro, G. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Processing+of+donor+human+milk%3A+Update+and+recommendations+from+the+European+Milk+Bank+Association+%28EMBA%29%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pediatr%22%5BJournal%5D)">Processing of donor human milk: Update and recommendations from the European Milk Bank Association (EMBA).</a> Front Pediatr. 7, 49(2019).</li>
<li>Landers, S., Hartmann, B. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donor+human+milk+banking+and+the+emergence+of+milk+sharing%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Clin+North+Am%22%5BJournal%5D)">Donor human milk banking and the emergence of milk sharing.</a> Pediatr Clin North Am. 60 (1), 247-260 (2013).</li>
<li>Stachelska, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+Lactobacillus+delbrueckii+and+Streptococcus+thermophilus+strains+present+in+artisanal+raw+cow+milk+cheese+using+real-time+PCR+and+classic+plate+count+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Pol+J+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Identification of Lactobacillus delbrueckii and Streptococcus thermophilus strains present in artisanal raw cow milk cheese using real-time PCR and classic plate count methods.</a> Pol J Microbiol. 66 (4), 491-499 (2017).</li>
<li>Ruiz, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+two+approaches+for+the+metataxonomic+analysis+of+the+human+milk+microbiome%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Comparison of two approaches for the metataxonomic analysis of the human milk microbiome.</a> Front Cell Infect Microbiol. 11, 622550(2021).</li>
<li>Lopez Leyva, L., Brereton, N. J. B., Koski, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+frontiers+in+human+milk+microbiome+research+and+suggested+primers+for+16S+rRNA+gene+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Struct+Biotechnol+J%22%5BJournal%5D)">Emerging frontiers in human milk microbiome research and suggested primers for 16S rRNA gene analysis.</a> Comp Struct Biotechnol J. 19, 121-133 (2021).</li>
<li>Bolger, A. M., Lohse, M., Usadel, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trimmomatic%3A+A+flexible+trimmer+for+Illumina+sequence+data%5BTitle%5D)+AND+%22Bioinformatics%22%5BJournal%5D)">Trimmomatic: A flexible trimmer for Illumina sequence data.</a> Bioinformatics. 30 (15), 2114-2120 (2014).</li>
<li>Bolyen, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((interactive%2C+scalable+and+extensible+microbiome+data+science+using+QIIME+2%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">interactive, scalable and extensible microbiome data science using QIIME 2.</a> Nat Biotechnol. 37 (8), 852-857 (2019).</li>
<li>McMurdie, P. J., Holmes, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((phyloseq%3A+An+R+package+for+reproducible+iInteractive+analysis+and+graphics+of+microbiome+census+data%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">phyloseq: An R package for reproducible iInteractive analysis and graphics of microbiome census data.</a> PLoS ONE. 8 (4), e61217(2013).</li>
<li>R Core Team. R: A language and environment for statistical computing. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22R+Foundation+for+Statistical+Computing%22">R Foundation for Statistical Computing</a>. , R Foundation for Statistical Computing. Vienna, Austria. https://www.R-project.org/ (2024).</li>
<li>Torrez Lamberti, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolomic+profile+of+personalized+donor+human+milk%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Metabolomic profile of personalized donor human milk.</a> Molecules. 25 (24), 5783(2020).</li>
<li>Mallardi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inoculation+of+mother%27s+own+milk+could+personalize+pasteurized+donor+human+milk+used+for+feeding+preterm+infants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Inoculation of mother's own milk could personalize pasteurized donor human milk used for feeding preterm infants.</a> J Transl Med. 19 (1), 420(2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Bomba elétrica para leite materno</td><td>Horigen</td><td>XN-2219M2</td><td>Bomba macia dual plus</td></tr><tr><td>Pyrex&nbsp; garrafas de mídia</td><td>Corning&nbsp;</td><td>CLS1395100</td><td>Recipientes de vidro com tampas de plástico&nbsp;</td></tr><tr><td>1000 &micro; Pipeta L Labmate pro</td><td>Corning HTL SA&nbsp; &nbsp;</td><td>5666</td><td>Pipetador de volume variável&nbsp;</td></tr><tr><td>Frasco criogênico&nbsp;</td><td>Corning&nbsp;</td><td>CLS431417</td><td>Frascos de 2 mL sem DNase/RNase&nbsp;</td></tr><tr><td>Tubos de centrífuga de 15 mL Corning</td><td>&nbsp;</td><td>CLS431470</td><td>Tubos de 15 mL sem DNase/RNase&nbsp;</td></tr><tr><td>Banho-maria</td><td>EcoSonics</td><td>Q3.0/40A</td><td></td></tr><tr><td>Man&ndash; Rogosa&ndash; Sharpe (MRS)&nbsp;</td><td>Difco</td><td>288210</td><td>Meio de crescimento de bactérias lácticas</td></tr><tr><td>Ágar Sal de Manitol (MSA)</td><td>Himedia</td><td>MH118</td><td>Staphylococcus&nbsp; Meio de crescimento</td></tr><tr><td>Anaeróbico</td><td>Jar Permution</td><td></td><td>Crie um ambiente de baixo oxigênio para o crescimento de bactérias lácticas</td></tr><tr><td>Extraa&nbsp; Kit - DNA e RNA</td><td>Loccus</td><td>MPTA-PV16-B Y</td><td>Kit de extração de DNA</td></tr><tr><td>Nanodrop</td><td>Promega</td><td>E6150</td><td>Quantus DNA</td></tr><tr><td>GoTaqG2</td><td>Promega</td><td>M7841</td><td>Sistema de amplicação de PCR</td></tr><tr><td>Quórmetro</td><td>Promega</td><td>E5150</td><td>Kit de quantificação de DNA / RNA</td></tr><tr><td>MiSeq System</td><td>Illumina Inc.</td><td>M-GL-00006 v4.0</td><td>Equipamento de sequenciamento</td></tr><tr><td>Kit de reagentes MiSeq v2 (300 ciclos)</td><td>Illumina Inc.</td><td>MS-102-2002</td><td>Kits e reagentes de sequenciamento</td></tr><tr><td>Nome do software&nbsp; </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Trimmomatic</td><td>http://www.usadellab.org/cms/index.php?page=trimmomatic</td><td></td><td>Ferramenta de corte de leitura para dados Illumina NGS</td></tr><tr><td>QIIME 2&nbsp;</td><td>https://docs.qiime2.org/2024.10/</td><td></td> <td>Pacote de análise de microbioma&nbsp;</td></tr><tr><td>Nome do primer</td><td>Sequência do primer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>16S_357F&nbsp;</td><td>TCGTCGGCAGCGTCAGA TGTGTATAAGAGACAGC CTACGGGNGGCWGCAG</td><td></td><td></td></tr><tr><td>16S_805R</td><td>GTCTCGTGGGCTCGGAG ATGTGTATAAGAGACAGG ACTACHVGGGTATCTAATC</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

reconstituição individualizada da microbiota do leite humano: uma abordagem viável em ambientes do mundo real

Individualized Reconstitution of Human Milk Microbiota: A Feasible Approach in Real-World Settings

Análise do crescimento bacteriano por cultura em placas Os testes microbiológicos realizados para validar o método de inoculação do PDM com o MOM, conforme proposto por Cacho et al.9, demonstraram que, com base na contagem de UFC/mL, não houve diferenças significativas entre as amostras de leite inoculadas antes e após a incubação de 4 h. No entanto, diferenças no número de colônias foram observadas nesses dois momentos, indicando crescimento bacteriano durante a incubação em M...

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Mother&#39;s own milk (MOM) is the most complete nutritional resource for newborns. In cases where mothers are unable to produce sufficient milk or cannot ...

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Um protocolo de produção é descrito para a produção em pequena escala de bebida láctea fermentada probiótica com o auxílio de uma nova cultura bacteriana inicial.

Protocolo de Produção da novela para em pequena escala Fabricação de alimentos fermentados probióticos

Este protocolo descreve como estabelecer um sistema de cultura de enteroid de rato neonatal ou intestino humano prematuro, bem como um método eficiente para coletar leite de ratos.

O leite materno aumenta o crescimento de Enteroids: um modelo Ex Vivo da proliferação celular

Um fluxo de trabalho semi-automático é apresentado para sequenciamento alvo de 16S rRNA de leite humano e outros tipos de amostras de biomassa de baixo.

Um método para o sequenciamento de alvo 16S das amostras de leite humano

Aqui, apresentamos um protocolo para cultivo a microbiota do intestino do cólon in vitro, usando uma série de biorreatores que simulam as condições fisiológicas do tracto gastro-intestinal.

Aplicação avançada em Vitro cultivo tecnologia para estudar a Microbiota do intestino humano

Este protocolo descreve um sistema de fermentação em lote-cultura in vitro de microbiota fecal humana, utilizando inulina (um prebiótico bem conhecido e um dos moduladores de microbiota mais amplamente estudados) para demonstrar o uso deste sistema na estimativa de efeitos de intervenções sobre a composição da microbiota fecal e atividades metabólicas.

Um modelo de cultura em lote in vitro para estimar os efeitos dos regimes intervencionistas na microbiota fecal humana

Este protocolo foi projetado para agilizar e permitir o isolamento eficaz de vesículas extracelulares do leite materno humano com alta pureza.

Isolamento rápido de vesículas extracelulares derivadas do leite materno humano

Este protocolo descreve as melhores práticas para transferência e alojamento de camundongos livres de germes em isoladores experimentais de gaiola única (isocages), mantendo condições estéreis. Métodos para transplante fecal em camundongos livres de germes e a coleta de bactérias viáveis desses camundongos "humanizados" intestinais para outras aplicações são discutidos.

Preparação e Manutenção do Experimento de Gaiola IsoPositivo de Bioexclusão para Transplante Fecal Humano em Camundongos Livres de Germes

O Minibioreactor Array (MBRA) é um sistema de cultura de fluxo contínuo, personalizável e de alto rendimento que permite o cultivo de comunidades microbianas complexas, apoiando experimentos paralelos para estudar a dinâmica do microbioma, interações terapêuticas e respostas microbianas a fatores ambientais.

Protocolo atualizado para montagem e uso do arranjo de minibiorreatores (MBRA)

Este protocolo permite uma avaliação rápida e econômica da composição microbiana em produtos lácteos, combinando culturomics com MALDI-TOF MS. Ele fornece resultados de taxonomia comparáveis ao sequenciamento de rRNA 16S com um tempo de resposta mais curto do que os métodos tradicionais de cultura.

Avaliação da segurança microbiana de laticínios usando perfil proteômico bacteriano via abordagem MALDI

A reabilitação pulmonar é amplamente reconhecida no tratamento de doenças respiratórias. Um componente-chave para a reabilitação pulmonar bem sucedida é a aderência ao treinamento físico recomendado. O objetivo do presente protocolo é descrever como a tecnologia de rastreamento de dados contínua pode ser usado para medir com precisão a adesão a uma intensidade de treinamento aeróbio prescrito.

Usando a tecnologia de rastreamento de dados contínua para Estudar Exercício Aderência em Reabilitação Pulmonar

Aprenda a reconstituir a microbiota individualizada do leite humano pasteurizado usando leite materno próprio. Este protocolo viável melhora o perfil nutricional para recém-nascidos em bancos de leite.

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