Name: Manejo da Gravidez e Amamentação para Coelhos Transferidos com Embriões e Geneticamente Modificados (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-12-13T14:50:00.000+00:00
Duration: 4 min 29 s
Description: Aprenda técnicas de manejo da gestação e amamentação para coelhos geneticamente modificados e transferidos com embriões. Este método reduz a mortalidade dos filhotes e melhora a eficiência na preparação de coelhos editados geneticamente para pesquisa.

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<li>Deng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+disrupted+balance+between+hair+follicles+and+sebaceous+glands+in+Hoxc13-ablated+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Faseb+j%22%5BJournal%5D)">The disrupted balance between hair follicles and sebaceous glands in Hoxc13-ablated rabbits.</a> Faseb j. 33 (1), 1226-1234 (2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Algodão artificial</td><td>Yangzhou Anguang Textile Co., Ltd, China</td><td>5490-Jinyu</td><td></td></tr><tr><td>Cloprostenol Injeção de Sódio</td><td>Shanghai Quanyu Biotechnology (Zhumadian) Animal Pharmaceutical Co., Ltd, China</td><td>163232207</td><td></td></tr><tr><td>Grânulos de espiga de milho</td><td>Centro de Animais de Laboratório Médico Provincial de Guangdong, China</td><td>YUMIXIN</td><td></td></tr><tr><td>Balança</td> <td>de plataforma eletrônicaYongkang Runjin instrumento de pesagem Co., Ltd, China</td><td>rj-09</td><td></td></tr><tr><td>Gentamicina</td><td>Shanxi Jinfukang Biological Pharmaceutical Co., Ltd, China</td><td>041531504</td><td></td></tr><tr><td>injeção de glicose</td><td>Henan Kelun Pharmaceutical Co., Ltd, China</td><td>Incubadora H41022251</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Foshan Chancheng Hualong Plastic Factory, China</td><td>AAA-2</td><td>Para coelhos recém-nascidos</td></tr><tr><td>Caixa da incubadora&nbsp;</td><td>Hebei mabao wire mesh products Co., Ltd., China</td><td>https://qr.1688.com/s/AJ1K7O3p</td><td>Como um ninho para os coelhos mãe</td></tr><tr><td>Inslin Seringa</td><td>Becton, Dickinson and Company, EUA</td><td>Ultra-Fine, 328421</td><td></td></tr><tr><td>Injeção de ocitocina</td><td>Guangzhou Baiyunshan Mingxing Pharmaceutical Co., Ltd</td><td>H44025245</td><td></td></tr><tr><td>Injeção de penicilina</td><td>Guangdong Kangtaiyuan Animal Husbandry Co., Ltd, China</td><td></td><td></td>Gaiola</tr> de <tr><td>entrega de coelho</td> 300012430 <td>Suzhou Suhang Technology Equipment Co., Ltd., Suzhou, China</td><td>RB42-8G</td><td></td></tr><tr><td>Toalha</td><td>Zhejiang Jieliya Co., Ltd, China</td><td>W3290</td><td></td></tr></tbody></table>

manejo da gravidez e amamentação para coelhos transferidos com embriões e geneticamente modificados

Pregnancy and Nursing Management for Embryo-Transferred and Genetically Modified Rabbits

Este artigo descreve um procedimento de manejo da gestação e da alimentação de coelhos transferidos por embriões e geneticamente modificados. No final de 2022, o laboratório do autor iniciou o desenvolvimento de uma plataforma de preparação para coelhos geneticamente modificados. Durante este período, vários problemas comuns foram encontrados, incluindo aborto, falha no parto a termo, distocia, falha em arrancar o cabelo para a preparação do ninho antes do parto, relutância das coelhas em amamentar ou incidentes de canibalismo, leite materno insuficiente devido ao grande tamanho da ninhada e coelhos bebês que não bebem leite. Esses desafios reduziram significativamente a eficiência reprodutiva de coelhos modificados por genes.
Resumindo experiências e aprendendo com essas questões, foi desenvolvido um protocolo de gerenciamento de gravidez e amamentação para coelhos transferidos de embriões e geneticamente modificados (Figura 3). Este protocolo melhorou substancialmente a taxa de sobrevivência de coelhos recém-nascidos e reduziu a mortalidade durante a lactação (Tabela 1). Para a maioria dos casos, exceto para modelos específicos de doenças geneticamente modificadas com fenótipos de doenças genéticas pós-natais graves que levam a taxas de mortalidade mais altas, essa abordagem provou ser eficaz e aceitável.
Atualmente, o laboratório do autor fez a transição dos métodos tradicionais de parto natural e nutrição para o recém-estabelecido modelo de gerenciamento de gravidez e amamentação. Até o momento, esse método facilitou a criação bem-sucedida de mais de dez novas variedades de coelhos geneticamente modificados, resultando na produção de numerosos descendentes. Embora essa abordagem aumente a carga de trabalho, ela é altamente eficaz. A Figura 4 ilustra um exemplo da vida real de criação de descendentes de coelhos modificados pelo gene MKRN3, mostrando o processo desde o nascimento até o desmame.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67793/67793fig01.jpg"> 
Figura 1: Arranjo das incubadoras de coelhos bebês. Etapas envolvidas na preparação de uma incubadora para coelhos bebês: (1) Preparação da incubadora; (2) Preenchimento; (3) Estender uma toalha; (4) Adição de algodão artificial; (5) Colocar o coelho bebê dentro; (6) Anexar o cartão de informações. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67793/67793fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67793/67793fig02.jpg"> 
Figura 2: Aleitamento materno assistido para coelhos bebês. (A) Alimentação de coelhos bebês de 1-2 dias de idade. (B) Alimentação de coelhos bebês com mais de 2 dias de idade. (C) Comparação do abdômen de filhotes de coelho antes e depois da alimentação, mostrando protuberância perceptível e leite materno branco visível no estômago (indicado pelo círculo vermelho). (D) Excreção de mecônio do trato gastrointestinal dentro de 3 dias após o nascimento (indicado pela seta vermelha). O períneo requer limpeza regular com uma bola de algodão úmida (indicada pela seta amarela). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67793/67793fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67793/67793fig03.jpg"> 
Figura 3: Processo de gerenciamento de gravidez e amamentação para coelhos transferidos de embriões e geneticamente modificados. Etapas do processo de manejo: Diagnóstico da gravidez; Assistência pré-natal; Obstetrícia; Cuidados pós-parto; Ablactation. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67793/67793fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67793/67793fig04.jpg"> 
Figura 4: Crescimento e desenvolvimento de coelhos geneticamente modificados desde o nascimento até a ablactação. (A) Imagens de coelhos bebês de 1 a 8 dias de idade. (B) Coelhos bebês de quinze dias, com a mãe coelho à esquerda e os coelhos bebês à direita. (C) Coelhos jovens desmamados de trinta e cinco dias de idade. (D) Curva de crescimento de coelhos bebês nas primeiras três semanas após o nascimento. Os coelhos bebês eram da mesma ninhada: ID1, ID2 e ID3 representam coelhos modificados pelo gene mkrn3 , enquanto ID4, ID5 e ID6 representam coelhos do tipo selvagem. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67793/67793fig04large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td>Parto natural tradicional e carinho</td>
			<td>Gestão da gravidez e da amamentação</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O número de coelhos recém-nascidos (8 ninhadas)</td>
			<td>68</td>
			<td>71</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O número de coelhos recém-nascidos sobreviventes</td>
			<td>42</td>
			<td>66</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O número de coelhos desmamados sobreviventes</td>
			<td>29</td>
			<td>63</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taxa de sobrevivência ao nascer (= coelhos recém-nascidos / coelhos recém-nascidos sobreviventes × 100%)</td>
			<td>61.80%</td>
			<td>93.00%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taxa de sobrevivência ao desmame (= coelhos desmamados sobreviventes / coelhos recém-nascidos × 100%)</td>
			<td>69.00%</td>
			<td>95.50%</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 1: Sobrevivência de filhotes de coelho sob diferentes modos de manejo reprodutivo. Uma comparação das taxas de sobrevivência de filhotes de coelho em várias estratégias de manejo reprodutivo.

Manejo da Gravidez e Amamentação para Coelhos Transferidos com Embriões e Geneticamente Modificados

With the advancement of scientific research, the demand for gene-edited rabbit models is increasing. However, there are limited pregnancy and feeding ...

Descrevemos uma técnica de gerenciamento de gravidez e amamentação para coelhos transferidos por embriões e coelhos geneticamente modificados com o objetivo de reduzir a taxa de mortalidade de coelhos bebês e aumentar o efeito de preparação de coelhos editados por genes. Muitas vezes é difícil para um iniciante preparar com sucesso o coelho editado por genes, e muitas vezes eles encontram problemas desagradáveis como baixa taxa de gravidez, aborto, parto difícil. A mãe coelha se recusa a amamentar, e muitas vezes morre de coelho bebê.Em comparação com o método tradicional de parto natural e nutrição usado em fazendas de coelhos, essa abordagem envolve um manejo mais refinado, exigindo tempo e esforço adicionais, mas aumentando significativamente a taxa de sobrevivência de coelhos recém-nascidos. Para começar, obtenha um coelho que tenha recebido embriões por meio de um procedimento de transferência. Segure a pele do pescoço atrás das orelhas do coelho com uma mão e posicione suas nádegas para a frente em direção à cavidade abdominal.Com a outra mão, palpe suavemente a parte posterior do abdômen para detectar sinais de gravidez. No 25º dia após a transferência do embrião, fixe uma incubadora em um lado da gaiola de parto e coloque toalhas, aparas ou pedaços de papel dentro para criar um ninho para a coelha grávida. Forneça ração adequada e água potável na gaiola e mova suavemente a coelha grávida para a gaiola de parto preparada.Então, no 30º dia de gravidez, segure a pele do pescoço do coelho atrás das orelhas com uma mão e posicione as nádegas do coelho para a frente em direção à cavidade abdominal. Use a outra mão para palpar suavemente a parte posterior do abdômen para avaliar a condição dos fetos. Se a coelha grávida concebeu apenas um a dois fetos, injete 0,02 miligramas de cloprostenol por via intramuscular às 17:00 para induzir o parto no dia seguinte.Se o coelho apresentar sinais de parto, como inquietação, respiração rápida, dilatação vascular da orelha ou comportamento de nidificação, injete 10 unidades de ocitocina por via intramuscular para induzir o parto. Em seguida, organize e prepare a incubadora. Adicione estofamento absorvente estéril, como grânulos de espiga de milho, à incubadora.Estenda uma toalha como tapete e cubra-a com algodão artificial. Limpe rapidamente o muco do coelho recém-nascido com uma toalha para garantir uma respiração suave e coloque o coelho limpo na incubadora. Anote o número de descendentes depois de limpá-los todos.Após o parto, usando algodão embebido em álcool, limpe todos os mamilos da coelha antes da primeira mamada. Massageie suavemente cada mamilo e esprema a primeira gota de leite. Coloque a coelha mãe em uma esteira em posição lateral ou deitada e guie os coelhos bebês de um a dois dias, um a um, até os mamilos para sugar o leite.No segundo dia após o nascimento, marque as costas de cada coelho bebê usando uma caneta marcadora. Para alimentar os coelhos bebês com mais de dois dias de idade, coloque a coelha mãe na incubadora para amamentar de forma independente. Depois que os coelhos abrirem os olhos com cerca de duas semanas de idade, leve-os para uma gaiola forrada com uma toalha.Depois de separar a coelha mãe dos coelhos jovens, abra o defletor uma vez ao dia para amamentar. Permita que a coelha beba e coma livremente durante a lactação e ofereça-lhe ração verde apropriada para garantir uma nutrição adequada.

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Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Este vídeo demonstra a geração de um modelo de câncer de endométrio em coelho injetando uma suspensão de células VX2 altamente metastática nos cornos uterinos suturados do coelho. Isso leva à geração de câncer de endométrio primário com metástases linfonodais retroperitoneais.

Modelo de modelagem de câncer de endométrio metastático: uma técnica para gerar câncer de endométrio com metástase linfonodal em modelos de coelhos

Este vídeo descreve a técnica de transferência de embriões para o oviduto de uma coelha receptora por meio de laparoscopia. Permite a remodelação embrionária em coelhos durante sua migração através do oviduto, eventualmente ajudando na implantação bem-sucedida. Esta técnica também pode ser usada para embriões armazenados com boa eficiência.

Transferência de embriões para coelhos: um procedimento para transferência de embriões guiada por laparoscopia para oviduto de modelo de coelho fêmea receptora ovulante

Descrevemos exame da função cardíaca fetal com a ecocardiografia fetal funcional contemporânea e fetoplacentária Doppler usando o VisualSonics VEVO 2100 microultrasound em um modelo induzido cirurgicamente de restrição do crescimento fetal intra-uterino em um coelho.

Ecocardiografia fetal e ultra-som Doppler pulsátil em um modelo de coelho de restrição do crescimento intra-uterino

Desenvolvimento recente no gene ferramentas que visam torna a produção de knockout (KO) coelhos possível. No presente trabalho, geramos cinco coelhos apolipoproteína (Apo) C-III KO usando Nucleases dedo de zinco (ZFN). Este trabalho demonstrou que ZFN é um método altamente eficiente para a produção de coelhos KO.

Produção de Coelhos Knockout apolipoproteína C-III, utilizando zinco Nucleases dedo

Aqui, descrevemos uma técnica para a entrega localizada de reagentes na glândula mamária de coelho por meio de uma injeção intraductal. Além disso, descrevemos um protocolo para visualização e confirmação da entrega por ultrassonografia de alta resolução de agentes de contraste.

Entrega Intraductal ao Coelho glândula mamária

Este método é introduzir um transgene no endotélio de artérias carótidas de coelho. Introdução do transgene permite a avaliação da função biológica do produto do transgene em artérias normais ou modelos de doença. O método também é útil para medir a atividade de sequências reguladoras de DNA.

Na Vivo Transferência de genes para o endotélio da artéria carótida comum de coelho

As técnicas reprodutivas assistidas (ARTs) estão em avaliação contínua para melhorar os resultados e reduzir os riscos associados. Este manuscrito descreve um procedimento de transferência de embriões minimamente invasivo com um protocolo de criopreservação eficiente que permite o uso de coelhos como um modelo animal ideal de reprodução humana.

Transferência de embriões minimamente invasivos e vitrificação embrionária na fase de embrião ideal em modelo de coelho

Este artigo descreve e demonstra a administração de vacinas intranasais e a coleta de leite de coelhos lactadores (Oryctolagus cuniculus) como forma de avaliar a imunidade mucosa em um modelo translacionalmente apropriado de imunização materna.

Imunização Intranasal e Coleta de Leite em Estudos de Imunização Materna em Coelhos Brancos da Nova Zelândia (Oryctolagus cuniculus)

Os mecanismos de morte súbita inesperada na epilepsia (SUDEP) são pouco compreendidos e difíceis de traduzir a partir dos modelos atuais. Coelhos transgênicos podem oferecer informações sobre esses mecanismos. Descrevemos um método para eletroencefalografia contínua de longo prazo e registros eletrocardiográficos em kits de coelhos transgênicos para avaliar eventos graves que podem levar à morte.

Implante de Eletroencefalograma e Telecardiograma em Kits Neonatais para Coelhos

Este protocolo apresenta um procedimento para infusão guiada por imagem no sistema da árvore ductal da glândula mamária de coelho. Demonstramos a infusão controlada de uma solução ablativa à base de etanol contendo agente de contraste de raios-X em todas as aberturas dos tetos por fluoroscopia em tempo real.

Visualização de raios-X de infusão ablativa intraductal à base de etanol para prevenção do câncer de mama em modelos de coelhos

Aprenda técnicas de manejo da gestação e amamentação para coelhos geneticamente modificados e transferidos com embriões. Este método reduz a mortalidade dos filhotes e melhora a eficiência na preparação de coelhos editados geneticamente para pesquisa.

Manejo da Gravidez e Amamentação para Coelhos Transferidos com Embriões e Geneticamente Modificados

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