Name: Imagens de células vivas com fotografia de lapso de tempo para estudar a cinética de proliferação de queratinócitos epidérmicos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T13:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 21 s
Description: Aprenda a usar imagens de células vivas com lapso de tempo para rastrear linhagens de queratinócitos epidérmicos e coletar métricas de proliferação. Este método permite estudar doenças hiper e hipoproliferativas como psoríase.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Mateu, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+differences+between+neonatal+and+adult+fibroblasts+and+keratinocytes%3A+Donor+age+affects+epithelial-mesenchymal+crosstalk+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Functional differences between neonatal and adult fibroblasts and keratinocytes: Donor age affects epithelial-mesenchymal crosstalk in vitro.</a> Int J Mol Med. 38 (4), 1063-1074 (2016).</li>
<li>Handl, J., Čapek, J., Majtnerová, P., Báčová, J., Roušar, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+repeated+passaging+on+the+susceptibility+of+human+proximal+tubular+HK-2+cells+to+toxic+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Res%22%5BJournal%5D)">The effect of repeated passaging on the susceptibility of human proximal tubular HK-2 cells to toxic compounds.</a> Physiol Res. 69 (4), 731-738 (2020).</li>
<li>Moran, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+human+keratinocyte+cell+lines+for+barrier+studies%5BTitle%5D)+AND+%22JID+Innov%22%5BJournal%5D)">Characterization of human keratinocyte cell lines for barrier studies.</a> JID Innov. 1 (2), 100018(2021).</li>
<li>Seo, M. -D., Kang, T. J., Lee, C. H., Lee, A. -Y., Noh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HaCaT+keratinocytes+and+primary+epidermal+keratinocytes+have+different+transcriptional+profiles+of+cornified+envelope-associated+genes+to+T+helper+cell+cytokines%5BTitle%5D)+AND+%22Biomol+Ther%22%5BJournal%5D)">HaCaT keratinocytes and primary epidermal keratinocytes have different transcriptional profiles of cornified envelope-associated genes to T helper cell cytokines.</a> Biomol Ther. 20 (2), 171-176 (2012).</li>
<li>Jahn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+immortalized+keratinocyte+cell+lines+display+distinct+capabilities+to+differentiate+and+reconstitute+an+epidermis+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Different immortalized keratinocyte cell lines display distinct capabilities to differentiate and reconstitute an epidermis in vitro.</a> Exp Dermatol. 33 (1), e14985(2024).</li>
<li>Xiao, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+cell+cycle+duration+is+a+phenotype+of+human+epidermal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Short cell cycle duration is a phenotype of human epidermal stem cells.</a> Stem Cell Res Ther. 15 (1), 76(2024).</li>
<li>Hirose, T., Kotoku, J., Toki, F., Nishimura, E. K., Nanba, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+quality+control+and+identification+of+human+keratinocyte+stem+cells+by+deep+learning-based+automated+cell+tracking%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Label-free quality control and identification of human keratinocyte stem cells by deep learning-based automated cell tracking.</a> Stem Cells. 39 (8), 1091-1100 (2021).</li>
<li>Roshan, A., Murai, K., Fowler, J., Simons, B. D., Nikolaidou-Neokosmidou, V., Jones, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+keratinocytes+have+two+interconvertible+modes+of+proliferation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Human keratinocytes have two interconvertible modes of proliferation.</a> Nat Cell Biol. 18 (2), 145-156 (2016).</li>
<li>Abegaze, B., Ijeh, N., Vittimberga, B., Ghadially, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generating+primary+cultures+for+the+purpose+of+keratinocyte+live+cell+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Generating primary cultures for the purpose of keratinocyte live cell imaging.</a> J Vis Exp. , In Press (2024).</li>
<li>Piedrafita, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single-progenitor+model+as+the+unifying+paradigm+of+epidermal+and+esophageal+epithelial+maintenance+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A single-progenitor model as the unifying paradigm of epidermal and esophageal epithelial maintenance in mice.</a> Nat Commun. 11 (1), 1429(2020).</li>
<li>Ścieżyńska, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+culture+of+human+primary+keratinocytes-a+methods+review%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Isolation and culture of human primary keratinocytes-a methods review.</a> Exp Dermatol. 28 (2), 107-112 (2019).</li>
<li>Mansoury, M., Hamed, M., Karmustaji, R., Al Hannan, F., Safrany, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+edge+effect%3A+A+global+problem.+The+trouble+with+culturing+cells+in+96-well+plates%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Rep%22%5BJournal%5D)">The edge effect: A global problem. The trouble with culturing cells in 96-well plates.</a> Biochem Biophys Rep. 26, 100987(2021).</li>
<li>Malin-Mayor, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+reconstruction+of+whole-embryo+cell+lineages+by+learning+from+sparse+annotations%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Automated reconstruction of whole-embryo cell lineages by learning from sparse annotations.</a> Nat Biotechnol. 41 (1), 44-49 (2023).</li>
<li>Waliman, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+cell+lineage+reconstruction+using+label-free+4D+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Automated cell lineage reconstruction using label-free 4D microscopy.</a> Genetics. 228 (2), iyae135(2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Placa de Imagelock de 96 Poços</td><td>Sartorius</td><td>BA-04856</td><td>Sugeri microplaca compatível com máquina se estiver usando uma placa de 96 poços.</td></tr><tr><td>Placa de 24 poços</td><td>Corning</td><td>3524</td><td>Sugero microplacas compatíveis com máquina se estiver usando uma placa de 24 poços.</td></tr><tr><td>Anfotericina B, 50 mL</td><td>Corning</td><td>30-003-CF</td><td>Dilua para 5x (vem em 100x original) para 5x PSA - 1x para trocas de mídia</td></tr><tr><td>Epilife, 50 mL</td><td>Gibco</td><td>MEP1500CA</td><td>Adicione a S7, considere a primocin</td></tr><tr><td>IncuCyte S3</td><td>Sartorius</td><td>4637</td><td>Imager (alternativas aceitáveis para Zoom/SX5)</td></tr><tr><td>Penicilina/Estreptomicina, 100 mL</td><td>Corning</td><td>30-002-CL</td><td>Diluir para 5x (vem em 100x de estoque)</td></tr><tr><td>Primocin</td><td>Invivogen</td><td>ANT-PM-05</td><td>1 mL por meio de 500 mL</td></tr><tr><td>Suplemento S7</td><td>Gibco</td><td>S0175</td><td>Adicionado à epivida</td></tr></tbody></table>

imagens de células vivas com fotografia de lapso de tempo para estudar a cinética de proliferação de queratinócitos epidérmicos

Live Cell Imaging with Time Lapse Photography to Study Epidermal Keratinocyte Proliferation Kinetics

Imagens de células vivas com fotografia de lapso de tempo para estudar a cinética de proliferação de queratinócitos epidérmicos

Live-cell imaging is an evolving and somewhat challenging method to study keratinocyte behavior in vitro. Historically, keratinocyte division behavior was ...

live-cell-imaging-with-time-lapse-photography-to-study-epidermal

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Bioquímica

Imagem tecido embrionário em tempo real, é um desafio durante longos períodos de tempo. Aqui nós apresentamos um ensaio para o monitoramento das alterações celulares e sub-celular na medula espinhal pinto por longos períodos com resolução espacial e temporal. Esta técnica pode ser adaptado para outras regiões do sistema nervoso e embrião em desenvolvimento.

De alta resolução de imagem ao vivo de comportamento de células no desenvolvimento neuroepitélio

Nós descrevemos um protocolo com lâminas de câmara e de mídia para imobilizar cotilédones de plantas para imagem confocal da epiderme durante vários dias de desenvolvimento, documentação diferenciação estomática. Proteínas fluoróforo com a tag pode ser monitorado de forma dinâmica por expressão e localização subcelular, aumentando a compreensão de seus possíveis papéis durante a divisão celular e diferenciação do tipo de célula.

Longo prazo, de alta resolução de imagem Lapse Confocal Tempo de<em&gt; Cotilédone Arabidopsis</em&gt; Epiderme durante a germinação

Lapso de tempo de imagem é utilizado para avaliar o comportamento dos principais pré-neoplásicas células epiteliais mamárias derivados de modelos de ratos geneticamente modificados de risco de câncer de mama para determinar se há correlação entre os parâmetros específicos de comportamento e distintas lesões genéticas.

Lapso de tempo de imagem de pré-neoplásicas primárias células epiteliais mamárias derivados de modelos de rato geneticamente modificado do cancro da mama

Este protocolo descreve o uso de microscopia multifotônica para executar imagiologia prolongado de lapso de tempo de interacções multicelulares em tempo real, in vivo, a resolução de células simples.

Estendida Time-lapse Imagem intravital do Real-time multicelular Dynamics no microambiente tumoral

Aqui, apresentamos o monitoramento em tempo real de migração celular em um ensaio de cicatrização de feridas utilizando empobrecido TIP60 MCF10A mama células epiteliais. A implementação de técnicas de imagem de viver-pilha em nosso protocolo nos permite analisar e visualizar o movimento de célula única em tempo real e ao longo do tempo.

Imagens ao vivo de migração de células epiteliais da mama após o esgotamento de transiente de TIP60

As alterações morfológicas ocorrem em células de fibroblastos imunes responsivos após a ativação e promovem alterações no recrutamento celular. Utilizando a imagem latente do Photon 2 conjuntamente com uma proteína fibroblástica-específica geneticamente projetada 1 (FSP1)-CRE; tdtomato floxed-parar-floxed (TB/TB) linha do mouse e verde cDNAs Tagged lipopolissacarídeo-FITC, podemos ilustrar a captação altamente específica de lipopolissacaríno em fibroblastos dérmicos e alterações morfológicas in...

In vivo duas cores 2-Photon Imaging de células de repórter geneticamente marcadas na pele

Aqui nós apresentamos um protocolo para avaliar a dinâmica da formação do eixo e da progressão mitotic. Nossa aplicação da imagem latente do lapso de tempo permite que o usuário identifique pilhas em vários estágios do mitosis, controle e identifique defeitos mitotic, e analise a dinâmica do eixo e o Fate mitotic da pilha em cima da exposição às drogas antimitotic.

Imagem latente viva da pilha para avaliar a dinâmica do sincronismo da metafase e do Fate da pilha depois das perturbações mitotic do eixo

Aqui descrevemos um protocolo para o cultivo sistemático de esferoides epidérmicos na cultura de suspensão 3D. Este protocolo possui amplas aplicações para uso em uma variedade de tipos de tecido epitelial e para a modelagem de várias doenças e condições humanas.

Estabelecendo um sistema de cultura esferoide epidérmico de alta produtividade para modelar a plasticidade das células-tronco de ceratinócito

O protocolo apresenta uma nova ferramenta para simplificar a obtenção de imagens intravitais usando microscopia confocal invertida.

Abordagem simplificada de imagem intravital para monitoramento de longo prazo da dinâmica do tecido epitelial em um microscópio confocal invertido

A combinação de multiplexidade iterativa de branqueamento (IBEX) e um ensaio comercial de marcação de nucleotídeos (Click-iT EdU) permite a detecção e categorização de tipos de células em divisão em processos altamente dinâmicos em seções fixas de tecido murino congelado. Além disso, um novo pipeline de processamento de imagens de código aberto fornece aquisição e análise de imagens de alto rendimento.

Fluxo de trabalho de imagem e análise de alto rendimento para avaliar fenótipos de células da pele e estados de proliferação em amostras de tecido

Este protocolo descreve a cultura de queratinócitos recém-obtidos (passagem 0) para uso em imagens de células vivas.

Geração de culturas primárias para imagens de células vivas de queratinócitos

Aprenda a usar imagens de células vivas com lapso de tempo para rastrear linhagens de queratinócitos epidérmicos e coletar métricas de proliferação. Este método permite estudar doenças hiper e hipoproliferativas como psoríase.

Imagens de células vivas com fotografia de lapso de tempo para estudar a cinética de proliferação de queratinócitos epidérmicos

Explorar mais vídeos