Uso de montagem in vivo para construção de plasmídeo de alta eficiência

Minha pesquisa de doutorado está focada no estudo de proteínas que são secretadas por bactérias. Eu quero entender especificamente se algumas dessas proteínas secretadas são importantes para causar infecções humanas. Um grande desafio no trabalho com bactérias clínicas recentemente isoladas é sua resistência a antibióticos, o que dificulta as técnicas de genética molecular que dependem da seleção de antibióticos, como deleções de genes e complementação genética.

Este protocolo de clonagem é mais rápido e econômico, pois o IVA elimina a necessidade de enzimas especializadas e reações enzimáticas sequenciais para montagem de plasmídeos antes da transformação de E.coli. Para começar, inicie um software especializado de análise de DNA em um sistema de computador. Monte artificialmente o plasmídeo desejado.