Name: Macroscopa de globos não neoplásicos, incluindo olhos fetais (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-30T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 15 s
Description: Aprenda técnicas padronizadas de dissecação macroscópica de globos oculares não neoplásicos, incluindo fetais, para histopatologia de qualidade. Este método melhora a reprodutibilidade e auxilia na tomada de decisões em cortes histológicos.

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<li>Darche, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+characterization+of+developing+and+adult+ocular+vasculature+in+mice+using+in+toto+clearing%5BTitle%5D)+AND+%22Commun+Biol%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional characterization of developing and adult ocular vasculature in mice using in toto clearing.</a> Commun Biol. 5 (1), 1135(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Régua de paquímetro</td><td>Mauser</td><td>fora do mercado</td><td>INOX Messchieber 0- 200 mm</td></tr><tr><td>Microscópio de dissecação ou microscópio de cirurgia oftálmica descartado</td><td>M&ouml; ller Wedel</td><td>fora do mercado</td><td></td></tr><tr><td>Fórceps</td><td>Ciências Belas Artes</td><td>11203-23</td><td>SS INOX</td></tr><tr><td>HistoBond</td><td>Marienfeld, Alemanha</td><td>RUÍDO ISO 8037-1</td><td>lâminas revestidas</td></tr><tr><td>Tubo de LED para transiluminação em uma sala escura</td><td>Schott, Mainz</td><td>fora do mercado</td><td>KL150</td></tr><tr><td>Lâmina de micrótomo</td><td>Lâminas de micrótomo de penas</td><td>N/A</td><td>Tipo A35</td></tr></tbody></table>

macroscopa de globos não neoplásicos, incluindo olhos fetais

Grossing of Non-neoplastic Globes, Including Fetal Eyes

Após a orientação, deve ser viável determinar a lateralidade para olhos adultos. No entanto, isso geralmente é impossível para os olhos fetais. A lateralidade é importante para confirmar que o olho correto foi removido e que corresponde ao relato. As medições antes do corte são documentadas. Em particular, para os olhos fetais, um nomograma é útil para descartar anomalias de tamanho ocular, como microftalmia.
Com base na história e transiluminação do paciente, a secção é planejada. O globo é geralmente seccionado horizontalmente, o que requer a identificação adequada do plano horizontal, conforme descrito acima. Se houver áreas específicas de interesse (por exemplo, coloboma, lesões insuspeitas identificadas na transiluminação ou locais cirúrgicos, como trabeculectomia), a secção é adaptada, respectivamente. O resultado de destino do seccionamento é uma seção PO adequada (Figura 5 e Figura 6).
Um globo ocular desajeitadamente seccionado prejudica uma correlação clínico-patológica precisa e a interpretação dos achados histológicos com um impacto potencial no acompanhamento do paciente. Por exemplo, um dos diagnósticos mais ameaçadores a serem considerados é a oftalmia simpática23 , uma inflamação granulomatosa crônica bilateral da úvea, potencialmente levando à cegueira do outro olho remanescente (olho simpatizante). Essa entidade precisa ser descartada em todos os globos e, em particular, em olhos cegos e doloridos. Como isso é fundamental para preservar o olho remanescente, seções representativas do globo são obrigatórias para avaliação, de preferência como seções PO.
No caso de um corte ser feito erroneamente em toda a córnea em vez de seccionar a periferia, envie a calota com córnea e segmento anterior e a seção PO falhada. A segunda calota precisa ser removida conforme descrito acima para que o globo caiba no. Notavelmente, os olhos tísicos podem exibir metaplasia óssea do epitélio pigmentar da retina, tornando quase impossível seccionar o globo. Descalcifique o globo em ácido nítrico a 5% por 24 h, seguido de solução de lítio ou sulfato de sódio a 5% por 24 h, armazene em água da torneira por 24-48 h e tente novamente cortar o globo. Repita a descalcificação até que o globo possa ser seccionado. Por fim, a fotodocumentação de cada globo deve ser realizada. Isso não é apenas por razões forenses, mas também útil se ocorrerem achados histológicos inesperados.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig01.jpg"> 
Figura 1: Fluxograma para preparação, orientação e secção de olhos não tumorais listando as etapas relevantes em uma abordagem semelhante a uma lista de verificação. Abreviatura: LED = diodo emissor de luz. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig02.jpg"> 
Figura 2: Orientação. A córnea é claramente visível de uma vista anterior. (A) As inserções dos quatro músculos retos são destacadas por pontas de setas. (B) O nervo óptico (asterisco) é visível de uma vista posterior. A artéria ciliar longa (seta) marca o meridiano horizontal. A inserção tipicamente carnuda do músculo oblíquo inferior (cabeça de seta) é aproximadamente temporal. Duas das veias do vórtice são destacadas por setas finas. (C) A inserção tendínea do músculo oblíquo superior (cabeça de seta) é superiormente entre o músculo reto superior e o nervo óptico. Uma veia de vórtice é marcada por uma flecha fina. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig03.jpg"> 
Figura 3: Macroscopagem. (A) Medição do diâmetro horizontal e vertical em mm (linha pontilhada). Medição do diâmetro da córnea e, por exemplo, do diâmetro da ceratoplastia. (B) Meça o diâmetro ântero-posterior em mm (linha vermelha) e o comprimento do nervo óptico (linha verde). O nervo óptico é seccionado transversalmente (linha pontilhada) e submetido separadamente para processamento posterior. (C) Transiluminação regular de um globo por uma luz LED. (D) Na transiluminação, uma sombra é vista causada por um tumor de coróide (seta). Abreviatura: LED = diodo emissor de luz. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig04.jpg"> 
Figura 4: Material estranho extraocular. (A) Globo ocular com uma banda envolvente/cerclagem (seta; o nervo óptico é marcado por um asterisco). (B) Após a dissecção horizontal, a faixa circundante ainda está presa ao globo (setas). (C) Múltiplas aplicações externas de materiais estranhos para cirurgia histórica de descolamento de retina consistindo em placas (asterisco) e várias fivelas esclerais (seta). (D) A seção correspondente de Hematoxilina e Eosina mostra a localização intraescleral de uma fivela (seta), bem como a imagem negativa de uma placa extraescleral (asterisco). A córnea é marcada em C e D por uma seta fina e o nervo óptico por uma ponta de seta em D. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig04large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig05.jpg"> 
Figura 5: Seccionamento. (A) O globo é colocado com a córnea para baixo (mesmo olho da Figura 2) e (B) os planos de seção superior (vermelho) e inferior (azul) são marcados. (C) O plano de corte passa idealmente pela córnea periférica / área límbica. (D) Após a remoção da calota superior, um descolamento de retina em forma de funil pode ser visto. A seção está apenas próxima à córnea periférica (seta), mas isso também é suficiente para análise. (E) A remoção da calota inferior (observe a córnea periférica na seção, seta) produz a seção do nervo óptico pupila pretendida. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig05large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig06.jpg"> 
Figura 6: Cortes e calotas PO. (A) Corte PO, (B) calota superior e (C) inferior. A pars plicata do corpo ciliar é destacada por setas em B e C. As calotas sem detalhes clinicamente relevantes não precisam ser processadas posteriormente e, em vez disso, são arquivadas. Abreviatura: PO = nervo óptico pupilar. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig06large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig07.jpg"> 
Figura 7: Olhos fetais e microftálmicos. (A) Olho fetal regular, 21 semanas de gestação e 10 mm de diâmetro AP. (B) Empurrar suavemente com uma pinça revela a artéria ciliar posterior longa (pontas de setas), que indica o meridiano horizontal. (C) Após a bissecção, as estruturas intraoculares podem ser inspecionadas, incluindo a artéria hialóide (seta). (D) Olho microftálmico de um adulto. A córnea é destacada por uma seta. (E) Os globos foram divididos ao meio; A artéria ciliar posterior longa não pôde ser identificada. Abreviatura: AP = ântero-posterior. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig07large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig08.jpg"> 
Figura 8: Incisão coronal. Uma incisão coronal é útil se a aquisição de imagens post-mortem do fundo do olho for pretendida. Durante a transiluminação, a pars plana do corpo ciliar pode ser identificada como uma estrutura circular em forma de banda. (A) Usando um bisturi, uma incisão circular é feita na área da pars plana (linha pontilhada) e o segmento anterior é removido. (B) A retina e o nervo óptico podem ser documentados e visualizados. (C) O segmento anterior é então investigado separadamente. (D) Corte horizontal com segmento anterior removido. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig08large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Figura suplementar S1: Unidade de microscópio de dissecação. Unidade de trabalho com microscópio de cirurgia oftálmica descartado. (A) Um tubo de LED (seta) e o equipamento necessário para grossura e seccionamento. Os materiais necessários são (B) régua, régua de paquímetro, pinça e (C) micrótomo/lâminas de barbear. Para seccionamento de globos adultos, lâminas de micrótomo (direita) são recomendadas; Para olhos fetais ou outras amostras oculares, lâminas de barbear (esquerda) são suficientes. (D) Microscópio de dissecação com uma câmera conectada para documentar a amostra. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/suppl%20figure.jpg" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>

Macroscopa de globos não neoplásicos, incluindo olhos fetais

Grossing and sectioning of fetal and adult globes are critical steps in the histopathologic evaluation of ocular diseases. Proper handling of the globe is ...

Minha pesquisa se concentra na patologia oftálmica, que inclui correlações patológicas clínicas e pesquisa básica sobre melanoma uveal. Até agora, descrevi várias correlações patológicas clínicas, por exemplo, na atrofia do nervo óptico de Schnabel, bem como achados pós-operatórios após reticulação da córnea e implantes sub-retinianos. A inspeção macroscópica e o seccionamento de um globo são bastante desafiadores. Nossos protocolos devem ajudar os patologistas a identificar estruturas oculares críticas e seccionar adequadamente um globo ocular sem tumor.[Instrutor] Para começar, reúna todos os itens necessários para o procedimento. Primeiro, identifique os quatro músculos retos na amostra do globo ocular. Em seguida, identifique o músculo oblíquo superior por sua aparência de sensibilidade à medida que se insere na esclera na superfície póstero-temporal do globo. Em seguida, identifique o músculo oblíquo inferior, que se insere temporalmente inferiormente na esclera entre o músculo reto lateral e o nervo óptico. Depois de identificar a artéria ciliar posterior longa, determine a lateralidade do globo com precisão com base nos músculos oblíquo superior e oblíquo inferior e na artéria ciliar posterior longa. Usando um paquímetro, meça os diâmetros anterior, posterior, horizontal e vertical do globo em milímetros. Examine e descreva quaisquer anormalidades na superfície externa do globo, incluindo cicatrizes, suturas, materiais estranhos ou deformações. Em seguida, meça a córnea em seus diâmetros horizontal e vertical em milímetros. Descreva as características da córnea, incluindo transparência, presença de cicatrizes, sinais de ceratoplastia, suturas ou vascularização. Neste globo, há um estafiloma anterior superiormente. Meça o nervo óptico quanto ao seu comprimento e observe quaisquer anormalidades, como hemorragias nas bainhas. Faça um corte transversal através do nervo óptico, se possível, e submeta-o separadamente para exame histológico. Agora, transilumine o globo usando um tubo de LED para destacar os defeitos da íris e, neste caso específico, o estafiloma anterior. Nesse caso, há um sombreamento nasal. Realize documentação fotográfica de todo o globo. Usando uma caneta, marque o meridiano vertical ou o plano de corte desejado para que o corte passe perto do nervo óptico e da córnea periférica. Usando uma lâmina de microtom, divida o globo ao longo da linha marcada enquanto o prende com a outra mão. Remova o culot e inspecione se há anormalidades. Armazenado em formalina ou submetido a processamento histológico. Agora, inspecione as estruturas oculares internas, incluindo a câmara anterior, o status do cristalino, a íris, o corpo ciliar, a coroide, a retina e o nervo óptico. A esclera é observada em busca de anormalidades, como espessamento ou atrofia. Nesta área, a esclera é afinada correspondendo ao estafiloma anterior. Não há lente e a parte de trás da íris pode ser vista diretamente. O corpo ciliar tem uma membrana cíclica. A retina é tipicamente descolada após a enucleação. O nervo óptico atrófico pode ser visualizado junto com a mácula. E há uma área pigmentada na coróide. Segure o globo agora aberto e separe-o paralelamente, mas acima do nervo óptico. Novamente, mirando através da córnea periférica. Em seguida, remova o culot e inspecione se há anormalidades restantes. Armazene ou envie a amostra para análise histológica. Finalmente, execute a documentação fotográfica da seção do nervo óptico da pupila e envie-a para processamento posterior. Múltiplas aplicações externas de materiais estranhos para cirurgia histórica de descolamento de retina foram realizadas para amostra composta por placas e várias fivelas esclerais. A hematoxilina correspondente e a secção corada com eosina mostraram a localização intraescleral de um vestibular, bem como a imagem negativa de uma placa extra escleral. O resultado alvo da secção foi uma seção adequada do nervo óptico pupal.

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In vivo como Cultura Wholemount organotípicas murino da retina

Um método é descrito para propagar tumores retinoblastoma humano em camundongos. Células tumorais são diretamente injetadas nos olhos de ratos imune deficiente. Tumores secundários foram estabelecidas com sucesso usando as duas células diretamente colhidas a partir de tumores humanos e tumorspheres cultivadas.

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A técnica de dissecção ilustra enucleação do olho do rato para fixação do tecido para realizar fenotipagem em alto rendimento telas.

Enucleação Rato Olho para fenotipagem de alta capacidade remota

O artigo descreve uma técnica simplificada de córnea especiais de consumo e eviscerar os tecidos da retina do globo ocular de humanos doadores cadavéricos. A técnica descrita aqui vai ajudar a impostos especiais de consumo tecidos de boa qualidade para ser utilizados para transplantação, cirúrgicos ou de pesquisa, sem danificar outros tecidos do globo ocular.

Uma técnica simplificada para<em&gt; In situ</em&gt; Excisão de Córnea e evisceração de tecido da retina do globo ocular humano

O objetivo deste protocolo é caracterizar um novo modelo de neurodegeneração glaucomatosa baseado na cauterização térmica 360° do plexo vascular limbal, induzindo hipertensão ocular subaguda.

Cauterização em círculo completo do plexo vascular limbal no glaucoma induzido cirurgicamente em roedores

Injeções intravítreas foram realizadas no olho de ovelha com o objetivo de fornecer terapia gênica mediada por vírus para a retina.

Injeções intravítreas no olho ovino

A inflamação da superfície ocular prejudica os tecidos da superfície ocular e compromete as funções vitais do olho. O presente protocolo descreve um método para induzir inflamação ocular e coletar tecidos comprometidos em um modelo de camundongo de disfunção da glândula de Meibomian (MGD).

Indução da inflamação da superfície ocular e coleta de tecidos envolvidos

O presente trabalho descreve um novo protocolo experimental que utiliza um suporte impresso em 3D para permitir imagens de células vivas de alta resolução de globos enucleados. Através deste protocolo, a atividade de sinalização celular de cálcio no epitélio corneano ferido de globos ex vivo pode ser observada em tempo real.

Imagem de células vivas de globos ex vivo intactos usando um novo suporte impresso em 3D

Descrevemos um método para separar eficientemente o epitélio pigmentar da retina (EPR) da retina em olhos humanos e gerar montagens planas inteiras de EPR/coroide para análises histológicas e morfométricas da EPR.

Geração eficiente e consistente de epitélio/coroide de pigmento da retina a partir de olhos humanos para análise histológica

Os ensaios laboratoriais podem alavancar o valor prognóstico da imagem multimodal baseada em tomografia de coerência óptica longitudinal (OCT) da degeneração macular relacionada à idade (DMRI). Olhos de doadores humanos com e sem DMRI são fotografados usando OCT, oftalmoscopia a laser de varredura por reflectância no infravermelho próximo e autofluorescência em dois comprimentos de onda de excitação antes da secção do tecido.

Ex Vivo Imagem Multimodal Baseada em OCT de Olhos de Doadores Humanos para Pesquisa em Degeneração Macular Relacionada à Idade

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Entrega terapêutica ocular e recuperação avançada de tecidos em ratos adultos

Aprenda técnicas padronizadas de dissecação macroscópica de globos oculares não neoplásicos, incluindo fetais, para histopatologia de qualidade. Este método melhora a reprodutibilidade e auxilia na tomada de decisões em cortes histológicos.

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