Name: Implante de enxerto vascular de engenharia de tecidos na artéria carótida de camundongo via técnica de manguito (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-02T13:55:00.000+00:00
Duration: 7 min 13 s
Description: Aprenda a implantar enxertos vasculares de engenharia de tecidos na artéria carótida de camundongos usando a técnica de manguito. Este método permite investigar mecanismos de regeneração vascular in vivo.

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<ol><li>Adhikary, D., Barman, S., Ranjan, R., Stone, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+of+major+cardiovascular+risk+factors%3A+A+growing+global+health+concern%5BTitle%5D)+AND+%22Cureus%22%5BJournal%5D)">A systematic review of major cardiovascular risk factors: A growing global health concern.</a> Cureus. 14 (10), e30119(2022).</li>
<li>Alexander, J. H., Smith, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary-artery+bypass+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Coronary-artery bypass grafting.</a> N Engl J Med. 374 (20), 1954-1964 (2016).</li>
<li>Jeong, Y., Yao, Y., Yim, E. K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+understanding+of+intimal+hyperplasia+and+effect+of+compliance+in+synthetic+small+diameter+vascular+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Biomater+Sci%22%5BJournal%5D)">Current understanding of intimal hyperplasia and effect of compliance in synthetic small diameter vascular grafts.</a> Biomater Sci. 8 (16), 4383-4395 (2020).</li>
<li>Lawson, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioengineered+human+acellular+vessels+for+dialysis+access+in+patients+with+end-stage+renal+disease%3A+Two+phase+2+single-arm+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Bioengineered human acellular vessels for dialysis access in patients with end-stage renal disease: Two phase 2 single-arm trials.</a> Lancet. 387 (10032), 2026-2034 (2016).</li>
<li>Kirkton, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioengineered+human+acellular+vessels+recellularize+and+evolve+into+living+blood+vessels+after+human+implantation%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Bioengineered human acellular vessels recellularize and evolve into living blood vessels after human implantation.</a> Sci Transl Med. 11 (485), eaau6934(2019).</li>
<li>Wang, C., Li, Z., Zhang, L., Sun, W., Zhou, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+results+of+triple-layered+small+diameter+vascular+grafts+in+sheep+carotid+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Eng+Phys%22%5BJournal%5D)">Long-term results of triple-layered small diameter vascular grafts in sheep carotid arteries.</a> Med Eng Phys. 85, 1-6 (2020).</li>
<li>Tanaka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+small-diameter+silk+vascular+grafts+implanted+in+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22JTCVS+Open%22%5BJournal%5D)">Evaluation of small-diameter silk vascular grafts implanted in dogs.</a> JTCVS Open. 6, 148-156 (2021).</li>
<li>Jin, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+small-diameter+tissue-engineered+vascular+grafts+electrospun+from+heparin+end-capped+PCL+and+evaluation+in+a+rabbit+carotid+artery+replacement+model%5BTitle%5D)+AND+%22Macromol+Biosci%22%5BJournal%5D)">Preparation of small-diameter tissue-engineered vascular grafts electrospun from heparin end-capped PCL and evaluation in a rabbit carotid artery replacement model.</a> Macromol Biosci. 19 (8), e1900114(2019).</li>
<li>Xiao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fabrication+of+small-diameter+in+situ+tissue+engineered+vascular+grafts+with+core%2Fshell+fibrous+structure+and+a+one-year+evaluation+via+rat+abdominal+vessel+replacement+model%5BTitle%5D)+AND+%22Biomater+Adv%22%5BJournal%5D)">Fabrication of small-diameter in situ tissue engineered vascular grafts with core/shell fibrous structure and a one-year evaluation via rat abdominal vessel replacement model.</a> Biomater Adv. 165, 214018(2024).</li>
<li>Wei, Y., Wang, F., Guo, Z., Zhao, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-engineered+vascular+grafts+and+regeneration+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Tissue-engineered vascular grafts and regeneration mechanisms.</a> J Mol Cell Cardiol. 165, 40-53 (2022).</li>
<li>Cleary, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+tissue+engineering%3A+The+next+generation%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Vascular tissue engineering: The next generation.</a> Trends Mol Med. 18 (7), 394-404 (2012).</li>
<li>Roh, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-engineered+vascular+grafts+transform+into+mature+blood+vessels+via+an+inflammation-mediated+process+of+vascular+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Tissue-engineered vascular grafts transform into mature blood vessels via an inflammation-mediated process of vascular remodeling.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (10), 4669-4674 (2010).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+thick+fibers+and+large+pores+of+electrospun+poly%28%CE%B5-caprolactone%29+vascular+grafts+on+macrophage+polarization+and+arterial+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The effect of thick fibers and large pores of electrospun poly(ε-caprolactone) vascular grafts on macrophage polarization and arterial regeneration.</a> Biomaterials. 35 (22), 5700-5710 (2014).</li>
<li>Wu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptide-tethered+vascular+grafts+enable+blood+vessel+regeneration+via+endogenous+cell+recruitment+and+neovascularization%5BTitle%5D)+AND+%22Compos+B+Eng%22%5BJournal%5D)">Peptide-tethered vascular grafts enable blood vessel regeneration via endogenous cell recruitment and neovascularization.</a> Compos B Eng. 252, 110504(2023).</li>
<li>Hu, Y., Xu, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vessel+graft+atherosclerosis+in+murine+models%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Drug+Targets%22%5BJournal%5D)">Vessel graft atherosclerosis in murine models.</a> Curr Drug Targets. 9 (3), 239-250 (2008).</li>
<li>Qin, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implantation+of+electrospun+vascular+grafts+with+optimized+structure+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Implantation of electrospun vascular grafts with optimized structure in a rat model.</a> J Vis Exp. (136), e57340(2018).</li>
<li>Geelhoed, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+engineering+autologous+non-thrombogenic+in+situ+tissue-engineered+blood+vessels+for+arteriovenous+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">A novel method for engineering autologous non-thrombogenic in situ tissue-engineered blood vessels for arteriovenous grafting.</a> Biomaterials. 229, 119577(2020).</li>
<li>Wu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Construction+of+vascular+graft+with+circumferentially+oriented+microchannels+for+improving+artery+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Construction of vascular graft with circumferentially oriented microchannels for improving artery regeneration.</a> Biomaterials. 242, 119922(2020).</li>
<li>Vasquez, E. C., Peotta, V. A., Gava, A. L., Pereira, T. M., Meyrelles, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+and+vascular+phenotypes+in+the+apolipoprotein+e-deficient+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Cardiac and vascular phenotypes in the apolipoprotein e-deficient mouse.</a> J Biomed Sci. 19 (1), 22(2012).</li>
<li>Garcia, V., Sessa, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+nos%3A+Perspective+and+recent+developments%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Endothelial nos: Perspective and recent developments.</a> Br J Pharmacol. 176 (2), 189-196 (2019).</li>
<li>He, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+the+precision+of+genetic+lineage+tracing+using+dual+recombinases%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Enhancing the precision of genetic lineage tracing using dual recombinases.</a> Nat Med. 23 (12), 1488-1498 (2017).</li>
<li>Wang, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide+improves+regeneration+and+prevents+calcification+in+bio-hybrid+vascular+grafts+via+regulation+of+vascular+stem%2Fprogenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide improves regeneration and prevents calcification in bio-hybrid vascular grafts via regulation of vascular stem/progenitor cells.</a> Cell Rep. 39 (12), 110981(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1% penicilina-estreptomicina</td><td>Solarbio</td><td>P1400</td><td></td></tr><tr><td>10% soro bovino fetal</td><td>Gibco</td><td>A5256701</td><td></td></tr><tr><td>4% paraformaldeído</td><td>Solarbio</td><td>P1110</td><td></td></tr><tr><td>4',6-Diamidino-2-Fenilindol (DAPI)</td><td>SouthernBiotech</td><td>0100-20</td><td></td></tr><tr><td>Álcool</td><td>Tianjin Chemical Reaggent Company</td><td>1083</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo primário anti-rato CD31</td><td>BD Bioscience</td><td>553370</td><td></td></tr><tr><td>Clipes arteriais</td><td>RWD Life Science</td><td>R31005-06</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6 camundongos</td><td>Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Company</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Meio de águia modificado de Dulbecco (DMEM)</td><td>Gibco</td><td>11966025</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de fiar eletrostática</td><td>Yunfan Technology</td><td>DP30</td><td></td></tr><tr><td>IgG anti-rato de cabra (Alexa Fluor 555)</td><td>Invitrogen</td><td>A-21434</td><td></td></tr><tr><td>Hematoxilina e eosina (H& E)</td> <td>Solarbio</td><td>G1120</td><td></td></tr><tr><td>Hexafluoroisopropanol (HFIP)</td> <td>McClean</td><td>H811026</td><td></td></tr><tr><td>Iodophor</td><td>LIRCON</td><td>V273068</td><td></td></tr><tr><td>Microscissors</td><td>World Precision Instruments</td><td>14124</td><td></td></tr><tr><td>Micropinças</td><td>World Precision Instruments</td><td>500338</td><td></td></tr><tr><td>soro de cabra normal</td><td>Boster</td><td>AR0009</td><td></td></tr><tr><td>Solução salina normal</td><td>Cisen Pharmaceutical company</td><td>H20113369</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de nylon para manguito</td><td>Portex</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Composto de temperatura de corte ideal (OCT)</td><td>Sakara</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>Pentobarbital sódico</td><td>Sigma</td><td>P3761</td><td></td></tr><tr><td>Solução salina tamponada com fosfato (PBS)</td><td>Solarbio</td><td>P1003</td><td></td></tr><tr><td>Poli(&epsilon;- caprolactona) (PCL) pellets (Mn = 80.000)</td><td></td>Macrófagos <td>Sigma 704067</td><td></td></tr><tr><td>RAW264.7</td><td>Biyuntian Biotecnologia</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscópio eletrônico de varredura (SEM)</td><td>Zeiss</td><td>PHENOM-XL-G2</td><td></td></tr><tr><td>Suturas cirúrgicas 6-0</td><td>Ningbo Chenghe microaparelho fábrica</td><td>220919</td><td></td></tr><tr><td>Suturas cirúrgicas 9-0</td><td>Ningbo Chenghe microaparelho fábrica</td><td>221006</td><td></td></tr><tr><td>Seringa</td><td>Changqiang Dispositivos Médicos&nbsp; &nbsp;</td><td>0197</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de ensaio de tração</td><td>Instron</td><td>WDW-5D</td><td></td></tr></tbody></table>

implante de enxerto vascular de engenharia de tecidos na artéria carótida de camundongo via técnica de manguito

Implantation of Tissue-Engineered Vascular Graft in Mouse Carotid Artery via Cuff Technique

Enxertos vasculares de pequeno diâmetro com diferentes parâmetros foram preparados com sucesso por eletrospinning. As imagens de MEV revelaram que as fibras estavam uniformemente distribuídas e exibiam um arranjo irregular dentro da parede do enxerto, com a presença de estruturas porosas (Figura 4). À medida que a concentração de PCL aumentava, tanto o diâmetro da fibra quanto o tamanho dos poros aumentavam. Os valores específicos para cada grupo de enxerto vascular são apresentados...

Implante de enxerto vascular de engenharia de tecidos na artéria carótida de camundongo via técnica de manguito

The development of small-diameter vascular grafts has been a global endeavor, with numerous research groups contributing to this field. Animal ...

implantation-tissue-engineered-vascular-graft-mouse-carotid-artery

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioengenharia

Descrevemos uma técnica em que uma secção da aorta abdominal de um rato é transplantado ortotopicamente para um pouco abaixo das artérias renais de um receptor alogénico ou singeneicos. Esta técnica pode ser útil em estudos em que o transplante de grandes artérias de tamanho uniforme é considerada vantajosa.

Transplante ortotópico de aorta em camundongos para o Estudo da Doença Vascular

O modelo de transplante de coração de murídeo cervical é bem adequado para imunológico, bem como estudos de lesão de reperfusão de isquemia. Nós modificamos o procedimento usando uma técnica cuff não sutura e realizou mais de 1.000 transplantes de sucesso com essa abordagem.  Aqui, nós fornecemos mais detalhes desta técnica para complementar o vídeo.

Murino Cervical Modelo de coração Transplante usando uma técnica Cuff Modificado

Para melhorar o nosso conhecimento da formação neotissue celular e molecular, um modelo murino da TEVG foi recentemente desenvolvida. Os enxertos foram implantados como infra-enxertos na veia cava de interposição em camundongos C57BL / 6. Este modelo consegue resultados semelhantes aos obtidos em nossa investigação clínica, mas ao longo de um curso de tempo muito reduzido.

Implantação de Veia Cava Inferior interposição de enxerto no Rato Modelo

Um protocolo de passo-a-passo para a colocação inter-posicional de engenharia de tecidos Vessels (TEVs) na artéria carótida de um carneiro usando anastomose end-to-end e avaliação digital em tempo real, in vivo até o sacrifício animal.

Técnica Cirúrgica para a Implantação de engenharia de tecidos enxertos vasculares e Subsequente<em&gt; In Vivo</em&gt; Monitoring

Aqui, apresentamos um protocolo para gerar engenharia de tecidos enxertos de vasos que são funcionais para enxerto em camundongos por semeadura dupla parcialmente célula-tronco pluripotentes induzidas (PPCPE) - derivados de células musculares lisas e PPCPE - células endoteliais derivadas em um biorreator descelulada navio andaime.

Geração e Alongamento das embarcações da engenharia de tecidos em um modelo de rato

A técnica do manguito encurta e facilita o modelo de transplante cardíaco cervical heterotópico em camundongos, evitando anastomoses de sutura tecnicamente desafiadoras de pequenos vasos. Os detalhes técnicos mostrados neste vídeo devem permitir que as pesquisas estabeleçam esse modelo em seus laboratórios.

Heterotopic Cervical Transplante Cardíaco em Ratos

Aqui, apresentamos um protocolo de transplante heterotópico da aorta em camundongos usando a técnica de manguito não sutura em um modelo de urina cervical. Este modelo pode ser usado para estudar a patologia subjacente da vasculopatia aloenxerto crônica (CAV) e pode ajudar a avaliar novos agentes terapêuticos, a fim de evitar a sua formação.

Murine Modelo de Transplante de Aorta Cervical usando uma técnica de manguito não sutura modificada

No presente protocolo, um modelo de transplante cardíaco em camundongos é utilizado para investigar o mecanismo de rejeição do enxerto cardíaco. Neste modelo heterotópico de transplante cardíaco, a eficiência da operação é melhorada, e a sobrevida dos enxertos cardíacos é garantida por uma anastomose cervical término-terminal do implante cardíaco usando uma técnica de Cuff modificada.

Técnica de Cuff Modificada para Modelo de Transplante Cardíaco Heterotópico Cervical:

Modelos de transplante cardíaco de camundongos representam valiosas ferramentas de pesquisa para o estudo da imunologia do transplante. O presente protocolo detalha o transplante cardíaco cervical heterotópico de camundongos que envolve a colocação de manguitos na artéria carótida comum do receptor e no tronco da artéria pulmonar do doador para permitir o fluxo sanguíneo laminar.

Transplante cardíaco cervical heterotópico de camundongo utilizando manguitos vasculares

Este protocolo fornece informações técnicas para a reconstrução de vasos usando a técnica do manguito no transplante hepático ortotópico de camundongos.

Reconstrução Vascular com a Técnica do Manguito no Transplante Hepático Ortotópico de Camundongo

Este protocolo apresenta uma técnica simplificada de anastomose de sutura ponta a ponta para transplante cardíaco cervical murino, fornecendo um modelo robusto e reprodutível para o estudo da imunologia de transplantes.

Transplante cardíaco de camundongo heterópico cervical usando a técnica de anastomose ponta a lateral para estudar imunologia de transplante

Aprenda a implantar enxertos vasculares de engenharia de tecidos na artéria carótida de camundongos usando a técnica de manguito. Este método permite investigar mecanismos de regeneração vascular in vivo.

Implante de enxerto vascular de engenharia de tecidos na artéria carótida de camundongo via técnica de manguito

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