Name: Montagem de biorreatores para cultura contínua de comunidades fecais complexas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-04-25T14:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 37 s
Description: Aprenda a montar mini-biorreatores para cultura contínua de comunidades fecais complexas em condições anaeróbicas. Este método permite experimentos paralelos controlados para estudar interações microbianas e seu impacto na saúde.

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<ol><li>Sender, R., Fuchs, S., Milo, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revised+estimates+for+the+number+of+human+and+bacteria+cells+in+the+body%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Revised estimates for the number of human and bacteria cells in the body.</a> PLoS Biol. 14 (8), e1002533(2016).</li>
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A microbiota intestinal é uma vasta rede de microrganismos, incluindo bactérias, fungos, arqueias e vírus, que contêm um enorme repertório genético e metabólico que supera em muito o de um hospedeiro humano1. A rica capacidade metabólica do microbioma inclui metabólitos produzidos a partir do processamento bacteriano de nutrientes dietéticos, metabólitos hospedeiros quimicamente modificados por bactérias e metabólitos sintetizados exclusivamente pela microbiota2. A microbiota está implicada em quase todos os bioprocessos do hospedeiro, mas também em estados de doença como doença inflamatória intestinal, câncer, distúrbios metabólicos e até distúrbios neurológicos 2,3. Dissecar a contribuição da microbiota da do hospedeiro é essencial para entender o papel de microrganismos específicos ou comunidades complexas na saúde e na doença. Uma abordagem que permite essa dissecação é o uso de biorreatores microbianos, que cultivam diversas comunidades microbianas sob condições dinâmicas. Existem muitos biorreatores disponíveis comercialmente que permitem o crescimento de comunidades bacterianas fecais para quase qualquer finalidade, incluindo o cultivo de bioprodutos em larga escala ou o controle preciso de fatores nutritivos específicos para o estudo de processos metabólicos. No entanto, esses sistemas são extremamente caros e requerem preparação extensiva, e não permitem que diversas condições experimentais sejam examinadas em paralelo. Para uma abordagem simplificada que seja menos dispendiosa, mais adaptável e permita muitas condições paralelas, apresentamos aqui o protocolo para a configuração e uso de um arranjo de mini-biorreatores sob fluxo contínuo adaptado de Auchtung et al.4.
A configuração completa do sistema de mini-biorreator é demonstrada na Figura 1A. Este sistema de mini-biorreator usa matrizes de 6 poços de reatores, que são completamente independentes uns dos outros e são configurados em uma câmara anaeróbica sob fluxo peristáltico para permitir a entrega e remoção contínua do meio (Figura 1A). Cada conjunto de reatores fica em uma placa de agitação magnética de 60 posições, com duas bombas peristálticas de 48 segurando tubos de 2 pontos para o meio de origem e fluxo de resíduos (Figura 1A). A câmara anaeróbica está equipada com um monitor anaeróbico CAM-12 para conteúdo de oxigênio, uma caixa de catalisador para remover oxigênio com capacidade de aquecimento e uma coluna de remoção de sulfeto de hidrogênio para absorver o excesso de gás do metabolismo bacteriano. Cada poço do reator é equipado com uma entrada de meio de origem, saída de resíduos e porta de amostra, o que permite a inoculação ou amostragem de cada poço de reator individual (Figura 1B).
Conforme descrito, o sistema de biorreator permite o controle dinâmico sobre a temperatura, o consumo de meio e a disponibilidade de nutrientes para apoiar o cultivo e a manutenção das comunidades fecais. A temperatura é modulada por uma caixa de catalisador com capacidade de aquecimento, permitindo que mudanças de temperatura em toda a câmara anaeróbica sejam implementadas rapidamente. O consumo de mídia é regulado por taxas de fluxo de bomba peristáltica, que podem ser modificadas para alterar a rotatividade de mídia nos reatores. A rotatividade do meio pode ser personalizada para os tipos de comunidade que estão sendo cultivados em reatores, por exemplo, sendo adaptados para cepas-alvo de crescimento lento ou muito rápido. Por fim, a disponibilidade de nutrientes pode ser modificada dinamicamente adicionando componentes através das portas de amostra individuais para cada poço do reator. As condições estáticas que podem ser modificadas no início de um experimento, mas que não têm controle dinâmico no sistema, são o tipo de meio, o teor de oxigênio e o número de reatores simultâneos. Os investigadores podem optar por implementar qualquer mídia de origem que desejarem e, embora uma mídia seja descrita aqui, vários outros tipos de mídia de origem foram implementados com sucesso. Pode-se operar os reatores em condições aeróbicas ou microaerofílicas (dependendo da disponibilidade de uma câmara microaerofílica). Por fim, podem ser instalados tantos ou menos reactores quantos forem necessários, dependendo das necessidades experimentais do investigador. Enquanto os reatores estão em conjuntos de seis dentro de uma matriz, cada reator opera independentemente dos outros e cada um pode ser conectado a uma fonte diferente, se desejado.
Este sistema modular de biorreator pode ser completamente configurado por cerca de US $ 25.000 (sem incluir a câmara anaeróbica ou componentes específicos da câmara), com a única parte não reutilizável sendo a tubulação que pode ser substituída por menos de US $ 100 por execução do sistema. O sistema é principalmente automatizado, mas requer verificação diária dos níveis de mídia, pois os frascos de fonte de mídia precisarão ser trocados quando vazios. Além disso, qualquer amostragem deve ser concluída manualmente e quaisquer alterações condicionais dinâmicas no sistema precisarão ser iniciadas manualmente (por exemplo, alteração da temperatura). A partir do protocolo original do sistema publicado por Auchtung et al., algumas modificações foram implementadas para melhorar o desempenho geral e a utilidade4. Em primeiro lugar, o material para impressão 3D da matriz do biorreator é modificado para ser plástico transparente translúcido semelhante ao ABS para melhorar a integridade estrutural do sistema por meio de repetidas rodadas de autoclavagem. Além disso, no lugar da tubulação de PTFE de 1/8 de polegada (3,2 mm) OD, E-LFL, 2,06 mm de diâmetro interno, a tubulação de 100 pés é usada devido ao material mais resistente, que é mais resistente ao colapso, o que causaria bloqueios no fluxo no sistema. Por fim, um encaixe adicional usando rosca de 1/4 -28 mm para adaptadores macho farpado é usado para reduzir as mudanças no deslizamento do tubo dos frascos de fonte de mídia. De Han et al., a receita de mídia MEGA adaptada fornece um meio indefinido, complexo e altamente rico que permite o cultivo de microrganismos anaeróbicos exigentes5. O meio é modificado para utilizar a preparação alternativa do componente histidina-hematina, pois o original não está mais disponível comercialmente. O hidróxido de sódio também é usado para pH do meio para 7,0 ou qualquer pH desejado. No geral, este sistema é econômico e fácil de usar, otimizado e um excelente ponto de entrada para sistemas de cultura de fluxo contínuo.
Neste protocolo, descrevemos em detalhes a configuração deste sistema de matriz de mini-biorreatores, incluindo materiais, esterilização do sistema e uso subsequente para cultivo de amostras fecais murinas humanizadas no intestino. O objetivo geral deste método é construir um sistema de biorreator adaptável e econômico que possa ser utilizado para cultivar comunidades microbianas sob condições controladas. Um esquema detalhado do fluxo de trabalho para a montagem do sistema de mini-biorreator é fornecido na Figura 2 e referenciado nas etapas apropriadas dentro do protocolo. Em nosso exemplo, inoculamos dois reatores com a mesma amostra fecal de camundongos intestinais humanizados e descrevemos a estrutura da comunidade microbiana sob um fluxo contínuo de meio MEGA.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68035/68035fig1v2.jpg"> 
Figura 1: Diagrama esquemático da configuração da matriz de minibiorreatores na câmara anaeróbica. (A) Visão completa da configuração completa da matriz de minibiorreatores na câmara anaeróbica. O conjunto de biorreatores de 6 poços está situado na placa de agitação magnética de 60 posições. A rede luer tee de origem é conectada à mídia de origem no lado esquerdo através da tampa da garrafa de dois orifícios. Duas bombas peristálticas seguram a tubulação de 2 pontos da fonte e das redes de resíduos à esquerda e à direita, respectivamente. A rede de resíduos luer tee deságua na garrafa de resíduos do lado direito. Equipamentos essenciais para a operação da câmara anaeróbica, incluindo o monitor CAM-12, caixa de catalisador com capacidade de aquecimento e coluna de remoção de sulfeto de hidrogênio, estão dispostos dentro da câmara ao redor do sistema de matriz. (B) Vista superior da fonte, amostra e portas de resíduos conectadas a um poço de reator com mídia na altura apropriada no reator. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68035/68035fig1v2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68035/68035fig2v2.jpg"> 
Figura 2: Diagrama esquemático do fluxo de trabalho de montagem da matriz de mini-biorreatores. (A) Vista de cima para baixo da matriz de mini-biorreatores, mostrando a orientação da fonte, resíduos e portas de amostra. (B) Vista lateral da matriz de mini-biorreatores com vista ilustrando as etapas 2.3-2.4 do protocolo. A tubulação e a conexão de PTFE de 1/8 de polegada (1) são conectadas e inseridas nas portas de resíduos e amostras. A conexão (1) sem PTFE é inserida na porta de origem. (C) Vista lateral da matriz de mini-biorreatores ilustrando as etapas 2.5-2.6 do protocolo. O encaixe (2) está conectado às portas de origem e resíduos. O encaixe (3) é conectado à porta de amostra e, a isso, o encaixe (4) é inserido na parte superior. (D) Vista lateral da matriz de mini-biorreatores ilustrando as etapas 2.9-2.11. A tubulação E-LFL de 2.06 mm é conectada às portas de origem e resíduos, e a outra extremidade é conectada às conexões (5) e depois (6). A tubulação de 2 paradas do diâmetro apropriado é então conectada à conexão (6). A conexão reversa é então repetida na extremidade da tubulação de 2 pontos, com a conexão (6) conectando à tubulação de 2 pontos e a conexão (5) conectando-se a ela. Por fim, a tubulação E-LFL de 2.06 mm será conectada ao encaixe (5) para conexão à rede luer tee. (E) Vista de cima para baixo da matriz de minibiorreatores exibindo a configuração da rede luer tee de fontes e resíduos descrita nas etapas 2.12-2.15. A tubulação E-LFL de 2.06 mm terminando na conexão (5) é usada para conectar cada reator a várias conexões (7), cuja última abertura é conectada à tampa da fonte ou garrafa de resíduos. (F) Vista lateral do conjunto da tampa da garrafa de dois orifícios descrito nas etapas 2.16-2.17. Uma abertura na tampa é conectada à tubulação de PTFE que é colocada dentro da garrafa. A essa abertura é inserido o encaixe (1), seguido pelo encaixe (2) e a tubulação E-LFL de 2.06 mm conectada ao encaixe (5). Este acessório é conectado à rede luer de origem ou resíduo. Na abertura não conectada à tubulação de PTFE, a conexão (1) é inserida, seguida pela conexão (2), e a tubulação E-LFL de 2.06 mm é conectada a outra conexão (5). Esta extremidade é tampada com papel alumínio durante a esterilização em autoclave para futura fixação a um filtro de seringa estéril de 0,22 μM. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68035/68035fig2v2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>

<table><tbody><tr><td>Seringa de ponta deslizante BD de 1 mL estéril, uso único</td><td>Fisher Scientific</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>Adaptador macho de rosca de 1/4-28 mm para macho farpado (3,2 mm), 5/pacote</td><td>Cole-Parmer</td><td>008NB32-KD5L</td><td>Para construir 1 matriz de 6 poços, precisa de 2 pacotes</td></tr><tr><td>10M NaOH (Hidróxido de Sódio)</td><td>Sigma</td><td>72068-100ML</td><td></td></tr><tr><td>2.0ml Tubo de Tampa de Rosca, Não Serrilhado, Rodapé, Natural, E-Beam Tubo estéril com tampa anexada</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-755-228</td><td></td></tr><tr><td>2mag MIXdrive 60 Stirring Drive</td><td>2mag</td><td>40060</td><td>Placa de agitação magnética de 60 posições (adição opcional de capacidade de aquecimento- cat# 40260)</td></tr><tr><td>Arrray de reator de 6 poços, plástico transparente translúcido semelhante a ABS</td><td>Protolabs</td><td>Custom</td><td>Veja arquivos suplementares para arquivo .stl para impressão 3D</td></tr><tr><td>Etanol Absoluto (200 Provas)</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP2818</td><td></td></tr><tr><td>Ácido acético, glacial</td><td>Adaptador Sigma</td><td>A6283</td><td></td></tr><tr><td>, nylon, macho luer para rosca 1/4-28, 25/pacote</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-45505-82</td><td>Para construir 1 matriz de 6 poços, precisa de 6 (1 pacote)</td></tr><tr><td>Folha de alumínio</td> Câmara anaeróbica <td>Fisher Scientific</td><td>01-213-100</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Coy Lab Products</td><td>Tipo B</td><td></td></tr><tr><td>Bel-Art&nbsp; SP Scienceware Flea Micro Spinbar Barras de Agitação Magnéticas (1/pk)</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-261679</td><td>Para construir 1 matriz de 6 poços, precisa de 6&nbsp;</td></tr><tr><td>Gabinete de biossegurança classe 2</td><td>Nuaire</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ácido butírico</td><td>Sigma</td><td>B103500&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2 &middot; 2H2O (Cloreto de Cálcio Di-hidratado)</td><td>Sigma</td><td>C7902</td><td></td></tr><tr><td>Toalhetes Germicidas Clorox Healthcare Com Alvejante, Sem Perfume, 6" x 5", Pacote de 150 Toalhetes</td><td>Office Depot</td><td>129202</td><td></td></tr><tr><td>D-(-)-Frutose</td><td>Sigma</td><td>F0127-100G</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-Celobiose</td><td>Sigma</td><td>C7252-100G</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-Glicose</td><td>Sigma</td><td>G8270-100G</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-Maltose monohidratada</td><td>Broca Sigma</td><td>M5885-100G</td><td></td></tr><tr><td>Torneira de Mão com Plugue America DWTP1/4-28</td><td>Home Depot</td><td>305699489</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's Phosphate Buffered Saline, 1X sem Ca e Mg, Estéril</td><td>Genesee</td><td>25-508</td><td></td></tr><tr><td>Fêmea luer &times; 1/16&Prime; adaptador de mangueira barb, Nylon, 25/pacote</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-45502-00</td><td>Para construir 1 matriz de 6 poços, precisa de 24 (1 pacote)</td></tr><tr><td>Luer fêmea &times; 1/8&Prime; adaptador de mangueira barb, Nylon 25/pacote</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-45502-04</td><td>Para construir 1 matriz de 6 poços, precisa de 6 (1 pacote)</td></tr><tr><td>Luer feminino &times; 3/32&Prime; adaptador de mangueira barb, Nylon, 25/ pacote</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-45502-02</td><td>Para construir 1 matriz de 6 poços, precisa de 6 (1 pacote)</td></tr> <tr><td>Camiseta luer feminina, Nylon, 25/pacote</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-45502-56</td><td>Para construir 1 matriz de 6 poços, precisa de 10 (1 pacote)</td></tr> <tr><td>FeSO4 &middot; 7H2O (Ferro [II] Sulfato Heptahidratado)</td> <td>Sigma</td><td>F8633</td><td></td></tr><tr><td>Hematin</td><td>Sigma</td><td>H3281</td><td></td></tr><tr><td>Histidina</td><td>Sigma</td><td>H7750</td><td></td></tr><tr><td>Ácido isovalérico</td><td>Sigma</td><td>129542</td><td></td></tr><tr><td>K2HPO4 dibásico (hidrogenofosfato dipotássico)</td><td>Sigma</td><td>P2222-1KG</td><td></td></tr><tr><td>KH2PO4 monobásico (dihidrogenofosfato de potássio)</td>Pontas de Pipeta de Orifício Grande <td>Sigma</td><td>P0662-500G</td><td></td></tr><tr><td>Fisher</td><td>Scientific</td><td>02-707-134</td><td></td></tr><tr><td>Cloridrato de L-Cisteína</td><td>Sigma</td><td>C1276-10G</td><td></td></tr><tr><td>Luer macho com anel de trava &times; 1/8&Prime; adaptador de mangueira barb, Nylon, 25/pacote</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-45505-04</td><td>Para construir 1 matriz de 6 poços, precisa de 42 (2 pacotes)</td></tr><tr><td>Extrato de carne</td><td>Sigma</td><td>70164-500G</td><td></td></tr><tr><td>Med Vet International&nbsp; Agulha Exel, 20G X 1", Hipodermica, 100/Caixa, 26417</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-209-2532</td><td></td></tr><tr><td>Menadiona (Vitamina K3)</td><td>Sigma</td><td>M5625</td><td></td></tr><tr><td>MgSO4&nbsp; &middot; 7H2O (Sulfato de Magnésio Heptahidratado)</td><td>Sigma</td><td>M1880-500G&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Milli-Q água</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>NaCl (Cloreto de Sódio)</td><td>Sigma</td><td>S9888-500G&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>NaHCO3 (Bicarbonato de Sódio)</td><td>Sigma</td><td>S5761-500G</td><td></td></tr><tr><td>Omnifi t Q-series tampa de garrafa de dois furos</td><td>Cole-Parmer</td><td>00945Q-2</td><td>Para construir 1 matriz de 6 poços, precisa de 1</td></tr><tr>bomba peristáltica de 24 canais<td>PMP IPC-N L 24CHNL 8RLR 115V</td><td>MasterFlex</td><td>ISM939C-115V</td><td>, requer 1 para fonte e 1 para resíduos</td></tr><tr><td>Selo de Precisão&reg; septos de borracha, branco, tubo de vidro de 7 mm O.D. (100/pk)</td><td>Millipore Sigma</td><td>Z553905-100EA</td><td>Para construir 1 matriz de 6 poços, precisa de 6 septos</td></tr><tr><td>Ácido propiônico</td><td>Sigma</td><td>P5561&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Tubulação de Bomba, 2-Stop, Tygon S3 E-Lab, 1.02 mm ID; 12/PK</td><td>VWR</td><td>MFLX96460-28</td><td>Para construir 1 matriz de 6 poços, precisa de 6&nbsp; (1 pacote)</td></tr><tr><td>Tubulação da bomba, 2 paradas, Tygon S3 E-Lab, 1,14 mm de diâmetro; 12/PK</td><td>VWR</td><td>MFLX96460-30</td><td>Para construir 1 matriz de 6 poços, precisa de 6 (1 pacote)</td></tr> <tr><td>Puritan Cary-Blair Medium, 5 ml</td> Garrafas de armazenamento de mídia redondas <td>Fisher Scientific</td><td>22-029-646</td><td></td></tr><tr><td>PYREX 2L, com tampa de rosca GL45</td> Lâminas de barbear <td>Fisher Scientific</td><td>06-414-1E</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Genesee</td><td>12-640</td><td></td></tr><tr><td>Resazurin, sal de sódio</td><td>ACROS Organics da ThermoFisher</td><td>AC41890-0010</td><td></td></tr><tr><td>Amido solúvel</td><td>Sigma</td><td>S9765-100G</td><td></td></tr><tr><td>Micro Espátulas de Aço Inoxidável, lâmina semelhante a colher</td><td>Fisher Scientific</td><td>S50823</td><td></td></tr><tr><td>TBNG TYGON ELFL 2.06MMID 100'VWR</td><td></td> <td>MFLX06449-42</td><td>Para construir 1 matriz de 6 poços, precisa de 205.5 cm</td></tr><tr><td>Suplemento Mineral Traço</td><td>ATCC</td><td>MD-TMS</td><td></td></tr><tr><td>Peptona de Tripticase (BBL)</td> <td>Fisher Scientific</td><td>B11921</td><td></td></tr><tr><td>Tubulação, PTFE, 1/8&Prime; (3,2 mm) OD &vezes; 1,5 mm ID, 10 M</td><td>Cole-Parmer</td><td>008 T32-150-10</td><td>Para construir 1 matriz de 6 poços, precisa de 300 mm</td></tr><tr><td>Tween 80</td><td>Sigma</td><td>P1754&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Suplemento vitamínico</td><td>ATCC</td><td>MD-VS</td><td></td></tr><tr><td>Extrato de levedura (Bacto)</td><td>Fisher Scientific</td><td>DF0127-17-9</td><td></td></tr></tbody></table>

montagem de biorreatores para cultura contínua de comunidades fecais complexas

Bioreactor Assembly for Continuous Culture of Complex Fecal Communities

Amostras fecais foram coletadas de camundongos colonizados com dejeto líquido fecal humano 2 semanas após a inoculação e armazenadas a -80 °C. O sistema de biorreator foi configurado com fluxo contínuo de meio MEGA para dois poços de reator replicados (Figura 3A). A pasta fecal foi preparada a partir dos pellets fecais de camundongo de acordo com o protocolo descrito na etapa 6, e ambos os reatores foram inoculados por porta de amostra com a pasta fecal de c...

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The microbiota, especially bacteria, respond to various environmental exposures such as micro and macronutrients, pharmacological compounds, and ...

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Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Imunologia e Infecção

Laboratório escala biodigestores permitem aos cientistas para pesquisar novas formas de otimização de aplicações existentes de biotecnologia anaeróbia e avaliar o potencial de produção de metano de vários resíduos orgânicos. Este artigo apresenta um modelo generalizado para a construção, a inoculação, operação e monitoramento de uma escala laboratorial continuamente agitada digestor anaeróbico.

Continuamente agitada digestor anaeróbico para converter resíduos orgânicos em biogás: Configuração do Sistema e Operação Básica

Fonte: Ahmadi, S., et al. Um modelo de cultivo lotado in vitro para estimar os efeitos dos regimes intervencionistas na microbiota fecal humana. J. Vis. Exp. (2019).Este vídeo demonstra um método para modelar a fermentação microbiana intestinal incubando amostras fecais com fibra fermentável dietética sob condições anaeróbias para estudar a produção de metabólitos pela microbiota intestinal.

In vitro Modelo de Cultura em Lote para Imitar a Fermentação Cólica pela Microbiota Intestinal Humana

A regulação de nutrientes usando alimentação ajustada ao crescimento contínuo melhora as taxas de crescimento de esferoides de células de mamíferos em comparação com a alimentação em lote intermitente para culturas em biorreatores de suspensão agitada.  Este estudo demonstra os métodos necessários para estabelecer culturas alimentadas com taxa ajustada simples.

Nutrient regulamento, a alimentação contínua de Expansão em grande escala de células de mamíferos em Spheroids

O comportamento funcional de células em cultura pode ser melhorada por cultura em mais in vivo -like ambientes de cultura 3-dimensionais 16-21. Este manuscrito descreve o set-up e operação de um sistema de fibra biorreator oco para in vivo -como mamíferos cultura de tecidos.

Biorreactores de fibras ocas para<em&gt; In Vivo</em&gt; -como Cultura tecidos de mamíferos

Um novo projeto de reator, denominado biorreator de alta densidade (HDBR), é apresentado para o cultivo e estudo de comunidades microbianas de alta densidade. Aqui, o HDBR é aplicado com sucesso em uma configuração de fotobiorreator (PBR) para o estudo do metabolismo do nitrogênio por uma comunidade mista de algas de alta densidade.

Um biorreator Novel de Cultivo de Alta Densidade de diversas comunidades microbianas

Interações do anfitrião-micróbio de intestino foram avaliadas usando uma nova abordagem que combina uma comunidade oral sintética, em vitro digestão gastrointestinal e um modelo do epitélio do intestino delgado. Apresentamos um método que pode ser adaptado para avaliar a invasão celular dos micróbios patogénicos e biofilmes de várias espécies, ou mesmo para testar a capacidade de sobrevivência dos probióticos formulações.

Avaliação da viabilidade de um consórcio bacteriano sintético na Interface Host-micróbio em Vitro Gut

Aqui, apresentamos um protocolo para cultivo a microbiota do intestino do cólon in vitro, usando uma série de biorreatores que simulam as condições fisiológicas do tracto gastro-intestinal.

Aplicação avançada em Vitro cultivo tecnologia para estudar a Microbiota do intestino humano

Aqui, apresentamos um protocolo para alcançar a fabricação em larga escala de células aderentes através de um sistema totalmente fechado baseado em microcarreadores dissolvidos grau GMP. O cultivo de células-tronco mesenquimais humanas, células HEK293T e células Vero foi validado e atendeu tanto às exigências de quantidade quanto aos critérios de qualidade para a indústria de terapia celular e gênica.

Produção de células em larga escala com base em microtransportadores porosos solúveis de grau GMP

O foco deste artigo é detalhar as melhores práticas para a fabricação de meios para microrganismos anaeróbios fastidiosos adquiridos de um ambiente. Esses métodos ajudam a gerenciar culturas anaeróbias e podem ser aplicados para apoiar o crescimento de microrganismos indescritíveis não cultivados, a "matéria escura microbiana".

Um conjunto de formatos de meios simulados informados in situ para cultivo de microrganismos anaeróbios ambientalmente adquiridos

O Minibioreactor Array (MBRA) é um sistema de cultura de fluxo contínuo, personalizável e de alto rendimento que permite o cultivo de comunidades microbianas complexas, apoiando experimentos paralelos para estudar a dinâmica do microbioma, interações terapêuticas e respostas microbianas a fatores ambientais.

Protocolo atualizado para montagem e uso do arranjo de minibiorreatores (MBRA)

Aprenda a montar mini-biorreatores para cultura contínua de comunidades fecais complexas em condições anaeróbicas. Este método permite experimentos paralelos controlados para estudar interações microbianas e seu impacto na saúde.

Montagem de biorreatores para cultura contínua de comunidades fecais complexas

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