Imagem de transferência de energia de ressonância de Förster de células vivas da dinâmica de ativação de Akt regulada metabolicamente em células HepG2

A heterogeneidade celular é um obstáculo para a descrição precisa dos meandros da dinâmica celular, que são essencialmente calculados em média. É por isso que estamos aqui para obter imagens de células únicas. Desenvolvimentos recentes em biossensores FRET geneticamente codificados melhoraram a especificidade e revolucionaram o rastreamento em tempo real de Akt dentro das células, o que é fundamental para a compreensão heterogenética e o desenvolvimento de terapias medicamentosas personalizadas.

O câncer e o diabetes são através de vias metabólicas complexas. Para decodificar a biocomplexidade da via de sinalização da insulina no câncer, usamos imagens FRET de células vivas de ponta com resolução de célula única. Descobrimos que otimizar o microscópio confocal, a configuração de hardware e software, juntamente com o ajuste fino da potência do laser e o ajuste do ganho do detector, são essenciais para minimizar qualquer ruído e diafonia espectral nos sinais FRET.