Name: Um modelo de transferência adotiva de artrite reumatóide em camundongos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T15:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 37 s
Description: Aprenda a estabelecer um modelo de transferência adotiva de artrite reumatoide em camundongos C57BL/6 usando células T CD4+ de camundongos SKG. Este método rápido e reprodutível permite estudar mecanismos imunológicos e testar novas terapias.

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<ol><li>Global, regional, and national burden of rheumatoid arthritis, 1990-2020, and projections to 2050: A systematic analysis of the global burden of disease study. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Lancet+Rheumatol%22">Lancet Rheumatol</a>. 5 (10), e594-e610 (2021).</li>
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<li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+sequencing+of+immune+cells+from+anticitrullinated+peptide+antibody+positive+and+negative+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Single-cell sequencing of immune cells from anticitrullinated peptide antibody positive and negative rheumatoid arthritis.</a> Nat Commun. 12 (1), 4977(2021).</li>
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<li>Ahmed, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual+inhibition+of+glycolysis+and+glutaminolysis+for+synergistic+therapy+of+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Dual inhibition of glycolysis and glutaminolysis for synergistic therapy of rheumatoid arthritis.</a> Arthritis Res Ther. 25 (1), 176(2023).</li>
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<li>Huo, F., Hou, J., Zhu, Y., Feng, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ferroptosis+inducer+ike+ameliorate+pulmonary+fibrosis+in+collagen-induced+arthritis+%28CIA%29+mice+via+decreasing+the+expression+of+IL-6%2C+CCL5+and+CXCL9%5BTitle%5D)+AND+%22Xi+Bao+Yu+Fen+Zi+Mian+Yi+Xue+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">ferroptosis inducer ike ameliorate pulmonary fibrosis in collagen-induced arthritis (CIA) mice via decreasing the expression of IL-6, CCL5 and CXCL9.</a> Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi. 40 (2), 114-120 (2024).</li>
<li>Sun, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ID2+exacerbates+the+development+of+rheumatoid+arthritis+by+increasing+IFN-%CE%B3+production+in+CD4%2B+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">ID2 exacerbates the development of rheumatoid arthritis by increasing IFN-γ production in CD4+ T cells.</a> Clin Transl Med. 15 (3), e70242(2025).</li>
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<li>Sakaguchi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+thymic+T-cell+selection+due+to+a+mutation+of+the+ZAP-70+gene+causes+autoimmune+arthritis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Altered thymic T-cell selection due to a mutation of the ZAP-70 gene causes autoimmune arthritis in mice.</a> Nature. 426 (6965), 454-460 (2003).</li>
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<li>Wu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((B+cells+in+rheumatoid+arthritis%3A+pathogenic+mechanisms+and+treatment+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">B cells in rheumatoid arthritis: pathogenic mechanisms and treatment prospects.</a> Front Immunol. 12, 750753(2021).</li>
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<li>Wang, X. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopamine+D2+receptor+on+CD4%2B+T+cells+is+protective+against+inflammatory+responses+and+signs+in+a+mouse+model+of+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Dopamine D2 receptor on CD4+ T cells is protective against inflammatory responses and signs in a mouse model of rheumatoid arthritis.</a> Arthritis Res Ther. 25 (1), 87(2023).</li>
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<li>Anaparti, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+frequency+of+TIGIT%2B+CD4+T+cell+subset+in+autoantibody-positive+first-degree+relatives+of+patients+with+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Increased frequency of TIGIT+ CD4 T cell subset in autoantibody-positive first-degree relatives of patients with rheumatoid arthritis.</a> Front Immunol. 13, 932627(2022).</li>
<li>Lei, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synovial+microenvironment-influenced+mast+cells+promote+the+progression+of+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Synovial microenvironment-influenced mast cells promote the progression of rheumatoid arthritis.</a> Nat Commun. 15 (1), 113(2024).</li>
<li>Jinno, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+retention+of+biologics+in+Japanese+patients+with+elderly-onset+rheumatoid+arthritis-the+answer+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Rheumatology+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">Comparison of retention of biologics in Japanese patients with elderly-onset rheumatoid arthritis-the answer cohort study.</a> Rheumatology (Oxford). 64 (2), 509-516 (2025).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Agarose</td><td>Yeasen</td><td>10208ES60</td><td>Preparando gel de agarose para uso em experimentos de eletroforese de DNA</td></tr><tr><td>Etanol anidro</td><td>Shanghai HuShi Laboratory Instruments Co., Ltd.</td><td>100009218</td><td>Agente desidratante e fixador</td></tr><tr><td>ZAP 70 primers</td><td>Tsingke</td><td></td><td>Primers usados para detectar a expressão do gene ZAP70, comumente usados em experimentos de PCR para genotipagem de camundongos</td></tr><tr><td>0,5 M Solução de EDTA (pH = 7,4)</td><td>Biosharp</td><td>R00521</td><td>Usado para descalcificação para garantir a qualidade das seções de tecido e coloração para tecidos contendo cálcio, mantendo a integridade estrutural do tecido</td></tr><tr><td>Tubos ep sem enzimas de 1,5 mL</td><td>LABSELECT</td><td>MCT-001-150-S</td><td>Usado para uma variedade de experimentos, como armazenamento de amostras, separação centrífuga, etc</td></tr><tr><td>2x Q3 SYBR qPCR Master Mix (Universal)</td><td>ToloBio</td><td>22204</td><td>Usado para realizar reações qPCR altamente específicas e altamente sensíveis.</td></tr><tr><td>2x Magic Green Taq SuperMix</td><td>TOLOBIO</td><td>21502-04</td><td>Solução tampão para pré-eletroforese</td></tr> Solução <tr><td>de formaldeído (paraformaldeído) a 4%</td><td>Biosharp</td><td>BL539A</td><td>Usado como fixador para preservar a estrutura do tecido e a morfologia celular, fornecendo amostras estáveis e bem preservadas para as etapas de coloração subsequentes</td></tr><tr><td>Kit de isolamento de RNA total de tecido/célula animal</td><td>Servicebio</td><td>MPC2409122</td><td>Extração de RNA total de tecidos/células animais</td></tr><tr><td>BD Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Th1/Th2/Th17 Cytokine Kit</td><td>BD Biosciences</td><td>560485</td><td>Medir a expressão de citocinas Th1/2/17 no soro de camundongo.</td></tr><tr><td>Placa de cultura celular</td><td>LABSELECT</td><td>12211</td><td>Um recipiente para fluido celular do baço e gânglios linfáticos</td></tr><tr><td>Dimetilbenzeno</td><td>China National Pharmaceutical Group Chemical Reagents Co., Ltd.</td><td>10023418</td><td>Usado como agente de desparafinização e limpeza</td></tr><tr><td>Câmara de contagem de células de seis portas Easyfive</td><td>CytoEasy</td><td>N3EF110</td><td>Usado para contagem de células</td></tr><tr><td>Solução de coloração Safranin O-Fast Green aprimorada para cartilagem.</td><td>Solarbio</td><td>G1371</td><td>Mancha cartilagem e tecidos ósseos para observar alterações patológicas na área articular.</td></tr><tr><td>Lâmina de vidro</td><td>CITOTEST</td><td>188105</td><td>Suporte básico para fatiamento de tecidos</td></tr><tr><td>Solução de coloração de hematoxilina</td><td>Servicebio</td><td>G1005-1</td> Solução de coloração de hematoxilina <td>moribunda</td></tr><tr><td></td><td>Servicebio</td><td>G1001</td><td>Morrendo</td></tr><tr><td>Centrífuga refrigerada de baixa velocidade</td><td>Cence</td><td>F14300021010004</td><td>É usado para centrifugação e precipitação</td></tr><tr><td>Manan</td><td>Sigma</td><td>m7504</td><td>Ativador para o modelo. Dissolva em PBS estéril a 2 mg / mL, misture bem e filtre através de um 0,22 &mu; m para eliminar quaisquer partículas ou possíveis fontes de contaminação.</td></tr><tr><td>MojoSort Magnet</td><td>Biolengend</td><td>480019</td><td>Usado para isolar e purificar células T CD4 + do baço, gânglios linfáticos de camundongos</td></tr><tr><td>Kit de isolamento de células T CD4 de camundongos MojoSort</td><td></td> Mouse <td>480033</td><td>Usado para isolar e purificar células T CD4 + do baço, gânglios linfáticos de camundongos. Use um método de seleção negativa que se liga diretamente à molécula CD4 para isolar células T CD4+, preservando a integridade dos antígenos de superfície sem afetar a funcionalidade da molécula CD4, tornando-o adequado para experimentos de infusão de células T CD4+.</td></tr><tr><td>Nano-300</td><td>ALLSHENG</td><td>AS-11020-00</td><td>Detecção precisa de ácidos nucleicos, proteínas e soluções celulares Agente de</td></tr><tr><td>montagem de resina neutra</td><td>Biosharp</td><td>BL704A</td><td>Fixar e preservar seções de tecido manchado</td></tr><tr><td>Micrótomo de parafina</td><td>KEDEE</td><td>KD-3389</td><td>Usado para seções de parafina</td></tr><tr><td>Solução salina tamponada com fosfato (PBS)</td> <td>Pricella</td><td>WHB824P281</td><td>Usado como tampão solvente ou agente de limpeza,</td></tr> <tr><td>filtro de célula estéril (70 &micro; m)</td> <td>Biosharp</td><td>BS-70-CS</td><td>Remova grandes impurezas ou aglomerados de células agregadas da suspensão celular para garantir a pureza da amostra e a uniformidade celular</td></tr><tr><td>Seringa estéril (1 mL)</td> <td>Lingyang Medical Apparatus</td><td>20241020</td><td>Injeção na veia canthal interna</td></tr><tr><td>Centrífuga microrefrigerada de mesa de alta velocidade</td><td>SCILOGEX</td><td>S1010E</td><td>Usado para centrifugação e precipitação</td></tr><tr><td>TEA Buffer (50x)</td><td>Yeasen</td><td>60116ES76</td><td>Estabiliza o pH, ajuda a proteger e preservar moléculas como DNA e RNA, usadas em experimentos de eletroforese</td></tr><tr><td>ToloScript All-in-one RT EasyMix para qPCR</td><td>ToloBio</td><td>22107</td><td>Usado para converter modelos de RNA em cDNA, facilitando a análise subsequente da expressão gênica, qPCR e outros experimentos de biologia molecular.</td></tr><tr><td>Pipetas Transefer</td><td>BIOFIL</td><td>240515-133-A</td><td>Usado para transferir soluções</td></tr><tr><td>Solução de corante azul de tripano</td><td>Biosharp</td><td>7009529</td><td>Comumente usado para ensaios de viabilidade celular, ajuda a diferenciar células vivas de células mortas</td></tr></tbody></table>

um modelo de transferência adotiva de artrite reumatóide em camundongos

An Adoptive Transfer Model of Rheumatoid Arthritis in Mice

Pontuação clínica do inchaço articular e taxa de incidência em camundongos 
A Figura 1 mostra a pontuação clínica do inchaço articular e a taxa de incidência em camundongos modelo. Os resultados indicam que todos os camundongos do grupo modelo desenvolveram a doença (n = 4), com uma taxa de incidência de 100%. As pontuações no grupo modelo aumentaram significativamente, mostraram breve alívio na segunda semana e, posteriormente, aumentaram ao longo de um período de 6 semanas.
Manifestação de inchaço articular em camundongos As articulações dos camundongos do grupo modelo exibem espessamento e inchaço significativos, com inchaço e espessamento perceptíveis também observados nos membros anteriores e posteriores (Figura 2).
Resultados patológicos das articulações do tornozelo de camundongos Os resultados patológicos indicam que, em comparação com o grupo controle, os camundongos do grupo modelo apresentam espessamento significativo da sinóvia nas articulações do tornozelo, descontinuidade no osso e agregação acentuada de células inflamatórias (Figura 3, Figura 4 e Figura 5).
Fatores inflamatórios séricos relacionados às células T Em comparação com o grupo controle, os camundongos do grupo modelo apresentaram aumentos significativos nos níveis séricos de IL-10 (7,51 vs 2,15 pg/mL), TNF (78,83 vs 13,11 pg/mL), IL-17 (101,6 vs 12,64 pg/mL) e IFN-γ (5,15 vs 1,90 pg/mL) (p &lt; 0,05). A IL-6 também aumentou significativamente em comparação com o grupo controle (15,59 vs 6,27 pg/mL) (p = 0,05, Figura 6).
Alterações nas subpopulações de células T Th1/2/17 e Tregs no baço Os níveis de expressão de mRNA de Tbx21 (Th1), Gata3 (Th2), Il-17 (Th17) e Foxp3 (Tregs) foram medidos para avaliar alterações em subconjuntos de células T no baço. Esses genes codificam os principais fatores de transcrição e citocinas que definem a diferenciação e a função de seus respectivos subconjuntos de células T. Em comparação com o grupo controle, os camundongos do grupo modelo mostraram expressão de mRNA significativamente aumentada de Tbx21 (1,68 vs 0,61) e Il-17 (26,30 vs 0,75) no baço (p &lt; 0,05) em relação ao gene de referência Gapdh.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68196/68196fig01.jpg"> 
Figura 1: Pontuação clínica do edema articular. (A) Camundongos de grupo modelo; (B) Incidência cumulativa nos camundongos do grupo modelo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68196/68196fig01large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68196/68196fig02.jpg"> 
Figura 2: Manifestações de inchaço articular em camundongos controle e modelo (n = 4). (A-C) Imagens representativas dos escores de inchaço da pata e das articulações (0,2,4) nos grupos controle e modelo de camundongos. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68196/68196fig02large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68196/68196fig03.jpg"> 
Figura 3: Alterações histológicas nas articulações do tornozelo de camundongos do grupo controle e modelo observadas com coloração de hematoxilina-eosina. (A) Articulação do tornozelo de camundongo controle; (B) Descontinuidade no osso da articulação do tornozelo do camundongo do grupo modelo; (C) Proliferação sinovial na articulação do tornozelo de camundongo do grupo modelo. Barras de escala = 50 μm (primeira coluna), 100 μm (segunda e terceira colunas). As imagens nas Fig. 3B e 3C são do mesmo camundongo, demonstrando diferentes fenótipos patológicos. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68196/68196fig03large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68196/68196fig04.jpg"> 
Figura 4: Diferenças na espessura sinovial das articulações do tornozelo entre os camundongos do grupo controle e do grupo modelo (p &lt; 0,05). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68196/68196fig04large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68196/68196fig05.jpg"> 
Figura 5: Alterações histológicas nas articulações do tornozelo de camundongos do grupo controle e modelo observadas com a coloração Safranin O-Fast Green. (A) Articulação do tornozelo do camundongo do grupo controle; (B) Proliferação sinovial na articulação do tornozelo do camundongo do grupo modelo. Barras de escala = 50 μm (primeira coluna), 100 μm (segunda e terceira colunas). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68196/68196fig05large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68196/68196fig06.jpg"> 
Figura 6: Alterações nos fatores inflamatórios relacionados às células T e subconjuntos em camundongos do grupo controle e modelo. (A) Expressão de fatores inflamatórios relacionados a células T no soro de camundongos do grupo controle e modelo e (B) as alterações nos subconjuntos de células T Th1/2/17 e Tregs no baço. *p &lt; 0,05, **p &lt; 0,01. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68196/68196fig06large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Pontuação</td>
			<td>Inchaço (intervalo 0-4)</td>
			<td>Eritema (intervalo 0-2)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0</td>
			<td>Nenhum</td>
			<td>Nenhum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1</td>
			<td>Qualquer dígito</td>
			<td>ligeiro</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2</td>
			<td>Pata</td>
			<td>Extremo</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3</td>
			<td>Pulso/tornozelo</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4</td>
			<td>Membro inteiro</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 1: Critérios de pontuação de artrite. Para pontuar a artrite, cada membro é pontuado de acordo com o inchaço e o eritema, com uma pontuação de 0 a 6 atribuída a cada membro. As pontuações para todos os quatro membros são somadas para gerar a pontuação total de artrite para cada camundongo.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="2">Sequências de primers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nome do oligo</td>
			<td>Sequência 5' a 3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tbx21-Avançar</td>
			<td>AGCAAGGAGCGAATGTT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tbx21-Reverso</td>
			<td>GGGTGGACATATAAGCGGTTC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gata3-Avançado</td>
			<td>CTCGGCCATTCGTACATGGAA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gata3-Reverso</td>
			<td>GGATACCTCTGCACCGTAGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Il-17A-Avançado</td>
			<td>TTTAACTCCCTTGGCGCAAAA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-17A-Reverso</td>
			<td>CTTTCCCTCCGCATTGACAC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foxp3-Forward</td>
			<td>CCCTTGACCTCAAAACCAAG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foxp3-Reverso</td>
			<td>GTGTGACTGCATGACTAACTTTGA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gapdh-Forward</td>
			<td>GGTTGTCTCCTGCGACTTCA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gapdh-Reverso</td>
			<td>TGGTCCAGGGTTTCTTACTCC</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 2: Lista de sequências de primers.
Figura suplementar S1: Estratégia de gating para classificação de células T CD4+ por citometria de fluxo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68196/Supplemental%20Figure-Gating%20strategy.tif" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>

Um modelo de transferência adotiva de artrite reumatóide em camundongos

Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic, systemic autoimmune inflammatory disorder that may result in joint damage, deformities, disability, and even ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Este vídeo demonstra um método para gerar artrite induzida por adjuvante em um modelo murino. O adjuvante completo de Freund (CFA) é injetado na articulação do tornozelo do camundongo e nas áreas periarticulares. O CFA ativa o sistema imunológico, levando à infiltração de neutrófilos e inflamação exagerada.

Uma técnica para gerar um modelo de camundongo com artrite induzida por adjuvante

Este vídeo mostra uma terapia baseada em células para artrite autoimune em camundongos. As células T reguladoras derivadas de iPSC que expressam receptores específicos de ovalbumina são injetadas com albumina de soro bovino metilado (mBSA) emulsionada em um adjuvante. As células apresentadoras de antígenos murinos (APCs) processam e apresentam o mBSA às células T, estimulando a ativação e migração das células T para a membrana sinovial da articulação do joelho. As injeções subsequentes envolvem...

Uma terapia baseada em células para artrite autoimune em um modelo murino

Descrevemos os protocolos para nossos arteriosclerois enxerto do mouse (GA) modelos que envolvem a interposição de um segmento de vaso do mouse em um receptor da mesma linhagem consanguínea. Por recruzá alterações genéticas adicionais no recipiente dador, o modelo pode determinar o efeito de genes específicos em GA.

Os modelos de mouse para Arteriosclerose Graft

Aqui, apresentamos um protocolo para induzir inflamação colônica em camundongos por transferência adotiva de células Taltas CD4+CD45RB singênicas para receptores deficientes em células T e B. As características clínicas e histopatológicas mimetizam as doenças inflamatórias intestinais humanas. Este método permite o estudo do início da inflamação colônica e da progressão da doença.

Indução de Murino inflamação intestinal por transferência adotiva de Effector CD4<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; Alta</sup&gt; Células T em imunodeficientes Mice

Descrevemos um protocolo para enxerto de interposição aórtica em camundongos. O objetivo do protocolo é fornecer um modelo para estudar processos patológicos e estratégias terapêuticas relevantes para reações aloimunes nas artérias e as alterações arteriais resultantes que contribuem para a falha do transplante de órgãos.

Modelo rato de rejeição vascular induzida por Aloimune e Transplante Arteriosclerose

A transferência de linfócitos bm12 para um receptor C57BL/6 é um modelo estabelecido de lúpus eritematoso sistêmico. Aqui descrevemos como iniciar a doença usando este modelo e como caracterizar células T foliculares auxiliares, células B do centro germinativo e células plasmáticas por citometria de fluxo.

O Inducible Modelo BM12 de Lúpus Eritematoso Sistêmico (LES) em camundongos C57BL / 6

Apresentamos aqui um método para desenvolver células T reguladoras (Tregs) específicas de antígeno funcional (Ag) a partir de células-tronco pluripotentes induzidas (iPSCs) para imunoterapia de artrite autoimune em um modelo murino.

Desenvolvimento de Células-Tronco de derivados de células T regulatórias antígeno específico da Contra Auto-imunidade

Descrito, é a preparação de nanopartículas lipossomas antigênicas e seu uso em estimulando células B ativação in vitro e em vivo. Respostas consistentes e robustas anticorpo levaram ao desenvolvimento de um novo modelo de alergia ao amendoim. O protocolo para a geração de lipossomas antigênicos pode ser estendido para antígenos diferentes e modelos de imunização.

Antigênicos lipossomas para a geração de anticorpos específicos de doença

Este protocolo usa peptídeos mistos G6PI para construir modelos de artrite reumatoide que estão mais próximos do da artrite reumatoide humana em células CD4+ T e citocinas. Células T assassinas naturais invariantes de alta pureza (principalmente iNKT2) com fenótipos e funções específicas foram obtidas por indução in vivo e purificação in vitro para imunoterapia adotiva.

Imunoterapia adotiva de células iNKT em Isomerase Isomerase Induzida de Glicose-6-Fosfato (G6PI)-Induzido RaMice

Um método criogênico de pulverização para processar patas de urina usando um moinho congelador de nitrogênio líquido foi desenvolvido para melhorar o rendimento e a qualidade do RNA ou proteína extraído dos tecidos e permitir a análise de perfis moleculares associados a inflamatórios Respostas.

Um protocolo de crio-pulverização para processar patas do rato para avaliar caminhos moleculares da inflamação do tecido em um modelo induzido da artrite do colágeno

A imagem in vivo das articulações é uma técnica valiosa para descobrir o comportamento migratório dos leucócitos e a dinâmica molecular dentro das articulações inflamadas. Aqui, apresentamos um protocolo detalhado para imagens in vivo das articulações usando um modelo murino da artrite induzida por colágeno tipo II (CIA).

In vivo Imagens revelam o comportamento migratório dos leucócitos dentro das articulações

Aprenda a estabelecer um modelo de transferência adotiva de artrite reumatoide em camundongos C57BL/6 usando células T CD4+ de camundongos SKG. Este método rápido e reprodutível permite estudar mecanismos imunológicos e testar novas terapias.

Um modelo de transferência adotiva de artrite reumatóide em camundongos

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