Name: Isolamento de células contendo retinóides pulmonares por classificação de células (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-04-11T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 47 s
Description: Aprenda a isolar células pulmonares contendo retinoides por classificação de células ativada por fluorescência (FACS) em camundongos. Este método revela a complexidade do metabolismo de retinoides e seu papel protetor nos pulmões.

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<table><tbody><tr><td>Pipeta sorológica de 10 mL</td><td>Avantor/VWR</td><td>76452-284</td><td></td></tr><tr><td>100 &micro; m coador&nbsp;</td><td>Greiner Bio-One</td><td>542000</td><td></td></tr><tr><td>15 mL tubo de falcão</td><td>Corning</td><td>352099</td><td></td></tr><tr><td>40 &micro; m coador&nbsp;</td><td>Greiner Bio-One</td><td>542040</td><td></td></tr><tr><td>50 mL tubo de falcão</td><td>Corning</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Placa de cultura de células, 35 mm &agudo; 10 mm</td><td></td><td>Corning 430165</td><td></td></tr><tr><td>Meio de classificação de células</td><td>Gibco</td><td>A59688DJ</td><td></td></tr><tr><td>Collagenase tipo IV&nbsp;</td><td>Corporação Bioquímica</td><td>Worthington LS004188&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Sistema de Classificação de Células Cytek Aurora</td><td>Cytek Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dispase II</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D4693</td><td></td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>DN25</td><td></td></tr><tr><td>Falcon marca 5 ml polipropileno tubo inferior redondo, 12 mm &acute; 75 mm</td><td>Corning</td><td>352063</td><td></td></tr><tr><td>Falcon marca 5 ml de poliestireno tubo de fundo redondo com tampa de filtro de células, 12 mm &acute; 75 mm</td><td>Corning</td><td>352235</td><td></td></tr><tr><td>Software FlowJo</td><td>Software de citometria de fluxo</td> <td>Becton Dickinson</td><td></td></tr><tr><td>HBSS com Ca2+/Mg2+</td><td>Gibco</td><td>14925-092</td><td></td></tr><tr><td>HBSS sem Ca2+/Mg2+</td><td>Gibco</td><td>14175-095</td><td></td></tr><tr><td>Filtros de tampa de garrafa descartáveis estéreis de fluxo rápido Nalgene</td><td>ThermoFisher</td><td>595-3320</td><td></td></tr><tr><td>Lise de glóbulos vermelhos buffer</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>R7757</td><td></td></tr><tr><td>SpectroFlo CS software&nbsp;</td><td>Cytek Biosciences</td><td>Versão 1.3.0&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Lâminas de bisturi cirúrgico de aço inoxidável Royaltek</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-079-683</td><td></td></tr><tr><td>SYTOX Mancha verde de células mortas</td><td>Invitrogen</td><td>S34860</td><td></td></tr><tr><td>Tamoxifeno</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T2859</td><td></td></tr></tbody></table>

isolamento de células contendo retinóides pulmonares por classificação de células

Isolation of Lung Retinoid-Containing Cells by Cell Sorting

Isolamento de células contendo retinóides pulmonares Pulmões de camundongos (de camundongos Lrat+/+ e Lrat-/-) foram digeridos enzimaticamente e suspensões unicelulares foram preparadas e submetidas a FACS de acordo com o procedimento descrito acima. A classificação de células e a aquisição de dados foram realizadas em um sistema Cytek Aurora™ Cell Sorter operado pelo software SpectroFlo CS versão 1.3.0 usando um bico ...

Isolamento de células contendo retinóides pulmonares por classificação de células

Retinoids (vitamin A and its metabolites) are an essential lipid component of the alveolar microenvironment, and cell-type specific retinoid metabolism is ...

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Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

A preparação altamente purificada de células dendríticas pulmonares do rato é descrito. Ênfase específica é dada para o isolamento de um subconjunto de células dendríticas convencionais.

Isolamento de células dendríticas pulmonares do rato

Este vídeo demonstra o procedimento para isolar células ganglionares primárias da retina (RGCs) murinas usando citometria de fluxo. Este método permite o estudo futuro dos RGCs, com o objetivo de entender melhor o grande declínio na acuidade visual que resulta da perda de RGCs funcionais em doenças neurodegenerativas.

Isolando células ganglionares da retina murina usando classificação de células ativadas por fluorescência

Aqui, fornecemos um protocolo otimizado para o isolamento e clonagem da escassa entidade de células T Vδ1+CD4+ periféricas que é, como mostramos recentemente, um progenitor de células T αβ extratímicas. Esta técnica permite isolar quantitativamente, clonar e expandir eficientemente essas células em cultura ex vivo.

Isolamento e<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Cultura de Vδ1<sup&gt; +</sup&gt; CD4<sup&gt; +</sup&gt; Células T, γδ um Extrathymic αβT de células progenitoras

Este protocolo descreve uma técnica de isolamento para a obtenção de células do estroma mesenquimal residentes primários de pulmão de ratos, através do uso de digestão enzimática, separação por gradiente de densidade, e aderência ao plástico CD146 + selecção esférulas magnéticas.

Isolamento de CD146<sup&gt; +</sup&gt; Células Residente Lung estromais mesenquimais de rato Pulmões

lesões no figado são acompanhadas por expansão de células progenitoras que representa uma população celular heterogénea. classificação Novel deste compartimento celular permite a distinção dos vários subgrupos. O método descrito aqui ilustra a análise de citometria de fluxo e de alta pureza isolamento de vários subconjuntos que podem ser utilizadas para ensaios posteriores.

Isolamento e Enriquecimento de fígado progenitoras Subconjuntos identificado por um marcador combinação de superfícies Novel

Milhões de pessoas sofrem de doenças degenerativas da retina que resultam em cegueira irreversível. Um elemento comum de muitas dessas doenças é a perda de células ganglionares da retina (RGCs). Este protocolo detalhado descreve o isolamento de RGC murinos primários por seleção positiva e negativa com citometria de fluxo.

Isolamento de células de gânglio retiniano murino primário (RGCs) por citometria de fluxo

Este artigo fornece uma metodologia detalhada para as abordagens de dissociação tecidual e fracionamento celular permitindo o enriquecimento de células epiteliais viáveis de regiões proximais e distais do pulmão humano. Aqui essas abordagens são aplicadas para a análise funcional das células progenitoras epiteliais pulmonares através do uso de modelos de cultura organoides 3D.

Isolamento e enriquecimento de células progenitoras epiteliais pulmonares humanas para a cultura organoide

Este protocolo descreve um método para o isolamento de células endoteliais da retina pós-natais murinas otimizado para o rendimento, pureza e viabilidade celular. Essas células são adequadas para abordagens de sequenciamento de próxima geração.

Isolamento de células endoteliais da retina murinas para sequenciamento de próxima geração

Apesar de desafiador, o isolamento das células endoteliais pulmonares é essencial para estudos sobre inflamação pulmonar. O presente protocolo descreve um procedimento para o isolamento de alto rendimento e pureza de células endoteliais macrovasculares e microvasculares.

Isolamento e Purificação de Células Endoteliais Microvasculares e Macrovasculares a partir de Amostras Derivadas de Pulmão

Apresentamos aqui um método reprodutível, acessível e robusto para o isolamento e expansão de células epiteliais brônquicas primárias para biobanco de longo prazo e geração de células epiteliais diferenciadas por cultura na interface ar-líquido.

Isolando Células Epiteliais Brônquicas de Tecido Pulmonar Ressecado para Biobanco e Estabelecendo Culturas de Interface Ar-Líquido Bem Diferenciadas

Este protocolo detalha o isolamento de populações imunes e não imunes vivas do pulmão de camundongo em estado estacionário e após a infecção por influenza. Ele também fornece estratégias de gating para identificar subconjuntos de células epiteliais e mieloides.

Isolamento de populações de células mieloides e epiteliais vivas do pulmão de camundongo

Aprenda a isolar células pulmonares contendo retinoides por classificação de células ativada por fluorescência (FACS) em camundongos. Este método revela a complexidade do metabolismo de retinoides e seu papel protetor nos pulmões.

Isolamento de células contendo retinóides pulmonares por classificação de células

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