Modelo murino de dissecção da aorta torácica induzida por infusão oral de β-aminopropionitrila e angiotensina II subcutânea

Este estudo estabelece um modelo de camundongo de dissecção da aorta torácica, TAD, por meio de indução de BAPN e angiotensina II, fornecendo um procedimento detalhado que oferece uma ferramenta valiosa para explorar a patogênese do TAD ou abordagens terapêuticas. A combinação BAPN-angiotensina II fornece um método para estabelecer modelos de TAD murinos, que atingem uma alta taxa de incidência de TAD e replicam características fisiopatológicas que se assemelham às observadas no TAD humano. No futuro, nossa equipe de pesquisa integrará pesquisas clínicas e fundamentais para ilustrar a patogênese cardiovascular, priorizando a descoberta de novas estratégias terapêuticas por meio de insights mecanicistas e inovação translacional.

[Apresentador] Pesar cada camundongo e registrar o peso corporal máximo para calcular a massa de angiotensina II necessária para o experimento. Use o modelo de cálculo para determinar a massa de angiotensina II para cada camundongo com base no peso corporal máximo. Em seguida, calcule a massa total de angiotensina II necessária para preparar 130 microlitros de solução de angiotensina II por camundongo. Use o modelo fornecido para determinar o volume de enchimento da solução de angiotensina II e solução salina necessária para o experimento. Pesar a quantidade calculada de angiotensina II num microtubo estéril utilizando uma balança analítica. Adicione o volume calculado de solução salina normal ao microtubo. Usando um misturador de vórtice, dissolva bem o pó até que não haja partículas visíveis. Pesar cada bomba osmótica, incluindo o corpo da bomba e o moderador de fluxo, utilizando uma balança analítica. Conecte um tubo de enchimento a uma seringa estéril de 1 mililitro recém-aberta e aspire cuidadosamente a solução de angiotensina II preparada. Segure o tubo de enchimento para cima e remova quaisquer bolhas de ar da seringa. Insira cuidadosamente a extremidade do tubo de enchimento na abertura superior da bomba osmótica até que o tubo não possa mais ser inserido. Segure a bomba na vertical e pressione lentamente o êmbolo da seringa até que a solução de angiotensina II apareça na saída. Em seguida, pare e remova o tubo de enchimento com cuidado. Em seguida, insira o moderador de fluxo na abertura da bomba com cuidado e lentamente até que não haja espaço entre o moderador e a parte superior da bomba. Pesar a bomba carregada utilizando a balança analítica e registar o valor. Coloque as bombas cheias em solução salina estéril a 37 graus Celsius, com a cabeça do moderador voltada para cima, por pelo menos seis horas antes do implante. Coloque o mouse em decúbito ventral na superfície cirúrgica. Use um bisturi para fazer cuidadosamente uma incisão transversal de 1 centímetro na pele. Use um par de pinças curvas para agarrar a margem incisal e outro par de pinças para dissecar sem rodeios o tecido subcutâneo, criando uma bolsa para a bomba osmótica. Insira a bomba cheia no bolso com a cabeça do moderador de fluxo apontando para a extremidade caudal do mouse. Alinhe bem as margens incisais e feche a pele, usando suturas inabsorvíveis 6-0. Esta figura ilustra a incidência de dissecção e ruptura da aorta em todos os grupos experimentais. A dissecção da aorta ocorreu em 100% dos camundongos no grupo BAPN mais angiotensina II, com 35% apresentando ruptura, superando a incidência de 55% ou 60% observada no grupo BAPN ou BAPN mais solução salina, enquanto nenhuma dissecção ou ruptura ocorreu nos controles. A morfologia macroscópica da aorta mostrou deformação progressiva nos grupos BAPN, BAPN mais solução salina e BAPN mais angiotensina II em comparação com as aortas nos controles. Os diâmetros máximos da aorta torácica foram significativamente maiores em todos os grupos tratados com BAPN em comparação com os controles, sem diferenças significativas entre os grupos tratados. A coloração de hematoxilina e eosina revelou paredes aórticas finas e uniformes nos controles, enquanto todos os grupos tratados com BAPN apresentaram espessamento e infiltração inflamatória. A coloração com elastina Van Gieson demonstrou fibras elásticas intactas nos controles e fragmentação progressiva das fibras com formação de falso lúmen em todos os grupos tratados com BAPN.