Name: Modelo de camundongo de doença hepática esteatótica associada à disfunção metabólica com fibrose (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-18T13:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 26 s
Description: Aprenda a desenvolver um modelo de camundongo para MASLD com fibrose avançada usando dieta semelhante à americana. Este método permite estudar a patofisiologia da doença hepática e testar novas terapias em modelos pré-clínicos.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>4-(Dimetilamino)benzaldeído</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D2004</td><td></td></tr><tr><td>Ácido acético</td><td>Vários</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Dieta de calorias ajustadas Dieta ocidental</td><td>Inotiv</td><td>TD.88137</td><td>Dieta contém gordura (42% kcal) e sacarose (34% p/p). Outros fornecedores fornecem dietas com a mesma composição</td></tr><tr><td>B6. Cg-ay/J</td><td>O Laboratório Jackson</td><td>000021</td><td>A cepa possui a mutação amarela letal de Agouti e um fundo C57BL6/J. Atualmente, o Laboratório Jackson mantém a cepa criopreservada.</td></tr><tr><td>C57BL/6J</td><td>O Laboratório Jackson</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>Centrífuga</td><td>Vários</td><td>NA</td><td>Com rotor para tubos de 1,5 mL, refrigerado, capaz de atingir 16.000 xg.</td></tr><tr><td>Centrífuga</td><td>Vários</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Cloramina-T hidratado</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>857319</td><td></td></tr><tr><td>Ácido cítrico</td><td>Vários</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Direct Red 80</td><td>Sigma</td><td>365548-5G</td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Laboratórios de Descontaminação</td><td>2701</td><td></td></tr><tr><td>Solução de formalina, tamponado neutro</td><td>Sigma</td><td>HT501128</td><td></td></tr><tr><td>Frutose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F0127</td><td></td></tr><tr><td>Glicose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G8270</td><td></td></tr><tr><td>Equipamentos de processamento histológico</td><td>NA</td><td>NA</td><td>A incorporação e o seccionamento podem ser feitos no laboratório do investigador ou em instalações externas</td></tr><tr><td>Homogeneizador</td><td>Vários</td><td>NA</td><td>Batedores de esferas são eficientes para processar múltiplas amostras. Outros métodos de homogeneização podem ser usados</td></tr><tr><td>Ácido clorídrico</td><td>Vários</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Hidroxiprolina</td><td>Sigma</td><td>H5534</td><td></td></tr><tr><td>Dieta de controle com baixo teor de gordura</td><td>Inotiv</td><td>TD.08485</td><td>Dieta controle, baixa em gordura (13% kcal) e sacarose (12% p/p)</td></tr><tr><td>Microscópio equipado para microscopia de luz polarizada</td><td>Vários</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>N-propanol</td><td>Vários</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Ácido perclórico</td><td>Vários</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Média de Montagem Permount</td><td>Fisher Scientific</td><td>SP15-100</td><td></td></tr><tr><td>Ácido Pícrico, Solução Aquosa Saturada, Espectro</td><td>Fisher</td><td>18612375</td><td></td></tr><tr><td>Triidrato de acetato de sódio</td><td>Vários</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Hidróxido de sódio</td><td>Vários</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Sonicator</td><td>Vários</td><td>NA</td><td>O Sonicator é útil para resuspender pellets na etapa 2.5, mas não é absolutamente necessário</td></tr><tr><td>Ácido tricloroacético</td><td>Vários</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Óculos VWR Micro Cover, Retangulares</td><td>VWR&nbsp;</td><td>48393-081</td><td></td></tr><tr><td>Láminas de Microscópio VWR Premium Superfrost Plus | VWR</td><td>VWR&nbsp;</td><td>48311-703</td><td></td></tr><tr><td>Água, deionizada</td><td>Vários</td><td>NA</td><td>Água desionizada do sistema de purificação ou comprada de um fornecedor.</td></tr><tr><td>Xilenos</td><td>Fisher Scientific</td><td>X3F</td><td>Agente de Compensação Citrisolv &nbsp; (Fisher 22-143-975) é vendido como uma alternativa ambientalmente amigável</td></tr></tbody></table>

modelo de camundongo de doença hepática esteatótica associada à disfunção metabólica com fibrose

Mouse Model of Metabolic Dysfunction-Associated Steatotic Liver Disease with Fibrosis

Modelo de camundongo de doença hepática esteatótica associada à disfunção metabólica com fibrose

Liver fibrosis is the most important predictor of adverse outcomes in metabolic dysfunction-associated steatotic liver disease (MASLD). In pre-clinical ...

mouse-model-metabolic-dysfunction-associated-steatotic-liver-disease

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Aqui, são descritos métodos otimizados para gerar modelos in vivo e in vitro de esteatose hepática e analisar os fenótipos esteatóticos e parâmetros fisiológicos relacionados.

Análise otimizada de<em&gt; In Vivo</em&gt; e<em&gt; In Vitro</em&gt; A esteatose hepática

Aqui nós descrevemos um método comum para induzir lesão hepática crônica em ratos, alimentando-se de uma dieta deficiente em colina e ethionine-complementado do (CDE). Demonstramos que o monitoramento de integridade, perfusão hepática, isolamento e preservação. Um curso de tempo de seis semanas pode informar sobre a lesão hepática, pathohistology, fibrose, inflamatória e respostas de células progenitoras de fígado.

O murino colina deficiente, Ethionine-completada (CDE) dieta modelo de lesão hepática crônica

Um modelo animal da dieta-induzido simples e de confiança do roedor para o esteatohepatite não alcoólico (Nash) é descrito, conseguido com a carcaça non-SPF dos animais e a administração de uma dieta high-fat específica. Nós descrevemos a identificação de subconjuntos hepatic e adiposos da pilha imune para recapitular condições imunológicas humanas expondo ratos aos germes ambientais.

Um modelo murino avançado para esteatohepatite não alcoólica em associação com diabetes tipo 2

Neste estudo, nós descrevemos um protocolo detalhado para induzir o esteatose vesicular do fígado em pilhas diferenciadas de HepaRG com o oleato do sódio do sal do ácido gordo e empregamos métodos para a deteção e a quantificação da acumulação do lipido, incluindo anti-Stokes coerente Microscopia do espalhamento de Raman (carros), análise cytofluorimetric, mancha vermelha O do óleo, e qPCR.

Induzir e caracterizar a esteatose vesicular em células HepaRG diferenciadas

Traduzir a purificação da afinidade do Ribossoma (armadilha) permite a isolação rápida e eficiente do tipo de pilha-específico que traduz o mRNA. Aqui, Nós demonstramos um método que combine a injeção hidrodinâmico da cauda-veia em um modelo do rato do repovoamento do fígado e da armadilha para examinar o perfil da expressão de repovoamento hepatocytes.

Perfil de expressão gênica específica do tipo de célula no fígado do mouse

Este protocolo pretende ser uma ferramenta para estudar a esteatose e as alterações moleculares, bioquímicas, celulares produzidas pela exposição excessiva de hepatócitos a lipídios in vitro.

Um modelo de esteatose experimental in vitro: cultura celular hepatocitada em meio lipídidamente condicionado

O presente protocolo otimiza os métodos de perfusão/decelularização hepática in situ e microscopia de dois fótons para estabelecer uma plataforma confiável para visualizar a dinâmica do remodelamento da matriz extracelular (MEC) durante a esteato-hepatite não alcoólica (EHNA).

Imagem 3D da Matriz Extracelular Hepática em Modelo de Esteatohepatite Não Alcoólica em Camundongos

Estabelecemos um modelo murino de fibrose hepática crônica, que fornece um modelo animal adequado para o estudo mecanístico da atresia biliar (AB) induzida por vírus e uma plataforma para futuros tratamentos de AB.

Um Modelo Murino de Fibrose Hepática Crônica para o Estudo da Atresia Biliar

Aqui, apresentamos um método robusto de perfusão in situ do fígado de camundongos para estudar a regulação aguda e direta do metabolismo hepático sem perturbar a arquitetura hepática, mas na ausência de fatores extra-hepáticos.

Produção Hepática de Glicose, Urateagênese e Lipólise Quantificada usando o Modelo de Fígado de Camundongo Perfundido

Este artigo descreve o uso de células HepG2 induzidas por ácido oleico como modelo para doença hepática esteatótica associada à disfunção metabólica.

Modelagem in vitro da deposição de gordura na doença hepática esteatótica associada à disfunção metabólica

Este protocolo apresenta um pipeline abrangente de imagem para visualizar e modelar a morfologia das células estreladas hepáticas em tecido hepático intacto. Essa abordagem combina marcação fluorescente de fibroblastos usando genética de camundongos, preparação de tecidos baseada em perfusão hepática in situ e um método modificado de limpeza de tecidos iDISCO para alcançar transparência óptica.

Mapeamento da morfologia das células estreladas hepáticas em modelos camundongos de fibrose hepática

Aprenda a desenvolver um modelo de camundongo para MASLD com fibrose avançada usando dieta semelhante à americana. Este método permite estudar a patofisiologia da doença hepática e testar novas terapias em modelos pré-clínicos.

Modelo de camundongo de doença hepática esteatótica associada à disfunção metabólica com fibrose

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