Name: Técnica de Biópsia Conjuntival e Imunofluorescência Direta para Diagnóstico de Penfigoide de Membrana Mucosa (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-17T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 5 s
Description: Aprenda a técnica de biópsia conjuntival e imunofluorescência direta para diagnóstico de penfigoide de membrana mucosa. Este protocolo padronizado melhora a precisão diagnóstica e pode prevenir a cegueira em pacientes.

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<ol><li>Jain, N., Jakati, S., Shanbhag, S. S., Basu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+immunofluorescence+findings+and+factors+affecting+conjunctival+biopsy+positivity+in+ocular+mucous+membrane+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Direct immunofluorescence findings and factors affecting conjunctival biopsy positivity in ocular mucous membrane pemphigoid.</a> Cornea. 43 (2), 159-165 (2024).</li>
<li>Vazirani, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+cicatrizing+conjunctivitis%3A+a+review+of+the+differential+diagnosis+and+an+algorithmic+approach+to+management%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Chronic cicatrizing conjunctivitis: a review of the differential diagnosis and an algorithmic approach to management.</a> Indian J Ophthalmol. 68 (11), 2349-2355 (2020).</li>
<li>Singh, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug-induced+cicatrizing+conjunctivitis%3A+a+case+series+with+review+of+etiopathogenesis%2C+diagnosis+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Surf%22%5BJournal%5D)">Drug-induced cicatrizing conjunctivitis: a case series with review of etiopathogenesis, diagnosis and management.</a> Ocul Surf. 24, 83-92 (2022).</li>
<li>Bocanegra-Oyola, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+characteristics+of+ocular+mucous+membrane+pemphigoid%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Immunol+Inflamm%22%5BJournal%5D)">Clinical characteristics of ocular mucous membrane pemphigoid: a systematic review and meta-analysis.</a> Ocul Immunol Inflamm. 32 (10), 2388-2404 (2024).</li>
<li>Coco, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conjunctival+biopsy+site+in+mucous+membrane+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Conjunctival biopsy site in mucous membrane pemphigoid.</a> Am J Ophthalmol. 216, 1-6 (2020).</li>
<li>Ong, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucous+membrane+pemphigoid+with+ocular+involvement%3A+the+clinical+phenotype+and+its+relationship+to+direct+immunofluorescence+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Mucous membrane pemphigoid with ocular involvement: the clinical phenotype and its relationship to direct immunofluorescence findings.</a> Ophthalmology. 125 (4), 496-504 (2018).</li>
<li>Anesi, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reliability+of+conjunctival+biopsy+for+diagnosis+of+ocular+mucous+membrane+pemphigoid%3A+redetermination+of+the+standard+for+diagnosis+and+outcomes+of+previously+biopsy-negative+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Immunol+Inflamm%22%5BJournal%5D)">Reliability of conjunctival biopsy for diagnosis of ocular mucous membrane pemphigoid: redetermination of the standard for diagnosis and outcomes of previously biopsy-negative patients.</a> Ocul Immunol Inflamm. 29 (6), 1106-1113 (2021).</li>
<li>Dart, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autoantibody+detection+for+diagnosis+in+direct+immunofluorescence-negative+mucous+membrane+pemphigoid%3A+ocular+and+other+sites+compared%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Autoantibody detection for diagnosis in direct immunofluorescence-negative mucous membrane pemphigoid: ocular and other sites compared.</a> Ophthalmology. 128 (3), 372-382 (2021).</li>
<li>Leonard, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunofluorescent+studies+in+ocular+cicatricial+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Immunofluorescent studies in ocular cicatricial pemphigoid.</a> Br J Dermatol. 118 (2), 209-217 (1988).</li>
<li>Mehra, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+relevance+of+direct+immunofluorescence+in+ocular+mucous+membrane+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22JDDG%22%5BJournal%5D)">Diagnostic relevance of direct immunofluorescence in ocular mucous membrane pemphigoid.</a> JDDG. 13 (12), 1268-1274 (2015).</li>
<li>Shimanovich, I., Nitz, J. M., Zillikens, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+and+repeated+sampling+increases+the+sensitivity+of+direct+immunofluorescence+testing+for+the+diagnosis+of+mucous+membrane+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Acad+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Multiple and repeated sampling increases the sensitivity of direct immunofluorescence testing for the diagnosis of mucous membrane pemphigoid.</a> J Am Acad Dermatol. 77 (4), 700-705 (2017).</li>
<li>Goldich, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characteristics+of+patients+with+ocular+cicatricial+pemphigoid+referred+to+major+tertiary+hospital%5BTitle%5D)+AND+%22Can+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Characteristics of patients with ocular cicatricial pemphigoid referred to major tertiary hospital.</a> Can J Ophthalmol. 50 (2), 137-142 (2015).</li>
<li>Mudhar, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biopsies+of+cicatricial+conjunctivitis+cases+reveal+highly+variable+sampling+practice+among+ophthalmologists%3A+time+for+national+and+international+standardisation%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Biopsies of cicatricial conjunctivitis cases reveal highly variable sampling practice among ophthalmologists: time for national and international standardisation.</a> Br J Ophthalmol. 100 (6), 736-744 (2016).</li>
<li>Vodegel, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+diagnostic+immunofluorescence+using+biopsies+transported+in+saline%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Enhanced diagnostic immunofluorescence using biopsies transported in saline.</a> BMC Dermatol. 4, 1-7 (2004).</li>
<li>Jonkman, M. F., De Groot, A. C., Slegers, T. P., De Jong, M. C., Pas, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+diagnosis+of+pure+ocular+mucous+membrane+pemphigoid%3A+indirect+immunofluorescence+versus+immunoblot%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Immune diagnosis of pure ocular mucous membrane pemphigoid: indirect immunofluorescence versus immunoblot.</a> Eur J Dermatol. 19 (5), 456-460 (2009).</li>
<li>Shimanovich, I., Nitz, J. M., Witte, M., Zillikens, D., Rose, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunohistochemical+diagnosis+of+mucous+membrane+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22J+Oral+Pathol+Med%22%5BJournal%5D)">Immunohistochemical diagnosis of mucous membrane pemphigoid.</a> J Oral Pathol Med. 47 (6), 613-619 (2018).</li>
<li>Philip, A. M., Stephenson, A., Al-Dabbagh, A., Ramezani, K., Fernandez-Santos, C. C., Foster, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ocular+cicatricial+pemphigoid+with+IgM-positive+biopsy%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Ocular cicatricial pemphigoid with IgM-positive biopsy.</a> Cornea. 42 (12), 1503-1505 (2023).</li>
<li>Williams, G. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conjunctival+neutrophils+predict+progressive+scarring+in+ocular+mucous+membrane+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Conjunctival neutrophils predict progressive scarring in ocular mucous membrane pemphigoid.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 57 (13), 5457-5469 (2016).</li>
<li>Levian, B., Hussaini, S. S., Woodley, D. T., Kasperkiewicz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pseudopemphigoid%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22JAAD+Int%22%5BJournal%5D)">Pseudopemphigoid: a systematic review.</a> JAAD Int. 17, 170-171 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 N ácido clorídrico&nbsp;</td><td>Finar&nbsp; química Limited&nbsp;</td><td>7647-01-0</td><td></td></tr><tr><td>Acetona&nbsp;</td><td>Qualigens</td><td>Pergunta 33517</td><td></td></tr><tr><td>Albumina</td><td>DAKO</td><td>F0117</td><td></td></tr><tr><td>Fucsina básica</td><td>Qualigens</td><td>Pergunta 39402</td><td></td></tr><tr><td>C3c</td><td>Biossistemas de Diagnóstico&nbsp;</td><td>F003</td><td></td></tr><tr><td>C4c</td><td>Biossistemas de Diagnóstico&nbsp;</td><td>F005</td><td></td></tr><tr><td>Cartucho</td><td>Policiências</td><td>25376-500</td><td></td></tr><tr><td>Carvão ativado&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>C-5260</td><td></td></tr><tr><td>Criostato&nbsp;</td><td>Leica&nbsp;</td><td>CM1860UV&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Lâminas criotomos&nbsp;</td><td>Leica&nbsp;</td><td>818</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Abcam&nbsp;</td><td>ab104139</td><td></td></tr><tr><td>Fibrinogênio</td><td>Biossistemas de Diagnóstico&nbsp;</td><td>F006</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio de fluorescência</td><td>Olimpo</td><td>CX43</td><td></td></tr><tr><td>Fórceps&nbsp;</td><td>Joja cirúrgico</td><td>JS1528A</td><td></td></tr><tr><td>Câmara de Umidade&nbsp;</td><td>Biossistemas de Diagnóstico&nbsp;</td><td>SM365</td><td></td></tr><tr><td>IgA</td><td>Biossistemas de Diagnóstico&nbsp;</td><td>F007</td><td></td></tr><tr><td>IgG</td><td>Biossistemas de Diagnóstico&nbsp;</td><td>F008</td><td></td></tr><tr><td>Grão-mestre</td><td>Biossistemas de Diagnóstico&nbsp;</td><td>F009</td><td></td></tr><tr><td>Lâminas de vidro adesivas IHC&nbsp;</td><td>Tomo&nbsp;</td><td>33140455</td><td></td></tr><tr><td>Fórceps de Lim</td><td>Autódromo&nbsp;</td><td>S-7223</td><td></td></tr><tr><td>Meio tansport de Michel</td><td>Fisher Scinitics&nbsp;</td><td>NC0253304</td><td></td></tr><tr><td>Vidro de cobertura microscópico</td><td>Estrela azul</td><td>https://www.bluestarslides.com</td><td></td></tr><tr><td>OCT Médio&nbsp;</td><td>Criomatriz&nbsp;</td><td>6769006</td><td></td></tr><tr><td>PBS&nbsp;</td><td>DAKO</td><td>DM831</td><td></td></tr><tr><td>Ácido periódico</td><td>Sigma</td><td>375810-25G</td><td></td></tr><tr><td>Dissulfito de potássio</td><td>Sigma</td><td>Pág. 2522-500G</td><td></td></tr><tr><td>Proparacaína 0,5%</td><td>Sunway Private&nbsp;</td><td>G / 1118A</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura de Westcott</td><td>Pillig Instrumentos Cirúrgicos</td><td>423480</td><td></td></tr></tbody></table>

técnica de biópsia conjuntival e imunofluorescência direta para diagnóstico de penfigoide de membrana mucosa

Technique of Conjunctival Biopsy and Direct Immunofluorescence for Diagnosing Mucous Membrane Pemphigoid

A interpretação da IFD requer a confirmação da presença da membrana basal nos cortes teciduais (Figura 1). Nas lâminas coradas com PAS, a membrana basal aparecerá como uma membrana rosa brilhante situada na região basal do epitélio conjuntival (Figura 1C). A continuidade e a arquitetura da membrana basal também devem ser comentadas. A positividade da IFD será vista como MO verde brilhante (Figura 1B), indicando a deposição de IgM (<...

Técnica de Biópsia Conjuntival e Imunofluorescência Direta para Diagnóstico de Penfigoide de Membrana Mucosa

Ocular mucous membrane pemphigoid (MMP) presents as chronic cicatrizing conjunctivitis that, if left untreated, can cause blindness. Timely diagnosis and ...

technique-conjunctival-biopsy-direct-immunofluorescence-for

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Imunologia e Infecção

Dermatite herpetiforme (DH) é uma condição inflamatória crônica caracterizada por uma reação auto-imune entre IgA e transglutaminase epidérmica (ETG). DH se desenvolve em uma parcela muito pequena dos pacientes glúten-sensíveis e / ou doença celíaca. Os resultados deste estudo indicam que a DH também pode se desenvolver em um hospedeiro macaco rhesus com sintomas da dermatite idiopática.

Reconhecimento da transglutaminase epidérmica por 2 Anticorpos IgA transglutaminase tecidular e em um caso raro de Rhesus Dermatite

Existe um interesse crescente na compreensão das funções imunológicas de subpopulações específicas de células em placas de Peyer (PP), os locais primários indutivos de tecidos linfóide associado ao intestino. Aqui destacamos protocolos paralelos para preparar PP preparações de células individuais para análise por citometria de fluxo e criosseções PP para imunocoloração.

Isolar e imunocoloração linfócitos e células dendríticas a partir de placas de Peyer Murino

Coletamos, coramos e fotografamos células da conjuntiva da margem interna da pálpebra de seres humanos. Ao caracterizar a morfologia celular e a atividade metabólica, este método pode aprofundar nossa compreensão do olho seco e do papel que o atrito entre as superfícies oculares pode desempenhar na percepção do desconforto ocular.

A citologia de impressão da Área Wiper a tampa

A superfície ocular normal exposta consiste em córnea e conjuntiva. As células epiteliais, as células caliciformes e as células imunes estão presentes na conjuntiva. Aqui, uma técnica não invasiva de citologia de impressão é descrita usando um dispositivo de citação de impressão e citometria de fluxo para analisar células imunes na conjuntiva.

Uma maneira não invasiva de isolar e células de fenótipo da Conjuntiva

Estudar o microambiente do tumor pode identificar biomarcadores prognósticos ou preditivos de resposta clínica à imunoterapia. Apresentado aqui, é um método inovador baseado em situ fluorescência multiespectral de imagens para analisar e contar automaticamente várias subpopulações de CD8+ T células. Esta técnica reprodutível e confiável é apropriada para análises de grandes coorte.

Multiplexado imunofluorescência análise e quantificação de Intratumoral PD-1+ + Tim-3 CD8+ T células

Um protocolo detalhado para um painel de seis-marcador multiplex imunofluorescência é otimizado e executado, usando um corante automatizado para resultados mais consistentes e um menor tempo de procedimento. Esta abordagem pode ser adaptada directamente por qualquer laboratório de estudos imuno-oncologia.

Painel de imunofluorescência Multiplex automatizada para estudos imuno-oncologia em amostras de Carcinoma fixada em formol

Aqui, nós apresentamos um protocolo para um ensaio indireto deflutuação da imunofluorescência em seções da biópsia da pele que permita a identificação de variações específicas da conformação da doença do sinucleína alfa envolvido na doença de Parkinson e nas proteínas múltiplas do sistema nervoso periférico.

Segmentação de agregados Alpha synuclein em fibras nervosas periféricas cutâneas por ensaio de imunofluorescência livre-flutuante

A inflamação da superfície ocular prejudica os tecidos da superfície ocular e compromete as funções vitais do olho. O presente protocolo descreve um método para induzir inflamação ocular e coletar tecidos comprometidos em um modelo de camundongo de disfunção da glândula de Meibomian (MGD).

Indução da inflamação da superfície ocular e coleta de tecidos envolvidos

As lesões cutâneas são características comuns e importantes em muitas doenças reumáticas, e a biópsia com análise patológica desempenha um papel crítico no diagnóstico. Este artigo fornece uma visão geral detalhada do procedimento padronizado de biópsia de pele e, usando o lúpus eritematoso discóide como exemplo, destaca o papel essencial da dermatopatologia no diagnóstico de doenças reumáticas.

Biópsia de pele para diagnóstico de lúpus eritematoso discóide

Este artigo demonstra a operação e o efeito da microscopia confocal in vivo no diagnóstico e tratamento do olho seco e investiga a aplicação e os resultados da microscopia confocal in vivo para fornecer uma base para pesquisas futuras.

In vivo Microscopia Confocal no Diagnóstico e Tratamento do Olho Seco: Um Foco em Protocolos de Imagem e Interpretação

Aprenda a técnica de biópsia conjuntival e imunofluorescência direta para diagnóstico de penfigoide de membrana mucosa. Este protocolo padronizado melhora a precisão diagnóstica e pode prevenir a cegueira em pacientes.

Técnica de Biópsia Conjuntival e Imunofluorescência Direta para Diagnóstico de Penfigoide de Membrana Mucosa

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