Desenvolvendo um modelo de rato para transtorno bipolar

Estamos investigando os mecanismos neurobiológicos subjacentes dos transtornos psiquiátricos usando modelos de roedores. A maioria dos modelos animais exibe comportamento semelhante à mania ou depressão, tornando difícil estudar o padrão bipolar.

Com o uso de um sistema antiviral induzível, podemos induzir comportamentos semelhantes a mania e depressivos no mesmo animal, permitindo uma pesquisa completa para o transtorno bipolar.

Com este modelo animal único, investigaremos os mecanismos neurológicos subjacentes à transição da mania para a depressão em pacientes com transtorno bipolar.

[Instrutor] Para começar, configure a armação estereotáxica com o suporte da seringa preso ao braço estereotáxico. Conecte o suporte da seringa à bomba da seringa. Monte uma seringa de injeção estereotáxica de 10 microlitros com uma agulha de injeção de calibre 33 no suporte da seringa. Configure a broca odontológica e monte uma broca de 0,9 milímetro. Em seguida, coloque a almofada de aquecimento e ajuste-a para 37 graus Celsius e cubra a almofada de aquecimento com uma cortina absorvente Retire 2,3 microlitros de suspensão viral para injeções bilaterais de um microlitro cada. Depois de anestesiar o rato, transfira-o para a estrutura estereotáxica, colocando os dentes da frente no suporte. Prenda o rato na estrutura estereotáxica usando barras auriculares, faça uma pequena incisão medial de aproximadamente 1,5 centímetros usando uma lâmina de bisturi e empurre a pele para os lados Com grampos de buldogue. Limpe o campo cirúrgico do sangue e do tecido restante usando cotonetes estéreis. Agora defina as coordenadas anterior, posterior e lateral da mídia como zero, com base em Bregma. Mova o braço estereotáxico para as coordenadas ântero-posterior mais 2,7 e medial lateral mais ou menos 0,4 e visualize usando um lápis desinfetado. Em seguida, faça um furo de aproximadamente um milímetro de diâmetro cobrindo os locais de injeção para ambos os hemisférios. Remova qualquer sangue usando um cotonete estéril. Agora defina as coordenadas ventrais dorsais como zero na superfície do cérebro e abaixe lentamente a agulha de injeção para menos 2,8 para injetar na área pré-límbica do córtex pré-frontal medial. Aguarde cinco minutos para permitir o relaxamento do tecido. Em seguida, injete um microlitro de suspensão viral a uma taxa de 0,1 microlitros por minuto. Aguarde cinco minutos para absorção antes de remover lentamente a agulha. Depois de repetir a injeção no outro hemisfério, feche a abertura no crânio usando cera óssea. Remova os grampos de buldogue e suture a pele usando uma sutura cirúrgica de três oh. Prepare a doxiciclina contendo água fresca a cada 48 a 72 horas. Para induzir um fenótipo semelhante à mania, administre 0,5 gramas por litro de hiclato de doxiciclina adicionando-o à água potável. Mude os animais de volta à água potável normal para induzir um episódio depressivo. Animais semelhantes à mania demonstraram um aumento nos comportamentos relacionados à recompensa, incluindo aumento do comportamento sexual de montaria em uma caixa de observação, e tomaram decisões mais desvantajosas, de alto risco e alta recompensa na versão de rato da tarefa de jogo de Iowa, animais depressivos exibiram maior desamparo no paradigma triádico, conforme mostrado por latências escapadas mais longas em resposta ao choque elétrico. No teste de enterramento de mármore, os animais depressivos também estavam mais ansiosos.