Obtenção de um alotransplante de parede abdominal vascularizada e reinervada

Nosso laboratório francês está focado em aprimorar a VCA para melhorar os protocolos de colheita, otimizar a preservação do enxerto, estratégia para reduzir a lesão de isquemia e reperfusão e induzir tolerância humana.

Os principais desafios atuais na VCA incluem a padronização de métodos de aquisição e o desenvolvimento de técnicas robustas de preservação de tecidos protocolizados para garantir a viabilidade do enxerto e melhorar os resultados funcionais e imunológicos a longo prazo. Este protocolo destina-se a equipes especializadas em VCA para ajudá-las a realizar alotransplantes abdominais otimizados de maneira confiável e reproduzível. Ao contrário de outras técnicas, este protocolo fornece um guia passo a passo para obter um transplante de parede abdominal reinervado, que é fundamental para uma recuperação funcional ideal.

Nosso departamento de reconstrução francês se concentra em melhorar a regeneração nervosa, um campo crescente usando técnicas como TMR, APNI e conduítes nervosos. Isso é especialmente relevante durante a etapa de transplante deste enxerto.

Nosso protocolo levanta questões-chave sobre quantos reparos nervosos são necessários e quais técnicas usar para alcançar reinervação motora significativa e recuperação funcional.

Nosso laboratório se concentrará na preservação do enxerto, que é a chave para um transplante bem-sucedido, e este protocolo pode ser um modelo muito útil se colhido em um doador de raça morta, mas deve ser feito sob estrita autorização de pesquisa.

[Instrutor] Para começar, posicione o paciente em decúbito dorsal na mesa cirúrgica com os braços ao longo do corpo. Use um lápis dermográfico para desenhar a linha limite superior começando no processo xifóide do esterno. Estenda essa linha lateralmente, traçando a margem inferior da caixa torácica em ambos os lados até atingir uma linha vertical situada dois a três centímetros lateral à espinha ilíaca ântero-superior. Defina o limite lateral com uma linha vertical posicionada dois a três centímetros lateralmente à espinha ilíaca ântero-superior. A partir deste ponto, desenhe uma linha descendente para alcançar o pulso da artéria femoral localizado aproximadamente sete a 10 centímetros abaixo do ligamento inguinal. Em seguida, desenhe o limite inferior estendendo uma linha do pulso da artéria femoral em direção à coluna púbica de cada lado. Conecte os dois lados do desenho ao longo da linha média, terminando na síntese púbica para completar o contorno triangular. Realize uma incisão bilateral na pele subcostal ao longo da linha previamente marcada usando uma lâmina de bisturi fria. Em seguida, usando um dispositivo de eletrocautério, faça uma incisão através do tecido subcutâneo até atingir a fáscia muscular. Incisar a fáscia que cobre os músculos retos abdominais para expor os corpos musculares subjacentes e transeccionar as inserções costais dos músculos retos abdominais com o dispositivo de eletrocautério. Agora identifique os vasos epigástricos superiores atrás dos músculos retos, ligue-os cuidadosamente e separe-os com o eletrocautério atrás de cada músculo reto mobilizado, incise a aponeurose muscular profunda, depois a fáscia transversal e, finalmente, a fáscia peritoneal parietal. Dissecar lateralmente os músculos oblíquos externos para expor e identificar a linha semilunar. Realize uma incisão na pele com uma lâmina de bisturi fria seguindo o limite lateral previamente marcado. Use um dispositivo de eletrocautério para continuar a incisão através do tecido subcutâneo até que a camada aponeurótica dos músculos oblíquos externos seja alcançada. Em seguida, incisar o músculo oblíquo externo seguido do músculo oblíquo interno, mantendo uma margem lateral de dois a três centímetros da linha semilunar. Em seguida, localize os nervos toracolombares entre os músculos oblíquo interno e transverso do abdome e disseque cuidadosamente esses nervos lateralmente o máximo possível para preservá-los. Uma vez que os nervos toracolombares estejam protegidos, faça uma incisão no músculo transverso do abdome, seguido pela fáscia transversal e, em seguida, pela fáscia peritoneal parietal. Ao liberar o aloenxerto, identifique os pedículos epigástricos inferiores profundos localizados na superfície profunda dos músculos retos abdominais. Faça uma incisão na pele ao longo do desenho inferior usando uma lâmina de bisturi fria. Usando um bisturi elétrico, continue a dissecção através do tecido subcutâneo até atingir o plano aponeurótico muscular crural da coxa. Agora identifique a veia safena magna, ligue e transeccione-a. Em seguida, localize o nervo cutâneo femoral lateral e faça o transecto. Incisar a fáscia crural, certificando-se de que ela seja incluída na amostra do enxerto. Em seguida, eleve os dois retalhos cutâneos da fáscia triangular localizados abaixo dos ligamentos inguinais até que os vasos femorais fiquem expostos. Em ambos os lados, dissecar cuidadosamente a artéria e a veia femoral, juntamente com seus ramos colaterais, incluindo os vasos epigástricos inferiores superficiais e os vasos ilíacos circunflexos superficiais. Continue a dissecção em direção à artéria e veia ilíaca externa, identificando e preservando os vasos ilíacos epigástricos inferiores profundos e circunflexos profundos. Em seguida, enrole os vasos epigástricos inferiores profundos com uma alça de silicone para proteção. Para continuar a dissecção acima do ligamento inguinal, remova a fáscia muscular sobre o músculo ilíaco para evitar danificar os vasos ilíacos circunflexos profundos. Usando um bisturi elétrico, descole os músculos retos abdominais de suas inserções púbicas, garantindo que os vasos epigástricos inferiores profundos permaneçam intactos. Em seguida, ligue e corte o conteúdo do canal inguinal, incluindo o ligamento redondo do útero e o nervo ilioinguinal nas mulheres. Para completar a dissecção, ligue e corte os vasos ilíacos circunflexos profundos, os vasos ilíacos circunflexos superficiais e os epigástricos inferiores superficiais em suas origens nos vasos ilíacos externos e femorais. Certifique-se de que os dois pedículos vasculares epigástricos inferiores profundos permaneçam presos ao aloenxerto da parede abdominal e ao corpo do doador. Após a remoção das vísceras abdominais, identifique e marque os vasos epigástricos inferiores profundos em ambos os lados, geralmente uma artéria e duas veias de cada lado. Disseque e ligue cuidadosamente esses vasos em suas origens a partir dos vasos ilíacos externos e, em seguida, corte os vasos para liberar o enxerto. Agora cateterize cada artéria epigástrica inferior profunda usando uma cânula vascular equipada com uma torneira e prenda-a ao lúmen arterial com uma ligadura. Por fim, conecte um conjunto de irrigação às cânulas e lave o enxerto com um a três litros de solução de preservação da Universidade de Wisconsin temperada a quatro graus Celsius. Mantenha uma vazão de aproximadamente 100 mililitros por minuto sob baixa pressão, não excedendo 100 milímetros de mercúrio até que o efluente saia limpo. O comprimento médio utilizável dos nervos toracolombares dissecados dos lados direito e esquerdo foi de 68 milímetros, com comprimentos de nervos individuais variando de 60 a 85 milímetros. A artéria epigástrica inferior profunda media 85 milímetros à esquerda e 71 milímetros à direita antes de entrar no enxerto.