Name: Um Protocolo Baseado em Fluorescência para Triagem Preliminar de Inibidores de Síntese de Proteínas de Fontes Naturais (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-27T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 24 s
Description: Aprenda um protocolo de triagem fluorométrica para identificar inibidores da síntese proteica de fontes naturais. Este método aplica-se à descoberta de fármacos e à química medicinal.

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<li>Gautam, L. N., Ling, T., Lang, W., Rivas, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-proliferative+evaluation+of+monoterpene+derivatives+against+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Anti-proliferative evaluation of monoterpene derivatives against leukemia.</a> Eur J Med Chem. 113, 75-80 (2016).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Leitor Multimodo Multimodo de Imagem de Células Agilent Biotek Cytation 1</td><td>Agilent&nbsp;</td><td>BTCYT1V</td><td></td></tr><tr><td>Composto 1 (Deshidroabietilamina, CAS 1446-61-3)</td><td>Enamine</td><td>EN300-7409771</td><td></td></tr><tr><td>Composto 2 (Bakuchiol, CAS 10309-37-2)</td><td>ChemFaces</td><td>CFN99047</td><td></td></tr><tr><td>Heraeus Megafuge 16R</td><td>Thermo Scientific & nbsp;</td><td>75004271</td><td></td></tr><tr><td>Placa Ibidi Gmbh-slide de 96 poços</td><td>Ibidi</td><td>80826</td><td></td></tr><tr><td>Linhas Celulares MDA-MB-231</td><td>ATCC</td><td>ATCC HTB-26</td><td></td></tr><tr><td>Soro tamponado com fosfato pH 7,4</td><td>ATCC</td><td>ATCC 30-2200</td><td></td></tr><tr><td>Kit de Ensaio de Síntese de Proteínas (Verde)</td><td>Abcam</td><td>Ab239725</td><td></td></tr></tbody></table>

um protocolo baseado em fluorescência para triagem preliminar de inibidores de síntese de proteínas de fontes naturais

A Fluorescence-based Protocol for Preliminary Screening of Protein Synthesis Inhibitors from Natural Sources

Um Protocolo Baseado em Fluorescência para Triagem Preliminar de Inibidores de Síntese de Proteínas de Fontes Naturais

Natural products represent a rich source of therapeutic compounds with applications across multiple diseases, particularly cancer. By leveraging these ...

a-fluorescence-based-protocol-for-preliminary-screening-protein

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Pesquisa sobre o Câncer

Neste vídeo, demonstramos o ensaio homogêneo de proximidade luminescente amplificado - um ensaio de proximidade baseado em esferas. Ele utiliza grânulos aceptores e doadores de tamanho homogêneo, imobilizados com duas proteínas que tendem a interagir para rastrear pequenas moléculas potenciais que inibem as interações proteicas.

Ensaio homogêneo de proximidade luminescente amplificada: um ensaio de proximidade baseado em esferas para rastrear pequenas moléculas que inibem as interações proteína-proteína

Este vídeo demonstra a triagem de compostos imunomoduladores por meio de ensaio baseado em fluorescência. Linfócitos T derivados de camundongos transgênicos com de expressão de proteína fluorescente verde são tratados com esses compostos. Os sinais GFP aprimorados e reduzidos permitem a identificação dos efeitos estimulatórios e inibitórios dos compostos, respectivamente.

Um ensaio baseado em fluorescência usando linfócitos projetados para triagem de compostos imunomoduladores

Uma abordagem simplificada para a triagem para a expressão de proteínas de membrana recombinantes em Escherichia coli com base na fusão de proteína fluorescente verde é apresentada.

Verde Fluorescente à base de proteínas Expressão Rastreio de Proteínas de Membrana em<em&gt; Escherichia coli</em

Um protocolo para triagem de drogas moleculares pequenas baseado na síntese in-situ de nanoclusters de ouro fluorescentes ultrapequenos (Au NCs) usando proteína carregada de drogas como modelo é apresentado. Este método é simples para determinar a afinidade de ligação de drogas a uma proteína-alvo por um sinal fluorescente visível emitido pelos NCs de Au moldados por proteínas.

Uma rápida e quantitativa método fluorimétrico para-Targeting proteína pequena molécula Rastreio de drogas

Apresenta-se no presente estudo, um ensaio baseado em fluorescência de novo utilizando linfócitos derivados de um ratinho transgénico. Este ensaio é adequado para rastreio de alto rendimento (HTS) de pequenas moléculas dotadas com a capacidade de qualquer inibição ou promoção da activação dos linfócitos.

A Fluorescência baseada em Linfócitos ensaio adequado para high-throughput screening de pequenas moléculas

Este manuscrito descreve um método para visualizar e quantificar eventos tradução localizada em compartimentos subcellular. A abordagem proposta neste manuscrito requer um sistema básico de imagens confocal e reagentes e é rápido e econômico.

Imunofluorescência quantitativa a medida Global localizadas Tradução

Um fácil e adaptável como caldo para a seleção de extratos e compostos antifúngicos.

Como caldo em Vitro rastreio: um método fácil e rápido para detectar novos compostos antifúngicos

Aqui, apresentamos o procedimento detalhado de uma plataforma de ensaio de protease recentemente desenvolvido utilizando o N-terminal hexahistidine/maltose-proteína e fluorescentes substratos recombinantes da proteína-fundido, anexados à superfície do níquel-nitrilotriacético grânulos de agarose magnético ácido. Também é apresentada uma análise subsequente em-gel das amostras de ensaio separados por eletroforese em gel polyacrylamide do sulfato dodecyl de sódio.

Utilização de proteínas recombinantes de fusão em uma plataforma de ensaio de Protease fluorescente e sua renaturalização em-gel

O rastreamento de eventos de tradução individual permite estudos cinéticos de alta resolução de mecanismos de tradução dependentes de tampas. Aqui demonstramos um ensaio in vitro de molécula única baseado em interações de imagem entre anticorpos fluorescentes rotulados e peptídeos nascentes marcados por epítope. Este método permite a caracterização de uma molécula de cinética de iniciação e alongamento de peptídeos durante a tradução ativa in vitro dependente de tampas.

Um ensaio de imagem de molécula única in vitro para a análise de cinética de tradução dependente da tampa

Monitorar mudanças na temperatura de fusão de uma proteína alvo (ou seja,ensaio de mudança térmica, TSA) é um método eficiente para triagem de bibliotecas de fragmentos de algumas centenas de compostos. Apresentamos um protocolo TSA implementando fluoremetria nano-diferencial assistida por robótica (nano-DSF) para monitorar fluorescência triptofano intrínseca e dispersão de costas leves para triagem de fragmentos.

Fluormetria de varredura nano-diferencial para triagem em descoberta de chumbo baseada em fragmentos

Este protocolo descreve um ensaio bioquímico de mudança de gel para medir a atividade de FEN1 (Flap Endonuclease 1) e o desenvolvimento de inibidores.

Detecção baseada em fluorescência da atividade da nuclease FEN1 e triagem de inibidores de moléculas pequenas

Aprenda um protocolo de triagem fluorométrica para identificar inibidores da síntese proteica de fontes naturais. Este método aplica-se à descoberta de fármacos e à química medicinal.

Um Protocolo Baseado em Fluorescência para Triagem Preliminar de Inibidores de Síntese de Proteínas de Fontes Naturais

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