Name: Caracterização por imagem ao vivo dos movimentos do centrômero durante a prófase meiótica masculina em Arabidopsis thaliana (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-24T13:45:00.000+00:00
Duration: 7 min 18 s
Description: Aprenda a caracterizar movimentos de centrômeros durante a prófase meiótica em Arabidopsis thaliana usando imagem ao vivo de alta resolução. Este método permite quantificar dinâmicas cromossômicas essenciais para a formação de esporos.

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<ol><li>Zickler, D., Kleckner, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meiotic+chromosomes%3A+Integrating+structure+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Meiotic chromosomes: Integrating structure and function.</a> Annu Rev Genet. 33 (1), 603-754 (1999).</li>
<li>Zickler, D., Kleckner, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meiosis%3A+Dances+between+homologs%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Meiosis: Dances between homologs.</a> Annu Rev Genet. 57 (1), 1-63 (2023).</li>
<li>Kim, H. J., Liu, C., Dernburg, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+and+why+chromosomes+interact+with+the+cytoskeleton+during+meiosis%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">How and why chromosomes interact with the cytoskeleton during meiosis.</a> Genes (Basel). 13 (5), 901(2022).</li>
<li>Harline, K., Roeder, A. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+optimized+pipeline+for+live+imaging+whole+Arabidopsis+leaves+at+cellular+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Methods%22%5BJournal%5D)">An optimized pipeline for live imaging whole Arabidopsis leaves at cellular resolution.</a> Plant Methods. 19 (1), 10(2023).</li>
<li>Prunet, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+confocal+imaging+of+developing+Arabidopsis+flowers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Live confocal imaging of developing Arabidopsis flowers.</a> J Vis Exp. (122), e55156(2017).</li>
<li>Peng, Z., Jiao, Y., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+imaging+of+Arabidopsis+shoot+primordia+via+a+confocal+laser+scanning+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Live imaging of Arabidopsis shoot primordia via a confocal laser scanning microscope.</a> STAR Protoc. 4 (2), 102217(2023).</li>
<li>Prusicki, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+cell+imaging+of+meiosis+in+Arabidopsis+thaliana%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Live cell imaging of meiosis in Arabidopsis thaliana.</a> eLife. 8, e42834(2019).</li>
<li>Valuchova, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+plant+germline+differentiation+within+Arabidopsis+flowers+by+light+sheet+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22ELife%22%5BJournal%5D)">Imaging plant germline differentiation within Arabidopsis flowers by light sheet microscopy.</a> ELife. 9, e52546(2020).</li>
<li>Ravi, M., Chan, S. W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Haploid+plants+produced+by+centromere-mediated+genome+elimination%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Haploid plants produced by centromere-mediated genome elimination.</a> Nature. 464 (7288), 615-618 (2010).</li>
<li>Cromer, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+meiotic+prophase+chromosome+movements+in+Arabidopsis+thaliana+are+linked+to+essential+reorganization+at+the+nuclear+envelope%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Rapid meiotic prophase chromosome movements in Arabidopsis thaliana are linked to essential reorganization at the nuclear envelope.</a> Nat Commun. 15 (1), 5964(2024).</li>
<li>R: A language and environment for statistical computing. , at
 <a target="_blank" href="https://www.R-project.org/">https://www.R-project.org/</a> (2021).</li>
<li>RStudio: Integrated development environment for R. , at
 <a target="_blank" href="http://www.posit.co/">http://www.posit.co/</a> (2025).</li>
<li>Wickham, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Data+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22ggplot2%22%5BJournal%5D)">Data Analysis.</a> ggplot2. , 189-201 (2016).</li>
<li>Wortel, I. M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CelltrackR%3A+An+R+package+for+fast+and+flexible+analysis+of+immune+cell+migration+data%5BTitle%5D)+AND+%22Immunoinformatics%22%5BJournal%5D)">CelltrackR: An R package for fast and flexible analysis of immune cell migration data.</a> Immunoinformatics. 1 - 2, 100003(2021).</li>
<li>Lee, C. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+and+regulation+of+rapid+telomere+prophase+movements+in+mouse+meiotic+chromosomes%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Mechanism and regulation of rapid telomere prophase movements in mouse meiotic chromosomes.</a> Cell Rep. 11 (4), 551-563 (2015).</li>
<li>Nozaki, T., Weiner, B., Kleckner, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+homologue+juxtaposition+during+meiotic+chromosome+pairing%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Rapid homologue juxtaposition during meiotic chromosome pairing.</a> Nature. 634 (8036), 1221-1228 (2024).</li>
<li>Fang, Y., Spector, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Centromere+positioning+and+dynamics+in+living+Arabidopsis+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Cell%22%5BJournal%5D)">Centromere positioning and dynamics in living Arabidopsis plants.</a> Mol Biol Cell. 16 (12), 5710-5718 (2005).</li>
<li>Arpòn, J., Gaudin, V., Andrey, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+testing+random+spatial+models+on+nuclear+object+distributions%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Chromatin+Dynamics%3A+Methods+and+Protocols%22%5BJournal%5D)">A method for testing random spatial models on nuclear object distributions.</a> Plant Chromatin Dynamics: Methods and Protocols. 1675, 493-507 (2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Área de reprodução</td><td>TREF (Jiffy)</td><td>101820/02227861</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio confocal</td><td>Leica</td><td>TCS SP8 AOBS (Divisor de Feixe Acusto-Óptico)</td><td></td></tr><tr><td>Software de confocal</td><td>Leica</td><td>Software LAS X 3.5.0.18371</td><td></td></tr><tr><td>Coberturas</td><td>Paul Marienfeld GmbH</td><td>107052</td><td>22x22 Nº1,5H</td></tr><tr><td>Pinças</td><td>Ideal-Tek</td><td>4.SA.0</td><td>Pinças de alta precisão</td></tr><tr><td>GFP:CENH3</td><td></td><td>Ravi et al. 2010</td><td>Sementes de Arabidopsis thaliana usadas aqui</td></tr><tr><td>ggplot2</td><td></td><td>&nbsp; ggplot2: Gráficos Elegantes para Análise de Dados &nbsp; Reference13</td><td>https://ggplot2.tidyverse.org</td></tr><tr><td>Cabo para agulhas</td><td>Hammacher</td><td>Alça para laço, comprimento 170 mm</td><td></td></tr><tr><td>Imaris</td><td>Instrumentos Oxford</td><td>Imaris 9.7.2</td><td>Análise de imagem - módulo "Spot"</td></tr><tr><td>Lente</td><td>Leica</td><td>HC PL APO CS2 20 vezes/0,75 IMM</td><td></td></tr><tr><td>Relâmpago</td><td>Leica</td><td>Deconvolução Adaptativa</td><td>Extração automatizada de informações inteligentes a partir de dados confocais</td></tr><tr><td>Luzes</td><td>VEGELED</td><td>Apollo LL252-Gen2</td><td></td></tr><tr><td>Agulhas</td><td>Watkins & Doncaster</td><td>Pinos E3 .0124"(.31mm) x 25mm</td><td></td></tr><tr><td>NUP54:RFP</td><td></td><td>Cromer et al. 2024</td><td>Sementes de Arabidopsis thaliana usadas aqui</td></tr><tr><td>Potes</td><td>TEKU (POPPELMANN)</td><td>VDF 7x7x6,5 cm</td><td></td></tr><tr><td>R</td><td>Equipe RCore</td><td>R: Uma linguagem e ambiente para estatísticas&nbsp; &nbsp; Computação. Fundação R para Computação Estatística, Viena, Áustria.&nbsp; Reference11</td><td>https://www.R-project.org/&nbsp;&nbsp;</td></tr><tr><td>Rstudio</td><td>Equipe Posit</td><td>&nbsp; RStudio: Ambiente Integrado de Desenvolvimento para R. Posit Software, PBC, Boston, MA. Reference12</td><td>http://www.posit.co/</td></tr><tr><td>Slides</td><td>COPO DE KNITTEL</td><td>100003</td><td>26x76x1,0mm</td></tr><tr><td>Espaçadores</td><td>Termo-pescador</td><td>Espaçador de Vedação Segura, 8 poços, 9 mm de diâmetro, 0,12 mm de profundidade</td><td>Corte cada espaçador individualmente</td></tr><tr><td>Estereoscópios</td><td>Nikon</td><td>SMZ800</td><td></td></tr></tbody></table>

caracterização por imagem ao vivo dos movimentos do centrômero durante a prófase meiótica masculina em arabidopsis thaliana

Live Imaging Characterization of Centromere Movements During Male Meiotic Prophase in Arabidopsis thaliana

Caracterização por imagem ao vivo dos movimentos do centrômero durante a prófase meiótica masculina em Arabidopsis thaliana

Meiosis is a cellular division, essential for sexual reproduction. During meiotic prophase, homologous chromosomes of maternal and paternal origin ...

live-imaging-characterization-centromere-movements-during-male

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JoVE Journal

Biology

Biologia

Nós descrevemos um protocolo com lâminas de câmara e de mídia para imobilizar cotilédones de plantas para imagem confocal da epiderme durante vários dias de desenvolvimento, documentação diferenciação estomática. Proteínas fluoróforo com a tag pode ser monitorado de forma dinâmica por expressão e localização subcelular, aumentando a compreensão de seus possíveis papéis durante a divisão celular e diferenciação do tipo de célula.

Longo prazo, de alta resolução de imagem Lapse Confocal Tempo de<em&gt; Cotilédone Arabidopsis</em&gt; Epiderme durante a germinação

Imagiologia de proteínas centrosomal durante Drosophila espermatogénese é um método potente para identificar novas proteínas críticas para a biologia do centrossoma, bem como para elucidar a função particular de jogadores conhecidos neste processo.

Centrossomas de imagem na mosca Testículos

Nós fornecemos aqui um protocolo eficiente e confiável para a imunocoloração, hibridação in situ fluorescente, a coloração do DNA seguido de quantitativo, imagem de alta resolução em Arabidopsis thaliana óvulos inteiros de montagem. Este método foi utilizado com sucesso para analisar as modificações da cromatina e arquitectura nuclear.

Um método eficiente para Quantitativa, Análise de células Único de cromatina Modificação e Arquitetura Nuclear em Todo-mount óvulos em<em&gt; Arabidopsis</em

Este protocolo descreve um método para observar a embriogênese em Arabidopsis através do apuramento ovule, seguido de inspeção de formação padrão de embrião sob um microscópio.

Um método para caracterizar a embriogênese em Arabidopsis

Este manuscrito descreve um in vitro ovule cultivo método que permite que a imagem latente da viver-pilha de Arabidopsis zigotos e embriões. Este método é utilizado para visualizar a dinâmica intracelular durante a polarização de zigoto e a especificação do destino de célula no desenvolvimento de embriões.

In Vitro Ovule cultivo para viver-pilha de imagem do zigoto polarização e padronização do embrião em Arabidopsis thaliana

O objetivo desta técnica de abóbora do túbulo é rapidamente avaliar características citológicas de desenvolver espermatócitos de rato, preservando a integridade celular. Esse método permite o estudo de todas as fases da espermatogênese e pode ser facilmente implementado juntamente com outras abordagens biológicas bioquímicas e moleculares para o estudo da meiose rato.

Uma técnica de Squash do tubo seminífero para a análise citológica da espermatogênese usando o modelo de Mouse

Este protocolo descreve um método fácil e conveniente para rotular e Visualizar ao vivo cromossomos em células mitóticas usando Histone2B-GFP BacMam 2.0 label e um sistema de microscopia confocal de disco girando.

Imagem de célula viva de segregação do cromossomo durante a mitose

Como as variantes genéticas associadas a doenças humanas começam a tornar-se descoberto, está se tornando cada vez mais importante desenvolver sistemas com os quais rapidamente avaliar o significado biológico dessas variantes identificadas. Este protocolo descreve métodos para avaliar a função do gene humano durante a meiose feminina eu usando oócitos de rato.

Usando oócitos de camundongo para avaliar a função de genes humanos durante a meiose I

Nós demonstramos um método para determinar a fecundação bem sucedida ou falhada com base na morfologia nuclear do esperma na fertilização dobro de Arabidopsis usando um microscópio da epifluorescência.

Avaliação do estado de fertilização por rastreamento da morfologia nuclear de espermatozóides na adubação dupla de Arabidopsis

Esse protocolo de imunolocalização nos meiócitos machos do milho mantém a integridade tridimensional das células durante a meiose. Ele permite o rastreamento dinâmico da localização intracelular de até três anticorpos independentes em material preservado fixado com paraformaldeído, além do DAPI, que tinge o DNA.

Imunolocalização Tridimensional em Meiocitos de Milho

Esse processo utiliza microscopia confocal em conjunto com um núcleo e linha marcadora de cromatina marcados fluorescentemente em Arabidopsis thaliana para registrar simultaneamente a dinâmica do núcleo e da cromatina nas raízes de Arabidopsis e investigar mudanças nessas dinâmicas em resposta a sinais de desenvolvimento e ambientais.

Imagem quantitativa de células vivas da forma nuclear e dinâmica da cromatina durante o desenvolvimento e estresse ambiental na raiz de Arabidopsis thaliana

Aprenda a caracterizar movimentos de centrômeros durante a prófase meiótica em Arabidopsis thaliana usando imagem ao vivo de alta resolução. Este método permite quantificar dinâmicas cromossômicas essenciais para a formação de esporos.

Caracterização por imagem ao vivo dos movimentos do centrômero durante a prófase meiótica masculina em Arabidopsis thaliana

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