Name: Caracterização por imagem ao vivo dos movimentos do centrômero durante a prófase meiótica masculina em Arabidopsis thaliana (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-24T13:45:00.000+00:00
Duration: 7 min 18 s
Description: Aprenda a caracterizar movimentos de centrômeros durante a prófase meiótica em Arabidopsis thaliana usando imagem ao vivo de alta resolução. Este método permite quantificar dinâmicas cromossômicas essenciais para a formação de esporos.

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<ol><li>Zickler, D., Kleckner, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meiotic+chromosomes%3A+Integrating+structure+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Meiotic chromosomes: Integrating structure and function.</a> Annu Rev Genet. 33 (1), 603-754 (1999).</li>
<li>Zickler, D., Kleckner, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meiosis%3A+Dances+between+homologs%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Meiosis: Dances between homologs.</a> Annu Rev Genet. 57 (1), 1-63 (2023).</li>
<li>Kim, H. J., Liu, C., Dernburg, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+and+why+chromosomes+interact+with+the+cytoskeleton+during+meiosis%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">How and why chromosomes interact with the cytoskeleton during meiosis.</a> Genes (Basel). 13 (5), 901(2022).</li>
<li>Harline, K., Roeder, A. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+optimized+pipeline+for+live+imaging+whole+Arabidopsis+leaves+at+cellular+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Methods%22%5BJournal%5D)">An optimized pipeline for live imaging whole Arabidopsis leaves at cellular resolution.</a> Plant Methods. 19 (1), 10(2023).</li>
<li>Prunet, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+confocal+imaging+of+developing+Arabidopsis+flowers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Live confocal imaging of developing Arabidopsis flowers.</a> J Vis Exp. (122), e55156(2017).</li>
<li>Peng, Z., Jiao, Y., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+imaging+of+Arabidopsis+shoot+primordia+via+a+confocal+laser+scanning+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Live imaging of Arabidopsis shoot primordia via a confocal laser scanning microscope.</a> STAR Protoc. 4 (2), 102217(2023).</li>
<li>Prusicki, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+cell+imaging+of+meiosis+in+Arabidopsis+thaliana%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Live cell imaging of meiosis in Arabidopsis thaliana.</a> eLife. 8, e42834(2019).</li>
<li>Valuchova, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+plant+germline+differentiation+within+Arabidopsis+flowers+by+light+sheet+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22ELife%22%5BJournal%5D)">Imaging plant germline differentiation within Arabidopsis flowers by light sheet microscopy.</a> ELife. 9, e52546(2020).</li>
<li>Ravi, M., Chan, S. W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Haploid+plants+produced+by+centromere-mediated+genome+elimination%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Haploid plants produced by centromere-mediated genome elimination.</a> Nature. 464 (7288), 615-618 (2010).</li>
<li>Cromer, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+meiotic+prophase+chromosome+movements+in+Arabidopsis+thaliana+are+linked+to+essential+reorganization+at+the+nuclear+envelope%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Rapid meiotic prophase chromosome movements in Arabidopsis thaliana are linked to essential reorganization at the nuclear envelope.</a> Nat Commun. 15 (1), 5964(2024).</li>
<li>R: A language and environment for statistical computing. , at
 <a target="_blank" href="https://www.R-project.org/">https://www.R-project.org/</a> (2021).</li>
<li>RStudio: Integrated development environment for R. , at
 <a target="_blank" href="http://www.posit.co/">http://www.posit.co/</a> (2025).</li>
<li>Wickham, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Data+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22ggplot2%22%5BJournal%5D)">Data Analysis.</a> ggplot2. , 189-201 (2016).</li>
<li>Wortel, I. M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CelltrackR%3A+An+R+package+for+fast+and+flexible+analysis+of+immune+cell+migration+data%5BTitle%5D)+AND+%22Immunoinformatics%22%5BJournal%5D)">CelltrackR: An R package for fast and flexible analysis of immune cell migration data.</a> Immunoinformatics. 1 - 2, 100003(2021).</li>
<li>Lee, C. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+and+regulation+of+rapid+telomere+prophase+movements+in+mouse+meiotic+chromosomes%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Mechanism and regulation of rapid telomere prophase movements in mouse meiotic chromosomes.</a> Cell Rep. 11 (4), 551-563 (2015).</li>
<li>Nozaki, T., Weiner, B., Kleckner, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+homologue+juxtaposition+during+meiotic+chromosome+pairing%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Rapid homologue juxtaposition during meiotic chromosome pairing.</a> Nature. 634 (8036), 1221-1228 (2024).</li>
<li>Fang, Y., Spector, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Centromere+positioning+and+dynamics+in+living+Arabidopsis+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Cell%22%5BJournal%5D)">Centromere positioning and dynamics in living Arabidopsis plants.</a> Mol Biol Cell. 16 (12), 5710-5718 (2005).</li>
<li>Arpòn, J., Gaudin, V., Andrey, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+testing+random+spatial+models+on+nuclear+object+distributions%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Chromatin+Dynamics%3A+Methods+and+Protocols%22%5BJournal%5D)">A method for testing random spatial models on nuclear object distributions.</a> Plant Chromatin Dynamics: Methods and Protocols. 1675, 493-507 (2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Área de reprodução</td><td>TREF (Jiffy)</td><td>101820/02227861</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio confocal</td><td>Leica</td><td>TCS SP8 AOBS (Divisor de Feixe Acusto-Óptico)</td><td></td></tr><tr><td>Software de confocal</td><td>Leica</td><td>Software LAS X 3.5.0.18371</td><td></td></tr><tr><td>Coberturas</td><td>Paul Marienfeld GmbH</td><td>107052</td><td>22x22 Nº1,5H</td></tr><tr><td>Pinças</td><td>Ideal-Tek</td><td>4.SA.0</td><td>Pinças de alta precisão</td></tr><tr><td>GFP:CENH3</td><td></td><td>Ravi et al. 2010</td><td>Sementes de Arabidopsis thaliana usadas aqui</td></tr><tr><td>ggplot2</td><td></td><td>&nbsp; ggplot2: Gráficos Elegantes para Análise de Dados &nbsp; Reference13</td><td>https://ggplot2.tidyverse.org</td></tr><tr><td>Cabo para agulhas</td><td>Hammacher</td><td>Alça para laço, comprimento 170 mm</td><td></td></tr><tr><td>Imaris</td><td>Instrumentos Oxford</td><td>Imaris 9.7.2</td><td>Análise de imagem - módulo "Spot"</td></tr><tr><td>Lente</td><td>Leica</td><td>HC PL APO CS2 20 vezes/0,75 IMM</td><td></td></tr><tr><td>Relâmpago</td><td>Leica</td><td>Deconvolução Adaptativa</td><td>Extração automatizada de informações inteligentes a partir de dados confocais</td></tr><tr><td>Luzes</td><td>VEGELED</td><td>Apollo LL252-Gen2</td><td></td></tr><tr><td>Agulhas</td><td>Watkins & Doncaster</td><td>Pinos E3 .0124"(.31mm) x 25mm</td><td></td></tr><tr><td>NUP54:RFP</td><td></td><td>Cromer et al. 2024</td><td>Sementes de Arabidopsis thaliana usadas aqui</td></tr><tr><td>Potes</td><td>TEKU (POPPELMANN)</td><td>VDF 7x7x6,5 cm</td><td></td></tr><tr><td>R</td><td>Equipe RCore</td><td>R: Uma linguagem e ambiente para estatísticas&nbsp; &nbsp; Computação. Fundação R para Computação Estatística, Viena, Áustria.&nbsp; Reference11</td><td>https://www.R-project.org/&nbsp;&nbsp;</td></tr><tr><td>Rstudio</td><td>Equipe Posit</td><td>&nbsp; RStudio: Ambiente Integrado de Desenvolvimento para R. Posit Software, PBC, Boston, MA. Reference12</td><td>http://www.posit.co/</td></tr><tr><td>Slides</td><td>COPO DE KNITTEL</td><td>100003</td><td>26x76x1,0mm</td></tr><tr><td>Espaçadores</td><td>Termo-pescador</td><td>Espaçador de Vedação Segura, 8 poços, 9 mm de diâmetro, 0,12 mm de profundidade</td><td>Corte cada espaçador individualmente</td></tr><tr><td>Estereoscópios</td><td>Nikon</td><td>SMZ800</td><td></td></tr></tbody></table>

caracterização por imagem ao vivo dos movimentos do centrômero durante a prófase meiótica masculina em arabidopsis thaliana

Live Imaging Characterization of Centromere Movements During Male Meiotic Prophase in Arabidopsis thaliana

Caracterização por imagem ao vivo dos movimentos do centrômero durante a prófase meiótica masculina em Arabidopsis thaliana

Meiosis is a cellular division, essential for sexual reproduction. During meiotic prophase, homologous chromosomes of maternal and paternal origin ...

live-imaging-characterization-centromere-movements-during-male

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JoVE Journal

Biology

Biologia

Nós descrevemos um protocolo com lâminas de câmara e de mídia para imobilizar cotilédones de plantas para imagem confocal da epiderme durante vários dias de desenvolvimento, documentação diferenciação estomática. Proteínas fluoróforo com a tag pode ser monitorado de forma dinâmica por expressão e localização subcelular, aumentando a compreensão de seus possíveis papéis durante a divisão celular e diferenciação do tipo de célula.

Longo prazo, de alta resolução de imagem Lapse Confocal Tempo de<em&gt; Cotilédone Arabidopsis</em&gt; Epiderme durante a germinação

Imagiologia de proteínas centrosomal durante Drosophila espermatogénese é um método potente para identificar novas proteínas críticas para a biologia do centrossoma, bem como para elucidar a função particular de jogadores conhecidos neste processo.

Centrossomas de imagem na mosca Testículos

Nós fornecemos aqui um protocolo eficiente e confiável para a imunocoloração, hibridação in situ fluorescente, a coloração do DNA seguido de quantitativo, imagem de alta resolução em Arabidopsis thaliana óvulos inteiros de montagem. Este método foi utilizado com sucesso para analisar as modificações da cromatina e arquitectura nuclear.

Um método eficiente para Quantitativa, Análise de células Único de cromatina Modificação e Arquitetura Nuclear em Todo-mount óvulos em<em&gt; Arabidopsis</em

Este protocolo descreve um método para observar a embriogênese em Arabidopsis através do apuramento ovule, seguido de inspeção de formação padrão de embrião sob um microscópio.

Um método para caracterizar a embriogênese em Arabidopsis

Este manuscrito descreve um in vitro ovule cultivo método que permite que a imagem latente da viver-pilha de Arabidopsis zigotos e embriões. Este método é utilizado para visualizar a dinâmica intracelular durante a polarização de zigoto e a especificação do destino de célula no desenvolvimento de embriões.

In Vitro Ovule cultivo para viver-pilha de imagem do zigoto polarização e padronização do embrião em Arabidopsis thaliana

O objetivo desta técnica de abóbora do túbulo é rapidamente avaliar características citológicas de desenvolver espermatócitos de rato, preservando a integridade celular. Esse método permite o estudo de todas as fases da espermatogênese e pode ser facilmente implementado juntamente com outras abordagens biológicas bioquímicas e moleculares para o estudo da meiose rato.

Uma técnica de Squash do tubo seminífero para a análise citológica da espermatogênese usando o modelo de Mouse

Este protocolo descreve um método fácil e conveniente para rotular e Visualizar ao vivo cromossomos em células mitóticas usando Histone2B-GFP BacMam 2.0 label e um sistema de microscopia confocal de disco girando.

Imagem de célula viva de segregação do cromossomo durante a mitose

Aqui descrevemos um protocolo para imagens de células vivas do citoesqueleto de microtúbulos cortical no meristem apical de tiro e monitorando sua resposta às mudanças nas forças físicas.

Imagem celular ao vivo do citoesqueleto microtubulo e manipulação micromecânica da Arabidopsis Shoot Apical Meristem

Apresentado aqui é um protocolo para imagens de células vivas de super-resolução em tecido intacto. Nós padronizamos as condições para a imagem de uma população de células-tronco adultas altamente sensíveis em seu ambiente de tecido nativo. Esta técnica envolve o equilíbrio da resolução temporal e espacial para permitir a observação direta de fenômenos biológicos no tecido vivo.

Imagem celular ao vivo super-resolução de estruturas subcelulares

Esse protocolo de imunolocalização nos meiócitos machos do milho mantém a integridade tridimensional das células durante a meiose. Ele permite o rastreamento dinâmico da localização intracelular de até três anticorpos independentes em material preservado fixado com paraformaldeído, além do DAPI, que tinge o DNA.

Imunolocalização Tridimensional em Meiocitos de Milho

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Imagem quantitativa de células vivas da forma nuclear e dinâmica da cromatina durante o desenvolvimento e estresse ambiental na raiz de Arabidopsis thaliana

Aprenda a caracterizar movimentos de centrômeros durante a prófase meiótica em Arabidopsis thaliana usando imagem ao vivo de alta resolução. Este método permite quantificar dinâmicas cromossômicas essenciais para a formação de esporos.

Caracterização por imagem ao vivo dos movimentos do centrômero durante a prófase meiótica masculina em Arabidopsis thaliana

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