Name: Microscopia de Expansão: Imagem Fluorescente de Alta Resolução com Microscópio Convencional (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-19T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 53 s
Description: Aprenda microscopia de expansão com criofixação para imagem de alta resolução em biologia celular. Este método preserva estruturas celulares nativas e supera limitações da microscopia de superresolução tradicional.

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<ol><li>Jacquemet, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cell+biologist%27s+guide+to+super-resolution+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">The cell biologist's guide to super-resolution microscopy.</a> J Cell Sci. 133 (11), jcs240713(2020).</li>
<li>Chen, F., Tillberg, P. W., Boyden, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+imaging%3A+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Optical imaging: expansion microscopy.</a> Science. 347 (6221), 543-548 (2015).</li>
<li>Laporte, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-series+reconstruction+of+the+molecular+architecture+of+human+centriole+assembly%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Time-series reconstruction of the molecular architecture of human centriole assembly.</a> Cell. 187 (9), 2158-2174 (2024).</li>
<li>Steib, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((WDR90+is+a+centriolar+microtubule+wall+protein+important+for+centriole+architecture+integrity%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">WDR90 is a centriolar microtubule wall protein important for centriole architecture integrity.</a> Elife. 9, e57205(2020).</li>
<li>Le Borgne, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+evolutionary+conserved+proteins+CEP90%2C+FOPNL%2C+and+OFD1+recruit+centriolar+distal+appendage+proteins+to+initiate+their+assembly%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">The evolutionary conserved proteins CEP90, FOPNL, and OFD1 recruit centriolar distal appendage proteins to initiate their assembly.</a> PLoS Biol. 20 (9), e3001782(2022).</li>
<li>Bertiaux, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy+provides+new+insights+into+the+cytoskeleton+of+malaria+parasites+including+the+conservation+of+a+conoid%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy provides new insights into the cytoskeleton of malaria parasites including the conservation of a conoid.</a> PLoS Biol. 19 (3), e3001020(2021).</li>
<li>Liffner, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atlas+of+Plasmodium+falciparum+intraerythrocytic+development+using+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Atlas of Plasmodium falciparum intraerythrocytic development using expansion microscopy.</a> Elife. 12, RP88088(2023).</li>
<li>Amodeo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+novel+mitochondrial+genome+segregation+factor+TAP110+in+Trypanosoma+brucei%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Characterization of the novel mitochondrial genome segregation factor TAP110 in Trypanosoma brucei.</a> J Cell Sci. 134 (5), jcs254300(2021).</li>
<li>Corrales, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tubulin+detyrosination+shapes+Leishmania+cytoskeletal+architecture+and+virulence%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Tubulin detyrosination shapes Leishmania cytoskeletal architecture and virulence.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 122 (3), e2415296122(2025).</li>
<li>Brunet, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+Alms1+proteins+regulate+centriolar+cartwheel+assembly+by+enabling+Plk4-Ana2+amplification+loop%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+J%22%5BJournal%5D)">Drosophila Alms1 proteins regulate centriolar cartwheel assembly by enabling Plk4-Ana2 amplification loop.</a> EMBO J. 44 (8), 2396(2025).</li>
<li>Langner, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+expansion+microscopy+%28U-ExM%29+of+mouse+and+human+kidneys+for+analysis+of+subcellular+structures%5BTitle%5D)+AND+%22Cytoskeleton+%28Hoboken%29%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure expansion microscopy (U-ExM) of mouse and human kidneys for analysis of subcellular structures.</a> Cytoskeleton (Hoboken). 81 (11), 618-638 (2024).</li>
<li>Mercey, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+connecting+cilium+inner+scaffold+provides+a+structural+foundation+that+protects+against+retinal+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">The connecting cilium inner scaffold provides a structural foundation that protects against retinal degeneration.</a> PLoS Biol. 20 (6), e3001649(2022).</li>
<li>Steib, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TissUExM+enables+quantitative+ultrastructural+analysis+in+whole+vertebrate+embryos+by+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep+Methods%22%5BJournal%5D)">TissUExM enables quantitative ultrastructural analysis in whole vertebrate embryos by expansion microscopy.</a> Cell Rep Methods. 2 (10), 100311(2022).</li>
<li>Freifeld, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy+of+zebrafish+for+neuroscience+and+developmental+biology+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy of zebrafish for neuroscience and developmental biology studies.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 114 (50), E10799-E10808 (2017).</li>
<li>Yu, C. J., Orozco Cosio, D. M., Boyden, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ExCel%3A+super-resolution+imaging+of+C.+elegans+with+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">ExCel: super-resolution imaging of C. elegans with expansion microscopy.</a> Methods Mol Biol. 2468, 141-203 (2022).</li>
<li>Tillberg, P. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein-retention+expansion+microscopy+of+cells+and+tissues+labeled+using+standard+fluorescent+proteins+and+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Protein-retention expansion microscopy of cells and tissues labeled using standard fluorescent proteins and antibodies.</a> Nat Biotechnol. 34 (9), 987-992 (2016).</li>
<li>Gambarotto, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+cellular+ultrastructures+using+expansion+microscopy+%28U-ExM%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Imaging cellular ultrastructures using expansion microscopy (U-ExM).</a> Nat Methods. 16 (1), 71-74 (2019).</li>
<li>Ku, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplexed+and+scalable+super-resolution+imaging+of+three-dimensional+protein+localization+in+size-adjustable+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Multiplexed and scalable super-resolution imaging of three-dimensional protein localization in size-adjustable tissues.</a> Nat Biotechnol. 34 (9), 973-981 (2016).</li>
<li>Schnell, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunolabeling+artifacts+and+the+need+for+live-cell+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Immunolabeling artifacts and the need for live-cell imaging.</a> Nat Methods. 9 (2), 152-158 (2012).</li>
<li>Dubochet, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryo-EM-the+first+thirty+years%5BTitle%5D)+AND+%22J+Microsc%22%5BJournal%5D)">Cryo-EM-the first thirty years.</a> J Microsc. 245 (3), 221-224 (2012).</li>
<li>Neuhaus, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethane-freezing%2Fmethanol-fixation+of+cell+monolayers%3A+a+procedure+for+improved+preservation+of+structure+and+antigenicity+for+light+and+electron+microscopies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">Ethane-freezing/methanol-fixation of cell monolayers: a procedure for improved preservation of structure and antigenicity for light and electron microscopies.</a> J Struct Biol. 121 (3), 326-342 (1998).</li>
<li>Kellenberger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potential+of+cryofixation+and+freeze+substitution%3A+observations+and+theoretical+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Microsc%22%5BJournal%5D)">The potential of cryofixation and freeze substitution: observations and theoretical considerations.</a> J Microsc. 161 (Pt 2), 183-203 (1991).</li>
<li>Laporte, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+the+native+cellular+organization+by+coupling+cryofixation+with+expansion+microscopy+%28Cryo-ExM%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Visualizing the native cellular organization by coupling cryofixation with expansion microscopy (Cryo-ExM).</a> Nat Methods. 19 (2), 216-222 (2022).</li>
<li>Hinterndorfer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+expansion+microscopy+reveals+the+cellular+architecture+of+budding+and+fission+yeast%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure expansion microscopy reveals the cellular architecture of budding and fission yeast.</a> J Cell Sci. 135 (24), jcs260240(2022).</li>
<li>Mikus, F., Dey, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+expansion+microscopy+%28U-ExM%29+of+the+fission+yeast+Schizosaccharomyces+pombe%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure expansion microscopy (U-ExM) of the fission yeast Schizosaccharomyces pombe.</a> Methods Mol Biol. 2862, 47-59 (2025).</li>
<li>Ben Chaabene, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxoplasma+gondii+rhoptry+discharge+factor+3+is+essential+for+invasion+and+microtubule-associated+vesicle+biogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Toxoplasma gondii rhoptry discharge factor 3 is essential for invasion and microtubule-associated vesicle biogenesis.</a> PLoS Biol. 22 (8), e3002745(2024).</li>
<li>Shah, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Life-cycle-coupled+evolution+of+mitosis+in+close+relatives+of+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Life-cycle-coupled evolution of mitosis in close relatives of animals.</a> Nature. 630 (8015), 116-122 (2024).</li>
<li>Klena, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+in-depth+guide+to+the+ultrastructural+expansion+microscopy+%28U-ExM%29+of+Chlamydomonas+reinhardtii%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">An in-depth guide to the ultrastructural expansion microscopy (U-ExM) of Chlamydomonas reinhardtii.</a> Bio Protoc. 13 (17), e4792(2023).</li>
<li>van den Hoek, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+architecture+of+the+ciliary+base+reveals+the+stepwise+assembly+of+intraflagellar+transport+trains%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">In situ architecture of the ciliary base reveals the stepwise assembly of intraflagellar transport trains.</a> Science. 377 (6605), 543-548 (2022).</li>
<li>Mikus, F., et al. Charting the landscape of cytoskeletal diversity in microbial eukaryotes. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMikus%2C+F+%22bioRxiv%22">bioRxiv</a>. , (2024).</li>
<li>Petrich, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expanding+insights%3A+harnessing+expansion+microscopy+for+super-resolution+analysis+of+HIV-1-cell+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Expanding insights: harnessing expansion microscopy for super-resolution analysis of HIV-1-cell interactions.</a> Viruses. 16 (10), 1610(2024).</li>
<li>Louvel, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((iU-ExM%3A+nanoscopy+of+organelles+and+tissues+with+iterative+ultrastructure+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">iU-ExM: nanoscopy of organelles and tissues with iterative ultrastructure expansion microscopy.</a> Nat Commun. 14 (1), 7893(2023).</li>
<li>Lemaître, F., et al. Unveiling the molecular architecture of T cells and immune synapses with cryo-expansion microscopy. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLema%C3%AEtre%2C+F+%22bioRxiv%22">bioRxiv</a>. , (2025).</li>
<li>Millierioux, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((De+novo+biosynthesis+of+sterols+and+fatty+acids+in+the+Trypanosoma+brucei+procyclic+form%3A+carbon+source+preferences+and+metabolic+flux+redistributions%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">De novo biosynthesis of sterols and fatty acids in the Trypanosoma brucei procyclic form: carbon source preferences and metabolic flux redistributions.</a> PLoS Pathog. 14 (5), e1007116(2018).</li>
<li>Bangs, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+cloning+and+cellular+localization+of+a+BiP+homologue+in+Trypanosoma+brucei%3A+divergent+ER+retention+signals+in+a+lower+eukaryote%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Molecular cloning and cellular localization of a BiP homologue in Trypanosoma brucei: divergent ER retention signals in a lower eukaryote.</a> J Cell Sci. 105 (Pt 4), 1101-1113 (1993).</li>
<li>Dolgin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%27Expansion+microscopy%27+turns+ten%3A+how+a+tissue-swelling+method+brought+super-resolution+imaging+to+the+masses%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">'Expansion microscopy' turns ten: how a tissue-swelling method brought super-resolution imaging to the masses.</a> Nature. 637 (8046), 752-754 (2025).</li>
<li>Tosetti, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essential+function+of+the+alveolin+network+in+the+subpellicular+microtubules+and+conoid+assembly+in+Toxoplasma+gondii%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Essential function of the alveolin network in the subpellicular microtubules and conoid assembly in Toxoplasma gondii.</a> Elife. 9, e56635(2020).</li>
<li>Gorilak, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy+facilitates+quantitative+super-resolution+studies+of+cytoskeletal+structures+in+kinetoplastid+parasites%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Biol%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy facilitates quantitative super-resolution studies of cytoskeletal structures in kinetoplastid parasites.</a> Open Biol. 11 (9), 210131(2021).</li>
<li>Halpern, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hybrid+structured+illumination+expansion+microscopy+reveals+microbial+cytoskeleton+organization%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Hybrid structured illumination expansion microscopy reveals microbial cytoskeleton organization.</a> ACS Nano. 11 (12), 12677-12686 (2017).</li>
<li>Gao, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+stimulated+emission+depletion+microscopy+%28ExSTED%29%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Expansion stimulated emission depletion microscopy (ExSTED).</a> ACS Nano. 12 (5), 4178-4185 (2018).</li>
<li>Zwettler, F. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+resolution+imaging+by+post-labeling+expansion+single-molecule+localization+microscopy+%28Ex-SMLM%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Molecular resolution imaging by post-labeling expansion single-molecule localization microscopy (Ex-SMLM).</a> Nat Commun. 11 (1), 3388(2020).</li>
<li>Daetwyler, S., Fiolka, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light-sheets+and+smart+microscopy%2C+an+exciting+future+is+dawning%5BTitle%5D)+AND+%22Commun+Biol%22%5BJournal%5D)">Light-sheets and smart microscopy, an exciting future is dawning.</a> Commun Biol. 6 (1), 502(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Suporte metálico para tubos de 5ml</td><td>Dominique Dutscher</td><td>QB-E5</td><td>Etapa de substituição por congelamento</td></tr><tr><td>Êmbolo criogênico manual 620</td><td>RHOST</td><td>https://rhost-em.com/</td><td>Etapa de criofixação</td></tr><tr><td>Acetona 99,8% AcroSeal</td><td>Acros Organics</td><td>Gato. nº 67-64-1&nbsp;</td><td>Etapa de substituição por congelamento</td></tr><tr><td>Acrilamida 40% (AA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A4058</td><td>Procedimento de expansão &nbsp; (âncora)</td></tr><tr><td>Ácido acrílico &nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>8.00181&nbsp;</td><td>Procedimento de expansão (polímero)</td></tr><tr><td>Persulfato de amônio (APS)</td><td>Thermo Fisher</td><td>17874</td><td>Procedimento de expansão (polímero)</td></tr><tr><td>Punção de biópsia</td><td>Dominique Dutscher</td><td>PUK-40</td><td>Necessário para cortar o gel antes da desnaturalização &nbsp;</td></tr><tr><td>BSA</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P1379</td><td>Imunocoloração&nbsp;</td></tr><tr><td>Câmara celular Attofluor</td><td>Invitrogen</td><td>A7816</td><td>Câmara de imagem adaptada para coberturas de 24mm para imagem</td></tr><tr><td>Câmara de celas</td><td>Serviço de Ampliação Vitalícia</td><td>10900</td><td>Câmara de imagem adaptada para coberturas de 18mm para imagem</td></tr><tr><td>Coberturas 12 mm&nbsp;</td><td>Dominique Dutscher</td><td>100040</td><td>Crescimento de células / fixação de T. brucei</td></tr><tr><td>Coberturas 24 mm&nbsp;</td><td>Dominique Dutscher</td><td>900547</td><td>Imagem&nbsp;</td></tr><tr><td>Coberturas 18mm</td><td>VWR</td><td>631-0153</td><td>Imagem&nbsp;</td></tr><tr><td>Gaz&nbsp;</td><td>Linde Gaz</td><td>88888DE</td><td>Necessário para criofixação</td></tr><tr><td>Formaldeído 36.5&ntraço; 38% (FA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>&nbsp; F8775</td><td>Procedimento de expansão &nbsp; (âncora)</td></tr><tr><td>Glutaraldeído 25% (GA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>&nbsp; G5882</td><td>Etapa de substituição por congelamento</td></tr><tr><td>Glicerol &nbsp;</td><td>Euromedex&nbsp;</td><td>EU3550</td><td>Armazenamento de gel a longo prazo &nbsp;</td></tr><tr><td>Nitrogênio líquido &nbsp;</td><td>Linde Gaz</td><td>2200975</td><td>Necessário para criofixação (resfriamento do sistema)</td></tr><tr><td>Microtubo clear-lock 5 ml&nbsp;</td><td>Dominique Dutscher</td><td>390932A</td><td>Necessário para substituição por congelamento</td></tr><tr><td>Agulha 18G</td><td>Dominique Dutscher</td><td>050123B</td><td>Necessário para coletar acetona</td></tr><tr><td>N,N-metilbisacrilamida 2% (BIS)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M1533, SIGMA</td><td>Procedimento de expansão (polímero)</td></tr><tr><td>Paraformaldeído 16% (PFA)</td><td>EMS</td><td>Gato. nº 15710</td><td>Etapa de substituição por congelamento</td></tr><tr><td>Poli-D-Lisina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P1024</td><td>Revestimentos para cobertura de amostras / imagens &nbsp;</td></tr><tr><td>Poli-L-Lisina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P1274</td><td>Revestimentos para cobertura de amostras / imagens &nbsp;</td></tr><tr><td>Reduicer de pressão&nbsp;</td><td>Linde Gaz</td><td>CPLH0SJ-LIN224</td><td>Reduicador de pressão permitindo a distração de etano (criofixação)</td></tr><tr><td>Seringe Terumo 10 ml</td><td>Dominique Dutscher</td><td>50132</td><td>Necessário para coletar acetona</td></tr><tr><td>Kit de elastomer de silicone</td><td>Dow</td><td>4001834</td><td>Kit para preparação de placas de poço silionado (imunocoloração) & nbsp;</td></tr><tr><td>Acrilato de Sódio 97-99% (SA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>408220</td><td>Procedimento de expansão (polímero)</td></tr><tr><td>AK Scientific</td><td>R624</td><td>Procedimento de expansão (polímero)</td><td></td></tr><tr><td>Dodecilsulfato de sódio</td><td>Euromedex</td><td>EU0660</td><td>Procedimento de expansão (desnaturação)</td></tr><tr><td>Tetrametiletilendiamina (TEMED)</td><td>Thermo Fisher</td><td>17919</td><td>Procedimento de expansão (polímero)</td></tr><tr><td>Tubings&nbsp;</td><td>Termo Científica</td><td>8060-0060</td><td>Tubos para desfregamento de etano (criofixação)</td></tr><tr><td>Pré-adolescente-20</td><td>Euromedex</td><td>1005-7</td><td>Imunocoloração&nbsp;</td></tr><tr><td>Pinças Dumont n&deg; 5&nbsp;</td><td>FineScienceTools</td><td>11255-20</td><td>Manipulação dos coverslips&nbsp;</td></tr></tbody></table>

microscopia de expansão: imagem fluorescente de alta resolução com microscópio convencional

Expansion Microscopy: High-Resolution Fluorescent Imaging with a Conventional Microscope

Microscopia de Expansão: Imagem Fluorescente de Alta Resolução com Microscópio Convencional

Expansion microscopy (ExM) is an innovative super-resolution fluorescence microscopy technique that physically enlarges biological specimens, enabling ...

expansion-microscopy-high-resolution-fluorescent-imaging-with

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Em muitas situações biológicas e clínicas, é vantajoso para estudar os processos celulares como eles evoluem no seu microambiente nativa. Aqui, descrevemos a montagem e uso de um microscópio de baixo custo de fibra óptica que pode fornecer imagens em tempo real em cultura de células, estudos em animais e estudos clínicos do paciente.

De alta resolução de fibra óptica para Microendoscopy In situ Celular imagem

Informações espaço-temporais sobre proteínas dinâmicas dentro de células vivas são cruciais para a compreensão da biologia. Um tipo de microscopia de super-resolução chamada microscopia de iluminação rápida estruturada em 3D (f3D-SIM) revela informações únicas sobre o anel Z citocinético em bactérias: tanto sua aparência semelhante a um grânulo quanto a dinâmica rápida do FtsZ dentro do anel.

Super-resolution Imaging do Z Anel Cytokinetic em bactérias vivas Usando o Fast-estruturados 3D Iluminação Microscopy (F3D-SIM)

Aqui nós apresentamos um guia prático de construção de um sistema integrado de microscopia, que mescla imagens de epi-fluorescente convencional, único-molécula detecção-baseado Super-resolução imagem e deteção de único-molécula multi cor, incluindo transferência de energia de ressonância de fluorescência de único-molécula de imagem, em um set-up de uma maneira custo-eficiente.

Realização de vários modos de imagem com um microscópio de fluorescência

A imagem latente de nanoscale de amostras clínicas do tecido pode melhorar a compreensão da patogénese da doença. A patologia de expansão (ExPath) é uma versão da microscopia de expansão (ExM), modificada para compatibilidade com amostras de tecido clínico padrão, para explorar a configuração de nanoescala de biomoléculas usando microscópios limitados de difração convencional.

Imagem nanoscópica de seções do tecido humano através da expansão física e isotropic

O método apresentado permite a visualização de proteínas celulares fluorescentes com microscopia de expansão levando a uma resolução de 70 nm em um microscópio convencional.

Imagem de Proteínas Podocíticas Nephrin, Actin e Podocina com Microscopia de Expansão

Aqui, um protocolo para a implementação de microscopia de expansão em embriões iniciais de Drosophila para obtenção de imagens de super-resolução usando um microscópio confocal convencional de varredura a laser é apresentado.

Usando microscopia de expansão para ampliar fisicamente embriões de Drosophila de montagem inteira para imagens de super-resolução

Apresentamos aqui uma nova versão da microscopia de expansão (ExM), Magnify, que é modificada para expansão de até 11 vezes, conservando uma ampla gama de classes de biomoléculas, e é compatível com uma ampla gama de tipos de tecidos. Ele permite a interrogação da configuração em nanoescala de biomoléculas usando microscópios convencionais limitados por difração.

Retenção molecular universal com microscopia de expansão de 11 vezes

Este estudo apresenta um protocolo detalhado para a realização de microscopia de expansão ultraestrutural em três estágios do ciclo de vida in vitro do Trypanosoma cruzi, o patógeno responsável pela doença de Chagas. Incluímos a técnica otimizada para proteínas do citoesqueleto e marcação de pan-proteoma.

Microscopia de Expansão Ultraestrutural em Três Estágios do Ciclo de Vida In Vitro do Trypanosoma cruzi

Aqui, propomos um protocolo simples que combina engenharia de oligossacarídeos metabólicos, química de clique e microscopia de expansão que permite a bioimagem de N-glicoproteínas sialiladas intracelulares com resolução aprimorada usando equipamentos de microscopia de rotina.

Visualização da Sialilação Intracelular com Química Click e Microscopia de Expansão

Este protocolo detalha as aplicações avançadas de imagem e o gerenciamento de recursos compartilhados de um sistema de microscópio confocal de varredura a laser integrado a um detector de matriz multiplexada para imagens celulares e subcelulares de alta resolução. O fluxo de trabalho permite imagens multimodais desde confocal até super-resolução (~120 nm) dentro de uma única plataforma, tornando a visualização em escala nanométrica mais acessível.

Imagem de Superresolução e Gerenciamento Compartilhado: Um Protocolo para Microscopia Confocal com Detecção de Multiplex

Aprenda microscopia de expansão com criofixação para imagem de alta resolução em biologia celular. Este método preserva estruturas celulares nativas e supera limitações da microscopia de superresolução tradicional.

Microscopia de Expansão: Imagem Fluorescente de Alta Resolução com Microscópio Convencional

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