Name: Um ensaio microscópico de cloreto 2,3,5-trifeniltetrazólio para análise precisa e confiável da lesão miocárdica (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-28T12:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 17 s
Description: Aprenda o ensaio microscópico de TTC para análise precisa de lesão miocárdica. Este método refinado utiliza crioseccionamento e imagem microscópica para avaliar viabilidade cardiomiocitária com alta qualidade.

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<ol><li>Bolli, R., Becker, L., Gross, G., Mentzer, R., Balshaw, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+protection+at+a+crossroads%3A+the+need+for+translation+into+clinical+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Myocardial protection at a crossroads: the need for translation into clinical therapy.</a> Circ Res. 95 (2), 125-134 (2004).</li>
<li>Murphy, E., Steenbergen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+underlying+acute+protection+from+cardiac+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Mechanisms underlying acute protection from cardiac ischemia-reperfusion injury.</a> Physiol Rev. 88 (2), 581-609 (2008).</li>
<li>Bohl, S., Medway, D. J., Schulz-Menger, J., Schneider, J. E., Neubauer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refined+approach+for+quantification+of+in+vivo+ischemia-reperfusion+injury+in+the+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Refined approach for quantification of in vivo ischemia-reperfusion injury in the mouse heart.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297 (6), H2054-H2058 (2009).</li>
<li>Liepinsh, E., Kuka, J., Zvejniece, L., Vilskersts, R., Dambrova, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+heart+and+brain+tissue+preparation+for+digital+macro+photography+after+ischemia-reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Rodent heart and brain tissue preparation for digital macro photography after ischemia-reperfusion.</a> J Vis Exp. (180), e62942(2022).</li>
<li>Kim, S. -C., Boehm, O., Meyer, R., Hoeft, A., Knüfermann, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> J Vis Exp. (65), e3896(2012).</li>
<li>Lindsey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+experimental+models+of+myocardial+ischemia+and+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for experimental models of myocardial ischemia and infarction.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 314 (4), H812-H838 (2018).</li>
<li>Ding, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+refined+TTC+assay+precisely+detects+cardiac+injury+and+cellular+viability+in+the+infarcted+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A refined TTC assay precisely detects cardiac injury and cellular viability in the infarcted mouse heart.</a> Sci Rep. 14 (1), 25214(2024).</li>
<li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-6+coaxes+cellular+dedifferentiation+as+a+pro-regenerative+intermediate+that+contributes+to+pericardial+ADSC-induced+cardiac+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">IL-6 coaxes cellular dedifferentiation as a pro-regenerative intermediate that contributes to pericardial ADSC-induced cardiac repair.</a> Stem Cell Res Ther. 13 (1), 44(2022).</li>
<li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sfrp1+as+a+pivotal+paracrine+factor+in+the+trained+pericardial+stem+cells+that+foster+reparative+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Sfrp1 as a pivotal paracrine factor in the trained pericardial stem cells that foster reparative activity.</a> Stem Cells Transl Med. 13 (2), 137-150 (2023).</li>
<li>Yellon, D. M., Hausenloy, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Myocardial reperfusion injury.</a> N Engl J Med. 357, 1121-1135 (2007).</li>
<li>Li, C., Chen, M., Zhang, D., Xu, T., Wang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+injury+induced+by+obstructive+jaundice%3A+a+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Perioper+Precis+Med%22%5BJournal%5D)">Cardiac injury induced by obstructive jaundice: a comprehensive review.</a> Perioper Precis Med. 28 (1), 28-38 (2025).</li>
<li>Chang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%C3%9F-tubulin+contributes+to+Tongyang+Huoxue+decoction-induced+protection+against+hypoxia%2Freoxygenation-induced+injury+of+sinoatrial+node+cells+through+SIRT1-mediated+regulation+of+mitochondrial+quality+surveillance%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">ß-tubulin contributes to Tongyang Huoxue decoction-induced protection against hypoxia/reoxygenation-induced injury of sinoatrial node cells through SIRT1-mediated regulation of mitochondrial quality surveillance.</a> Phytomedicine. 108, 154502(2023).</li>
<li>Li, Z., Hu, B., Zou, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+advances+in+understanding+the+role+and+mechanism+of+pyroptosis+in+myocardial+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Perioper+Precis+Med%22%5BJournal%5D)">Research advances in understanding the role and mechanism of pyroptosis in myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Perioper Precis Med. 2 (2), 52-63 (2024).</li>
<li>Ouyang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+immunostaining-based+approach+for+assessing+myocardial+viability+in+the+infarcted+mouse+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cardiovasc+Med%22%5BJournal%5D)">An immunostaining-based approach for assessing myocardial viability in the infarcted mouse hearts.</a> Front Cardiovasc Med. 12, 1598314(2025).</li>
<li>Benedek, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+TTC+staining+for+the+evaluation+of+tissue+injury+in+the+early+phases+of+reperfusion+after+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Use of TTC staining for the evaluation of tissue injury in the early phases of reperfusion after focal cerebral ischemia in rats.</a> Brain Res. 1116 (1), 159-165 (2006).</li>
<li>Lindsey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+in+vivo+mouse+models+of+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for in vivo mouse models of myocardial infarction.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 321 (6), H1056-H1073 (2021).</li>
<li>Lujan, H. L., Janbaih, H., Feng, H. -Z., Jin, J. -P., DiCarlo, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+ischemia%2C+reperfusion%2C+and+infarction+in+chronically+instrumented%2C+intact%2C+conscious%2C+and+unrestrained+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial ischemia, reperfusion, and infarction in chronically instrumented, intact, conscious, and unrestrained mice.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 302 (12), R1384-R1400 (2012).</li>
<li>Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarct+size+and+area+at+risk+assessment+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarct size and area at risk assessment in mice.</a> Exp Clin Cardiol. 17 (4), 268-272 (2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Objetivo 1,25x</td><td>Olympus</td><td>PlanApo 1.25X/0.04</td><td>Imagem</td></tr><tr><td>Seringas de 10 mL</td><td>B.Braum</td><td>4617100V</td><td>Retroperfusão</td></tr><tr><td>2,3,5-cloreto de trifeniltetrazólio</td><td>Milipore</td><td>1.08380.0100</td><td>Produtos químicos</td></tr><tr><td>Cânula 20 G</td><td>BD</td><td>305895</td><td>Retroperfusão</td></tr><tr><td>3&nbsp; seringas mL</td><td>B.Braum</td><td>4617022V</td><td>Retroperfusão</td></tr><tr><td>Torneira de 3 vias</td><td>B.Braum</td><td>16494C</td><td>Retroperfusão</td></tr><tr><td>Aquamount&nbsp;</td><td>BDH</td><td>362262H</td><td>Cirosseção</td></tr><tr><td>Equilíbrio</td><td>Ohaus</td><td>N/A</td><td>Pesagem de produtos químicos</td></tr><tr><td>Microscópio binocular</td><td>Leica</td><td>MZ6</td><td>Canulação</td></tr><tr><td>C57BL/6J</td><td>Janvier</td><td>N/A</td><td>Animais</td></tr><tr><td>Câmera</td><td>Olympus</td><td>UC30</td><td>Imagem</td></tr><tr><td>Slips de cobertura</td><td>Epredia</td><td>BB02400500A113MN20</td><td>Cirosseção</td></tr><tr><td>Criostato</td><td>Leica</td><td>M850</td><td>Cirosseção</td></tr><tr><td>Água Duplamente Destilada</td><td>MIlipore</td><td>N/A</td><td>Produtos químicos dissolvedores</td></tr><tr><td>Tesouras finas de dissecação</td><td>AESCULAP</td><td>BC702R</td><td>Instrumentos cirúrgicos</td></tr><tr><td>Pinça microdissecante fina &nbsp;</td><td>AESCULAP</td><td>FM001R</td><td>Instrumentos cirúrgicos</td></tr><tr><td>Lâminas de microscópio de vidro</td><td>Engelbrecht</td><td>11102</td><td>Cirosseção</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td>1,54g</td><td>Processamento de imagem</td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Piramal</td><td>14150097146754</td><td>Produtos químicos</td></tr><tr><td>Isopropanol</td><td>Roth</td><td>&nbsp; 0733.1</td><td>Produtos químicos</td></tr><tr><td>Microscópio óptico</td><td>Olympus</td><td>BX61</td><td>Imagem</td></tr><tr><td>Microdissecação de pinças & nbsp;</td><td>F.S.T</td><td>11152-10</td><td>Instrumentos cirúrgicos</td></tr><tr><td>Composto OCT</td><td>Sakura</td><td>4583</td><td>Produtos químicos</td></tr><tr><td>Placa de Petri</td><td>Therno Scientific</td><td>172931</td><td>Retroperfusão</td></tr><tr><td>Soro Tamponado de Fosfato</td><td>Roth</td><td>9143.1</td><td>Produtos químicos</td></tr><tr><td>Rstudio</td><td>Posit Software</td><td>2024.09.0</td><td>Processamento de imagem</td></tr><tr><td>Sutura de seda</td><td>F.S.T</td><td>18020-60</td><td>Retroperfusão</td></tr><tr><td>Software</td><td>Olympus</td><td>CellSens V3.2</td><td>Imagem</td></tr><tr><td>Tesoura de dissecação de aço inoxidável</td><td>AESCULAP</td><td>BC257R</td><td>Instrumentos cirúrgicos</td></tr><tr><td>Solução de Zamboni</td><td>Morphisto</td><td>12773.0050</td><td>Produtos químicos</td></tr></tbody></table>

um ensaio microscópico de cloreto 2,3,5-trifeniltetrazólio para análise precisa e confiável da lesão miocárdica

A Microscopic 2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride Assay for Accurate and Reliable Analysis of Myocardial Injury

Um ensaio microscópico de cloreto 2,3,5-trifeniltetrazólio para análise precisa e confiável da lesão miocárdica

In this protocol, we present a refined 2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride (TTC)-based method for the accurate and reliable analysis of myocardial ...

a-microscopic-235-triphenyltetrazolium-chloride-assay-for-accurate

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Biomarcadores de medição em amostras biológicas complexas é cada vez mais guiando tomada de decisão clínica. Nós descrevemos um método altamente sensível para medir simultaneamente miosina cardíaca binding protein-C, MB da creatina quinase e troponina I em amostras de soro de pacientes com infarto do miocárdio e controle de indivíduos saudáveis.

Um método de quantificação sensível e específico para Determinação do Serum miosina cardíaca Binding Protein-C por Imunoensaio electroquimioluminescência

Um modelo altamente reprodutível para infarto do miocárdio em camundongos com manipulações minimamente invasivas é descrito. O modelo pode ser facilmente executado, resultando em alta reprodutibilidade e taxa de sobrevida. Assim, o modelo descrito reduzirá o número de animais necessários conforme solicitado pelo princípio 3R (Substituição, Refinamento e Redução).

Minimal procedimento cirúrgico invasivo de induzir Infarto do Miocárdio em Ratos

Este método descreve o uso da Microtomografia Computadorizada Quântica (MicroCT) para avaliar a morfologia, função, perfusão, metabolismo e viabilidade cardíaca com contraste iodado em camundongos com isquemia miocárdica induzida experimentalmente. A técnica pode ser aplicada para imagens longitudinais in vivo não destrutivas de alto rendimento de vários modelos animais de doenças cardíacas humanas.

In Vivo quantitativa Avaliação da Estrutura do miocárdio, função, perfusão e viabilidade Usando Cardiac Micro-Tomografia Computadorizada

Um modelo de rato de constrição da aorta abdominal que induz hipertrofia e remodelamento cardíaco é descrito. Um método eficiente, altamente reprodutível e minimamente invasivo é usado para fornecer uma plataforma simples, mas útil, para pesquisa em hipertrofia e disfunção miocárdica.

Um Modelo de Cardiologia remodela Através constrição da Aorta Abdominal em Ratos

A avaliação post-mortem do infarto do miocárdio (IM) em roedores é baseada na quantificação do infarto em cortes cardíacos corados. Descrevemos um método preciso para quantificar o tamanho do infarto usando amostragem sistemática de corações de ratos colhidos da base ao ápice e análises de imagem de cortes histológicos corados com tricrômio.

Quantificação histológico de miocárdio crônico infarto em ratos

Este protocolo descreve um novo método para a comparação 3D do tecido do miocárdio todo-coração com a RM. Este é concebido para a avaliação precisa de injecções intramiocárdicos na zona de fronteira do enfarte de um modelo suíno crónica de enfarte do miocárdio.

Análise Tecidos do Miocárdio Whole-coração 3D

Aqui vamos demonstrar um protocolo para padronizar os procedimentos de amostragem de um modelo estabelecido de suínos de infarto agudo do miocárdio, a fim de aumentar seu valor de translação no entendimento da fisiopatologia da lesão de isquemia/reperfusão miocárdica e para testar candidatos a novos fármacos.

Aprimoramento do modelo de suínos do miocárdio peito fechado pela padronização do tecido e os procedimentos de recolha de amostras de sangue

Aqui, apresentamos um protocolo que usa JC-1 tintura para avaliar o potencial de membrana mitocondrial das células após serem expostos a hipóxia/reoxigenação com ou sem um agente protetor.

Um ensaio de baseados em citometria de fluxo para medir o potencial de membrana mitocondrial em miócitos após hipóxia/reoxigenação

Sob anestesia adequada, o coração de camundongo foi exteriorizado através do espaço intercostal, e o infarto do miocárdio foi induzido com sucesso pela ligadura da artéria descendente anterior (DA) usando materiais prontamente disponíveis na maioria dos laboratórios.

Um Método Simples Modificado para Indução de Infarto do Miocárdio em Camundongos

Este estudo investiga os efeitos cardioprotetores do Munziq, uma preparação tradicional de ervas uigur, na lesão de isquemia-reperfusão miocárdica (MIRI) em ratos com fluido corporal anormal. Por meio de métodos experimentais abrangentes, demonstramos o potencial de Munziq para mitigar o MIRI suprimindo a via de sinalização NF-κB.

Herbal Munziq melhora a lesão de isquemia-reperfusão miocárdica inibindo a inflamação

A reconstrução tridimensional (3D) do dano cardíaco no infarto agudo do miocárdio reperfundido (repIAM) permite a quantificação fiel e a co-localização dos padrões associados que afetam a doença. Aqui, uma abordagem de imagem guiada por folha de luz automatizável é fornecida para medição contemporânea de danos cardíacos, área de risco e resposta de células imunes.

Análise 3D Simultânea de Dano Cardíaco e Resposta Imune em Infarto Agudo do Miocárdio Reperfundido Usando Microscopia de Fluorescência de Folha de Luz

Aprenda o ensaio microscópico de TTC para análise precisa de lesão miocárdica. Este método refinado utiliza crioseccionamento e imagem microscópica para avaliar viabilidade cardiomiocitária com alta qualidade.

Um ensaio microscópico de cloreto 2,3,5-trifeniltetrazólio para análise precisa e confiável da lesão miocárdica

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