Name: Linfodenectomia mesentérica murina para interrupção seletiva da comunicação linfática com intestino específico de região (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-30T12:35:00.000+00:00
Duration: 7 min 27 s
Description: Aprenda a técnica de linfodenectomia mesentérica seletiva em camundongos para interromper a drenagem linfática de segmentos específicos do intestino. Este protocolo de cirurgia com sobrevivência permite estudar as contribuições distintas dos linfonodos locais versus sistêmicos na imunidade intestinal.

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<ol><li>Chopp, L., Redmond, C., O'shea, J. J., Schwartz, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+thymus+to+tissues+and+tumor%3A+A+review+of+T+cell+biology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Allergy+Clin+Immunol%22%5BJournal%5D)">From thymus to tissues and tumor: A review of T cell biology.</a> J Allergy Clin Immunol. 151 (1), 81-97 (2023).</li>
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<li>Crespo, J., Sun, H., Welling, T. H., Tian, Z., Zou, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T+cell+anergy%2C+exhaustion%2C+senescence%2C+and+stemness+in+the+tumor+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Immunol%22%5BJournal%5D)">T cell anergy, exhaustion, senescence, and stemness in the tumor microenvironment.</a> Curr Opin Immunol. 25 (2), 214-221 (2013).</li>
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<li>Simoes, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymph+node+yield+in+the+pathological+staging+of+resected+nonmetastatic+colon+cancer%3A+The+more+the+better%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Lymph node yield in the pathological staging of resected nonmetastatic colon cancer: The more the better.</a> Surg Oncol. 43, 101806(2022).</li>
<li>Resio, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Commission+on+cancer+standards+for+lymph+node+sampling+and+oncologic+outcomes+after+lung+resection%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Thorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Commission on cancer standards for lymph node sampling and oncologic outcomes after lung resection.</a> Ann Thorac Surg. 119 (2), 308-315 (2025).</li>
<li>Connolly, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reservoir+of+stem-like+CD8+T+cells+in+the+tumor-draining+lymph+node+preserves+the+ongoing+antitumor+immune+response%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">A reservoir of stem-like CD8 T cells in the tumor-draining lymph node preserves the ongoing antitumor immune response.</a> Sci Immunol. 6 (64), eabg7836(2021).</li>
<li>Saddawi-Konefka, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic-preserving+treatment+sequencing+with+immune+checkpoint+inhibition+unleashes+cdc1-dependent+antitumor+immunity+in+HNSCC%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Lymphatic-preserving treatment sequencing with immune checkpoint inhibition unleashes cdc1-dependent antitumor immunity in HNSCC.</a> Nat Commun. 13, 4298(2022).</li>
<li>Saddawi-Konefka, R., Schokrpur, S., Gutkind, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Let+it+be%3A+Preserving+tumor-draining+lymph+nodes+in+the+era+of+immuno-oncology%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Let it be: Preserving tumor-draining lymph nodes in the era of immuno-oncology.</a> Cancer Cell. 42 (6), 930-933 (2024).</li>
<li>Houston, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+lymph+nodes+draining+the+small+intestine+and+colon+are+anatomically+separate+and+immunologically+distinct%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunol%22%5BJournal%5D)">The lymph nodes draining the small intestine and colon are anatomically separate and immunologically distinct.</a> Mucosal Immunol. 9 (2), 468-478 (2016).</li>
<li>Brinkmann, V., Pinschewer, D., Chiba, K., Feng, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fty720%3A+A+novel+transplantation+drug+that+modulates+lymphocyte+traffic+rather+than+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Pharmacol+Sci%22%5BJournal%5D)">Fty720: A novel transplantation drug that modulates lymphocyte traffic rather than activation.</a> Trends Pharmacol Sci. 21 (2), 49-52 (2000).</li>
<li>Mehandru, S., Colombel, J. -F., Juarez, J., Bugni, J., Lindsay, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+the+molecular+mechanisms+of+anti-trafficking+therapies+and+their+clinical+relevance+in+inflammatory+bowel+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunol%22%5BJournal%5D)">Understanding the molecular mechanisms of anti-trafficking therapies and their clinical relevance in inflammatory bowel disease.</a> Mucosal Immunol. 16 (6), 859-870 (2023).</li>
<li>Mariathasan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absence+of+lymph+nodes+in+lymphotoxin-alpha+%28lt+alpha%29-deficient+mice+is+due+to+abnormal+organ+development%2C+not+defective+lymphocyte+migration%5BTitle%5D)+AND+%22J+Inflam%22%5BJournal%5D)">Absence of lymph nodes in lymphotoxin-alpha (lt alpha)-deficient mice is due to abnormal organ development, not defective lymphocyte migration.</a> J Inflam. 45 (1), 72-78 (1995).</li>
<li>Kwon, S., Agollah, G. D., Wu, G., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatio-temporal+changes+of+lymphatic+contractility+and+drainage+patterns+following+lymphadenectomy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Spatio-temporal changes of lymphatic contractility and drainage patterns following lymphadenectomy in mice.</a> PLoS One. 9 (8), e106034(2014).</li>
<li>Blum, K. S., Proulx, S. T., Luciani, P., Leroux, J. -C., Detmar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamics+of+lymphatic+regeneration+and+flow+patterns+after+lymph+node+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Cancer+Res+Treat%22%5BJournal%5D)">Dynamics of lymphatic regeneration and flow patterns after lymph node dissection.</a> Breast Cancer Res Treat. 139 (1), 81-86 (2013).</li>
<li>Shaikh, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenteric+lymph+node+transplantation+in+mice+to+study+immune+responses+of+the+gastrointestinal+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Mesenteric lymph node transplantation in mice to study immune responses of the gastrointestinal tract.</a> Front Immunol. 12, 689896(2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Circuito anestésico</td><td>Qualquer</td><td></td><td>Ou anestésico injetável</td></tr><tr><td>Citômetro de fluxo BD LSRII (ou equivalente)</td><td>BD em Biociências</td><td></td><td>Equipado com o software FACS Diva (para citometria de fluxo) e nbsp;</td></tr><tr><td>Buprenorfina XR</td><td>Qualquer</td><td></td><td>Para analgesia</td></tr><tr><td>Mídia de cultura celular &nbsp;</td><td>Qualquer</td><td></td><td>(para técnicas de células vivas; ou seja, DMEM ou RPMI)</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Biolenda</td><td>422801</td><td>Concentração de trabalho: 15 ug/mL</td></tr><tr><td>Etanol (70% em água)</td><td>Qualquer</td><td></td><td>Para limpeza</td></tr><tr><td>CD45.2 (104) conjugado com FITC anti-mouse</td><td>Biolenda</td><td>109806</td><td>Concentração de trabalho: 5 ug/mL</td></tr><tr><td>Pinça: Pinças de ponta fina e angular</td><td>Roboz</td><td>RS-5058</td><td>Material: Dumoxel; Padrão #5, ângulo de 45 graus; Tamanho da ponta 0,1 x 0,06mm</td></tr><tr><td>Pinça: Pinças de ponta fina</td><td>Roboz</td><td>RS-4960</td><td>Material: Dumostar; Padrão #1; Tamanho da ponta: 0,20 x 0,12mm</td></tr><tr><td>Pinça: Pinças de ponta fina</td><td>Roboz</td><td>RS-4966</td><td>Material: Dumostar, ponta de Biologie; Padrão #3; Tamanho da ponta: 0,08 x 0,04mm</td></tr><tr><td>Lidocaína</td><td>Qualquer</td><td></td><td>Para analgesia</td></tr><tr><td>Agulha metálica de gavage</td><td>Qualquer</td><td></td><td>Agulha reutilizável reutilizável de gavage oral reta calibre 20/22, aço inoxidável.</td></tr><tr><td>Condutores de agulha</td><td>Roboz</td><td>RS-6410</td><td>Suporte de agulhas Castroviejo; Reto</td></tr><tr><td>OPCIONAL:&nbsp; &nbsp; &nbsp; Luzes LED duplas/duplas de microscópio de pescoço de ganso</td><td>Qualquer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>OPCIONAL: Corante azul Evans</td><td>Sigma</td><td>E2129-10G</td><td>Para rastreamento linfático opcional.</td></tr><tr><td>OPCIONAL: Microscópio de operação</td><td>Leica</td><td>MZ9.5</td><td>Microscópio operador de cabeça estéreo Leica Mz9.5</td></tr><tr><td>Solução salina tamponada com fosfato (PBS)</td><td>Qualquer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solução de povidona/iodo</td><td>Qualquer</td><td></td><td>Para preparação/esterilização da pele</td></tr><tr><td>Tesoura: Tesoura de ponta extra fina</td><td>Roboz</td><td>RS-5605</td><td>McPherson-Vannas; Aresta de corte de 3mm; curva (para os nós da estação 3/4)</td></tr><tr><td>Tesoura: Tesoura de ponta fina</td><td>Roboz</td><td>RS-5650SC</td><td>Tesouras Surecut Castroviejo (para nós da estação 1/2/3)</td></tr><tr><td>Tesoura: Tesoura média</td><td>Roboz</td><td>RS-5676</td><td>Noyes; Borda de corte de 13mm; Direto</td></tr><tr><td>Cola cirúrgica</td><td>Qualquer</td><td></td><td>Cola de tecido 3M Vetbond</td></tr><tr><td>Sutura: 6-0 monofilamento azul polipropilenex</td><td>Qualquer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sutura: sutura de nylon monofilamento preto 9-0</td><td>Qualquer</td><td></td><td>(opcional) Também pode usar o 8-0 um pouco maior Tamanho do sutura.</td></tr><tr><td>Fixador tecidular</td><td>Qualquer</td><td></td><td>(para histologia planejada; ou seja, formalina tamponada com 10% neutro ou 4% paraformaldeído)</td></tr><tr><td>Bolsa térmica de circulação de água morna</td><td>Qualquer</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

linfodenectomia mesentérica murina para interrupção seletiva da comunicação linfática com intestino específico de região

Murine Mesenteric Lymphadenectomy for Selective Disruption of Lymphatic Communication with Region-Specific Gut

Linfodenectomia mesentérica murina para interrupção seletiva da comunicação linfática com intestino específico de região

Immunosurveillance versus antigen-tolerance is a fine balance within the gut microenvironment, during which the critical role of circulating T cell ...

murine-mesenteric-lymphadenectomy-for-selective-disruption-lymphatic

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Imunologia e Infecção

Para seguir a progressão de uma resposta imune ao longo do tempo dentro do mesmo rato, gânglios linfáticos pode ser sequencialmente removido por cirurgia. Aqui, nós descrevemos como esta técnica pode ser realizada.

Cirurgia Nó murino superficial linfático

Este vídeo demonstra uma técnica para canular o ducto linfático mesentérico em ratos. Este método permite o acesso direto a todo o volume de componentes presentes no fluido linfático.

Canulação do Ducto Linfático Mesentérico em Modelo de Rato para Colheita de Fluido Linfático

Aqui descrevemos uma técnica para canular o ducto linfático mesentérico em ratos que permite a quantificação do transporte de lipídios e drogas através do sistema linfático após a administração intestinal. A técnica pode ser adaptada para avaliar as concentrações de linfa mesentérica e/ou transporte de fluidos, células imunes, peptídeos, proteínas e moléculas lipofílicas.

A linfa mesentérica Duct canulada Rat Modelo: Aplicação para a Avaliação de Intestinal Linfática transporte da droga

Apresentamos um procedimento cirúrgico para cateterizar o tronco linfático intestinal em porcos neonatais para coletar grandes quantidades de componentes do metabolismo lipídico da linfa eferente.

Long-Term Cateterismo do tronco linfa intestinal e Recolha de linfa no Neonatais Pigs

Aqui, descrevemos uma técnica laparoscópica minimamente invasiva para a amostragem de série do fígado e linfonodos mesentéricos (MLN) em macacos que permite o aumento da frequência de amostragem, e reduz o potencial de complicações cirúrgicas quando comparada a realização de uma laparotomia.

Técnica laparoscópica para a coleção de série do fígado e mesentérica linfonodos em macacos

Um protocolo para bloquear o fluxo linfático por sutura cirúrgica de vasos linfáticos diferentes é apresentado.

Bloqueando o fluxo linfático suturing afferent vasos linfáticos em camundongos

O presente protocolo descreve um protocolo cirúrgico detalhado para o isolamento de linfa intestinal corrente em resposta a infusões intraduodenais de nutrientes em camundongos. Isso permite a determinação fisiológica da absorção de lipídios intestinais totais e da síntese e secreção de quilomícrons em resposta a vários nutrientes experimentais.

O Isolamento da Linfa Mesentérica Corrente em Camundongos para Quantificar a Cinética In Vivo de Absorção de Lipídios da Dieta e Secreção de Quilomícrons

Este estudo tem como objetivo apresentar a viabilidade da macro e microdissecção dos linfáticos mesentéricos na raiz do mesentério com a morfometria associada dos depurantes linfáticos.

O papel da dissecção anatômica na definição de feixes linfovasculares de cólicas e artérias do intestino delgado no volume D3 do mesentério do intestino delgado e grosso

Esse protocolo descreve um procedimento de sobrevivência para linfadenectomia renal bilateral murina segura e bem tolerada.

Linfodenectomia Renal Bilateral Murina

A cirurgia laparoscópica é amplamente utilizada no tratamento do câncer de cólon do lado direito e oferece inúmeras vantagens. Este artigo descreve a abordagem cirúrgica caudal para craniano combinada com excisão mesocólica completa (CME) e dissecção do linfonodo D3, o que pode potencialmente reduzir a dificuldade técnica e parecer uma abordagem segura.

Abordagem caudal-craniana em hemicolectomia laparoscópica direita com excisão completa do mesocólon e dissecção do gânglio linfático D3

Aprenda a técnica de linfodenectomia mesentérica seletiva em camundongos para interromper a drenagem linfática de segmentos específicos do intestino. Este protocolo de cirurgia com sobrevivência permite estudar as contribuições distintas dos linfonodos locais versus sistêmicos na imunidade intestinal.

Linfodenectomia mesentérica murina para interrupção seletiva da comunicação linfática com intestino específico de região

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