Name: In vitro Infusão de gel intraluminal: uma abordagem avançada para análise microscópica de artérias de resistência humana (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 20 s
Description: Aprenda a infundir gel intraluminal para preservar artérias de resistência humana em análise microscópica. Este protocolo mantém a integridade estrutural e molecular para estudos cardiovasculares avançados.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+remodeling+in+hypertension%3A+Roles+of+apoptosis%2C+inflammation%2C+and+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Vascular remodeling in hypertension: Roles of apoptosis, inflammation, and fibrosis.</a> Hypertension. 38 (3 Pt 2), 581-587 (2001).</li>
<li>Mulvany, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+artery+remodelling+in+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Clin+Pharmacol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Small artery remodelling in hypertension.</a> Basic Clin Pharmacol Toxicol. 110 (1), 49-55 (2012).</li>
<li>Petrie, J. R., Guzik, T. J., Touyz, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes%2C+hypertension%2C+and+cardiovascular+disease%3A+Clinical+insights+and+vascular+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Can+J+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Diabetes, hypertension, and cardiovascular disease: Clinical insights and vascular mechanisms.</a> Can J Cardiol. 34 (5), 575-584 (2018).</li>
<li>Schiffrin, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+remodeling+in+hypertension%3A+Mechanisms+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Vascular remodeling in hypertension: Mechanisms and treatment.</a> Hypertension. 59 (2), 367-374 (2012).</li>
<li>Zieman, S. J., Melenovsky, V., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms%2C+pathophysiology%2C+and+therapy+of+arterial+stiffness%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Mechanisms, pathophysiology, and therapy of arterial stiffness.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 25 (5), 932-943 (2005).</li>
<li>Bell, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microstructure+and+mechanics+of+human+resistance+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Microstructure and mechanics of human resistance arteries.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 311 (6), H1560-H1568 (2016).</li>
<li>Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+mechanical+properties+of+resistance+arteries+in+hypertension%3A+Role+of+adhesion+molecules+and+extracellular+matrix+determinants%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Structure and mechanical properties of resistance arteries in hypertension: Role of adhesion molecules and extracellular matrix determinants.</a> Hypertension. 36 (3), 312-318 (2000).</li>
<li>Rajendran, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+vascular+endothelium+and+human+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biol+Sci%22%5BJournal%5D)">The vascular endothelium and human diseases.</a> Int J Biol Sci. 9 (10), 1057-1069 (2013).</li>
<li>Chistiakov, D. A., Orekhov, A. N., Bobryshev, Y. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+barrier+and+its+abnormalities+in+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Endothelial barrier and its abnormalities in cardiovascular disease.</a> Front Physiol. 6, 365(2015).</li>
<li>Gurina, T. S., Simms, L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGurina%2C+TS+%22Histology%2C+Staining%22">Histology, Staining</a>. , Statpearls Publishing. Treasure Island, FL. (2025).</li>
<li>Hillman, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limitations+of+clinical+and+biological+histology%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Hypotheses%22%5BJournal%5D)">Limitations of clinical and biological histology.</a> Med Hypotheses. 54 (4), 553-564 (2000).</li>
<li>Taylor, A. M., Bordoni, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTaylor%2C+AM+%22Histology%2C+Blood+Vascular+System%22">Histology, Blood Vascular System</a>. , Statpearls Publishing. Treasure Island, FL. (2025).</li>
<li>Nolte, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+correlation+of+2D+hard-tissue+histology+with+3D+microCT+scans+through+3C+printed+phantoms%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Spatial correlation of 2D hard-tissue histology with 3D microCT scans through 3C printed phantoms.</a> Sci Rep. 13 (1), 18479(2023).</li>
<li>Taqi, S. A., Sami, S. A., Sami, L. B., Zaki, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+artifacts+in+histopathology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Oral+Maxillofac+Pathol%22%5BJournal%5D)">A review of artifacts in histopathology.</a> J Oral Maxillofac Pathol. 22 (2), 279(2018).</li>
<li>Torii, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathologic+characterization+of+peripheral+arteries+in+subjects+with+abundant+risk+factors%3A+Correlating+imaging+with+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22JACC+Cardiovasc+Imaging%22%5BJournal%5D)">Histopathologic characterization of peripheral arteries in subjects with abundant risk factors: Correlating imaging with pathology.</a> JACC Cardiovasc Imaging. 12 (8 Pt 1), 1501-1513 (2019).</li>
<li>Brooks, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sickle+trait+and+alpha+thalassemia+increase+nos-dependent+vasodilation+of+human+arteries+through+disruption+of+endothelial+hemoglobin-enos+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Sickle trait and alpha thalassemia increase nos-dependent vasodilation of human arteries through disruption of endothelial hemoglobin-enos interactions.</a> Circulation. 151 (1), 8-30 (2025).</li>
<li>Chatzizisis, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+endothelial+shear+stress+in+the+natural+history+of+coronary+atherosclerosis+and+vascular+remodeling%3A+Molecular%2C+cellular%2C+and+vascular+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Role of endothelial shear stress in the natural history of coronary atherosclerosis and vascular remodeling: Molecular, cellular, and vascular behavior.</a> J Am Coll Cardiol. 49 (25), 2379-2393 (2007).</li>
<li>Li, S., Liu, S., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+of+3D+printing+in+vascularized+organ+construction%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Bioprint%22%5BJournal%5D)">Advances of 3D printing in vascularized organ construction.</a> Int J Bioprint. 8 (3), 588(2022).</li>
<li>Rengier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+printing+based+on+imaging+data%3A+Review+of+medical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Comput+Assist+Radiol+Surg%22%5BJournal%5D)">3D printing based on imaging data: Review of medical applications.</a> Int J Comput Assist Radiol Surg. 5 (4), 335-341 (2010).</li>
<li>Solanki, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+three+dimensional+coronary+artery+reconstruction+accuracy+when+computing+virtual+fractional+flow+reserve+from+invasive+angiography%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">The importance of three dimensional coronary artery reconstruction accuracy when computing virtual fractional flow reserve from invasive angiography.</a> Sci Rep. 11 (1), 19694(2021).</li>
<li>Tucker, W. D., Arora, Y., Mahajan, K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTucker%2C+WD+%22Anatomy%2C+Blood+Vessels%22">Anatomy, Blood Vessels</a>. , Statpearls Publishing. Treasure Island, FL. (2025).</li>
<li>Choi, J., Lee, E. J., Jang, W. B., Kwon, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+biocompatible+3D-printed+artificial+blood+vessels+through+multidimensional+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22J+Funct+Biomater%22%5BJournal%5D)">Development of biocompatible 3D-printed artificial blood vessels through multidimensional approaches.</a> J Funct Biomater. 14 (10), 497(2023).</li>
<li>De Graaf, M. N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplexed+fluidic+circuit+board+for+controlled+perfusion+of+3D+blood+vessels-on-a-chip%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Multiplexed fluidic circuit board for controlled perfusion of 3D blood vessels-on-a-chip.</a> Lab Chip. 23 (1), 168-181 (2022).</li>
<li>Lapierre-Landry, M., Liu, Y., Bayat, M., Wilson, D. L., Jenkins, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digital+labeling+for+3D+histology%3A+Segmenting+blood+vessels+without+a+vascular+contrast+agent+using+deep+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Opt+Express%22%5BJournal%5D)">Digital labeling for 3D histology: Segmenting blood vessels without a vascular contrast agent using deep learning.</a> Biomed Opt Express. 14 (6), 2416-2431 (2023).</li>
<li>Abdul Sisak, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+near-infrared+organic+fluorescent+probe+for+broad+applications+for+blood+vessel+imaging+by+high-throughput+screening+via+3D-blood+vessel+models%5BTitle%5D)+AND+%22Small+Methods%22%5BJournal%5D)">A near-infrared organic fluorescent probe for broad applications for blood vessel imaging by high-throughput screening via 3D-blood vessel models.</a> Small Methods. 5 (8), e2100338(2021).</li>
<li>Yu, T., Yang, Q., Peng, B., Gu, Z., Zhu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+organoid-on-a-chip%3A+Design%2C+imaging%2C+and+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Vascularized organoid-on-a-chip: Design, imaging, and analysis.</a> Angiogenesis. 27 (2), 147-172 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Álcool Ácido Focado 1%</td><td>StatLab</td><td>&nbsp; SL89-1</td><td></td></tr><tr><td>10% NBS</td><td>Leica Biosystems</td><td>3800598</td><td></td></tr><tr><td>Câmera HDMI em Microscopia 4K</td><td>Hitech Instruments, Inc.</td><td>HT-XP4K8MA</td><td></td></tr><tr><td>Diluente de Anticorpos - Redução de Fundo</td><td>Dako</td><td>S3022</td><td></td></tr><tr><td>Processador Automatizado de Tecidos & nbsp;</td><td>Leica Biosystems</td><td>HistoCore PEGASUS/Cat# 14048858005</td><td></td></tr><tr><td>Solução de Dewax de Bond</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9222</td><td></td></tr><tr><td>Solução de Recuperação de Epítopos de Ligação 1</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9961</td><td></td></tr><tr><td>Solução de Recuperação de Epítopos de Ligação 2</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9640</td><td></td></tr><tr><td>Detecção de Refinamento de Polímeros de Ligação</td><td>Leica Biosystems</td><td>DS9800</td><td></td></tr><tr><td>Detecção de Vermelho Refinado de Polímero de Ligação</td><td>Leica Biosystems</td><td>DS9390</td><td></td></tr><tr><td>Solução de Lavagem de Ligação (10x)</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9590</td><td></td></tr><tr><td>Pacote de cânulas (vidro), 80 e traço; 100 & mu; m</td><td>DMT</td><td>Código do Produto: 300407</td><td></td></tr><tr><td>CD31</td><td>Abcam</td><td>ab28364</td><td></td></tr><tr><td>Pratos de dissecação, grandes (vidro pyrex), 93 mm</td><td>Instrumentação de Sistemas Vivos</td><td>SKU: DD-90</td><td></td></tr><tr><td>Pratos de Dissecação, Pequenos</td><td>Instrumentação de Sistemas Vivos</td><td>SKU: DD-50</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio de Dissecação</td><td>Hitech Instruments, Inc.</td><td>ZEISS SteREO Discovery.V8&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Pinça Dumont #5</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>Item nº 11295-10</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5SF Pinças</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>Item nº 11252-00</td><td></td></tr><tr><td>EcoMount</td><td>BioCare Medical</td><td>EM897L</td><td></td></tr><tr><td>Eosina</td><td>IHC World</td><td>IW-3100B</td><td></td></tr><tr><td>Hematoxilina</td><td>BioCare Medical</td><td>Cathe-MM</td><td></td></tr><tr><td>Câmera de Iamging</td><td>Olyumpus</td><td>DP28</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio de Imagem</td><td>Olyumpus</td><td>BX51</td><td></td></tr><tr><td>Buffer Krebs Henseleit (com 2 mM de Cloreto de Cálcio)</td><td>Boston BioProducts, Inc.</td><td>SKU: C-10625N-200mL</td><td></td></tr><tr><td>Buffer de Krebs-Henseleit (sem cálcio)</td><td>Boston BioProducts, Inc.</td><td>SKU: C-9906W-200mL</td><td></td></tr><tr><td>Mídia de Montagem</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>4111</td><td></td></tr><tr><td>Câmara e Unidade de Miógrafo</td><td>DMT</td><td>202/204CM</td><td></td></tr><tr><td>PBS (soro salino tamponado com fosfato)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>PPIB</td><td>&nbsp; ACDBio</td><td>313908</td><td></td></tr><tr><td>Kit de Reagente RNAscope 2.5 LS-RED</td><td>ACDBio</td><td>322150</td><td></td></tr><tr><td>Stainer</td><td>Leica</td><td>Sistema automatizado Leica Bond RX</td><td></td></tr><tr><td>Pinos de dissecação em aço inoxidável</td><td>Instrumentação de Sistemas Vivos</td><td>SKU: PIN-0,1MM | PIN-0,2MM | PIN-#3 | PIN-VP-1</td><td></td></tr><tr><td>Paraplastos Surgipath</td><td>Leica Biosystems</td><td>39601006</td><td></td></tr><tr><td>Gel de proteção de tecido</td><td>StatLab</td><td>&nbsp; TissueGuard/SKU: TG12</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura de mola Vannas - Corte de 2 mm</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>Item nº 15000-03</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura de mola Vannas - Corte de 2,5 mm</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>Item nº 15000-08</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura de mola Vannas - Borda de corte 3 mm</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>Item nº 15000-00</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-SMA</td><td>Abcam</td><td>ab5694</td><td></td></tr></tbody></table>

in vitro infusão de gel intraluminal: uma abordagem avançada para análise microscópica de artérias de resistência humana

In Vitro Intraluminal Gel Infusion: An Advanced Approach for Microscopic Analysis of Human Resistance Arteries

Tecidos omentais humanos foram obtidos de pacientes submetidos a cirurgias abdominais clinicamente indicadas. Pequenas artérias de resistência (100-300 μm de diâmetro) foram meticulosamente isoladas dos tecidos adiposo e conjuntivo circundantes sob um microscópio de dissecção (Figura 1A-C). As artérias isoladas foram limpas, canuladas com sucesso e montadas nas cânulas de vidro na câmara do miógrafo de cultura para pressurização (Figura ...

In vitro Infusão de gel intraluminal: uma abordagem avançada para análise microscópica de artérias de resistência humana

Resistance arteries, which include small arteries and arterioles, play essential roles in regulating blood pressure and tissue perfusion. Dysfunction in ...

in-vitro-intraluminal-gel-infusion-an-advanced-approach-for

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

O Ex vivo Preparação microvasos isolada esquelético de Investigação da reatividade vascular

Nós apresentamos uma preparação para a visualização e manipulação de sinalização do cálcio em nativa, endotélio microvascular intacta. Tubos endoteliais recém isolado das artérias de resistência do mouse fornecendo músculo esquelético manter vivo na morfologia e sinalização dinâmica dentro e entre as células vizinhas. Tubos endoteliais pode ser preparado a partir de microvasos de outros tecidos e órgãos.

Isolamento de tubos endoteliais microvasculares de Artérias Rato Resistência

A vasoconstrição pulmonar hipóxica (HPV) é um importante fenômeno fisiológico pelo qual a perfusão pulmonar de hipóxia alveolar é compatível com a ventilação. O principal segmento vascular que contribui para o HPV é a artéria intra-acinar. Aqui, descrevemos nosso protocolo para a análise do HPV de vasos pulmonares murinas com diâmetros de 20-100 μm.

Análise videomorfométrica da vasoconstrição pulmonar hipoxica de artérias intra-pulmonares usando fatias pulmonares cortadas por precisão de murina

Nós apresentamos um protocolo para estudar as interações endotelial-pericyte humanos no rato usando uma variação do ensaio plugue angiogênese gel matriz.

No estudo in vivo da Human Interaction Endotelial-pericyte usando o plug Ensaio Matrix Gel no mouse

Protocolos para o estudo da aorta murino embrionária e perinatal usando na vivo clonal análise e mapeamento de destino, explantes aórtica e isolado músculo liso, células são detalhadas aqui. Essas diversas abordagens facilitam a investigação sobre a morfogênese da aorta no normal desenvolvimento embrionária e perinatal e a patogênese na doença.

Usando In Vivo e tecido e célula explante abordagens para estudar a morfogênese e a patogênese da Aorta embrionária e Perinatal

Este manuscrito descreve em vitro protocolos de vídeo microscopia para avaliar a função vascular nas artérias de resistência cerebral de rato. O manuscrito também descreve técnicas para avaliar a densidade de microvessel com perfusão de lectina e tecido fluorescente etiquetada usando Laser Doppler Flowmetry.

Avaliação dos mecanismos de controlo Vascular utilizando a microscopia das artérias de resistência isolada de ratos

Os monócitos são importantes mediadores de arteriogenesis no contexto da doença arterial periférica. Usando uma membrana basal, como matriz e microscopia intravital, este protocolo investiga monócito homing e relacionados ao tumor angiogênese após injeção de monócitos no modelo murino de ligadura de artéria femoral.

Microscopia intravital de monócitos Homing e angiogênese relacionados ao Tumor em um modelo murino de Doença Arterial periférica

Descrevemos teste mecânico simultânea e imagens 3D de parede arterial isolada, viver artérias de resistência humana e análises de imagem de Fiji e Ilastik para a quantificação de elastina e colágeno espacial organização e volume densidades. Discutimos a utilização desses dados em modelos matemáticos da mecânica da parede arterial.

Avaliação de colágeno e elastina Microarchitectures dependente de pressão nas artérias de resistência humana, ao vivo por microscopia de fluorescência etiqueta livre

Apresentado aqui é um protocolo para estudar a microcirculação coronária no tecido cardíaco murino vivo por ex vivo monitoramento da pressão e fluxo de perfusão arterial que mantém a pressão, bem como componentes de árvores vasculares, incluindo os leitos capilares e pericitos, já que a artéria septal é canulada e pressurizada.

Medição dinâmica e imagem de capilares, arterioles e pericias em coração de rato

A preparação intensiva de "tubos" endoteliais cerebrais intactos de arteriolas parenchímicas cerebrais é ilustrada para o estudo da regulação do fluxo sanguíneo cerebral. Além disso, demonstramos os pontos fortes experimentais deste modelo de estudo endotelial para a medição de imagens de fluorescência e eletrofisiologia das principais vias de sinalização celular, incluindo alterações no potencial intracelular [Ca2+] e membrana.

Isolamento e Análise Funcional do Endotélio Arteriolar do Cérebro do Rato Parenchyma

As imagens de ultrassom intravascular in vivo mostram o movimento transversal coronário correspondente a diferentes condições de carga de pressão. Com base em um modelo de elementos finitos, um esquema iterativo foi empregado para determinar as propriedades mecânicas específicas do paciente das artérias coronárias in vivo, combinando o movimento coronário do modelo computacional e das imagens médicas.

Abordagem de modelagem de elementos finitos baseada em imagem de ultrassom intravascular para quantificar propriedades mecânicas in vivo da artéria coronária humana 

Aprenda a infundir gel intraluminal para preservar artérias de resistência humana em análise microscópica. Este protocolo mantém a integridade estrutural e molecular para estudos cardiovasculares avançados.

In vitro Infusão de gel intraluminal: uma abordagem avançada para análise microscópica de artérias de resistência humana

Explorar mais vídeos