Name: Revelando o controle eletromecânico da homeostase tecidual usando um dispositivo microfluídico de duas camadas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-19T13:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 8 s
Description: Aprenda a investigar a regulação eletromecânica da homeostase tecidual epitelial usando um dispositivo microfluídico de duas camadas com campos elétricos controlados e imagem de células vivas.

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<table><tbody><tr><td>1x DPBS</td><td>Gibco</td><td>14190144</td><td></td></tr><tr><td>Metacrilato de 3-(trimetoxissilil)propila, TPM</td><td>Sigma</td><td>2530850</td><td>Armazenar sob nitrogênio após a abertura.</td></tr><tr><td>Tubo Falcon de 50 mL</td><td>Corning</td><td>430829</td><td>Faça 4 furos na tampa do tubo falcon de 50 mL, para permitir que o eletrodo e a tubulação passem pela tampa e fiquem imersos no meio. Para um conjunto de dispositivos microfluídicos, são necessárias pelo menos 2 tampas.</td></tr><tr><td>Ácido acético</td><td>Sinopharm</td><td>10000208</td><td></td></tr><tr><td>Solução de acrilamida, 40%</td><td>Sigma</td><td>79061</td><td>Tóxico</td></tr><tr><td>Máquina Pneumática</td><td>Laboratório OKO</td><td>OKO-AP</td><td>Componente da incubadora de microscópio</td></tr><tr><td>Persulfato de amônio, APS</td><td>Aladdin</td><td>A112447</td><td></td></tr><tr><td>Cartucho</td><td>-</td><td>-</td><td>O cartucho é feito sob medida e o design refere-se ao material suplementar. A matéria-prima é PC Makrolon 2858 Medical Grade, e aqui você pode encontrar mais detalhes: https://solutions.covestro.com/zh/products/makrolon/2858_000000000000508397?SelectedCountry=US</td></tr><tr><td>Clipes</td><td>-</td><td>-</td><td>Robert Clip, para tubulação&nbsp; de 4,5 mm de diâmetro externo.<a href="https://item.taobao.com/item.htm?id=18717491819&amp; pisk=gAsj0ailDjcjqv-tCE2rVYReT5-1h8rFWA9OKOnqBnKv6A1RBjpxDchRepvBWczD0Ft1wQS2gt-v6c1NQi5NBGJOfnjPucR4ih6OThNUTkrFntYBXWPETzI4tHpikchwH3nJbds8Mz2dntxMXYlT8aBmCOO1qfp968tJCdc9XKnte89wBdK9MFh-ypdJXhdvkYpJBpn9HCnYF3pDKKhv6qK-edJXXCC9X86JZdt96bH_3dwJgtw2FbzzkyxCHQitXiEMlB_i7ci1TKLfXtd5zaSWhEOpWac1uiCPBiSDrzgJjT7C1NCLaqRARp1W8ZNIc61DB6tV4jeJXFQP8E_7McOP0dTpXUMtXTtPPFsWvkhWEaBVWifjCcpc0M86tUwtjF-RYeQdGA2henpOsejatmAAB9jh8HZjtK_ Rd3syxDRBL50sFem6FBy7FV0GhSGPYc782SYvEK__F8GxLEpkFBy7FV0MkLvf18wSMv5.. & spm=a21xtw.29978518.0.0& skuId=3344063585144"> https://item.taobao.com/item.htm?id=18717491819&pisk=gAsj0ailDjcjqv-tCE2rVYReT5-1h8rFWA9OKOnqBnKv6A1RBjpxDchRepvBWczD0Ft1wQS2gt-v6c1NQi5NBGJOfnjPucR4ih6OThNUTkrFntYBXWPETzI4tHpikchwH3nJbds8Mz2dntxMXYlT8aBmCOO1qfp968tJCdc9XKnte89wBdK9MFh-ypdJXhdvkYpJBpn9HCnYF3pDKKhv6qK-edJXXCC9X86JZdt96bH_3dwJgtw2FbzzkyxCHQitXiEMlB_i7ci1TKLfXtd5zaSWhEOpWac1uiCPBiSDrzgJjT7C1NCLaqRARp1W8ZNIc61DB6tV4jeJXFQP8E_7McOP0dTpXUMtXTtPPFsWvkhWEaBVWifjCcpc0M86tUwtjF-RYeQdGA2henpOsejatmAAB9jh8HZjtK_Rd3syxDRBL50sFem6FBy7FV0GhSGPYc782SYvEK__F8GxLEpkFBy7FV0MkLvf18wSMv5..&spm=a21xtw.29978518.0.0&skuId=3344063585144</a></td></tr><tr><td>Colágeno I</td><td>Corning</td><td>354236</td><td></td></tr><tr><td>Água DI Milli-Q</td><td>Milli-Q</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Meio de cultura de Eagle modificado de Dulbecco, DMEM (glicose alta)</td><td>Gibco</td><td>11965092</td><td>DMEM++ é DMEM com 10% adicionais&nbsp; FBS (Sigma-Aldrich) e 100&thinsp; unidades/mL de penicilina-estreptomicina (Gibco).</td></tr><tr><td>Gaiola preta do cerco</td><td>Laboratório OKO</td><td>H201</td><td>Componente da incubadora de microscópio</td></tr><tr><td>Microscópio invertido de epifluorescência</td><td>Olimpo</td><td>IX83</td><td></td></tr><tr><td>Etanol absoluto</td><td>Sinopharm</td><td>10009218</td><td></td></tr><tr><td>Soro fetal bovino</td><td>Sigma</td><td>Rolamento F8318</td><td></td></tr><tr><td>Contas fluorescentes, 0,1 &mu; L, vermelho (580/605)</td><td>Thermo</td><td>Rolamento F8801</td><td></td></tr><tr><td>Câmara de gás</td><td>Laboratório OKO</td><td>H201-PRIOR-SP200/400/600</td><td>Componente da incubadora de microscópio</td></tr><tr><td>Misturador manual de gás</td><td>Laboratório OKO</td><td>MISTURADOR 2GF</td><td>Componente da incubadora de microscópio</td></tr><tr><td>Geneticina</td><td>Gibco</td><td>10131027</td><td>GFP&ndash; actina e H1&ndash; GFP MDCK foram mantidos usando meios suplementados com 0,5&thinsp; mg/mL de genetrina (Gibco) para sustentar sua expressão gênica</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma</td><td>736459</td><td></td></tr><tr><td>Isopropanol</td><td>Sinopharm</td><td>80109218</td><td></td></tr><tr><td>Kimwipes</td><td>Profissional da Kimberly-Clark</td><td>LH-70155</td><td>Limpador de laboratório</td></tr><tr><td>Parafuso mais longo</td><td>-</td><td>-</td><td>Parafuso de máquina de precisão cruzada de cabeça redonda niquelado, M3 x 10 mm. <a href="https://item.taobao.com/item.htm?id=604899872494&amp; pisk=gbX7s64OI40STNJKAQqqhx58y8d9NoyapDtdjMHrvLpJOvIP5HkeT7xIdEsTqUP3Zw1fJZAyyeRedH_wogkUqgrQdMI9yp5yzHQVRZcPz98FuJsG5QkPv9oliNStUTPkLv9kKpUa7RyZqgvHpfPM7c0okhx_LYdKpLvx7Uiz6RyNqiiy2lSYQ9Sp5stS9vQpwIpvqEhKe3QpMKKBkYKKeH3YcEYv24HKwxnvvh0K9wKdDnKkV03KeBKYHhYvJppdJiEXYELK1OzXm7TRVu-iUlqUdgsJlvHdeJAv5LhELvJw2Q6d2EsV0ttWNFRjAbyCeZSdUTA09X9h01_C9NUqaUC6fZONNPM55axdAHQ7IcTAFM6XZsoZBisfv1Rf3leMFLLRTLjEfzSfFaSlhMoKML9PGC6WBR0J8sS1dH63--_ 1vGfpG9g54UMw5pb-OMiidnTacoGntEWrjhPgtYw2wnxVQoZjPXAJmn1UcoGntQKDm2rbc4Gh.& spm=tbpc.boughtlist.suborder_itemtitle.1.494a2e8d0lg31n"> https://item.taobao.com/item.htm?id=604899872494&pisk=gbX7s64OI40STNJKAQqqhx58y8d9NoyapDtdjMHrvLpJOvIP5HkeT7xIdEsTqUP3Zw1fJZAyyeRedH_wogkUqgrQdMI9yp5yzHQVRZcPz98FuJsG5QkPv9oliNStUTPkLv9kKpUa7RyZqgvHpfPM7c0okhx_LYdKpLvx7Uiz6RyNqiiy2lSYQ9Sp5stS9vQpwIpvqEhKe3QpMKKBkYKKeH3YcEYv24HKwxnvvh0K9wKdDnKkV03KeBKYHhYvJppdJiEXYELK1OzXm7TRVu-iUlqUdgsJlvHdeJAv5LhELvJw2Q6d2EsV0ttWNFRjAbyCeZSdUTA09X9h01_C9NUqaUC6fZONNPM55axdAHQ7IcTAFM6XZsoZBisfv1Rf3leMFLLRTLjEfzSfFaSlhMoKML9PGC6WBR0J8sS1dH63--_1vGfpG9g54UMw5pb-OMiidnTacoGntEWrjhPgtYw2wnxVQoZjPXAJmn1UcoGntQKDm2rbc4Gh.&spm=tbpc.boughtlist.suborder_itemtitle.1.494a2e8d0lg31n</a></td></tr><tr><td>Conector microfluídico</td><td>-</td><td>-</td><td>Conexão de união reta de polipropileno, 1/16"-10-32UNF. <a href="https://item.taobao.com/item.htm?abbucket=16&amp; detail_redpacket_pop=verdadeiro& id=555839592609& ltk2=1752310108435i7ldxj7ekdgu9qhnphlmj& ns=1& preçoTId=2150470617523101021033708e1a4b& query=10-32unf%E8%9E%BA%E7%BA%B9%E7%9B%B4%E9%80%9A%E6%8E%A5%E5%A4%B4%20%E5%A1%91%E6%96%99%E5%A4%96%E8%9E%BA%E7%BA%B9%E6%8E%A5%E5%A4%B4& skuId=3600497427939& spm=a21n57.1.hoverItem.1& utparam=%7B%22aplus_abtest%22%3A%2245243a364caf5527e8392ded0656451a%22%7D& xxc=taobaoSearch"> https://item.taobao.com/item.htm?abbucket=16&detail_redpacket_pop=true&id=555839592609&ltk2=1752310108435i7ldxj7ekdgu9qhnphlmj&ns=1&priceTId=2150470617523101021033708e1a4b&query=10-32unf%E8%9E%BA%E7%BA%B9%E7%9B%B4%E9%80%9A%E6%8E%A5%E5%A4%B4%20%E5%A1%91%E6%96%99%E5%A4%96%E8%9E%BA%E7%BA%B9%E6%8E%A5%E5%A4%B4&skuId=3600497427939&spm=a21n57.1.hoverItem.1&utparam=%7B%22aplus_abtest%22%3A%2245243a364caf5527e8392ded0656451a%22%7D&xxc=taobaoSearch</a></td></tr><tr><td>Suporte de placas multipoços</td><td>Laboratório OKO</td><td>H201-MW-SUPORTE-NZ500</td><td>Componente da incubadora de microscópio</td></tr><tr><td>N',N'-metilenobisacrilamida, 2%</td><td>Sigma</td><td>110269</td><td>Tóxico</td></tr><tr><td>NOA 73</td><td>Produtos Norland</td><td>17-345</td><td>Adesivo curável por UV</td></tr><tr><td>Penicilina-estreptomicina, PS (10.000 U/mL)</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Placa de Petri (150 mm e aguda; 25 mm)</td><td>Corning</td><td>430599</td><td>Resista a pelo menos 80 > C por 2 h</td></tr><tr><td>Ferramenta Pico Plasma</td><td>Diener Electronic GmbH + Co. KG</td><td>Pico Plasma</td><td>Para tratamento com plasma O2</td></tr><tr><td>Limpador de plasma</td><td>Harrick Plasma</td><td>PDC-002</td><td>Para tratamento de plasma a ar</td></tr><tr><td>Prato de plástico (diâmetro 60 mm, altura 15 mm)</td><td>Ninho</td><td>705001</td><td></td></tr><tr><td>Eletrodos de platina</td><td>Tianjin Aida Hengsheng</td><td>Pt005</td><td>Diâmetro 0,5 mm, comprimento 37 mm&nbsp;</td></tr><tr><td>Rain-X Vidro Original Repelente de Água</td><td>Produtos Químicos ITW</td><td>800002242</td><td></td></tr><tr><td>Lamínula retangular</td><td>Marienfeld</td><td>0107222</td><td>&nbsp; 1,5H, 24 e agudo; 50 mm2, 170 &mu; m de espessura</td></tr><tr><td>lamínula de vidro redonda</td><td>Marienfeld</td><td>0111500</td><td>&nbsp; 1,5H, redondo 10 mm de diâmetro</td></tr><tr><td>Parafuso mais curto</td><td>-</td><td>-</td><td>Parafuso de máquina de precisão cruzado de cabeça redonda niquelado, M3 x 4 mm. <a href="https://item.taobao.com/item.htm?id=604899872494&amp; pisk=gbX7s64OI40STNJKAQqqhx58y8d9NoyapDtdjMHrvLpJOvIP5HkeT7xIdEsTqUP3Zw1fJZAyyeRedH_wogkUqgrQdMI9yp5yzHQVRZcPz98FuJsG5QkPv9oliNStUTPkLv9kKpUa7RyZqgvHpfPM7c0okhx_LYdKpLvx7Uiz6RyNqiiy2lSYQ9Sp5stS9vQpwIpvqEhKe3QpMKKBkYKKeH3YcEYv24HKwxnvvh0K9wKdDnKkV03KeBKYHhYvJppdJiEXYELK1OzXm7TRVu-iUlqUdgsJlvHdeJAv5LhELvJw2Q6d2EsV0ttWNFRjAbyCeZSdUTA09X9h01_C9NUqaUC6fZONNPM55axdAHQ7IcTAFM6XZsoZBisfv1Rf3leMFLLRTLjEfzSfFaSlhMoKML9PGC6WBR0J8sS1dH63--_ 1vGfpG9g54UMw5pb-OMiidnTacoGntEWrjhPgtYw2wnxVQoZjPXAJmn1UcoGntQKDm2rbc4Gh.& spm=tbpc.boughtlist.suborder_itemtitle.1.494a2e8d0lg31n"> https://item.taobao.com/item.htm?id=604899872494&pisk=gbX7s64OI40STNJKAQqqhx58y8d9NoyapDtdjMHrvLpJOvIP5HkeT7xIdEsTqUP3Zw1fJZAyyeRedH_wogkUqgrQdMI9yp5yzHQVRZcPz98FuJsG5QkPv9oliNStUTPkLv9kKpUa7RyZqgvHpfPM7c0okhx_LYdKpLvx7Uiz6RyNqiiy2lSYQ9Sp5stS9vQpwIpvqEhKe3QpMKKBkYKKeH3YcEYv24HKwxnvvh0K9wKdDnKkV03KeBKYHhYvJppdJiEXYELK1OzXm7TRVu-iUlqUdgsJlvHdeJAv5LhELvJw2Q6d2EsV0ttWNFRjAbyCeZSdUTA09X9h01_C9NUqaUC6fZONNPM55axdAHQ7IcTAFM6XZsoZBisfv1Rf3leMFLLRTLjEfzSfFaSlhMoKML9PGC6WBR0J8sS1dH63--_1vGfpG9g54UMw5pb-OMiidnTacoGntEWrjhPgtYw2wnxVQoZjPXAJmn1UcoGntQKDm2rbc4Gh.&spm=tbpc.boughtlist.suborder_itemtitle.1.494a2e8d0lg31n</a></td></tr><tr><td>Sulfo-SANPAH, sem peso</td><td>Thermo</td><td>Rolamento A35395</td><td>Solução estoque SS: 20 mg/mL em DMSO anidro, 2 &mu; L para cada um; Solução de trabalho SS: 0,5 mg/mL SS em HEPES (0,1 M, pH 7,4).</td></tr><tr><td>SYLGARD 184 Kit de elastômero de silicone</td><td>Dow Corning</td><td>H052KCM147</td><td>O produto final é o polidimetilsiloxano, PDMS. Este Kit inclui resina base PDMS e agente de reticulação.&nbsp;</td></tr><tr><td>Unidade de temperatura</td><td>Laboratório OKO</td><td>H201-T-UNIDADE-BL</td><td>Componente da incubadora de microscópio</td></tr><tr><td>Tetrametiletilenodiamina, TEMED</td><td>Sigma</td><td>110189</td><td>Tóxico</td></tr><tr><td>Tela sensível ao toque</td><td>Laboratório OKO</td><td>OKO-TOQUE</td><td>Componente da incubadora de microscópio</td></tr><tr><td>Tridecafluoro-1,1,2,2-tetrahidrooctil-1-triclorossilano</td><td>Sigma</td><td>78560459</td><td></td></tr><tr><td>Tripsina-EDTA (0,25%)</td><td>gibco</td><td>25200072</td><td></td></tr><tr><td>Tubos Tygon</td><td>Tygon</td><td>AJK00002</td><td>Diâmetro externo (OD) = 3,2 mm, Diâmetro interno (ID) = 1,6 mm</td></tr><tr><td>Limpador ultrassônico</td><td>Sufício</td><td>KD-300DE</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de cura UV LED</td><td>GHUV</td><td>GHS-MFLG</td><td>Fonte de luz UV-LED, faixa de emissão: 363-ndash; 370 nm, densidade de potência máxima: 230 mW/cm2</td></tr><tr><td>Módulo de umidificação sem vibração</td><td>Laboratório OKO</td><td>HM-VF</td><td>Componente da incubadora de microscópio</td></tr><tr><td>Visualização</td><td>Visitron Systems GmbH</td><td>-</td><td>Hardware mais suave de imagem</td></tr><tr><td>Camada de wafer1</td><td>Universidade Nacional de Cingapura, instalação de microfabricação do instituto de Mecanobiologia</td><td>-</td><td>O wafer é feito sob medida e o design refere-se a material suplementar.</td></tr><tr><td>Wafer-layer2</td><td>Universidade Nacional de Cingapura, instalação de microfabricação do instituto de Mecanobiologia</td><td>-</td><td>O wafer é feito sob medida e o design refere-se a material suplementar.</td></tr></tbody></table>

revelando o controle eletromecânico da homeostase tecidual usando um dispositivo microfluídico de duas camadas

Revealing Electromechanical Control of Tissue Homeostasis Using a Two-Layer Microfluidic Device

Todos os resultados aqui apresentados são adaptados da publicação anterior4; Para mais detalhes, consulte esta publicação.
Este protocolo permite a aplicação de uma corrente iônica externa ou campo elétrico perpendicular ao plano das células ou tecidos. Essa estimulação elétrica perturba a diferença de potencial elétrico transepitelial endógeno (TEPD) e permite estudar o papel do TEPD no comportamento do tecido. Seguindo o protocolo, células MDCK do tipo selvagem e gene...

Revelando o controle eletromecânico da homeostase tecidual usando um dispositivo microfluídico de duas camadas

Cell behavior and cell fate are impacted by electric currents or fields that are endogenous or externally applied. Static electric signals can be applied ...

revealing-electromechanical-control-tissue-homeostasis-using-two

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioengenharia

Demonstramos protocolos para a fabricação e automação elastomérico polidimetilsiloxano (PDMS) com base em matrizes de microválvula que não precisam de energia extra para fechar e apresentam photolithographically definido volumes precisos. Um misturador subnanoliter volume paralelo e um sistema de perfusão integrado microfluídicos são apresentados.

Chips microfluídicos controlados com Arrays microválvula elastoméricos

Nós demonstramos a fabricação de um dispositivo simples microfluídicos que podem ser integrados com configurações padrão eletrofisiologia para expor superfícies microescala de uma fatia do cérebro de uma maneira bem controlada para diferentes neurotransmissores.

Estimulação cerebral Slice Usando uma Rede microfluídicos e da Câmara de Perfusão padrão

Fonte: Kurz, D. L., et al. Plataforma microfluídica para estudar bioentupimento em meios porosos. J. Vis. Exp. (2022)O vídeo demonstra o uso de um dispositivo microfluídico para estudar a formação de biofilmes. Uma suspensão bacteriana é introduzida no microcanal, seguida de incubação para permitir o desenvolvimento do biofilme. O fluxo é então retomado, e o monitoramento de pressão junto com imagens é usado para detectar formação de biofilme e obstrução dos poros ao longo do tempo.

Um dispositivo microfluídico para imagem em tempo real e acompanhamento de pressão durante a formação do biofilme

Aqui, apresentamos um protocolo para cocultura de células primárias, modelos de tecidos e biópsias por punção em um chip microfluídico de múltiplos órgãos por até 28 dias. Células endoteliais microvasculares dérmicas humanas, agregados hepáticos e biópsias de pele foram combinados com sucesso em uma circulação de mídia comum.

O Chip Multi-organ - Uma plataforma microfluídica para longo prazo Coculture Multi-tecidos

Dispositivos microfabricados integrados com componentes fluídicos fornecem uma plataforma in vitro para estudos celulares que imitam o microambiente in vivo. Desenvolvemos chips microfluídicos à base de polimetilmetacrilato para estudar as respostas celulares sob estímulos de estresse químico/elétrico/de cisalhamento únicos ou coexistentes.

Projetando microfluídicos para Estudar respostas celulares Sob único ou coexistindo Chemical / Elétrica / tensão de cisalhamento Estímulos

Descreve-se o processo de fabricação de um dispositivo microfluídico baseado em PDMS, multicamada, que permite a realização de reações in vitro de transcrição e tradução (IVTT) durante períodos prolongados. Além disso, uma visão geral abrangente do hardware e software necessários para automatizar e manter essas reações para durações prolongadas é fornecida.

Uma plataforma Microfluídico multicamada para a condução de expressão gênica sem células prolongada

O objetivo deste protocolo é explicar e demonstrar o desenvolvimento de um modelo microfluido tridimensional (3D) de tecido cardíaco humano altamente alinhado, composto por cardiomiócitos derivados de células-tronco co-cultivados com fibroblastos cardíacos (CFs) dentro de um hidrogel biomimético, à base de colágeno, para aplicações em engenharia de tecido cardíaco, triagem de medicamentos e modelagem de doenças.

Desenvolvimento de tecido cardíaco humano organizado 3D dentro de uma plataforma microfluida

A análise em tempo real de tecidos vivos fornece dados funcionais e mecanísticos importantes. Este artigo descreve os protocolos e variáveis críticas para garantir a geração precisa e reprodutível de dados por um novo sistema fluídico multicanal livre de bombas que mantém e avalia uma ampla gama de modelos de tecidos e células.

Manutenção e avaliação de vários tipos de tecidos e células do olho usando um novo sistema fluídico sem bomba

Este protocolo descreve uma plataforma de cultura celular baseada em membrana reconfigurável que integra o formato de poço aberto com recursos de fluxo de fluido. Esta plataforma é compatível com protocolos padrão e permite transições reversíveis entre os modos de cultura de poço aberto e microfluídica, acomodando as necessidades dos laboratórios de engenharia e biociências.

Transformando Modelos de Tecidos de Barreira Estática em Sistemas Microfisiológicos Dinâmicos

A fabricação de um dispositivo de bicamada à base de polidimetilsiloxano (PDMS) para a produção de bibliotecas combinatórias em emulsões de água em óleo (plugs) é apresentada aqui. O hardware e o software necessários para automatizar a produção de plugues são detalhados no protocolo, e a produção de uma biblioteca quantitativa de plugues fluorescentes também é demonstrada.

Dispositivo microfluídico bicamada para produção de plugue combinatório

Aqui, apresentamos um protocolo para fabricar e operar um sistema microfluídico que expõe células endoteliais à hiperglicemia oscilatória sincronizada e ao estresse de cisalhamento pulsátil. Essa abordagem fornece um modelo in vitro fisiologicamente relevante para estudar a disfunção endotelial diabética. Esse protocolo permite a medição quantitativa do estresse oxidativo e das respostas das células endoteliais.

Um Sistema Microfluídico para Modelagem de Disfunção Endotelial sob Estresse Fisiológico Combinado de Cisalhamento Pulsátil e Hiperglicemia Oscilatória

Aprenda a investigar a regulação eletromecânica da homeostase tecidual epitelial usando um dispositivo microfluídico de duas camadas com campos elétricos controlados e imagem de células vivas.

Revelando o controle eletromecânico da homeostase tecidual usando um dispositivo microfluídico de duas camadas

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