Name: Estabelecimento e manutenção de organoides de câncer de próstata derivados de pacientes: um protocolo experimental detalhado (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 4 s
Description: Aprenda a estabelecer organoides de câncer de próstata derivados de pacientes para estudos de tratamento personalizado. Este protocolo padronizado preserva características tumorais e aprimora o rastreamento de fármacos.

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<ol><li>James, N. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+lancet+commission+on+prostate+cancer%3A+planning+for+the+surge+in+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">The lancet commission on prostate cancer: planning for the surge in cases.</a> Lancet. 403 (10437), 1683-1722 (2024).</li>
<li>Knutson, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AR+alterations+inform+circulating+tumor+DNA+detection+in+metastatic+castration+resistant+prostate+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">AR alterations inform circulating tumor DNA detection in metastatic castration resistant prostate cancer patients.</a> Nat Commun. 15 (1), 10648(2024).</li>
<li>Haffner, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Framework+for+the+pathology+workup+of+metastatic+castration-resistant+prostate+cancer+biopsies%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Framework for the pathology workup of metastatic castration-resistant prostate cancer biopsies.</a> Clin Cancer Res. 31 (3), 466-478 (2025).</li>
<li>Fang, Z., Li, P., Du, F., Shang, L., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+organoids+in+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">The role of organoids in cancer research.</a> Exp Hematol Oncol. 12 (1), 69(2023).</li>
<li>Sachs, N., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+cultures+for+the+analysis+of+cancer+phenotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Genet+Dev%22%5BJournal%5D)">Organoid cultures for the analysis of cancer phenotypes.</a> Curr Opin Genet Dev. 24, 68-73 (2014).</li>
<li>Zhou, L., Zhang, C., Zhang, Y., Shi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+organoid+models+in+prostate+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Application of organoid models in prostate cancer research.</a> Front Oncol. 11, 736431(2021).</li>
<li>Gao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+cultures+derived+from+patients+with+advanced+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Organoid cultures derived from patients with advanced prostate cancer.</a> Cell. 159 (1), 176-187 (2014).</li>
<li>Drost, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+culture+systems+for+prostate+epithelial+and+cancer+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Organoid culture systems for prostate epithelial and cancer tissue.</a> Nat Protoc. 11 (2), 347-358 (2016).</li>
<li>Puca, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+organoids+to+model+rare+prostate+cancer+phenotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Patient-derived organoids to model rare prostate cancer phenotypes.</a> Nat Commun. 9 (1), 2404(2018).</li>
<li>Pamarthy, S., Sabaawy, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+organoids+in+prostate+cancer%3A+improving+therapeutic+efficacy+in+precision+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer%22%5BJournal%5D)">Patient-derived organoids in prostate cancer: improving therapeutic efficacy in precision medicine.</a> Mol Cancer. 20 (1), 125(2021).</li>
<li>Karkampouna, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenografts+and+organoids+model+therapy+response+in+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenografts and organoids model therapy response in prostate cancer.</a> Nat Commun. 12 (1), 1117(2021).</li>
<li>Driehuis, E., Kretzschmar, K., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+patient-derived+cancer+organoids+for+drug-screening+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Establishment of patient-derived cancer organoids for drug-screening applications.</a> Nat Protoc. 15 (10), 3380-3409 (2020).</li>
<li>Neal, J. T., Kuo, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids+as+models+for+neoplastic+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Pathol%22%5BJournal%5D)">Organoids as models for neoplastic transformation.</a> Annu Rev Pathol. 11, 199-220 (2016).</li>
<li>Waseem, M., Wang, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids%3A+an+emerging+precision+medicine+model+for+prostate+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Organoids: an emerging precision medicine model for prostate cancer research.</a> Int J Mol Sci. 25 (2), (2024).</li>
<li>Moschovas, M. C., Patel, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurovascular+bundle+preservation+in+robotic-assisted+radical+prostatectomy%3A+how+I+do+it+after+15%2C000+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Braz+J+Urol%22%5BJournal%5D)">Neurovascular bundle preservation in robotic-assisted radical prostatectomy: how I do it after 15,000 cases.</a> Int Braz J Urol. 48 (2), 212-219 (2022).</li>
<li>Li, Y., Qin, M., Liu, N., Zhang, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+development+and+applications+in+gynecological+cancers%3A+the+new+stage+of+tumor+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nanobiotechnology%22%5BJournal%5D)">Organoid development and applications in gynecological cancers: the new stage of tumor treatment.</a> J Nanobiotechnology. 23 (1), 20(2025).</li>
<li>Xiang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Building+consensus+on+the+application+of+organoid-based+drug+sensitivity+testing+in+cancer+precision+medicine+and+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Building consensus on the application of organoid-based drug sensitivity testing in cancer precision medicine and drug development.</a> Theranostics. 14 (8), 3300-3316 (2024).</li>
<li>Van Hemelryk, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenografts+and+organoids+recapitulate+castration-resistant+prostate+cancer+with+sustained+androgen+receptor+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenografts and organoids recapitulate castration-resistant prostate cancer with sustained androgen receptor signaling.</a> Cells. 11 (22), 3632(2022).</li>
<li>Zhao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+bladder+cancer+organoids+as+a+valuable+tool+for+understanding+tumor+biology+and+developing+personalized+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Patient-derived bladder cancer organoids as a valuable tool for understanding tumor biology and developing personalized treatment.</a> Adv Sci (Weinh). 12 (13), e2414558(2025).</li>
<li>Polak, R., Zhang, E. T., Kuo, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+organoids+2.0%3A+modelling+the+complexity+of+the+tumour+immune+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Cancer organoids 2.0: modelling the complexity of the tumour immune microenvironment.</a> Nat Rev Cancer. 24 (8), 523-539 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>A 83-01</td><td>TOCRIS</td><td>2939</td><td></td></tr><tr><td>adMEM/F12</td><td>Gibco</td><td>12634010</td><td></td></tr><tr><td>Gabinete de biossegurança</td><td>Jinan Xinbeixi Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solução de Recuperação Celular</td><td>Corning</td><td>354253</td><td></td></tr><tr><td>Centrífuga</td><td>Shenzhen Ruiwode Life Technology Co., Ltd</td><td>M1416R</td><td></td></tr><tr><td>Tubos centrífugas</td><td>Nanjing iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cultrex CaminhoLimpar BM</td><td>R& D</td><td>3533-010-02</td><td></td></tr><tr><td>Cultrex Redução do Fator de Crescimento BME, Tipo 2</td><td>R& D</td><td>3533-005-02</td><td></td></tr><tr><td>Recipientes de cultura (placas de baixa aderência de 24 poços)</td><td>termodinâmica</td><td>Nunc-174930-ZX</td><td></td></tr><tr><td>DHT</td><td>ISOREAG</td><td>521-18-6</td><td></td></tr><tr><td>Balanço eletrônico</td><td>Nanjing iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Soro Fetal Bovino</td><td>Gibco</td><td>10099141</td><td></td></tr><tr><td>GlutaminePlus-200mM</td><td>R& D</td><td>B90210</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>R& D</td><td>1254/10</td><td></td></tr><tr><td>incubadora de cultura celular umidificada (37&deg; C, 5% CO2)</td><td>Shanghai Hetian Scientific Instrument Co., Ltd</td><td>HY-160SY</td><td></td></tr><tr><td>Caixa de gelo</td><td>Nanjing iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pratos culturais de tamanho médio</td><td>Absin</td><td>abs7005</td><td></td></tr><tr><td>Suplemento de Mídia N21-MAX (50X)</td><td>R& D</td><td>AR008</td><td></td></tr><tr><td>N-Acetilcisteína</td><td>Sigma</td><td>A9165-5G</td><td></td></tr><tr><td>Nicotinamida</td><td>R& D</td><td>3533-010-02</td><td></td></tr><tr><td>Normocina</td><td>Invivogen</td><td>ANT-NR-2</td><td></td></tr><tr><td>Dispositivo pipeteador com pipeta</td><td>Nanjing Hotspot Scientific Instrument Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pipetas</td><td>Nanjing Hotspot Scientific Instrument Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Primocin</td><td>Invivogen</td><td>ANT-PM-2</td><td></td></tr><tr><td>rhEGF</td><td>R& D</td><td>236-EG-01M</td><td></td></tr><tr><td>rhFGF</td><td>R& D</td><td>233-FB-025</td><td></td></tr><tr><td>rhFGF-10</td><td>R& D</td><td>345-FG-025</td><td></td></tr><tr><td>rhNoggin</td><td>R& D</td><td>6057-NG-100</td><td></td></tr><tr><td>rhR-Spondin 1</td><td>R& D</td><td>4656-RS-100</td><td></td></tr><tr><td>SB 202190</td><td>TOCRIS</td><td>1264</td><td></td></tr><tr><td>Aparelho de preparação de suspensão de célula única</td><td>RWD</td><td>DSC-400</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura de tecido/bisturi</td><td>Nanjing iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TryplE Express</td><td>Gibco</td><td>126A04013</td><td></td></tr><tr><td>Kit de Dissociação Tumoral, Humano</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-095-929</td><td></td></tr><tr><td>Pinça</td><td>Nanjing iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Banho-maria</td><td>Changzhou Zhongjie Experimental Instrument Manufacturing Co., Ltd</td><td>HH-600</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632 di-hidrocloreto</td><td>R& D</td><td>1254/10</td><td></td></tr></tbody></table>

estabelecimento e manutenção de organoides de câncer de próstata derivados de pacientes: um protocolo experimental detalhado

Establishment and Maintenance of Patient-derived Prostate Cancer Organoids: A Detailed Experimental Protocol

Estabelecimento e manutenção de organoides de câncer de próstata derivados de pacientes: um protocolo experimental detalhado

Prostate cancer (PCa) is a highly heterogeneous malignancy and a leading cause of cancer-related mortality in men, with significant clinical challenges in ...

establishment-maintenance-patient-derived-prostate-cancer-organoids

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Pesquisa sobre o Câncer

Organoides derivados de tumores são um tipo de modelo de cultura de células 3D que pode manter as características patológicas e a linhagem celular específica de órgãos de tumores. No protocolo de exemplo, veremos os cientistas gerarem organoides a partir de um tumor de próstata a partir de um modelo de camundongo geneticamente modificado.

Preparação de organoides a partir de tumores: um modelo de tumor 3D in vitro

Aqui, apresentamos um protocolo para orientar a manipulação de organoides humano de próstata primário, em seguida, sugerir pontos de extremidade para avaliar o fenótipo. Semeadura, manutenção de cultura, recuperação de gel da matriz, quantificação morfológica, incorporação e seccionamento, FFPE seccionamento, toda a montagem coloração e aplicação de ensaios comerciais são descritos.

Manipulação e avaliação da cultura de organoides humano de próstata primário

Nós mostramos um método para a necropsia e a dissecção de modelos do cancro da próstata do rato, focalizando na dissecção do tumor da próstata. Um protocolo passo a passo para a geração de organóides do tumor da próstata do rato é apresentado igualmente.

Geração de organóides tumorais de modelos de camundongo geneticamente modificados de câncer de próstata

Apresentado aqui é um protocolo para estudar as respostas farmacológicas em organóides epitelia da próstata. Organóides se assemelham à biologia in vivo e recapitulam a genética do paciente, tornando-os sistemas modelo atraentes. Organóides da próstata podem ser estabelecidos a partir de próstatas wildtype, modelos de camundongos geneticamente modificados, tecido humano benigno, e câncer de próstata avançado.

Culturas organóides da próstata como ferramentas para traduzir genótipos e perfis mutacionais para respostas farmacológicas

Culturas tridimensionais de amostras de BMPC pacientes e xenoenxertos de câncer de próstata metastático mantêm a heterogeneidade funcional de seus tumores originais resultando em cistos, esferoides e organoides complexos, semelhantes a tumores. Este manuscrito fornece uma estratégia de otimização e protocolo para a cultura 3D de amostras derivadas de pacientes heterogêneos e sua análise utilizando IFC.

Estabelecimento e Análise de Organoides Tridimensionais (3D) derivados de amostras de metástase óssea do câncer de próstata paciente e seus Xenoenxertos

Um protocolo detalhado é fornecido aqui para estabelecer organoides mamários humanos a partir de ressecções de tumor de mama derivadas de pacientes ou tecido mamário normal. O protocolo fornece instruções passo a passo abrangentes para cultivar, congelar e descongelar organoides mamários derivados de pacientes humanos.

Estabelecimento e Cultura de Organoides Mamários Derivados da Paciente

Os organoides tumorais revolucionaram a pesquisa do câncer e a abordagem da medicina personalizada. Eles representam um modelo de tumor clinicamente relevante que permite aos pesquisadores ficar um passo à frente do tumor na clínica. Este protocolo estabelece organoides tumorais a partir de amostras de tecido tumoral pancreático fresco e xenoenxertos derivados do paciente de origem adenocarcinoma pancreático.

Estabelecimento de organoides tumorais derivados do câncer de pâncreas e fibroblastos a partir de tecido fresco

Este protocolo descreve a geração de um modelo murino baseado em organoide prostático cultivado em 2D. Inclui dissociação organoide, semeadura celular, diferenciação, avaliação da integridade epitelial e infecção in vitro com Escherichia coli uropatogênica. O modelo oferece acessibilidade apical e é adequado para estudar interações hospedeiro-patógeno, superando limitações dos sistemas organoides 3D tradicionais.

Geração de um modelo baseado em organoides prostáticos de camundongos para estudar as interações hospedeiro-patógeno

Utilizando tumores derivados do paciente em um modelo pré-clínico subcutânea é uma excelente maneira de estudar a eficácia de novas terapias, a descoberta de biomarcadores preditivos, e vias resistentes aos medicamentos. Este modelo, no processo de desenvolvimento de medicamentos, é essencial para determinar o destino de muitas terapias anti-cancro novos antes da investigação clínica.

Desenvolvimento e manutenção de um tumor do paciente pré-clínica Derivado Xenoenxerto Modelo de Investigação de Novel Anti-Cancer Therapies

O seguinte protocolo incide sobre o estabelecimento de uma cultura primária de sarcoma de tecidos moles paciente-derivado (STS). Este modelo pode nos ajudar a compreender melhor o fundo molecular e perfil farmacológico destas malignidades raras e poderia representar um ponto de partida para novas pesquisas que visam melhorar a gestão do STS.

Estabelecimento de uma cultura primária de Sarcoma macio do tecido derivado de paciente

Aprenda a estabelecer organoides de câncer de próstata derivados de pacientes para estudos de tratamento personalizado. Este protocolo padronizado preserva características tumorais e aprimora o rastreamento de fármacos.

Estabelecimento e manutenção de organoides de câncer de próstata derivados de pacientes: um protocolo experimental detalhado

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